基础生物学实验(一)_基础生物学实验(安徽大学生物研究生复试,生命科学学院)概论

实验十四小白鼠的解剖实验一、实验目的1．学习小型哺乳动物的外部测量法，掌握哺乳动物的一般解剖方法。

2．了解小脑对躯体运动的调节机能。

二、实验原理哺乳动物是动物界中进化程度最高的1个类群，其内部器官系统结构较复杂、完善，其生理活动、行为等受神经和体液的精确调节。

实验用小白鼠来源于野生小鼠，是人工选择长期培育的产物，是生命科学和医学等科学研究中的通用实验动物。

对小白鼠形态结构、生理机能等的深入了解是进一步认识阐明哺乳动物(包括人)生命活动的规律和进行生命科学与医学等科学研究的基础。

三、实验用品（一）材料小白鼠。

（二）器材显微镜、天平、解剖器具、大头针、蜡盘、鼠笼、25ml小烧杯、载玻片、盖玻片、棉花。

（三）试剂乙醚、0.9%生理盐水、碘酒、75%乙醇、自来水。

四、实验操作(一)外形观察外部形态观察：小白鼠身体分为头、颈、躯干、四肢和尾5部分。

1．头部观察其外耳、口鼻吻的特征。

2．颈有明显的颈部，活动自如。

3．躯干观察体毛的分布特征，注意腹面末端的外生殖器和肛门，区分鼠的性别（此外，雌鼠的胸、腹部有较明显的乳头）。

4．四肢前肢肘部向后弯曲，具5指；后肢膝部向前弯曲，具5趾；指(趾)端除第一指(趾)外,具坚硬的爪。

5．尾尾长约与体长相等，观察其外部特征。

(二)外部测量(图14-1)1．体长由头的吻端至尾基。

2．尾长由尾基至尾的尖端，不计毛长。

3．后足长后肢跗跖部连趾的全长(不计爪)。

4．耳长由耳尖至耳的内面基部(耳毛除外)。

此外，还有称量体重，观察毛的色泽、长短、厚薄及粗细等，都一一作记录。

注：接触小白鼠时需戴手套，操作要小心，避免被其咬伤！图14-1 小型兽类外部测量(三)损毁小脑的效应小脑具有维持身体平衡、调节肌紧张和协调肌肉运动等机能。

当小脑损毁后，随着破坏程度的不同，可表现出不同程度的肌紧张失调及平衡失调。

1．观察正常小白鼠的动作手持小白鼠尾部，观察小白鼠在桌面上向前爬行时四肢动作是否协调、姿势是否平衡。

实验十七植物标本采集与制作一、实验目的植物标本是学习与研究植物必不可少的实物资料，学会采集和制作腊叶标本，乃从事植物分类研究所必须具备的基本技能。

二、实验原理“没有蜡叶标本，也就没有分类学。

”这句话道出了蜡叶标本的重要意义。

近50万种植物，遍布整个地球的每一个角落，人们为了科学研究的方便，或是教学的需要，必须把它们采集回来，并以适当的方式把它保存起来，也就是制作成标本。

而大量的（数以万计的）用于长期教学和科研的标本，主要是用草纸压干，装帧在洁白的台纸上，并且按照植物分类的等级：纲、目、科、属、种存放在特制的标本柜内，按一定的系统陈列在标本室内，也就是通常所说的蜡叶标本，而蜡叶标本就是物种的具体佐证或模式。

在科学研究和教学的过程中，这些蜡叶标本是的宝贵资料，标本的时间越久，越有研究价值。

解放前，曾有11个国家的159人来我国采集植物标本，发表了大量的新属和新种，这些标本也就作为模式标本存入国外标本馆，成为十分珍贵的科学资料。

蜡叶标本是经过采集、加工和消毒处理，能够长期保存的植株片段或整体。

标本的制作要符合规范，记录完全，成为合用标本。

它可以作为教学标本展示给学生学习，也可以存放在某标本馆里，让世界上其他的植物学家也能看到它，那作用就更大了。

哪怕是世界广布的一棵春蓼(Polygonum persicaria)或蒲公英(Taraxacum mongolicum)的标本，由于它是来自不同居群中的一个代表，因此在植物分类学家眼里都有一定的份量，三、实验用品(一)材料各种野外生长的蕨类植物、裸子植物和被子植物的植株。

(二)器材枝剪、小镐、望远镜、高枝剪、采集袋(箱)、海拔仪、放大镜、钢卷尺、指南针、小纸袋、号牌、采集签、铅笔、吸水纸、台纸、针、线、胶水、固体胶等。

（三）试剂 95%酒精、0.5%的升汞酒精溶液。

四、实验方法（一）植物标本的采集1．野外采集需备用品枝剪、小镐、望远镜、高枝剪、采集袋(箱)、海拔仪、放大镜、钢卷尺、指南针、小纸袋、号牌、采集签、铅笔。

基础生物学实验教学大纲安徽大学生命科学学院基础生物实验教学中心二00四年三月前言本实验教学大纲是在现行教学计划的指导下，结合基础生物实验教学中心的条件，对原有实验教学内容进行修订。

通过调整实验项目，力求使学生掌握传统经典的实验理论和方法的同时，了解和掌握最新的生命科学技术方法，以实现培养掌握基本实验技能、较强实验动手能力和较好创新能力的生物学人才。

本教学大纲由四个模块组成，第一模块是基础生物学实验（一），主要包括生物形态与结构观察和制作技术；第二模块是基础生物学实验（二），主要包括生态与环境监测技术；第三模块是基础生物学实验（三），主要包括生理和生化研究技术；第四模块是基础生物学实验（四），是细胞和遗传研究技术。

此大纲于2003年12月由学院教学委员会审定通过。

从2004级起试行。

今后在试行过程中将根据情况进行修订。

安徽大学基础生物实验教学中心2004年3月第一模块基础生物学实验(一)——形态与结构Basic experiment of biology (I)课程性质：专业基础课授课对象：生命科学学院生物学相关各专业授课单位：安徽大学基础生物实验教学中心学分：1.5学分总学时：54学时预修课程或相关知识要求：植物生物学、动物生物学、微生物学一、教学目的：目的是使学生逐步掌握植物生物学、动物生物学和微生物学的基本方法和技能，了解植物生物学、动物生物学和微生物学实验设计的基本原则及获得植物生物学、动物生物学和微生物学知识的方法，并提高实验中各种植物生物学、动物生物学和微生物学现象的观察能力、分析能力、独立思考和独立解决问题的能力。

在实验的过程中，培养学生对科研工作严肃的态度、严格的方法和严谨的作风。

二、基本内容：植物生物学方面：按照从简单到复杂、从低等到高等、从微观到宏观的次序，依次安排了植物的细胞和组织、植物的营养器官和繁殖器官以及孢子植物（藻、菌、地衣、苔藓、蕨）形态结构等方面的项目，至于种子植物的系统分类将在专业系统实验部分介绍。

实验二培养基制备和灭菌技术一、实验目的1．学习一般培养基的制备方法。

2．掌握高压蒸汽灭菌技术，了解几种常用的灭菌方法。

二、实验原理（一）培养基培养基是按照微生物生长繁殖所需要的各种营养物质，用人工的方法配制而成的一种基质。

它是微生物的生活环境，各种微生物对养分和培养基的物理、化学要求条件不一样，为了分离、培养、鉴定、保藏和研究不同种类的微生物，就应当根据它们的需要，配制合适的培养基。

微生物在培养基上生长发育，必须在一定的最适酸碱度范围才能表现出它们最好的生命活动力。

不同的微生物对酸碱度的要求不同，因此，我们在配制培养基时，必须调节培养基的pH值。

培养基的种类繁多，根据培养基的成分、物理性状不同，可分为天然培养基、合成培养基、半合成培养基、固体培养基、半固体培养基和液体培养基。

1．天然培养基:主要成分是复杂的天然有机物质配制而成，如马铃薯、玉米粉、豆芽汁、牛肉膏、蛋白胨、血清等，这些复杂天然有机物质的成分不完全了解，每次所用的原料，其中各成分的数量也不恒定的天然有机物质配制成的培养基，如牛肉膏蛋白胨、马铃薯、麦芽汁培养基。

它适用于生产上大规模培养微生物。

2．合成培养基:合成培养基是用化学成分完全了解的纯化合物药品配制而成的培养基，也称化学成分明确的培养基，例如高氏一号培养基、查氏培养基等。

一般适用于在实验室范围内研究微生物的形态、代谢、分类鉴定、生物测定、菌种选育和遗传分析等工作。

3．半合成培养基:在以天然有机物作为微生物营养来源的同时，适当补充一些成分已知的化学药品所配制的培养基叫半合成培养基。

大多数微生物都能在此种培养基上生长，因此，应用广泛，如马铃薯葡萄糖(蔗糖)培养基，大多数霉菌都生长良好。

4．固体培养基:在液体培养基中加入凝固剂即为固体培养基，常用凝固剂有洋菜、明胶、硅胶，硅胶用于配制自养微生物的固体培养基；对于其他多数微生物来讲，洋菜最为合适，一般加入1.5～2.5%即可凝固成固体，如牛肉膏蛋白胨培养基等。

实验十反射弧分析一、实验目的通过实验分析反射弧的组成，了解反射弧的完整性与反射活动的关系。

二、实验原理在中枢神经系统参与下，机体对刺激所作的规律性应答称为反射。

反射活动的结构基础是反射弧，它一般包括感受器、传入神经、神经中枢、传出神经和效应器五个组成部分。

反射的实现必须有完整的反射弧，反射弧的任何一部分受到破坏，都将使反射不能实现。

由于脊髓是中枢神经系统的低级部位，机能比较简单，所完成的反射比较容易观察，故常用脊动物进行反射弧分析。

三、实验用品（一）材料蟾蜍或蛙（二）器材蛙类手术器械、毁髓针、铁架台、蜡盘、细铁丝钩、直棒、滤纸、纱布、滴管、小棉球、小烧杯、培养皿；（三）试剂0.5%及１%硫酸、1℅普鲁卡因（或利多卡因）、任氏液。

四、实验操作1、制备脊动物用探针划断蟾蜍脑与脊髓的联系，毁脑保留脊髓。

注意用棉花止血。

2、将脊动物俯卧固定在蛙板上。

剪开左侧大腿皮肤，分离肌肉和结缔组织，暴露坐骨神经，在神经下穿一条丝线，并垫一浸蜡纸片。

3、用大头针钩住动物的下颌，悬挂在支架上。

4、按以下步骤进行实验观察：(1) 用0.5%硫酸，分别刺激二后肢的中趾趾端，观察两腿有无屈反射发生。

立即清洗脚趾，并用纱布擦干。

(2) 在右侧膝关节处，将皮肤作一环形切口，剥去下肢皮肤，再用0.5%硫酸刺激右脚趾，观察两腿是否出现屈反射，并立即洗净脚趾。

(3) 将浸过１%硫酸的滤纸片贴在左后肢的皮肤上，观察两腿是否出现屈反射，并立即洗净脚趾。

(4) 在左后肢的坐骨神经上放一浸过普鲁卡因的小棉球，每隔１分钟用0.5%硫酸刺激该后肢脚趾，观察两腿是否出现屈反射，并立即洗净脚趾。

(5) 当左后肢刚刚不出现反应时，立即将浸过１%硫酸的滤纸片贴在左侧背部，观察两侧肢体是否出现搔扒反射。

(6) 每隔１分钟，重复一次步骤５，直到刺激身体任何部位都不能引起左后肢的反应。

(7) 用镊子夹右后肢，观察有无屈反射发生。

(8) 用探针捣毁脊髓，观察有无屈反射及搔扒反射发生。

实验七ABO血型鉴定及交叉配血实验一、实验目的通过鉴定实验和配血实验来学习、掌握人类ABO血型的原理和方法。

二、实验原理血型是特指血细胞膜表面抗原的类型。

ABO血型系统是一类常用的血液分型体系。

在ABO血型系统中，红细胞膜上抗原分A和B两种抗原，而血清抗体分抗A和抗B两种抗体。

A抗原加抗A抗体或B抗原加抗B抗体，则产生凝集现象。

血型鉴定是将受试者的红细胞加入标准A型血清（含有抗B抗体）与标准B型血清（含有抗A抗体）中，观察有无凝集现象，从而测知受试者红细胞膜上有无A 或/和B抗原。

在ABO血型系统，根据红细胞膜上是否含A、B抗原而分为A、B、AB、O四型(表7-1)。

统不同，人群中Rh血型的不匹配非常罕见，尤其在黄种人中，Rh(+)型占到99.7%,而Rh(-)型还不到0.3%。

所以在医疗输血中，通常只考虑献血者和输血者之间ABO血型是否匹配。

ABO血型在人群中的分布，存在着地理环境及民族、种族的差异，在我国汉族人群中，各血型的比例由多到少依次是O(34.11%)﹥ B(28.98%)﹥A(28.29%)﹥AB(8.69%)。

交叉配血是将受血者的红细胞与血清分别同供血者的血清与红细胞混合，观察有无凝集现象。

输血时，主要考虑供血者的红细胞不要被受血者的血清所凝集，其次才考虑受血者的红细胞不被供血者的血清所凝集。

前者叫交叉配血的主侧，后者称为交叉配血的次侧。

只有主侧和次侧均无凝集，称为“配血相合”。

如果主侧凝集，称为“配血不合”或“配血禁忌”，绝对不能输血；如果主侧不凝集，而次侧凝集，可以认为“基本相合”，但输血要特别谨慎，不宜过快过多，密切注视有无输血反应。

三、实验材料人外周血四、实验器材与试剂(一)器材采血针、尖头滴管、载玻片、1.5ml Eppendorf管、75%酒精棉球、消毒干棉球和记号笔。

(二)仪器显微镜、离心机。

(三)试剂标准A血清、标准B血清、生理盐水、碘酒。

五、实验操作（一）ABO血型鉴定1．用记号笔在载玻片两端分别作好标记A、B。

2011安徽大学生命科学学院复试笔试（回忆版）一. 名词解释（12*3）1.生物同化效率2.生态平衡3.Bergman规律4.食草动物的反刍5.细胞的渗透势6.光周期7.cell differentiation 8.signal sequence and leader sequence9.CDK10.Alu家族11.逆转录12.RNA编辑二. 简答（6*4）1.简述调查一定域内某物种种群密度的几种常见方法2.肾脏的功能有哪些？3.简介与G蛋白偶联受体介导磷酸肌醇信号通路4.RNA转录后加工包括哪些内容，有什么意义？三. 论述（10*4）1.写出自然界碳循环的三种生物间小循环和生物地质大循环2.光对植物生长有哪些影响？3.简述干细胞与癌症和衰老的关系4.什么是操纵子？科学家们在发现和研究操纵子的过程中应用了哪些方法？试阐明一种操纵子对基因转录调节的作用机理2012年复试笔试题目（部分题目）一、名词解释1.种群2.初级生产量3.贝格曼定律4.核仁组织区5.核定位信号6.微管组织中心7.反义RNA8.D环复制9.SD序列10.基因组二、简答1.谈谈陆生动物如何适应于干旱环境2.种群调节理论有哪些学派？各学派所强调的种群调节机制是什么？3.何为Rb蛋白？谈谈其在细胞周期调控中所起的作用4.从端粒酶的角度谈谈细胞衰变与肿瘤发生的关系5.试从转录起始、转录后这两个层次阐述真核生物基因表达调控的特点安徽大学生命科学院2015年复试真题一、名词解释1.基础代谢率2.干扰素3.营养繁殖4.分子伴侣5.RTK6.APC7.氨酰RNA合成酶8.转座子9.反式作用元件二、填空1.免疫第二道防线是，有哪些物质，干扰素，；2.垂体的组成：，。

3.生长激素幼体缺乏，导致；4.周围神经系统，中枢神经系统组成。

5.肌肉收缩的两个种类；6.根的出生结构；表皮，，维管束7.内质网的作用：参与蛋白质的合成，加工，运输以及参与；8.公认的第二信使cAMP，IP3+，Ca2+，；9.马达分子的种类：微丝，微管，；，10.蛋白质细胞外分泌的种类：，；11.细胞通讯连接，动物细胞，神经元之间突触，植物细胞；12.细胞程序性死亡的种类：，，，细胞死亡；13.真核生物mRNA的转录后加工包括：，，mRNA剪接15.真核生物翻译的起始密码子：；三．简答题1、动物激素的种类与作用；2、植物气孔开关的原理；3、为何说小肠是消化食物和吸收营养物质的主要场所?4、真核生物与原核生物转录过程的不同；5、线粒体和叶绿体在物质代谢与能量传递的作用；普生重点内容1：绪论和第一篇“细胞”为基础内容；双名法；生物膜；细胞通讯；物质跨膜转运方式；光合作用；细胞呼吸；有丝分裂与有丝分裂的不同点2：第二篇：为重点（去年考了好多填空题）；其中，第6，7，8，10，11，12，16节重点，其他的可一带而过；动物的四种组织结构；自养和异样；营养素；各种食物的消化吸收过程（去年考了个小肠的作用）；心脏的结构；双循环（体循环和肺循环）；人体呼吸系统组成及其调节；内环境含义及其组成；人体的供热和散热机制；尿的生成过程；抗利尿激素的调节机理；免疫系统的组成；（防线，免疫应答反应）；自身免疫病；激素的分类及其作用的机制（包括几种激素的调节功能）；神经元的结构以及产生电位的机理；反射及其结构；肌肉收缩机理；动物胚胎发育的一般模式（重点）；3：第三篇：植物学的重点主要问题：双子叶和单子叶的比较异同；植物器官的组织；根和茎横切面；三种基本细胞类型的特点；根和茎的初生生长和次生生长的分别比较；植物的生殖和发育(心皮，孢子体，配子体，世代交替，双受精作用）；被子植物的生活史；被子植物的雌雄配子体的生成；果实和种子结构；凯氏带及其结构；蒸腾作用；气孔开张机理9去年考的大题；菌根；各种生长素的功能；4：遗传与变异：都是基本的，去年考了个比较的题好像，这部分涉及分子生物学的知识(建议结合生化下册的分子生物学知识看），主要是DNA复制，转录，翻译，调控四个方面；5：第5篇，第6篇（第29，30节重点看），第7篇生态学可能会考；。

实验九植物组织渗透势的测定一、实验目的1. 观察植物组织的细胞质壁分离过程及其原理和方法的掌握。

2. 学会用质壁分离法测定植物细胞渗透势的方法。

二、实验原理渗透势是指因溶质溶解而使水的自由能降低(与纯水相比)的数值，降低的值与溶质的浓度成正比，纯水的水势最大(值定为零)，当水中具有溶质，水势便降低，此时的水势称为渗透势，故是负值(渗透势的绝对值等于溶质的渗透压，渗透压为正值)。

渗透势的单位以巴表示，1巴 = 0.985大气压(或1大气压 = 1.013巴)。

植物成熟的细胞都具有液泡，液泡中具有各种溶质，故具有一定的渗透势，液泡外面包裹着活的原生质，原生质外面有细胞壁包围，细胞壁可看作是层透膜，活的原生质具有选择性，所以整个细胞类似一个渗透系统。

可用质壁分离法测量细胞渗透势。

质壁分离法当细胞放在一种渗透势比其细胞液渗透势低的溶液中时，细胞液中的水向外渗，液泡体积缩小，原生质的胞壁也跟着向内收缩，如水分继续外渗，液泡体积缩小，而胞壁弹性有限，不能继续收缩，原生质就和细胞壁脱离，这就是质壁分离现象。

当细胞放在某一溶液中，细胞内外水分交换达到平衡，即处于渗透平衡状态，此时细胞内的压力势为零，那么细胞液的渗透势就等于该溶液的渗透势，该溶液浓度称为等渗浓度。

利用一系列梯度浓度的溶液，观察质壁分离现象时，细胞的等渗浓度将介于刚刚引起初始质壁分离现象时(即细胞只是角偶上与胞壁分离)的浓度和与其相邻的尚不能引起质壁分离浓度梯度之间的溶液浓= - RTiC即可算出其渗透势。

度。

代人公式Ψs三、实验用品（一）材料洋葱鳞茎或紫鸭跖草叶片。

（二）器材显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、刀片。

（三）试剂 1 mol/L蔗糖溶液。

四、实验操作1．以1 mol/L的蔗糖溶液作母液，用蒸馏水配成0.10，0.20，0.25，0.30，0.35，0.40，0.45，0.50，0.60 mol/L的一系列浓度的蔗糖溶液各10 ml。

各溶液分别装入具塞子试管中，按浓度梯度递减的次序排成一行，并在试管壁上贴上标签注明浓度。

实验十三蟾蜍的解剖一、实验目的通过对蟾蜍外部形态和内部构造的观察，重点了解两栖动物的消化、呼吸、泄殖及骨骼系统。

二、实验原理在脊椎动物进化史上，由水生到陆生是一个巨大的飞跃。

两栖类是由水生到陆生的过渡类群，其代表动物蟾蜍的形态结构和生理机能明显地反映了两栖类对陆生的初步适应及不完善性。

三、实验用品(一)材料活蟾蜍；蟾蜍整体骨骼标本。

(二)器材解剖器具、蜡盘、大头针、棉球。

四、实验操作(一)处死及外形观察将蟾蜍放入麻醉缸中用乙醚麻醉约20分钟致死，然后置蜡盘内观察。

蟾蜍身体可分为头、躯干和四肢3部分。

(1)头部蟾蜍头部扁平，略呈三角形，吻端稍尖。

口宽大，横裂型，由上下颌组成。

上颌背侧前端有1对外鼻孔，外鼻孔外缘具鼻瓣。

眼大而突出，生于头的左右两侧，具上、下眼睑，下眼睑内侧有一半透明的瞬膜（思考：眼睑和瞬膜的出现对陆上生活有何适应意义?）。

眼后侧隆起为蟾蜍特有的耳后腺。

(2)躯干部鼓膜之后为躯干部。

蟾蜍的躯干部短而宽，躯干后端两腿之间，偏背侧有一小孔，为泄殖腔孔。

(3)四肢前肢短小，从近体侧起，依次区分为上臂、前臂、腕、掌、指5部。

4指，指间无蹼，指端无爪。

生殖季节雄蟾蜍第1指基部内侧有一膨大突起，称婚瘤，为抱对之用。

后肢长而发达，从近体侧起，依次区分为股、胫、跗、跖、趾5部。

5趾，趾间有蹼。

在第1趾内侧有一较硬的角质化突起，称踝状距。

思考：根据以上观察，从外形上如何区别雄蟾蜍和雌蟾蜍?（4）皮肤蟾蜍背面皮肤粗糙，不像青蛙用手抚摸有粘滑感。

在后面剥离蟾蜍皮步骤中，注意皮肤与皮下肌肉的连接程度。

（思考：蟾蜍皮肤内分布的血管丰富吗?有何意义?）(二)解剖及内部构造观察(图13-1)将蟾蜍腹面向上置于解剖盘内，展开四肢。

左手持镊，夹起腹面后腿基部之间泄殖腔孔稍前方的皮肤，右手持剪剪开一切口，由此处沿腹中线向前剪开皮肤，直至下颌前端。

1．口咽腔为消化和呼吸系统共同的器官。

(1)舌左手持镊子将蟾蜍的下颌拉下，可见口腔底部中央有一柔软的肌肉质舌，其基部着生在下颌前端内侧，舌尖向后伸向咽部。

基础生物学实验（一）基本内容课程名称：基础生物学实验（一）实验总学时：72 实验学分：2英文名称：Basical experiment of biology （I ）面向专业：生命科学学院所有专业（生命科学、生物技术、生态学、环境科学）一、课程介绍“基础生物学实验（一）”即《动物生物学实验》，是生命科学学院有关专业（生物科学、生物技术、环境科学、生态学）的基础课。

本课程在一年级下学期开设。

《动物生物学实验》共72学时，2学分,其中必修内容56学时，选修内容必须选够16 学时。

基本内容为显微镜技术、动物的活体染色、活体观察、动物的细胞、组织以及基本制片方法、动物各类群代表动物形态解剖、观察、分类及检索表的编制。

二、教学目标与基本要求本课程的教学目标是使学生逐步掌握动物生物学实验的基本方法和技能，了解动物生物学实验设计的基本原理、获得动物生物学知识的方法，提高对各种动物生物学现象的观察能力、独立思考能力、分析和解决问题的能力。

在实验的过程中，培养学生科研工作的严肃态度、严格的方法和严谨的作风。

通过实验课教学加深理解和巩固课堂讲授所学知识，熟悉动物生物学的基本操作技术，提高动手能力及观察分析能力，培养科学、严谨、实事求是的学风。

实验结束后，要求每人写一份实验报告（包括绘图），或根据实验情况由教师进行当堂口试，结合实验操作情况打分。

实验报告要求文字简练、通顺、书写清楚、整洁、正确使用标点符号。

绘图要求正确、真实、精细、美观。

三、项目与内容提要四、考核办法实验课成绩由以下部分组成，各占一定的比例，各部分成绩必须达到相应成绩的60% 才能得到总成绩和相应的学分。

1.出勤与实验习惯占10%；；2.平时成绩（完成实验课的内容，实验操作及平时表现）占20%；3.实验报告占50%；4.考核成绩（面试或笔试，给出若干题目，要求学生任选一个设计实验方案，并动手完成，给出实验结果）占20%。

五、教科书与参考书（一）教科书黄诗笺主编.动物生物学实验指导.北京：高等教育出版社，2001（二）参考书1.刘凌云，郑光美主编.普通动物学实验指导（第二版）.北京：高等教育出版社，19982.王丽珍编.无脊椎动物实验指导：云南大学生物学系（讲义）3.秉志，鲤鱼解剖.北京：科学出版社，19604.孟庆闻等.鱼类比较解剖.北京：科学出版社，19875.马克勤.脊椎动物比较解剖学实验指导.北京：高等教育出版社,19866.吴政安.两栖类骨髓细胞的染色体标本制作法遗传4（1）：38-39, 19827.杨安峰.兔的解剖.北京：科学出版社，19798.程红.脊椎动物比较解剖学实验指导.北京：北京大学出版社，1996。

附录Ⅴ常用培养基一、牛肉膏蛋白胨培养基(培养细菌用)牛肉膏 3g 蛋白胨 10g NaCl 5g 琼脂 20g 蒸馏水 1000ml pH 7.2-7.4 121℃灭菌20min二、高氏(Gause)一号培养基(培养放线菌用)可溶性淀粉 20g KNO31g NaCl 0.5gK 2HPO40.5gMgSO40.5gFeSO40.01g琼脂 20g蒸馏水 1000mlpH 7.2-7.4配制时，先用少量冷水，将淀粉调成糊状，倒入煮沸的水中，在火上加热，边搅拌边加入其他成分，溶化后，补足水分至1000ml。

121℃灭菌20min。

三、马铃薯培养基(简称PDA)(培养真菌用)马铃薯 200g蔗糖(或葡萄糖) 20g琼脂 20g蒸馏水 1000mlpH 自然马铃薯去皮，挖去芽眼，切成块煮沸30min，然后用纱布过滤，再加入糖及琼脂，溶化后，补足水分至1000ml。

121℃灭菌20min。

四、豆芽汁蔗糖(或葡萄糖)培养基黄豆芽 100g蔗糖(或葡萄糖) 50g琼脂 20g蒸馏水 1000mlpH 自然新鲜豆芽100g，放入烧杯中，加水1000ml,煮沸约30min，然后用纱布过滤，再加入糖及琼脂，溶化后，补足水分至1000ml。

121℃灭菌20min。

五、淀粉培养基蛋白胨 10g NaCl 5g 牛肉膏 5g 可溶性淀粉 20g 琼脂 20g 蒸馏水 1000ml pH 7.2-7.4 121℃灭菌20min六、明胶培养基牛肉膏蛋白胨液 100ml 明胶 12-18g pH 7.2-7.4 121℃灭菌20min七、蛋白胨水培养基蛋白胨 10g NaCl 5g 蒸馏水 1000ml pH 7.6 121℃灭菌20min八、糖发酵培养基蛋白胨水培养基 1000ml 1.6%溴甲酚紫乙醇溶液 1-2ml pH 7.6 另配20%糖溶液(葡萄糖、乳糖、蔗糖等)各10ml九、葡萄糖蛋白胨水培养基蛋白胨 5g葡萄糖 5gK 2HPO42g蒸馏水 1000ml pH 7.2-7.4 112.6℃灭菌30min十、H2S实验培养基蛋白胨 20g NaCl 5g 柠檬酸铁铵 0.5g 琼脂 20g 蒸馏水 1000ml pH 7.2 121℃灭菌20min十一、乳糖蛋白胨培养液 ( 内有倒置小套管)蛋白胨 10g 牛肉膏 3g 乳糖 5g NaCl 5g1.6%溴甲酚紫乙醇溶液 2ml琼脂 20g蒸馏水 1000mlpH 7.2112.6℃灭菌30min十二、伊红美蓝琼脂平板(EMB培养基)蛋白胨水琼脂培养基 100ml20%乳糖溶液 2ml2%伊红水溶液 2ml0.5%美蓝水溶液 1ml将已灭菌的蛋白胨水琼脂培养基(pH7.6)加热溶化，冷却至60℃左右时，再把已灭菌的乳糖溶液，伊红水溶液及美蓝水溶液按上述量以无菌操作加入。

实验二十一外界因素对酶活性的影响一、实验目的1.了解外界因素对酶活性及酶促反应速度的影响。

2.加深对酶特性的认识。

二、实验原理酶的化学本质是蛋白质，它极易受外界条件的影响而改变它的构象及性质，因而也必然会影响到它的催化活性。

酶对温度、pH值、酶浓度及某些离子浓度等变化很敏感。

(一)pH值对酶活性的影响酶的活性受环境pH的影响极为显著，通常各种酶只有在一定的pH范围内才能表现它的活性。

一种酶表现其最高活性时的pH值称为该酶的最适pH。

高于或低于最适pH值时，酶的活性降低。

酶的最适pH值受酶的纯度、底物的种类和浓度、缓冲液的种类和浓度以及环境温度等条件影响。

(二)温度对酶活性的影响每种酶都有其最适温度，高于或低于此温度酶的活性都降低。

一般而言，若酶处于过高的温度环境中，会使酶活性永久地丧失；而若处于极低温度的环境中只会使酶活性受到抑制，一旦温度适宜，酶又会全部或部分地恢复其活性。

(三)酶浓度对酶促反应速度的影响在其它条件不变的情况下，若反应物浓度大大高于酶浓度时，则反应速度随酶浓度增加而增加，两者间成正比关系，即：V=k[E]但若反应底物浓度较低，而且酶的浓度足够高时，增加酶浓度，反应速度基本不变。

(四)离子对酶活性的影响就唾液淀粉酶而言，低浓度Cl- 可以增加酶活性，高浓度的Cl- 或者低浓度2-等对酶活性没有影响。

不同的酶的Cu2+则会抑制酶的活性，而低浓度的Na+、SO4对不同的离子具有不同的效应。

三、实验用品（一）材料淀粉、唾液淀粉酶。

（二）器材冰箱、电炉、恒温水浴锅和铜水浴锅、试管架及试管、移液管架及移液管、锥形瓶。

（三）试剂1. 0.2 mol/L磷酸氢二钠溶液称取35.61g含2个结晶水的磷酸氢二钠，用水定容至1 L。

2. 0.1 mol/L柠檬酸溶液称取21.01g含1个结晶水的柠檬酸，用水定容至1 L。

3. 唾液淀粉酶将唾液分别稀释10倍，50倍和100倍，得三种浓度的酶液。

4. O.5%淀粉的0.5%氯化钠溶液 0.5 g可溶性淀粉和0.5g氯化钠，溶于100 ml蒸馏水(需加热)。

实验11环境微⽣物的检测_基础⽣物学实验（安徽⼤学研究⽣复试⽤,⽣物⽣命科学）实验⼗⼀环境微⽣物的检测⼀、实验⽬的1.学习从混杂的微⽣物群体中分离纯化微⽣物的⽅法，掌握分离纯化的基本操作技术；2.学会从菌落及培养特征辨别细菌、酵母菌、放线菌和霉菌四⼤类微⽣物；3.学会好氧、厌氧的微⽣物平板及斜⾯培养的⽅法。

⼆、实验原理从杂居在⼀起的微⽣物群体中获得只含有某⼀种或某⼀株微⽣物的过程称为微⽣物的分离与纯化。

具体的⽅法有1.单细胞挑取法简易单孢⼦分离法是⼀种不需显微单孢操作器，可直接在普通显微镜下利⽤低倍镜分离单孢⼦的⽅法。

它采⽤很细的⽑细管吸取较稀的萌发的孢⼦悬浮液滴在培养⽫盖的内壁上，在低倍镜下逐个检查微滴，将只含有⼀个萌发孢⼦的微滴放⼀⼩块营养琼脂⽚上，使发育成微⼩菌落。

再将微⼩菌落转移到培养基中，即可获得仅由单个孢⼦发育⽽成的纯培养。

2.平板分离法该⽅法操作简便，普遍⽤于微⽣物的分离、纯化。

基本原理包括：（1）选择适合的待分离微⽣物的⽣长条件，例如营养条件、合适的酸碱度、温度和氧等要求或加⼊某种抑制剂造成只利于该微⽣物⽣长，⽽抑制其他微⽣物⽣长的环境，从⽽淘汰⼀些不需要的微⽣物。

（2）微⽣物在固体培养基上⽣长繁殖形成的单个菌落可以是由⼀个细胞繁殖⽽成的集合体。

可以通过挑取单菌落⽽获得⼀种纯培养，获取单个菌落的⽅法可通过稀释涂布平板法或平板划线法等技术完成。

值得⼀提的是从微⽣物群体中经分离⽣长在平板上的单个菌落并不⼀定保证是纯培养。

纯培养的确定除了观察其菌落形态外，还要结合显微镜观察到的个体形态特征后才能确定，有些微⽣物的纯培养要经过⼀系列的分离与纯化过程和多种特征鉴定⽅能得到。

⼟壤是微⽣物⽣活的⼤本营，它所含微⽣物⽆论是种类还是数量上都是极其丰富的。

因此⼟壤是微⽣物多样性的重要场所，是开发微⽣物资源的重要基地，可以从其中分离、纯化得到许多有价值的微⽣物菌株。

本实验将采⽤以下不同的培养基从⼟壤中分离出不同类型的微⽣物。

实验一显微镜下的生命世界一、实验目的1．了解普通光学显微镜的构造和各部分的性能，学习并掌握正确的使用方法及维护方法。

2．了解真核细胞的各种形态，及形态与机能的关系，理解细胞是生命体结构与生命活动的基本单位。

3．了解真核细胞与原核细胞，动物细胞与植物细胞结构的异同点。

4．在显微镜下观察水中的各种微小生物，认识常见的细菌和真菌，进一步认识生命的多样性。

5．学习临时装片方法、某些细胞器的活体染色方法和细菌的一般染色方法。

6．了解生物绘图的意义和方法，初步学习生物绘图技术二、实验原理生命的存在具有多层次性。

从宏观角度，在个体水平上，千姿万态的动、植物强烈表现出的生命多样性，使整个大自然显得生机盎然、绚丽多彩。

然而，随着显微镜的发明和显微技术的发展，当人们进入生命的显微世界后，不仅看到了肉眼所不能观察到的形形色色单细胞生物和低等多细胞生物，而且越来越深刻地认识到所有宏观生物都是多细胞生物，细胞是除病毒以外所有生命体结构与生命活动的基本单位，同时，细胞自身又是多层次的复杂结构体系。

生物细胞可分为原核细胞和真核细胞两大类。

原核细胞由细胞膜、细胞质和核物质等部分组成，不具有典型的细胞核结构及多种细胞器，如细菌细胞。

真核细胞由原核细胞进化而来，其内部结构与机能更复杂和多层次化。

在结构上，真核细胞突出表现为以膜系统的分化为基础，形成了有膜包围的典型细胞核和结构与功能更专一的多种细胞器，如线粒体、高尔基体、内质网、溶酶体、叶绿体及液泡等。

并且，构成真核生物的真核细胞种类繁多，形态各异，其形态的多样性又与机能密切联系。

在显微镜下观察生命世界，使人们进一步认识到生命的多样性、层次性和整体性，进一步认识细胞的结构，以及形态结构与机能的关系。

细胞内的结构在自然状态下近于无色，一般要经过染色后方可在普通光学显微镜下显示得较清楚。

不同的细胞组分对各种染料的亲和力不同。

两者间亲和力强，染色就深，否则，染色就浅或无，这样便能形成足够的反差以区分细胞组分。

实验二十纸层析法分析氨基酸一、实验目的1.掌握纸上层析的一般原理和操作方法。

2.了解氨基酸的特征性颜色反应。

3.学会分析未知样品的氨基酸成分。

二、实验原理纸上层析法是分配层析法中的一种，常以滤纸为惰性支持物。

纸上层析法是分离、鉴定和定量测定氨基酸、糖类、抗生素等有机物质的一项重要而简便的分析方法。

所用设备简单、操作方便，使用样品少，分离效果好，为近代生物化学分析中重要技术之一。

此法广泛地应用于科研和生产分析工作中。

纸上层析的原理，常以水和有机溶剂作为展层剂；水和有机溶剂互溶后形成两个相：一个是饱和了有机溶剂后的水相，一个是饱和了水后的有机溶剂相。

由于滤纸纤维素上的羟基和水分子有较大的亲和力，而与有机溶剂的亲和力相对较弱，因此我们认为水相为固定相，有机溶剂相为移动相。

由于物质的极性大小不同，在两相中分配比例有所差异。

极性小的物质在有机相中分配较多，随有机相移动较快；而极性大的物质在水相中分配较多，移动相对较慢，从而将极性不同的物质分开。

一般来说，在相同的条件下，每种物质都有其固定的Rf值。

Rf值的定义为：Rf=(原点到层析斑点中心的距离)/（原点到溶剂前沿的距离）影响Rf值的因素有：①物质本身的化学结构；②展层所用溶剂系统；③展层剂pH值；④展层时的温度；⑤展层所用滤纸；⑥展层的方向(横向，上行或下行)。

用纸层析鉴定样品时，一般都与标准品相比较。

若没有标准品，可选择文献记载的该物质层析条件，根据文献Rf值进行鉴定。

三、实验用品1．材料氨基酸2．器材层析缸、烘箱、冷热电吹风机、毛细管、针和线、培养皿。

3．试剂(1)展层剂和平衡液正丁醇：冰醋酸：水=4：1：5，充分摇匀，用分液漏斗取上层液作展层剂；下层液作平衡液。

(2)样品液用水配成每ml含有苯丙氨酸、丙氨酸、组氨酸、脯氨酸各4 mg的4种氨基酸溶液，以及上述4种氨基酸的混合液(各4 mg／m1)。

苯丙氨酸不易溶解于水，应稍微加热使之溶解。

(3)茚三酮按展层剂O.25％的比例将茚三酮加入展层剂中，使其溶解。

实验15花的基本形态、内部结构及花序类型_基础⽣物学实验（安徽⼤学研究⽣复试⽤,⽣物⽣命科学）实验⼗五花的基本形态、内部结构及花序类型⼀、实验⽬的1.了解花的基本构造和花序类型。

2.了解花药和⼦房的内部结构。

⼆、实验原理被⼦植物发育到⼀定阶段时，在茎上孕育着花原基并发育成花。

从植物系统进化和植物形态学的⾓度来看，有研究者认为花实际上是⼀种不分枝且节间短缩的、适于⽣殖作⽤的变态短枝。

花柄是枝条的⼀部分，花托是花柄顶端略为膨⼤的部分，花萼、花冠、雄蕊和雌蕊是着⽣于花托上的变态叶(图15-1)。

花在植物的个体发育中，花的分化标志着植物从营养⽣长转⼊⽣殖⽣长。

花是被⼦植物所特有的有性⽣殖器官，是形成雌雄⽣殖细胞和进⾏有性⽣殖的场所。

被⼦植物通过花器官完成受精、结果、产⽣种⼦等⼀系列有性⽣殖过程，以繁衍后代，延续种族。

花在植物的⽣活周期中占有极其重要的地位。

⼤多数被⼦植物的花，密集或稀疏地按照⼀定排列顺序，着⽣在特殊的总花柄上。

花在总花柄上有规律地排列⽅式，称为花序。

图15-1 花的基本组成部分三、实验⽤品(⼀)材料载玻⽚、盖玻⽚、油菜花、百合花药横切⽚、百合⼦房横切⽚、花序类型标本(⼆)器材显微镜、放⼤镜、解剖器、试剂瓶、滴管(三)试剂蒸馏⽔四、实验操作(⼀)花的组成及其特点取油菜花在放⼤镜下观察其外形，由外向内逐项观察下列各部 1．花萼在花的最外层，由四个绿⾊的，分离的萼⽚组成。

2．花冠在花萼的内侧，由四个黄⾊的，分离的花瓣组成。

3．雄蕊群在花冠内侧，共由六个雄蕊组成，四长⼆短，每个雄蕊包括两部分，上部是囊状体，叫花药。

下部是丝状体，叫花丝。

有些植物在雄蕊的基部有绿⾊⼩点，为密腺。

4．雌蕊位于花的中央，可分为柱头、花柱和⼦房三部分组成。

5．花托为以上四个部分共同着⽣之处，略为膨⼤部分。

6．花柄在花托下⾯，是每朵花着⽣的⼩枝，是花与茎相接部分。

(⼆)花的内部结构1．花药的解剖构造(图15-2) 取百合花药(图15-2，3，4，5)横切制⽚，在显微镜下观察下列各部(1)花粉囊正常的花药分为两半,每⼀半具有两个花粉囊,所以百合花药有四个花粉囊,花粉囊中包含着花粉粒。

实验十九Lowry法测定蛋白质含量一、实验目的1.掌握Lowry法测定蛋白质含量的原理和方法。

2.学会测定未知样品中蛋白质含量。

二、实验原理蛋白质(protein)是重要的生命物质。

细胞干重的一半是蛋白质，肌肉、皮肤、血液、毛发的主要成分都是蛋白质。

蛋白质在细胞和生物体的生命活动过程中起着十分重要的作用。

蛋白质参与基因表达的调节，以及细胞中氧化还原反应、电子传递、神经传递乃至学习和记忆等多种生命活动过程。

在细胞和生物体内各种生物化学反应中起催化作用的酶主要也是蛋白质。

许多重要的激素，如胰岛素和胸腺激素等也都是蛋白质。

蛋白质属于生物大分子，肽键(-CO-NH-)是蛋白质的特征连接键，凡含有肽键或类似肽键结构的化学物质，均可在碱性条件下与Cu2+络合起显色反应,即双缩脲反应；带有酚羟基的酪氨酸广泛地分布于蛋白质中，在碱性环境中，其可与磷钨酸和磷钼酸的混合物(福林酚试剂)反应，生成磷钼蓝和磷钨蓝的深蓝色混合物，颜色深浅与蛋白含量成正相关起显色反应。

这两个显色反应的结合是Lowry蛋白质测定法的基础，两个显色反应的结果，不仅保持了在一定范围内光吸收度和反应物浓度的线性关系，而且大大提高了灵敏度。

Lowry蛋白质测定法运用广泛，操作简便，但易受多种化学杂质的干扰，包括柠檬酸、EDTA、酚类、巯基乙醇、水杨酸盐等，这些局限影响了该法的适用范围。

三、实验用品（一）材料人血清（从血站购得），使用前稀释500倍。

（二）器材 UV2100分光光度计、电热恒温水浴锅、试管及试管架、吸量管及吸量管架、吸耳球。

（三）试剂1．标准酪蛋白溶液称取250 mg干酪素，用0.1 mol/L氢氧化钠加热溶解后，用水定容至500 ml，则配成500µg/ml标准酪蛋白溶液。

2. 双缩脲试剂A液：4 %碳酸钠溶液；B液：0.2 mol/L氢氧化钠溶液；C液：1%硫酸铜溶液(CuSO4·5H20)；D液：2%酒石酸钾钠溶液。