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圈养袋鼠的饲养和口腔疾病的治疗作者：姚启远邸海洋来源：《南方农业·下旬》2017年第08期摘要袋鼠的口腔构造决定了口腔疾病会对袋鼠造成致命打击，该病无法提早发现，也无法实施探查和外科手术治疗，并且一旦发现，往往都是病程的中后期，死亡率极高，最好的方法就是控制病情的发生。
针对袋鼠“粗颌病”的治疗，国内很多兽医工作者进行大量的工作和试验研究：从发病袋鼠发病部位分离出多种致病菌；通过不同药物组合治疗早期感染；针对种用袋鼠开展的外科治疗手段；中医中草药在治疗本病均有报道和经验交流。
根据国外文献报道，本病多是由坏死杆菌和放线菌感染引起，结合长春动植物公园情况，多次从发病动物病料中进行细菌分离鉴定，但均未分离到这两种细菌。
长春动植物公园发病袋鼠初次发病时，应用抗生素结合口腔清洁，治疗效果明显，但往往会在症状消失后不久再次出现，尝试更换多种不同抗生素组合均未取得满意理想效果。
关键词袋鼠；粗颌病；饲料；影响中图分类号：S858.9 文献标志码：B DOI：10.19415/ki.1673-890x.2017.24.0441 袋鼠的生境与疾病1.1 圈养条件下环境对袋鼠的影响袋鼠生活在南半球，天然的自然条件使它成为了世界上独一无二的动物，正是澳大利亚独特的自然条件进化出了袋鼠独特的生理结构。
笔者所处的地方是中国的北方城市长春市，这里是四季分明，温度变化很大，植被也很不同，在饲养的过程中遇到了很多问题。
一是食物的改变[1]，在国内因为地理位置、气候条件的不同，各动物园基本根据长春动植物公园的经验饲养袋鼠，缺乏赤大袋鼠日粮模式方面的研究。
经查阅资料，野生状态下的赤大袋鼠多采食三齿稃等粗纤维含量高的高茎草，袋鼠的口腔细长而且柔软，根本受不了坚硬的草。
二是环境，袋鼠需要广阔的空间奔跑，才能满足自身“跑步健将”的特质。
三是长春动植物公园袋鼠的常见疾病主要是口腔类疾病和消化系统疾病，做好饮食调节可有效预防其发生[2]，如减少投喂过于坚硬、含糖量高及含嘌呤高的食物。
白袋鼠口腔疾病死亡病例讨论贾常悦周宇飞发布时间：2023-06-23T09:45:37.587Z 来源：《中国科技信息》2023年7期作者：贾常悦周宇飞[导读] 在白袋鼠的饲养中，口腔疾病是其中最为常见且致死率较高的一类疾病，有明显的临床特征，但是因为其特殊的口腔构造，饲料管理，饲养环境等因素，治疗复杂且容易复发。
文章以一例白袋鼠口腔疾病死亡病例为例，重现了其发病过程、临床表现、剖检观察诊断，并进行总结反思，希望能白袋鼠口腔疾病的防治有所帮助。
唐山动物园河北唐山 063021摘要：在白袋鼠的饲养中，口腔疾病是其中最为常见且致死率较高的一类疾病，有明显的临床特征，但是因为其特殊的口腔构造，饲料管理，饲养环境等因素，治疗复杂且容易复发。
文章以一例白袋鼠口腔疾病死亡病例为例，重现了其发病过程、临床表现、剖检观察诊断，并进行总结反思，希望能白袋鼠口腔疾病的防治有所帮助。
关键词：白袋鼠；口腔疾病；死亡；防治袋鼠原产自澳大利亚草原或热带稀树干草原地带[1]，因为其奇特的育儿袋，健硕的身体，以及有趣的形态深受大家的喜爱。
而白袋鼠又是其中特别的一类，是由正常赤颈袋鼠基因变异而来，其特殊的身份较之正常袋鼠似是又多了几分娇贵。
我园饲养包括赤大袋鼠、灰大袋鼠、赤颈袋鼠、白袋鼠四种袋鼠，前后有多只感染了口腔疾病，尤其是白袋鼠。
由于白化动物本身体质较弱，受伤后自愈能力差且大多数伴随不同程度的健康问题。
我园白袋鼠感染口腔疾病三年内死亡率接近100％。
通过近年来对白袋鼠口腔疾病的治疗和死亡动物的解剖，我们对袋鼠的口腔疾病诊治有了一定经验，文章以2019年一例白袋鼠口腔疾病死亡病例为例，通过反思总结与讨论，为以后该疾病的防治提供参考。
1.病例概况2019年5月一只白袋鼠被发现精神差，采食量下降，流脓性鼻涕。
人工保定检查口腔，未发现明显病变。
但根据以往病例判断较大可能为口腔疾病。
给予肌注头孢曲松钠0.5g，连用5天处理。
7月起每间隔十天左右发现有口内溃疡，右下颌肿胀，直到10月初共发病7次发病期间体温明显升高。
貉源绿脓杆菌分离鉴定作者：王建军，莫玲，郭广君，韩强，姚春阳，王玉茂来源：《中国动物保健》2021年第12期摘要：为确诊引起山东省潍坊市某貉子养殖场的主要细菌性疾病，对该养殖户送检的病死貉子进行剖检，根据病貉的临床症状、病理剖检变化及其对分离纯化的细菌进行形态特征观察、生化试验、细菌16S rDNA PCR鉴定、药物敏感试验，初步确诊为绿脓杆菌感染。
药物敏感试验结果表明，分离菌株对恩诺沙星、硫酸粘杆菌素、氟苯尼考中敏，对头孢噻呋、庆大霉素、替米考星、多西环素、林可霉素、阿莫西林耐药。
关键词：貉;绿脓杆菌;药敏试验;PCR鉴定Isolation and PCR Identification of Pseudomonas Aeruginosa from RaccoonWang Jianjun1， Mo Ling1， Guo Guangjun1， Han Qiang2， Yao Chunyang1， Wang Yumao1（1.Shandong Binzhou Animal Science and Veterinary Medicine Academy; 2. Shandong LVDU Bio-science & Technology Co.， Ltd， Binzhou， Shandong， 256600）Abstract： In order to diagnose the main bacterial diseases caused by a raccoon dog farm in Weifang City， Shandong Province， the dead raccoon dogs sent by the farmer for examination were dissected. According to the clinical symptoms and pathological changes of the sick raccoon dogs and the morphological characteristics observation， biochemical test， bacterial 16S rDNA PCR identification and drug sensitivity test of the isolated and purified bacteria， it was preliminarily diagnosed as Pseudomonas aeruginosa infection. The results of drug sensitivity test showed that the isolated strains were moderately sensitive to enrofloxacin， Colistin sulfate and florfenicol， but resistant to ceftiofur， gentamicin， timicosin， doxycycline， lincomycin and amoxicillin.Keywords： Raccoon; Pseudomonas aeruginosa; drug sensitivity test; PCR identification绿脓杆菌（pseudomonas aeruginosa），又称铜绿假单胞菌，1882年首先由Gerssard从伤口脓液分离得到[1]，该菌广泛存在于自然界中，是一种临床上较为常见的人畜共患条件性致病[2]，主要经呼吸道、消化道和接触等多种途径易引起多种动物及人原发或继发或混合感染[3]，对多种畜禽均有不同程度的危害[4]，可导致水貂、狐、貉等毛皮动物出血性肺炎或经产道感染导致狐狸、貉子的内膜炎，经创伤感染引起化脓。
动物检验检疫学实验一动物病原细菌的分离与鉴定预览说明:预览图片所展示的格式为文档的源格式展示,下载源文件没有水印,内容可编辑和复制实验一动物病原细菌的分离与鉴定一、实验目的了解动物病原细菌的分离、鉴定的常规程序与基本方法二、实验原理初步分离鉴定：利用细菌在特定的选择培养基上的生长特性，观察细菌培养特征；确定细菌的血清型、毒力因子：血清学检测或PCR检测技术大肠杆菌的培养特征：37℃,培养24h,各种培养基生长特征：普通营养琼脂平板：白色圆形，隆起，中等大小麦康凯琼脂：红色、圆形、隆起、光滑、湿润、边缘整齐、中等大小糖铁琼脂斜面培养基：底层变黄，产酸产气伊红美蓝培养基：黑色、金属光泽革兰氏染色：革兰氏阴性、分散或成对排列、两端钝圆的短杆菌血清学鉴定：玻片凝集实验：颗粒性抗原与相应抗体结合出现凝集沉淀。
大肠杆菌中，为了避免K抗原对O抗原凝集的抑制作用，利用O抗原的耐热性高于K抗原，实验前进行、高压或煮沸处理。
三、实验材料1）材料：可疑病料，需提前三天提供小鼠2）菌株：致病性大肠杆菌菌株3）试剂：营养肉汤、营养琼脂、CT-SMAC琼脂、TSI琼脂、伊红美蓝琼脂培养基、IMViC、大肠杆菌O157标准血清、生理盐水、吉姆萨染色液、酒精或棉球。
4）仪器：显微镜、37℃恒温培养箱、酒精灯、接种棒、剪刀、镊子、载玻片、记号笔、口罩、手套。
四、操作步骤1.分离培养第一天：1.）处死小鼠，无菌解剖2.）观察各脏器是否出现肉眼病理变化；3.）无菌采集内脏病料，通过无菌操作划线接种于普通琼脂平板、改良山梨醇麦康凯（CT-MAC)琼脂平板各一块，37℃培养24h；4.）同时无菌挑取一小块病料，直接涂片，吉姆萨染色，油镜观察组织中的细菌特征；第二天5.）挑取CT-SMAC典型单个菌落分别接种于TSI琼脂斜面、伊红美蓝琼脂和营养肉汤，37℃培养24h。
挑取普通培养基上的菌落进行糖类发酵和IMViC生化实验。
糖（醇）类发酵实验：接种两只葡萄糖发酵培养基、乳糖发酵培养基，麦芽糖发酵培养基，一支接种，一支对照；接好后置于37℃温箱中培养24h。
1株虎源致病性肠球菌的分离鉴定及序列分析李富祥1,唐杨春2,宋建领1,王金萍1,张健2,李华春1*(1.云南省畜牧兽医科学院,云南昆明650224;2.云南省野生动物园,云南昆明650218)摘要从病死老虎肺脏中分离到1株肠球菌,并对该菌做了生理生化鉴定、药敏试验,致病性试验。
本菌对多种抗生素高度耐药,对小白鼠有强致病性,其LD50为2.7@109.2cfu。
并用PCR方法扩增分离菌株16S rDNA 基因,获得1415bp片段,该片段核苷酸序列提交G enB ank,登陆号为HM346186,将分离株的16S r DNA核苷酸序列与G enBank上其他肠球菌进行同源性分析。
结果表明,分离株的16S r DNA核苷酸序列与肠球菌(EU285587)的同源性为100%,因此该分离菌株被鉴定为致病性肠球菌,命名为YN-1株(云南-1株)。
关键词肠球菌;16S r DNA;致病性;分离;鉴定中图分类号S852.61文献标识码A文章编号1005-7021(2010)05-0059-04 Isol ati on,Identifi cati on and Sequence Analysis of a Pathogen i cEnterococcus Strai n Isol ated fro m T igerLI Fu-x iang1,TANG Yang-chun2,SONG Ji a n-li n g1,WANG Jin-ping1,Z HANG Jian2,LI H ua-chun1(1.Yunnan P rov.A c ad.of A ni ma lH u sb.&Vet.,K unm i ng650224;2.Yunnan P rov.W il d An i m a lP ark,K unm i ng650218)A bstrac t A n Enterococcus stra i n w as iso l ated fro m l ungs o f ti ge r died of ill ness.It w as i dentifi ed physio l og ica ll y and b i ochem ica ll y,and drug sensiti v ity and pat hogen ic tests aga i nst it.The results showed t hat it had h i ghly m ulti p l e drugresistance and had strong pathog en i c ity against m i ce w ith LD50of t he bacte ria at2.7@109.2cfu.16S r DNA gene and w as amp lified adopti ng PCR and obta i ned1415bp fragment and sub m it t o G enBank a fter sequenci ng w it h accessi on number HM346186,the16S rDNA sequence ho m o l ogy bet w een the iso lati on stra i n and stra i n Enterococcus galli naru m (EU285587)w as100%in G enBank.So the iso lated stra i n w as identifi ed as pa t hog en i c Enterococcus and nam ed as YN-1stra i n.K eywords Enterococcus;16S r DNA;pathogenicity;isolation;i dentifica ti on肠球菌为革兰阳性球菌,最初归于链球菌属,直到1984年Schle ifer K H等[1]才将其从链球菌属中分离出来作为一个独立的菌属,命名为肠球菌属。
文章编号:1004-2342(2016)03-0044-02中图分类号:S852.72+3文献标识码:C灰大袋鼠球虫病的诊断与治疗农汝,陈月妃,吴俊仪,陆兵兵,黄宁,雷伟(南宁市动物园,广西南宁530003)2014年5月南宁市动物园从某动物园引进3只灰大袋鼠,到园后15d,3只袋鼠先后出现排暗红色、酱油样便、褐色烂便,其中2只发病次日即死亡,另一只经治疗后存活。
经尸体检查及治疗效果诊断为球虫感染。
现将诊治情况介绍如下。
1临床症状1.1案例A6月5日上午见袋鼠A排红色糊状便,起卧不定,呼吸急促(R50-70),对外界反应迟钝,食饮下降。
中午排酱油样糊状便,T36.7℃,体瘦,次日死亡。
1.2案例B6月5日,袋鼠B精神活动、采食尚可,次日精神沉郁,对外界反应迟钝,上午粪便为绿色条状便,下午突变为褐色糊状便,体瘦,次日死亡。
1.3案例C6月5日,袋鼠C全天排绿色条状便,精神、活动、采食尚可。
此后两天粪便性状为绿色糊状,至8日粪成形,之后,膘情好转,但粪便性状有时为条状样便有时为糊状便。
6月25日粪检又检出球虫卵囊,按球虫感染给予驱虫治疗后,粪便检查未再次检出球虫卵囊。
2剖检2.1袋鼠A2.1.1解剖症状。
血性腹腔积液100mL,胸腔积液呈淡红色250mL,心包积液为无色透明15mL;心脏肥大,表面不光滑;肝色淡,表面有出血点;肺出血,细支气管有粘性分泌物;肾色淡;全肠道出血,肠内容物为暗红色。
2.1.2实验室检查2.1.2.1无菌取心、肝、脾、肺、肾、肠内容物做常规细菌分离培养。
结果为阴性。
2.1.2.2直接镜检小肠内容物直接涂片镜检:球虫卵囊+;胸腔积液直接涂片镜检,RBC++,WBC++, OB+++;腹腔积液直接涂片镜检,RBC少许,WBC+,OB+;肺分泌物直接涂片镜检,RBC+,WBC+,OB++。
2.2袋鼠B2.2.1解剖症状。
下颌两侧皮下有胶冻样渗出物,颈侧、心血管外、胃弯外周呈胶冻样浸润;腹腔积液130mL,胸腔积液右侧65mL,左侧25mL,积液透明水样;双肺褐红色,切开有血流出,气管内无分泌物;结肠黏膜呈条纹状出血,空肠呈斑纹状出血,盲肠内容物褐红色;胃黏膜局部斑状出血。
Chinese Journal of Wildlifehttp ：//一例赤大袋鼠梭菌性肠炎的诊断和病原分离鉴定董俊斌1，李静2，丁玉林1，王文龙1，高娃3，郑秉武4，张迪5，王金玲1 *（1. 内蒙古农业大学兽医学院，农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室，呼和浩特，010010；2. 内蒙古自治区科学技术厅，呼和浩特，010000；3. 内蒙古自治区蜱媒人畜共患传染病重点实验室，河套学院医学系，巴彦淖尔，015000；4. 呼和浩特市动物园，呼和浩特，010050；5. 内蒙古通辽市科尔沁区畜牧水产工作站，通辽，028000）摘 要通过临床症状、尸体剖检、组织病理学、毒素实验和细菌分离鉴定的方法确诊了1例由A 型产气荚膜梭菌（Clostridium perfringens ）引起的赤大袋鼠（Macropus rufus ）梭菌性肠炎的自然病例。
动物园1只成年赤大袋鼠突然精神沉郁、厌食，于20 h 后死亡，尸体角弓反张，腹围膨大。
尸体剖检和组织学检查表明：胃肠道、肝脏和肾脏出现具有梭菌性肠炎证病意义的病变。
小白鼠毒素实验结果显示，血样肠内容物内有急性致死性毒素。
从出血的肠黏膜面分离到单一、有芽孢、粗大的革兰阳性杆菌，经产气荚膜梭菌毒素基因型多重PCR 鉴定为A 型产气荚膜梭菌。
研究结果可为赤大袋鼠梭菌性肠炎的诊断和防控提供依据。
Diagnosis and Pathogen Isolation of a Case of Clostridial Enteritis in Red KangarooDONG Junbin 1，LI Jing 2，DING Yulin 1，WANG Wenlong 1，GAO Wa 3，ZHENG Bingwu 4，ZHANG Di 5，WANG Jinling 1 *稿件运行过程收稿日期：2023 - 12 - 06修回日期：2024 - 01 - 25关键词：赤大袋鼠；梭菌性肠炎；出血性坏死性胃肠炎；A 型产气荚膜梭菌Key words ：Red kangaroo （Macropusrufus ）；Clostridial enteritis ；Hemorrhagic necrotizinggastroenteritis ；Clostridiumperfringenstype A中图分类号：S858.9文献标识码：A 文章编号：2310 - 1490（2024）- 02 - 0403 - 06DOI ：10.12375/ysdwxb.20240220基金项目：内蒙古自治区科技重大专项课题（2021ZD0012）第一作者简介：董俊斌（1975—），女，副教授；主要从事兽医病理学相关工作。
２０１７年第３４卷第 ９ 期107园养大袋鼠“粗颌病”的病原分离与鉴定李照伟1，刘 霞1，费荣梅2，陈 蓉3，王素春4（1. 贵州省动物疫病预防控制中心，贵州贵阳 550008；2. 南京农业大学，江苏南京 210095；3. 南京市红山森林动物园，江苏南京 210028；4. 中国动物卫生与流行病学中心，山东青岛 266032）摘 要：园养大袋鼠“粗颌病”是一种由齿槽感染引发顽固性牙周炎，导致出现牙龈溃烂并形成溃疡、窦道，严重时颌面部肿胀、坏死，上下颌骨不可逆性变形等一系列临床症状为特征的口炎综合征。
本研究对江苏省南京市红山森林动物园发生“粗颌病”的两种园养大袋鼠进行病原分离与鉴定，从发病大袋鼠的病变部位分离出3株细菌。
依据形态特征和培养特性观察，以及生化试验和耐药性检测，初步判定其中1株为粪肠球菌（Enterococcus faecalis ），另2株为肺炎克雷伯菌（Klebsiella pnenmoniae ）。
通过全自动药敏分析和小鼠致病性试验，对分离菌株进一步鉴定，结果发现与初判结果一致。
小鼠口腔感染试验可以模拟复制出发病袋鼠下颌肿胀的病变特征，只是一般注射剂量不能致死小鼠。
关键词：袋鼠；粗颌病；病原分离与鉴定；粪肠球菌；肺炎克雷伯菌中图分类号：S851.3 文献标识码：A 文章编号：1005-944X （2017）09-0107-05DOI ：10.3969/j.issn.1005-944X.2017.09.028Pathogen Isolation and Identification for “Lumpy Jaw ”of Kangaroos in ZoosLi Zhaowei 1，Liu Xia 1，Fei Rongmei 2，Cheng Rong 3，Wang Suchun 4（1. Guizhou Provincial Animal Disease Prevention and Control Center ，Guiyang ，Guizhou 550008；2. Nanjing Agricultural University ，Nanjing ，Jiangsu 210095；3. Hongshan Forest Zoo ，Nanjing ，Jiangsu 210028；4. China Animal Health and Epidemiology Center ，Qingdao ，Shandong 266032）Abstract ：“Lumpy Jaw ”o f kangaroos in zoos is an oral inflammation syndrome caused by alveolus infection ，which was characterized by refractory periodontitis ，ulcerated gums resulting in ulcer and sinus ，swelling and necrosis in maxillofacial region and irreversible malposition of maxillary and mandible seriously. In this study ，the pathogens of “Lumpy Jaw ” in park kangaroos from Nanjing Hongshan Forest Zoo were isolated and identified. Three strains of bacteria were isolated and were identified as Enterococcus faecalis and Klebsiella pnenmoniae ，respectively ，by their morphology ，cultural characteristics ，biochemical characteristics and drug sensitivity. By full-automatic analysis of drug sensitivity and pathogenicity in mice experiment ，further identification of the isolated strains were carried out ，and the results were consistent with the former. The oral infection of mice experiment showed that the symptoms of “Lumpy Jaw ” in the mice could be simulated ，but general dozes could not contribute to death of mice.Key words ：kangaroo ；Lumpy Jaw ；pathogen isolation and identification ；Enterococcus faecalis ；Klebsiella pnenmoniae大袋鼠属哺乳动物纲有袋目（Marsupialia ）袋鼠科（Macropididae ）[1]，原产于澳大利亚大陆和巴布亚新几内亚的部分地区。
大袋鼠多群居，主要以灌木嫩树枝、青草和柔软植物为食[2]。
由于其具有较高的观赏价值，通常在动物园内作为观赏动物饲养[3]。
大袋鼠在园养过程中广泛流行一种口炎综合征，以齿槽感染引发顽固性牙周炎，出现牙龈基金项目：科技部科技基础性专项（SQ2012FY3260033）108溃烂并形成溃疡、窦道，严重时颌面部肿胀、坏死，上下颌骨不可逆性变形等为主要临床特征[4]，被Fowler 等[5]命名为“粗颌病”（Lumpy Jaw ）。
“粗颌病”的致病菌并非单一菌株，常为多种细菌，因而难以有效控制[6-8]。
发病袋鼠不分性别、品种和年龄，均有较高的发病率、复发率及病死率，因此严重影响袋鼠的正常展出与观赏，并可因预后不良导致死亡，造成巨大的经济损失。
对发病大袋鼠进行病原菌的分离与鉴定，可为该病的治疗及预防提供理论依据。
1 材料与方法1.1 材料发病袋鼠包括赤大袋鼠（Macropus rufus ）和灰大袋鼠（Macropus giganteus ）。
1.1.1 被检材料。
从发病袋鼠的口腔、牙龈、下颚，剪下痂皮、结节，或无菌采集病变部的脓汁、坏死组织。
1.1.2 培养基。
营养肉汤（NB ）、营养琼脂（NA ）平板、麦康凯琼脂（MAC ）平板、亚硫酸铋琼脂（BS ）平板、三糖铁琼脂（TSI ）斜面，血琼脂（BA ）平板（无菌脱纤羊血购自杭州微生物试剂有限公司），按使用说明书配制。
1.1.3 试剂及试纸。
草酸铵结晶紫溶液、革兰碘溶液、95%乙醇、沙黄溶液、香柏油、二甲苯溶液，硝酸盐还原检测试剂、VP 检测液、甲基红检测试剂、苯丙氨酸检测试剂，3% H 2O 2、生理盐水、氧化酶反应试剂及试纸、药敏试纸、葡萄糖氧化/发酵管、微量生化鉴定管，均购自杭州微生物试剂有限公司。
1.1.4 实验仪器。
SPX-150B-Z 型生化培养箱、DK-8D 数显恒温水浴箱、GY-31光学显微镜、SYQ-DSX-280B 手提式压力蒸汽灭菌器、THZ-C 台式恒温振荡器、Pico17离心机、Smart Spec TM3000紫外分光光度计、Biomerieux 微生物药敏分析鉴定系统等。
1.1.5 实验动物。
清洁级小鼠12只，雌性，体重均为20 g 左右，购自扬州大学比较医学中心。
1.2 细菌学检查1.2.1 细菌分离培养及形态学观察。
无菌采集发病袋鼠下颌感染部位脓汁[9]，接种于NB 中，分别置37 ℃烛缸和37 ℃生化培养箱内进行厌氧培养和有氧培养，24~48 h 后将其涂片染色镜检；待菌液浑浊度足够时，将增菌液分三区划线接种于BA 平板后，置37 ℃烛缸和37 ℃生化培养箱内增菌24~48 h ，挑取单个可疑菌落，对其涂片染色镜检。
1.2.2 细菌纯培养。
将染色镜检后的单个可疑菌落分别进行BA 平板接种、NB 纯培养，将培养物置37 ℃烛缸和37 ℃生化培养箱内24 h 后涂片染色镜检，观察是否出现杂菌。
如已达到纯培养目的，则继续观察细菌的形态以及在需氧环境和厌氧环境中的生长情况[10]。
1.2.3 细菌鉴别培养。
挑取单个可疑菌落，将其分三区划线接种于MAC 平板、BS 平板和TSI 斜面，置37 ℃生化培养箱，24 h 后观察。
1.3 生化试验取纯培养物，对其进行触酶、氧化酶、葡萄糖氧化/发酵等试验；参考细菌编码鉴定系统，接种微量生化鉴定管，置37℃生化培养箱，24 h 后鉴定生化特性[11]。
1.4 耐药性检测及全自动药敏分析鉴定根据抗生素敏感度判定标准[12]，采用K-B 纸片扩散法进行耐药性检测。
置37℃生化培养箱，24 h 后测量抑菌圈直径，判断细菌对14种药物的敏感性。
将3株纯培养物送检江苏省中西医结合医院进行全自动药敏分析鉴定。
1.5 动物试验取纯培养物，将其接种于NB 中，37 ℃，180 r/min 振摇12~14 h ，至细菌的生长对数期；以灭菌磷酸盐缓冲液（PBS ）洗涤3次，测定OD 600nm 值；将菌液浓度稀释至1.0×108CFU/mL ，进行小鼠口腔感染试验。
将小鼠随机分为4组，每组3只，设空白对照组。
除对照组外，其余各组分别注射不同细菌。
用无菌注射器吸取稀释菌液0.1~0.2 mL/只，２０１７年第３４卷第 ９ 期109进行小鼠口腔注射[10]（空白对照组不注射），观察小鼠1周内的发病情况。
2 结果与分析2.1 细菌学鉴定2.1.1 细菌形态。
经分离、纯化后得到3株不同的菌株。
其中：第1株为革兰阳性球菌，多呈双球形态，染色均匀，无鞭毛、芽孢和荚膜；第2株和第3株均为革兰阴性短杆菌，染色均匀，两端钝圆呈棒状，无规则散在，无鞭毛和芽孢，有荚膜。
2.1.2 细菌培养特征。
3株细菌均为需氧菌：第1株菌液浑浊度较低，管低见少量沉淀，振摇后沉淀呈螺旋上升；第2株和第3株菌液浑浊度较高，呈均匀浑浊。
细菌分离培养后，接种第1株菌的BA 平板上可见白色不透明针尖状菌落。
菌落直径0.5 mm 左右，表面光滑，边缘整齐；初分离时有狭窄溶血，传代后溶血现象不明显。
接种第2株和第3株菌的BA 平板上可见乳白色圆形小菌落。
菌落直径1~2 mm ，表面光滑、湿润，边缘整齐，不溶血。
细菌纯培养后，接种第2株和第3株菌的MAC 平板上出现呈玫红色圆形菌落。
