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试验研究 | Experimental research0 引言布鲁氏菌病（brucellosis 又称布氏菌病或布氏杆菌病，简称“布病”）是由布鲁氏菌（brucella）引起的人畜共患传染病，广泛分布于世界各地，多种动物和禽类对布鲁氏菌均有不同程度的易感性[1]。
自然感染以羊、牛和猪常见，其特征为生殖器官、胎膜及多种器官组织发炎、坏死和肉芽肿的形成，在临床上主要表现为波浪热、流产、不孕、睾丸及关节炎等症状[2]。
但近年羊布氏菌病感染率呈明显上升趋势，不但严重危害我国畜牧业（包括养羊业在内）的健康发展，还严重威胁国内部分地区人们的健康、食品安全以及全社会的公共卫生安全。
1 材料与方法1.1 疫苗 实验室制备的布氏菌病活疫苗（Rev.1株），批号为53003，布氏菌病活疫苗（S2株），批号为5393032，均由金宇保灵生物药品有限公司提供。
1.2 检测试剂 布鲁氏菌病试管凝集试验抗原、阳性对照、阴性对照、布鲁氏菌病虎红凝集试验抗原，均购自中国兽医微生物菌种保藏管理中心。
1.3 试验动物 试验动物来源于定点供应基地，经布鲁氏菌病虎红平板凝集试验检测为阴性的绵羊70只。
1.4 试验分组与免疫第1组为布氏菌活病疫苗（Rev.1株）免疫组，共计30只绵羊。
将疫苗用布氏菌活病疫苗（Rev.1株）专用稀释液溶解稀释至20头份/mL（按每头份为1滴，1滴约0.05 mL计算），用专用滴眼器进行眼结膜接种，每只羊滴眼1头份（0.05 mL），含1×109CFU/头份。
第2组为布氏菌病活疫苗（S2株）免疫组，共计30只绵羊。
将疫苗用生理盐水溶解稀释至1头份/mL，进行口服免疫，每只羊口服1头份，含1×1010 CFU/头份。
第3组为空白对照组，共计10只，不接种疫苗，相同条件下隔离饲养。
1.5 试验步骤所有试验羊分别于免疫前、免疫后14、21、28、49、60、90、120、150 d采血，分离血清，采用虎红平板凝集试验（RBT）和试管凝集试验（SAT）试验进行抗体测定。
抗体判定标准及分析依据一、抗体判定标准：1.新城疫抗体：育雏育成鸡在7以上，产蛋鸡在9以上。
2.H5抗体：抗体值在6以上。
3.H9抗体：抗体值在7以上。
注：低于以上标准，则需要进行免疫。
免疫后抗体规律一般活疫苗免后7-10天产生抗体，2-3周抗体到达峰值，可以维持2个月。
灭活疫苗免后10-15天产生抗体，3-4周抗体到达峰值，可以维持3-4个月。
二、结果分析1、正常情况1）商品肉鸡母抗≤28，有时可达29，一般情况下母抗较种代鸡低2个滴度。
2）种鸡/蛋鸡2个月时可达26-8，甚至更高，多次免疫也不会超过212。
3）通常一旦建立免疫保护，HI抗体维持2个月不会有大变动，抗体波动不会超过2个滴度。
4）正常情况下，育成期或产蛋期的油苗免疫一次可以提升1.5-2个滴度，否则就是免疫失败，否则应加免。
2、发病情况1）未免疫鸡群的抗体出现阳性。
2）发病后2周的ND-HI至少比发病前高2个滴度，个别可能异常高。
3）肉鸡或育雏的种鸡/蛋鸡发病后10天，ND-HI可上升5个滴度到210。
4）种鸡/蛋鸡场野毒感染1个月后，个别的滴度可达214或更高。
5）生物安全措施良好的鸡场往往存在野毒的滚动感染，因此鸡场的病程往往持续数月之久。
如确诊的早，可从远离发病舍的（假定）健康鸡舍做紧急免疫。
3、数据的意义1）抗体滴度：个体抵抗力2）GMT：平均值，显示群体的平均抵抗力3）CV%：变异系数(标准差S/平均值X )，代表群体相对与平均值的离散程度。
4、免疫蛋鸡血清ND-HI抗体水平与保护力的关系（理论值）。
免疫力的重要指标与测试方法免疫力是我们身体的一道坚固的防线，它时刻保护着我们免受疾病的侵扰。
然而，如何准确地衡量免疫力是一个备受关注的问题。
在本篇文章中，我将为大家介绍免疫力的重要指标以及测试方法，让我们一起来了解吧！1. 免疫力的重要指标：抗体水平抗体是免疫系统产生的一种特殊蛋白质，它们可以识别并中和入侵人体的病原体。
因此，抗体水平是衡量免疫力的重要指标之一。
我们可以通过血液检测来测量不同种类的抗体水平，从而判断我们对特定病原体的抵抗能力。
2. 免疫力的重要指标：细胞免疫细胞免疫是指通过免疫细胞进行吞噬、杀灭病原体的免疫反应。
其中，淋巴细胞是细胞免疫的核心，它们通过分泌细胞因子来调节免疫反应。
因此，衡量淋巴细胞的数量和活性是评估免疫力的重要指标之一。
3. 免疫力的重要指标：炎症反应炎症反应是机体对病原体入侵的一种自我保护机制。
然而，长期存在的炎症反应会导致免疫系统的过度活跃，从而损害身体健康。
因此，评估炎症反应水平对于衡量免疫力非常重要。
目前，我们可以通过测量血液中的C-反应蛋白和白细胞计数来评估炎症反应的程度。
4. 免疫力的测试方法：血液检测血液检测是目前最常用的免疫力测试方法之一。
通过采集一小部分血液样本，实验室技术人员可以检测其中的抗体水平、细胞免疫指标以及炎症反应相关的生物标志物。
这种方法准确且方便，可以帮助医生和研究人员了解我们的免疫状态。
5. 免疫力的测试方法：免疫功能评估除了血液检测，还有一些其他方法可用于评估免疫功能。
例如，我们可以通过免疫功能评估测试来测量免疫系统对不同刺激的反应能力。
这些测试通常会使用蛋白质、多肽等物质模拟病原体，观察免疫细胞的反应情况，进而评估免疫力。
总结：免疫力是我们身体健康的重要保障，准确衡量免疫力对于预防疾病至关重要。
抗体水平、细胞免疫和炎症反应是评估免疫力的重要指标，而血液检测和免疫功能评估则是常用的测试方法。
通过对免疫力的准确测试和评估，我们可以更好地了解自己的身体状况，做出相应的调整和预防措施，保持良好的免疫力水平。
怎样制定一个合理的免疫程序首先谈一谈制定免疫程序的依据一、当地疫病流行情况；当地疫病流行情况是制定免疫程序的第一依据。
1、当地流行的重大疫病应该是免疫的重中之重，特别是禽流感、新城疫、法氏囊、传支的流行往往给养殖业造成重创，必须格外重视!在当地和周围没有的疫病，完全可以不防！2、应随时了解禽厂周围疫情变化，随时做出调整应定期对平常不进行免疫的几种危害禽业疾病如传染性贫血、肺病毒、传染性鼻炎等，进行监测，以确定环境中是否有此种病毒存在，下一批雏鸡入舍是否应该五、各种疫苗不同接种方法对于机体的免疫力的影响；不同的免疫方法对提高机体的免疫力有着不同的效果。
如对于新城疫的免疫效果依次为气雾法-点眼法-滴鼻法-注射法-饮水法。
因不同的免疫方法其优点和缺点不同，所以应根据实际情况和目的选用不同的免疫方法。
对呼吸道类传染病首免最好是滴鼻、点眼和喷雾免疫，这样即能产生较好的免疫应答又能避免母源抗体的干扰。
1、不同疫病引起感染门户和免疫门户不同所采用的免疫方法不同，具有一定的固定性。
如呼吸道病一般采用气雾、滴鼻、点眼方法进行，法氏囊病一般采用消化道免疫方法如滴口和饮水，鸡痘一般采取刺种法，传喉一般采用滴眼、滴鼻和滴肛法。
雏鸡传支主要依靠局部粘膜免疫作用，来获得对传支的免疫力，蛋鸡传支还需要较高的体液免疫作用来支持。
2、不同疫苗所采取的免疫方法是有一定的固定性。
如一般情况下，弱毒苗可以采用气雾、点眼、滴鼻、注射、饮水、刺种等，而油苗只能采取注射法。
六、不同形式的抗体在体内的消长规律；1、疫苗免疫后，会在一定的时间内产生相应的抗体，并不断增高，达到高峰后再逐渐下降，到一定时间后降到保护范围以下，这个时候就需要重新进行免疫。
所以应根据抗体的消长规律，来确定疫苗免疫的间隔时间。
一般情况下，首免属于基础免疫，主要刺激机体产生识别和应答的能力，产生的抗体较少，维持时间较短，所以间隔时间也短，二免和再免产生的抗体维持时间逐渐延长；油苗产生抗体较多，维持时间较长，间隔时间可以延长。
鸡群抗体检测对免疫程序的影响目前大家养殖蛋鸡不重视疫苗的使用情况，只是按照一般的免疫程序给鸡群进行免疫，对抗体检测这个词语并不很熟悉，下面小编来给大家讲讲抗体检测对鸡群有哪些好处：1. 免疫前检查：了解免疫前抗体水平是否需要追加免疫，确定免疫时间和进行免疫后的效果评价。
2. 免疫后检查：检查疫苗免疫后(血清检测可在免疫后4周、鸡蛋样品可在免疫后5-6周)免疫效果，根据检测结果是否需要采取紧急措施，确保鸡群安全生产。
3.综合健康评价：鸡群疫苗抗体的产生及下降程度与疫苗质量、鸡群体质、均匀度及养殖场环境污染等有直接相关性;所以要规律性监测，适时了解鸡群整体健康状况，并且分析各种免疫之间相关性。
4.抗体保护性：根据养殖场鸡群健康状况了解疫苗抗体在本场消长规律、以便在特殊时期(如:免疫空白期、抗体较低时、野毒感染时)及时采取相关补救措施;另外对免疫程序进行适时调整。
5.流行病调查：抗体规律检测可在养殖场发病时做主要参考依据。
并且对本养殖场或区域流行病学分析提供数据，利于发现病原变异。
6.疫苗选择：用于指导疫苗厂家选择，可针对不同疫苗厂家在本场抗体消长规律及保护效果进行评价。
7.为疾病诊断提供依据：发病时期：一般在发病后随着时间的延长抗体通常会有明显升高，所以在发病时及发病10—15天后采取双份血清进行对比分析对疾病有很好的诊断价值。
注：1、使用疫苗同时使用特福，可以减少疫苗应激，延长疫苗保护期。
2、鸡群在300日龄以后，建议每1个月做一次新城疫与禽流感的抗体检测，建立抗体检测数据，根据检测结果确定免疫时间(新城疫疫苗与新支二联疫苗可交替使用，一般情况下35-40日龄使用一次，具体免疫时间可参考抗体检测结果)。
3、在用新城疫IV系疫苗进行免疫时配合新疫康同时使用，可以提高抗体效价，减少应激，延长疫苗保护期。
养殖与饲料2016年第8期摘要为探讨商品肉鸡新城疫免疫程序，采用血凝抑制（HI ）试验，对1～28日龄未经任何疫苗免疫的罗斯308商品肉雏鸡新城疫母源抗体进行跟踪检测，并观察其抗体水平消长规律。
结果表明，罗斯308商品肉雏鸡的母源抗体水平在3日龄时达到最高值（9.2log2），然后逐渐下降；至13日龄时新城疫母源抗体水平已低于保护临界值（4.8log2）。
该批肉雏鸡的新城疫疫苗最佳首免时间确定为12日龄。
关键词肉雏鸡；新城疫；母源抗体；血凝抑制商品肉雏鸡新城疫母源抗体水平的消长规律王丽娟辽宁职业学院，辽宁铁岭112099收稿日期：2016-06-14王丽娟，女，1967年生，副教授，研究方向：兽医微生物学和免疫学技术。
鸡新城疫是由新城疫病毒引起禽类的一种急性、高度接触性传染病，又称亚洲鸡瘟。
该病以高热、呼吸困难、下痢、神经紊乱、浆膜和黏膜出血为特征，目前本病仍然是威胁养鸡业发展最严重的疫病之一[1]。
疫苗免疫是目前控制新城疫发生的有效手段，而首免日龄的确定则是做好免疫工作的关键。
随着肉鸡养殖规模化、集约化程度的提高，肉种鸡场对种鸡通常都进行新城疫强化免疫，其雏鸡的母源抗体水平普遍较高。
高水平的母源抗体虽然给雏鸡提供较早的被动保护力，但也会影响弱毒疫苗的初次免疫效果[2]。
本试验通过对铁岭市某规模化肉鸡养殖场采用血凝抑制试验，对罗斯308商品肉雏鸡进行新城疫母源抗体水平监测，观察其抗体水平的消长规律，旨在为确定新城疫疫苗首次接种的最佳日龄和科学制定免疫程序提供理论依据。
1材料与方法1.1试验材料1）主要仪器及材料。
离心机（TDZ4-WS 上海卢湘仪离心机仪器有限公司）、迷你高速离心机（Min-Star 上海托莫斯科学仪器有限公司）、微量移液器（DRAGON 大龙兴创实验仪器-北京有限公司）、电子天平（JY6002上海良平仪器仪表有限公司）、微型振荡器（MM-I 型上海亚荣生化仪器厂）、托盘天平、恒温箱、冰箱、96孔V 型血凝反应板、离心管、镊子、75%乙醇棉球及常规消毒液等由辽宁职业学院动物微生物检测实验室提供。
影响疫苗免疫效果的因素疫苗免疫是预防动物传染性疾病最重要的措施之一，通过疫苗免疫可使动物获得坚强的抵抗力，由易感动物转化为不易感动物，从而保障动物的健康。
特别是对病毒性疾病，由于没有有效的治疗药物和措施，因此疫苗免疫尤为重要。
但是，在实际应用中疫苗免疫受到多种因素的影响，如疫苗的内在质量、类型以及保存、运输条件，动物的品种、营养、饲养管理、环境、应激、母源抗体，以及免疫程序和免疫抑制因子的存在，等等。
这些因素可通过不同的机制干扰疫苗的免疫效果，从而造成动物机体免疫力不足甚至免疫失败，导致个体或一定群体的疫病发生或流行，给养殖业造成重大损失，并影响动物食品质量安全。
因此，只有充分了解影响免疫接种效果的因素，科学地开展疫苗免疫接种，才能充分发挥疫苗的作用，保护养殖业的健康发展一、疫苗因素：包括疫苗的质量、疫苗的类型、疫苗的保存及运输条件等等。
1、疫苗的质量高质量的疫苗是免疫成功的基础。
首先，疫苗的质量主要取决于生产采用的菌（毒）株和血清型。
高质量的疫苗使用标准菌（毒）株，抗原性好、抗原含量高。
由于许多病原微生物如大肠杆菌、传染性支气管炎、禽流感、传染性法氏囊病、马立克氏病、口蹄疫、链球菌病、猪蓝耳病等等有多个血清型，易发生抗原变异或出现超强毒力变异株。
因此，疫苗菌（毒）株血清型为当前传染病流行的主导型、抗原的代表性强、覆盖面广，才能产生良好的免疫保护。
如疫苗菌（毒）株的血清型与当前传染病流行菌（毒）株之间存在差异，就不可能产生良好的免疫保护，甚至造成免疫失败。
例如，口蹄疫病毒有7个血清型，其中我国流行的口蹄疫以O型和亚洲I 型为主；而链球菌的血清型有脑炎型、败血型、关节炎型及淋巴结型。
疫苗使用时应选择疫苗毒株与当地猪群流行的病毒株的抗原型越接近的免疫保护越好，如果选用的疫苗毒株与当地猪群流行的病毒株的抗原型差异性较大，或不属同一血清型，不能产生交叉免疫性，这样免疫效果就很差，甚至起不到免疫保护作用。
免疫学与免疫监测衡量免疫功能的新方法免疫学是研究机体抵抗疾病的科学，通过免疫监测可以评估机体的免疫功能。
随着科学技术的不断发展，新的免疫监测方法相继出现，为衡量免疫功能提供了更丰富的选择。
本文将介绍一些新的免疫监测方法，包括细胞免疫学、分子免疫学和生物化学免疫学等方面的新技术。
细胞免疫学是研究免疫系统中各种免疫细胞的数量和功能状态的科学。
常用的细胞免疫监测方法包括流式细胞术和细胞增殖实验法。
流式细胞术是通过流式细胞仪对单个细胞进行标记和检测，可同时检测多个细胞表面标志物的表达水平和亚群分布情况。
细胞增殖实验法则是通过测定细胞的增殖能力来评估免疫系统的反应性。
这些细胞免疫学方法可以客观地反映机体的免疫细胞水平和活性，为评估免疫功能提供了重要指标。
分子免疫学是研究免疫系统中免疫相关分子的数量和功能状态的科学。
近年来，PCR和免疫组化等技术的发展为分子免疫学研究提供了更多选择。
PCR是通过扩增DNA片段来检测免疫相关基因的表达。
通过PCR，可以检测免疫系统中关键基因的表达水平，例如细胞因子、免疫受体等。
免疫组化则是通过标记抗体来检测免疫相关分子的表达和定位情况。
这些分子免疫学方法可以深入了解免疫系统的调节机制，为评估免疫功能提供了重要线索。
生物化学免疫学是研究免疫系统中免疫相关物质的检测和功能分析的科学。
常用的生物化学免疫学方法包括酶联免疫吸附实验（ELISA）和流式细胞术等。
ELISA可以使用酶标仪对特定抗原或抗体进行定量检测，通过测定样品中的免疫相关物质的浓度来反映免疫功能的状态。
流式细胞术则可以通过荧光标记来检测免疫相关物质的表达情况。
这些生物化学免疫学方法可以对机体免疫状态进行直接检测和定量，为评估免疫功能提供了重要数据。
综上所述，免疫学与免疫监测在衡量免疫功能方面具有重要意义。
随着科学技术的不断发展，新的免疫监测方法不断涌现，为评估免疫功能提供了更多的选择。
细胞免疫学、分子免疫学和生物化学免疫学等方面的新技术，使我们更加深入地了解机体的免疫状态，为疾病的预防和治疗提供了基础。
如何做好免疫抗体监测颜昭君【期刊名称】《中国畜牧兽医文摘》【年(卷),期】2012(000)007【总页数】1页(P106-106)【作者】颜昭君【作者单位】江苏省常熟市虞山动物防疫站,常熟 215500【正文语种】中文正确免疫接种是我国控制重大动物传染病的有效方法之一，但是免疫接种是否获得成功，取决于接种时疫苗的质量、接种途径和免疫程序以及机体的免疫应答能力等多种因素。
因此，确保免疫质量成为防控工作的重中之重，而免疫抗体监测是检验免疫质量最直接、最有效的方法。
通过有效的免疫抗体监测，才能确定科学的免疫程序、免疫时间，选择优质的疫苗，准确的免疫剂量，确保免疫质量。
1 建立完善的动物疫病监测网络建立一个以区域监控为主，规模饲养与社会散养并重，覆盖全市，布局合理、目标明确、管理规范的动物疫病的监测网络体系。
按定点监测、常规监测、集中监测和应急监测4个层次搞好动物疫病的监测。
定点监测是根据本区域动物疫病流行特点，各自在本区域内设立固定监测点，实行持续监测。
常规监测主要针对规模场、散养户等生产环节，每月随机采样监测。
集中监测主要针对春、秋两季重大动物疫病集中防疫行动，对种畜禽场、规模场、散养户、交易市场、屠宰场等进行采样监测，评估免疫效果。
应急监测主要针对突发主要动物疫病和新发动物疫病，及时组织监测，评估疫情范围和畜禽的免疫保护水平，为组织疫情扑灭工作提供依据。
在完成省、市动物疫控中心下达任务的前提下，自行制定并开展本区域内的监测工作。
不管是哪种监测，都要备案存档。
2 做好兽医实验室建设，提高检验人员素质要搞好免疫监测工作，就要先搞好实验室的软硬件建设。
动物疫病监测工作现已成为重大动物疫病防控的一项主要工作，越来越被各级政府重视，实验室工作包括动物疫病监测、诊断、评估、疫病净化等等，为动物疫病防制工作提供科学的依据。
这种形势下，迫切需要加强实验室的软硬件建设。
硬件上，必须达到省级主管部门关于县级兽医实验室达标的要求，建立实验室环境控制设施、完成老化仪器设备的更新等实验室硬件问题，改善实验室的条件。
