panbio登革热检测试剂

登革热胶体金法
摘要：
1.登革热胶体金法的概述
2.登革热胶体金法的原理
3.登革热胶体金法的操作步骤
4.登革热胶体金法的优点与局限性
5.登革热胶体金法在我国的应用现状
正文：
一、登革热胶体金法的概述
登革热胶体金法是一种检测登革病毒的方法，该方法采用胶体金技术，通过检测样本中登革病毒的抗原或抗体，从而判断被检测者是否感染了登革病毒。

二、登革热胶体金法的原理
胶体金法的原理是利用胶体金与抗原或抗体的特异性结合，形成肉眼可见的红色沉淀，从而判断被检测者是否感染了登革病毒。

三、登革热胶体金法的操作步骤
1.准备样本：采集被检测者的血液或尿液样本。

2.制备试剂：将胶体金与登革病毒的特异性抗体结合，制备成检测试剂。

3.滴定：将被检测者的样本滴在检测试剂上，观察是否出现红色沉淀。

四、登革热胶体金法的优点与局限性
优点：操作简便，结果快速且直观，适合现场检测。

局限性：可能会受到其他病毒或细菌的干扰，需要与其他检测方法结合使
用以提高准确性。

五、登革热胶体金法在我国的应用现状
登革热胶体金法在我国的应用已经相当广泛，尤其在登革热疫情高发区的防控工作中，该方法起到了重要的作用。

登革热IgG/IgM/NS1检测试剂盒（胶体金法）登革热IgG/IgM/NS1检测试剂盒是一种胶体金检测法，用于同时快速检测血清、血浆、全血标本中的登革热NS1抗原和登革热IgG / IgM抗体。

测试结果旨在帮助诊断登革热。

【检验原理】登革热检测试剂盒采用胶体金技术来定性检测全血/血清/血浆中是否含有登革热病毒IgG、IgM和登革热NS1抗原。

试剂盒含有被事先固定于膜上测试区的两条T线上的抗人IgM、抗人lgG抗体和抗SN1抗体和质控区(C)的相应抗体。

测试时，将全血/血清/血浆标本滴加于试剂条加样区，全血/血清/血浆标本与预包被的标记颗粒结合。

然后混合物随之在毛细效应下向上层析，如是阳性，混合物在层析过程中分别与标本中的登革热抗体IgG 或IgM或者登革热NS1抗原结合，随后结合物会分别被固定在膜上抗人IgG、抗人IgM和抗SN1抗体结合，在测试区(T1，T2，T3)内会出现红色条带。

如果在测试区(T1，T2，T3)内没有出现红色条带，则血标本中不含有登革热病毒，表明是阴性结果。

无论登隔热病毒抗体是否存在于血液标本中，混合物都会继续向上层析至质控区(C)，质控区的相应抗体与混合物反应出现一条红色条带。

质控区(C)内所显现的红色条带是判定层析过程是否正常的标准，同时也作为试剂的内控标准。

【检验方法】1.检测前应将未开封的试剂条置于室温中，使试剂的温度达到平衡。

2.依据产品类型进行检测条型产品：血清血浆：将试纸的加样端插入待检样本中(注意不要超过MAX线)等待5-20秒，等样本在NC膜上层析时取出，平放后开始计时。

全血：用吸管吸取样本，然后垂直滴加1-2滴于加样端,然后滴加1-2滴稀释液，加样后开始计时。

卡型产品：血清血浆：沿切口部位撕开铝箔袋，取出试剂条平放在干净的台面上，用吸管吸取样本，缓慢滴加3滴于加样孔上，开始计时。

全血：用吸管吸取样本，然后垂直滴加1-2滴于加样孔,然后滴加2滴稀释液。

加样后开始计时。

疑似登革热疫情标本检测方法分析引言登革热是一种由登革病毒引起的传染病，其传播途径主要为蚊虫叮咬，主要传播媒介为埃及伊蚊和亚洲虎蚊。

登革热病毒感染后，患者的临床表现多种多样，包括发热、头痛、肌肉和骨骼痛，也有严重的情况会引发出血症状。

在许多地区，登革热的疫情一直是一个严重的公共卫生问题，因此对于疑似登革热患者的标本检测显得尤为重要。

本文将从疑似登革热病毒标本的采集、处理和检测方法等方面进行分析，为疑似登革热病例的诊断提供参考。

一、疑似登革热标本的采集1. 血清标本的采集疑似登革热患者的血清标本是进行登革热病毒检测的重要样本之一。

血清标本的采集需要在患者发病的第3-7天进行，因为这个时间段是病毒在血液中的高峰期。

采集血清样本前，首先需要对患者进行严格的蚊虫叮咬预防措施，以避免交叉感染。

采集血清标本时需要使用抗凝血管，避免血液凝固影响检测的准确性。

血清标本采集完成后，需要立即进行标本的冷链运输，避免温度过高导致病毒失活，影响后续的检测结果。

2. 其他标本的采集除了血清标本外，疑似登革热患者的其他生物标本如尿液、唾液、组织等也可以用于登革热病毒的检测。

对于这些标本的采集，同样需要在患者发病的第3-7天进行，并严格按照标本采集的规范进行操作。

在采集过程中需要避免污染，以保证标本的纯净度和准确性。

二、标本的处理和保存1. 血清标本的处理和保存采集到的血清标本需要在采集完成后立即进行离心分离，分离后的血清需要存放在-70℃以下的冷冻箱中保存，并避免多次冻融，以避免病毒失活。

在血清标本离心分离的过程中也需要严格的无菌操作，避免细菌污染对病毒检测结果的影响。

三、标本的检测方法1. 血清标本的检测目前对于登革热病毒的检测方法主要有血清学检测和分子生物学检测两种方法。

血清学检测主要是通过补体结合试验（HIT）和中和试验（NT）进行病毒抗体的检测，从而判断患者是否感染了登革热病毒。

而分子生物学检测则是通过PCR（聚合酶链反应）等方法来检测病毒的核酸，从而判断病毒的存在和数量。

登革病毒NS1抗原捕获酶联免疫吸附试验在登革热实验室诊断中的应用价值目的：旨在检测登革病毒NS1抗原捕获酶联免疫吸附试验在登革热实验室诊断中的应用价值，为登革病毒早诊早筛提供帮助。

方法：选取2012-2016年间于本院就诊的疑似登革病毒感染患者的血清学标本共362例，通过过胶体金免疫层析法、荧光聚合酶链式反应以及NS1-ELISA试验对登革热诊断的灵敏度、特异性、阳性及阴性预测值、阳性及阴性似然比和约登指数等统计学指标进行比较。

结果：三种检测方法中，金标法具有较高的检测率（64.64%），然而其灵敏度和特异性较差（分别为87.80%和65.61%）；NS1-ELISA试验具有较高的灵敏度（91.22%）、阴性预测值（87.50%）及约登指数（0.71）和较低的阴性似然比（10.94%）；qPCR法则具有较高的特异性（85.99%）、阳性预测值（88.72%）和阳性似然比（598.51%）。

三种检测方法的灵敏度比较差异均无统计学意义（P>0.05）；金标法和qPCR法的特异性比较差异有统计学意义（P＜0.01），其他无统计学意义（P>0.05）。

结论：登革病毒NS1抗原捕获酶联免疫吸附试验的检测效能较优，在登革热的诊断中具有一定的应用价值，能够为登革热的早诊早筛提供帮助。

登革熱是热带亚热带地区极为高发的传染病[1]，致病病原体登革病毒是黄病毒属的重要成员[2]，以伊蚊作为传播媒介[3]。

目前，针对登革病毒仍无行之有效的特效药和疫苗[4]，因而，对登革热的早期诊断显得尤为重要。

登革病毒非结构蛋白NS1在病毒的感染、复制及致病过程之中具有至关重要的作用。

研究证实，NS1蛋白在4种病毒血清型间高度保守，其在血清中的检测常早于IgM 抗体和RNA的产生，在登革热的早期诊断中具有重要作用[5]。

针对登革病毒的检测常用的初步诊断方法为胶体金免疫层析法（以下简称为金标法），待检测结果确定为阳性后，采用荧光定量聚合酶链式反应（qPCR）对送检样本进行确诊。

6-10天
工作量大，需要培养 蚊虫 适于登革病毒分离
4-8天
细胞培养的设备与技 术 适于登革病毒分离
4-8天
细胞培养的设备与技 术 可用于病毒分离
需要多次传代
耗时长、费用高 不再推荐使用
病毒分离的流程
• • • • • • 蚊媒匀浆或血清； 加入细胞培养管或瓶； 37℃吸附1小时，每15分钟轻轻摇动一次； 补液； 33 ℃孵育3-7天，每日或隔日观察CPE； IFA检测，传代，IFA检测。单抗检测分型。
阴性检测结果不能排除近期感染 孕妇和携带类风湿因子的患者常可出现假阳性结果
适用于多种标本
临床标本
急性期全血、血清或血浆，脑脊液（0-5天） 4-8℃保存不超过2天 长时间保存-70 ℃以下或干冰
尸检组织标本应立即保存于-70
疫情暴发地区的蚊虫媒介
℃以下或干冰
适用于所有血清型，首次感染更敏感
尸检组织标本的NS1抗原检测
登革热实验室诊断技术及评价
病毒病预防控制所 李建东
内容概述
• • • • • • • 检测指标及动态变化 检测策略 抗原检测 病毒分离 核酸检测 抗体检测 常用检测试剂比较
登革病毒实验室检测指标
重要免疫原
诊断标记
RT-PCR
Y
Y
Y
Y
NS1： 膜相关NS1，mNS1 分泌型NS1，sNS1 发病第1-9天出现 病毒血症期必然出现的分子标识物 可高达50µg/mL
登革病毒首次感染
急性期 恢复期期 IgM ~90天 病毒血症 发热期 IgA ~45天 IgG
潜伏期
7
0
7
14
21
天
病毒分离 核酸检测 NS1抗原检测

登革热实验室检查结果登革热是一种由登革病毒感染引起的病情严重的疾病，其临床表现多种多样，包括发热、头痛、关节痛、肌肉痛、皮疹等症状。

为了准确诊断登革热，医生通常会进行实验室检查，以便及时采取适当的治疗措施。

下面我们将详细介绍登革热实验室检查的结果解读，为大家提供指导意义。

1. 血液检查：在登革病毒感染后，患者的血液中可以发现一些特殊的指标，这些指标有助于诊断登革热。

常见的检查指标包括白细胞计数和血小板计数。

在登革热病例中，白细胞计数通常是正常的或轻度下降的，而血小板计数则明显下降。

2. 血小板压积：血小板压积是衡量血小板数量和功能的一个重要指标。

登革病毒感染会导致血小板减少，同时血小板功能也受到损害。

因此，患者的血小板压积通常偏低。

3. 登革病毒特异性抗体检测：登革热是由登革病毒引起的，身体在感染后会产生相应的抗体来抵抗病毒。

通过检测特异性抗体，可以确定患者是否已经接触过登革病毒。

这种检测方法通常采用酶联免疫吸附试验（ELISA）或血清中的中和抗体试验。

4. 病毒核酸检测：登革病毒的核酸检测是目前最可靠的诊断方法之一。

通过提取患者血液中的RNA或DNA，利用聚合酶链式反应（PCR）技术可以直接检测登革病毒的存在。

这种方法不仅可以确定患者是否感染了登革病毒，还可以区分不同亚型的登革病毒。

5. 细胞培养：细胞培养是一种传统的登革病毒检测方法，通过将患者血液或组织标本接种到细胞培养基上，培养出登革病毒。

这种方法可以进一步确定病毒的亚型，并用于病毒发展和抗病毒药物的研究。

综上所述，登革热的实验室检查结果可以为医生提供重要的诊断依据。

通过血液检查、特异性抗体检测、病毒核酸检测以及细胞培养等方法的综合应用，可以准确判断患者是否感染登革病毒，并进一步了解病毒的亚型。

这些结果对于制定合理的治疗方案、防控措施和疫情监测具有重要的指导意义。

同时，我们也应该注意，实验室检查结果仅作为辅助诊断的参考，综合临床症状和流行病学调查等因素，以确保准确诊断和及时治疗。

附件1：免疫荧光法（IFA）检测IgG抗体 试验材料： （1）DV1～4型抗原片：DV标准毒株感染C6/36或BHK21细胞制备，低温干燥保存； （2）对照：登革热患者恢复期血清（阳性对照），非登革热患者血清阴性对照）； （3）羊抗人（或兔抗人）IgG荧光素标记抗体； （4）常用稀释液：pH7.2～7.4PBS、伊文思兰等； （5）荧光显微镜。

检测步骤： （1）用pH7.4，0.02mol/LPBS稀释待检血清，从1：20开始做4倍连续稀释至需要的稀释度。

（2）取出抗原片，用蒸馏水漂洗后，冷风吹干。

（3）用加样器依次从高稀释度到低稀释度逐个加入已稀释的待检血清，加入量以覆盖细胞抗原面为准（若为双份血清，最好上排为急性期血清，下排为恢复期血清），在37℃水浴箱湿盒孵育30分钟（每次试验设阳、阴性对照）。

（4）用PBS震荡洗涤3次，每次5分钟，再用蒸馏水洗涤1次脱盐，冷风吹干。

（5）用含1：3万的伊文思兰PBS按工作浓度稀释荧光结合物，滴加各孔（以覆盖细胞抗原面为准），在37℃水浴箱湿盒孵育30分钟，然后同（4）洗涤、漂洗、吹干。

（6）荧光显微镜观察结果。

结果判断： 细胞内病毒特异性荧光为黄绿色颗粒，分布在感染细胞的胞浆内。

根据特异性荧光颗粒多少、荧光亮度、阳性细胞在细胞总数中所占比例，可将免疫荧光反应大致区分为1～4个“＋”。

检测抗体滴度时，以能观察到明显特异性荧光反应（＞“＋”）最高血清稀释度的倒数表示。

意义： 阳性结果，表明曾受到DV感染，＞1：80有诊断参考意义； 恢复期血清抗体滴度比急性期抗体滴度有4倍或4倍以上升高则可确诊。

附件2：酶联免疫吸附试验（ELISA） 检测单份和/或双份血清IgG抗体 试验材料： （1）抗原： 阳性抗原：采用C6/36细胞感染登革病毒培养物为阳性抗原。

阴性抗原：未接种病毒的正常C6/36细胞为阴性抗原对照。

（2）辣根过氧化物酶标记的抗人IgG抗体； （3）缓冲液： 包被液：pH9.6碳酸缓冲液； 稀释液：pH7.4PBS（含5%脱脂奶） 洗涤液：pH7.4PBS－T（0.05％吐温－20）； （4）显色液：A/B液 （5）终止液：4NH2SO4 （6）酶标板、酶标仪。

MicroSafe移液管采集手指血，用Panbio 登革热Duo小盒来测试。在静脉采集得到血清，再用Panbio登革热Duo
IgM 捕获 和 IgG 捕获 ELISA (E-DEN01D)来确定。测试结果与登革热的血清状况进行比较以测定那方法用来
测定全血样本时的灵敏性，特异性和一致性。结果概括见表3。
重现性 为了测定Panbio登革热Duo小盒的重现性，我们用3个批号的试剂盒在不同的3天对9份血清进行测试。那9
份血清代表了登革热初次感染、二次感染和没有感染，然后将那测试结果和参照结果进行了比较。在15分钟
6 10 156
总计
74 77 180
总计
92
71
168
3318
相对血清灵敏性= 231/257 相对血清特异性= 66/74 相对血清一致性= 274/331 *CI =可信区间
89.9% 89.2% 82.8%
95% CI* 86.2 - 93.6% 82.1 - 96.3% 78.7 - 86.8%
Panbio 登革热 Duo 小盒
初次感染
二次感染
3
13
21
9
0
80
24
102
95% CI*
总计 93 32 83 208
相对血清灵敏性= 110/115 95.7% 92.9 - 98.4%
相对血清特异性= 77/93 82.8% 77.7 - 87.9%
相对血清一致性= 178/208 85.6% 80.8 - 90.4%
无效 在对照区域没有出现粉红色条带 测试无效得重做。 测试的局限性： 1.一个单独测试样本的分析不能作为诊断的唯一标准。 2.在早期感染和一些二次感染中， IgM抗体的可检测水平可能很低。一些病人在感染后的头7~10天可能不会 产生可检测到水平的抗体。只要症状还存在，我们就建议在第一份样本后的3~4天对病人重新进行测试。 3. 和黄病毒属出现血清学交叉反应是常见的事（即在登革热1，2，3，4型和圣路易脑炎、西尼罗河、日本脑 炎、黄热病病毒等之间）。 4.最终的诊断应建立在结合测试结果和其它临床和实验室发现的基础之上。 5. 不能用来做一般人群的筛查。阳性预值依赖于现存在病毒的可能性。只能对有临床症状的病人进行测试， 或者有可疑暴露时。 6.抗体的继续存在或不存在不能用来决定治疗的成功与否。 7.从免疫抑制病人得来的结果解释要慎重。 8.最佳的测试结果来自发热后的6~14天采集的样本。

登革热抗体(DF-Ab)ELISA试剂盒说明书登革热抗体(DF-Ab)ELISA试剂盒说明书产品规格：96T/48T。

供应商：上海乔羽生物有限公司上海乔羽有限公司，有elisa试剂盒，抗体，培养基登革热抗体(DF-Ab)ELISA试剂盒说明书ELISA试剂盒具有以下特点：1.专一性强。

抗原与抗体的免疫反应是专一反应，而免疫酶技术以免疫反应为基础，所检测的对象是抗原（或抗体），使用的抗体除标记了酶以外，与普通抗体的免疫反应特性并无多大差别。

2.灵敏度高。

由于抗体联结上了酶，因此，借助于酶与底物的显色反应，显示抗原与抗体的结合，大大提高了检测的灵敏性，使检测水平接近放射免疫测定法。

3.样品易保存。

经过酶反应显示的有色产物大多比较稳定，因此有利于样品的保存。

4.结果易观察。

对检测结果即可用肉眼观察，又可用显微镜观察，也可以用分光光度计进行比色测定，还可用显微镜观察。

这是因为某些酶反应产物能使电子密度发生改变，从而引起被检测物的显示。

5.可以定量测定。

溶液中的抗原物质，应用酶免吸附技术进行比色测定，依据光密度值的变化，可以定量。

预计用细胞分光光度计可对组织内的抗原进行免疫酶技术的定量测定。

6.可以大规模测定样品。

如有成千上万份样品需要进行检测，免疫酶技术都能在较短时间内完成。

7.仪器和试剂简单。

对免疫没技术来说，不需要荧光显微镜，也不需要测定放射性的特殊仪器，所用仪器及试剂均属一般性仪器与试剂，普通实验室及生产应用单位均易购置登革热抗体(DF-Ab)ELISA试剂盒说明书Kit130 times concentrated washing liquid 20ml x 1 bottles; 2 x 1 bottle 6ml ELISA Kit3 ELISA plates coated with 12 holes x 8;4 x 1 bottles of 6ml sample diluent5 color reagent A liquid 6ml * 1 bottle;6 color agent B liquid 6ml * 1/ bottle7 termination solution 6ml * 1 bottle;8 standard product (48ng/ml) 0.5ml * 1 bottle9 standarddiluent 1.5ml x 1 bottles;10 Manual 111 closure plate membrane 2; 12 sealed bag 1登革热抗体(DF-Ab)ELISA试剂盒说明书试剂盒特性◎应尽量选择正规厂家，产品经相应政府部门审核认可，试剂应从灵敏度、特异性、精密度、稳定性、简便性、安全性及经济性全面评价。

登革热疾病的流行特征及病毒检测文艳琼;朱柏珍;黄爱群;徐明霞;钟秀茵【摘要】目的结合登革热疫情的流行病学资料,探索登革热病毒检测的实验室诊断方法.方法选择2014年1～12月广州医科大学附属第五医院收治的登革热患者2 158例.分析登革热疫情的发病情况,包括发病年龄、发病时间和发病患者职业等,采用免疫层析(ICT)法、酶联免疫吸附(ELISA)法及核酸检测PCR法检测登革热病毒,分析检测结果.结果 2158例登革热患者中普通型登革热2 017例,占93.47％,重症登革热141例,占6.53％.登革热病例发病时间主要集中在8～11月,占99.54％,10月份发病例数最多,为1 226例,占56.81％.登革热病例的年龄段主要集中在21～60岁,占74.70％,21～30岁发病例数最多,为530例,占24.56％.登革热病例主要集中在待业(26.18％)、离退休人员(6.35％)和商业服务(6.35％)人群,医务人员(0.42％)和餐饮食品业(0.42％)的患者较少.ELISA法和核酸检测PCR法的总阳性率较高,ICT法的阳性率较低,ELISA法和核酸检测PCR法的灵敏度较高,三者特异度相差不大.发病1～5 d的血清,核酸检测PCR法的灵敏度最高,而发病6～7 d的血清,ELISA法的灵敏度最高.结论登革热疫情的发病时间集中在8～11月,年龄段主要集中在21～60岁,职业主要是待业人员,ELISA和核酸检测PCR法的总阳性率和灵敏度较高.【期刊名称】《检验医学与临床》【年(卷),期】2016(013)011【总页数】3页(P1459-1461)【关键词】登革热;流行特征;酶联免疫吸附法;免疫层析法;核酸检测PCR法【作者】文艳琼;朱柏珍;黄爱群;徐明霞;钟秀茵【作者单位】广州医科大学附属第五医院检验科 510700;广州医科大学附属第五医院检验科 510700;广州医科大学附属第五医院检验科 510700;广州市黄埔区疾病预防控制中心 510700;广州市黄埔区疾病预防控制中心 510700【正文语种】中文登革热和登革出血热是由登革热病毒引起的热带虫媒传染病，登革热病毒流行于全球热带和亚热带的60多个国家和地区，以东南亚国家最为严重[1-2]。

初次感染
二次感染
总计
血清阴性
76
4
0
80
初次感染
S1a
0
S2
0
18
0
18a
16
14
30
二次感染
S1
3
S2
1
3
24
30
1
28
30
总计
80
42
66
188
S1=第一份血样,S2=第二份血样 a 12对急性血清样本经HAI滴度测定Den-2和Den-3≤ 10被去除，没有计算了样本数目内。
.
相对血清灵敏性 = 104/108 相对血清特异性 = 76/80 相对血清一致性 = 162/188 *CI = 可信区间
96.3% 95.0% 86.2%
95% CI* 90.8 - 99.0% 87.7 - 98.6% 81.2 - 91.1%
表 2 Panbio 登革热 Duo 小盒灵敏性和特异性概括(血浆) 研究地点-澳大利亚

样本性能(经 Panbio 登革热
Panbio 登革热 Duo 小盒
IgM 和 IgG 捕获 ELISA 法)
和 IgG 捕获 ELISA (E-DEN01D)来确定。测试结果与登革热的血清状况进行比较以测定那方法用来测定全血样
本时的灵敏性，特异性和一致性。结果概括见表3。
表 1 Panbio 登革热 Duo 小盒灵敏性和特异性概括(血清) 研究地点-马来群岛
样本性能
Panbio 登革热 Duo 小盒
(经 HIA 和内部 IgM ELISA 法) 血清阴性
Panbio登革热快速检测试剂盒是用来定性检测人血清、血浆和全血中的登革热病毒IgM和IgG抗体的方法。 这方法能用来鉴别初次和二次感染。它仅能用来检测具有临床登革热症状的病人的样本。结果是假定阳性的， 必须经病毒分离、双份血清分析、免疫组织化学检测抗原或病毒核酸检测证实有登革热病毒感染。 原理：

登革热实验室常见结果登革热是由登革病毒引起的一种急性传染病，其临床表现多样，包括发热、头痛、肌肉和关节痛、皮疹等。

为了确诊登革热，需要进行实验室检测。

本文将介绍登革热实验室常见结果。

一、病毒学检测结果病毒学检测是确诊登革热的关键。

常用的病毒学检测方法包括病毒分离、核酸检测和免疫学检测。

1. 病毒分离病毒分离是通过将患者的血液、尿液或其他体液接种到细胞培养物中，观察是否能够分离出登革病毒。

阳性结果表明患者体内存在登革病毒感染。

2. 核酸检测核酸检测是通过提取患者体液中的病毒核酸，使用PCR技术进行扩增和检测。

阳性结果表明患者体内存在登革病毒感染。

3. 免疫学检测免疫学检测是通过检测患者体液中的登革病毒特异性抗体来判断是否感染登革病毒。

常用的免疫学检测方法包括酶联免疫吸附试验（ELISA）、免疫荧光试验（IFA）和中和试验等。

阳性结果表明患者体内存在登革病毒感染。

血液学检测是评估登革热患者的病情和并发症的重要手段。

1. 血常规检查血常规检查可以发现患者的白细胞计数、血小板计数和血红蛋白水平等指标的异常。

在登革热患者中，白细胞计数常常降低，血小板计数也会下降。

2. 凝血功能检查凝血功能检查可以评估患者的凝血功能状态。

在登革热患者中，由于血小板减少和凝血功能异常，常常会出现出血倾向。

凝血功能检查结果异常提示患者可能存在凝血功能障碍。

三、免疫学检测结果免疫学检测是评估患者的免疫状态和疫苗接种效果的重要手段。

1. 特异性抗体检测特异性抗体检测可以检测患者体液中的登革病毒特异性抗体，包括IgM和IgG。

IgM抗体阳性结果表明患者体内近期感染了登革病毒，而IgG抗体阳性结果则表示患者体内存在登革病毒感染的免疫记忆。

2. 细胞免疫学检测细胞免疫学检测可以评估患者的细胞免疫功能。

常用的细胞免疫学检测方法包括淋巴细胞亚群分析和细胞因子检测等。

除了上述常见的实验室检测结果外，还有一些其他检测可以辅助登革热的诊断和治疗。

说明书【产品名称】通用名称：登革病毒NS1抗原检测试剂（胶体金法）英文名称：Diagnostic Kit for Dengue Virus NS1 Antigen（Colloidal Gold）【包装规格】25人份/盒【预期用途】本试剂采用免疫层析技术，可定性检测人血清、血浆中的登革病毒NS1蛋白。

适用于登革病毒感染的辅助诊断和筛查。

登革热是由登革病毒（分为4个血清型，DENV-1~4）引起的，通过埃及伊蚊和白纹伊蚊传播的急性传染病，多见于热带和亚热带地区。

临床类型可分为登革热、登革热出血热和登革休克综合征三种。

登革病毒NS1抗原是一种高度保守的糖蛋白，先于血清抗体出现于样本中，可以用于血清抗体出现前的登革病毒感染早期诊断。

【检验原理】本试剂采用免疫层析法，应用捕获法快速、定性检测人血清、血浆的登革病毒NS1蛋白。

在玻璃纤维上预包被胶体金标记的NS1抗体（Au-NS1-Ab1），在硝酸纤维素膜上检测线包被有NS1抗体（NS1-Ab2）。

检测样本时，样本中的NS1抗原与Au-NS1-Ab1结合形成复合物，由于层析作用沿试纸条前移到检测线时形成(Au-NS1-Ab1)-NS1-(NS1-Ab2)夹心复合物而显色，阴性样本则仅在对照处显色。

【主要组成成分】试剂盒由测试卡、滴管、说明书等组成。

1. 测试卡由登革病毒NS1抗原测试条及塑料盒组成。

2. 滴管1支/人份。

3. 说明书1份/盒。

【储存条件及有效期】4℃～30℃保存，有效期12个月。

检测卡开封后，应在1小时内尽快使用。

【样本要求】1. 采静脉血后分离出血清或血浆，避免溶血；2.血清/血浆样本如不能及时测试应放置于2~8℃冷藏，可保存一周，如需长期保存应置-20℃冷冻保存，测试前注意恢复至室温，忌反复冻融。

注意：高浓度的黄疸样本（肉眼观察样本溶液外观为黄色）、高度溶血样本（游离血红蛋白浓度>9g/L）或肉眼可见多絮状沉积的乳糜血样本，将对检测结果的判读造成干扰，因此在使用样本前应注意样本的外观。

登革热快速检测试剂（胶体金法）规格：25T/盒澳大利亚Panbio公司一直在登革热（Dengue fever）、罗斯河热（Ross river fever）的诊断试剂产品方面保持着全球第一的市场地位。

公司的西尼罗河脑炎（West Nile encephalopalitis）诊断试剂在全球首家获得美国FDA注册。

Panbio 登革产品拥有全球最广的产品系列，有着全球最广的应用。

预期作用：Panbio登革热快速检测试剂盒是用来定性检测人血清、血浆和全血中的登革热病毒IgM和IgG抗体的方法。

这方法能用来鉴别初次和二次感染。

它仅能用来检测具有临床登革热症状的病人的样本。

结果是假定阳性的，必须经病毒分离、双份血清分析、免疫组织化学检测抗原或病毒核酸检测证实有登革热病毒感染。

原理：在处理病人样本时，登革热特异性IgM和IgG抗体和包埋在横过盒膜的两条线上的抗-人IgM和IgG抗体相结合。

胶态金复合物包含重组登革热1~4型抗原被病人的IgM和IgG捕获而显现出粉红色的线。

设定一个对照程序来指示方法操作正确。

警示1.所有的人血产品都应该按可能有传染性的材料来处理。

疾病预防控制中心和国家健康署建议可能传染的抗原应该在2级生物安全下进行处理。

2.不要用嘴吸取液体，皮肤不要和试剂或病人样本接触。

3.严格按照操作规程才能得到最佳的结果。

试剂必须小心地加以保持实验的准确度和精确度。

4.超出操作规程时间和温度范围做试验可能会导致无效的结果。

没有在即定的时间和温度内做试验必须要重做。

5.试剂盒内的成份是经一批单位进行质量控制的。

不同批号的产品不同混合使用。

不要与其它制造商的产品混合。

6.小心使用，避免试剂污染。

如果确实是有微生物污染或有沉淀，就不要使用。

配试剂的仪器、容器或是试剂生物污染都可导致错误的实验结果。

7.不要加热失活的样本。

8.试剂盒贮存在干燥的地方。

9.不要重复使用试剂盒。

10.如果箔袋有破损，试剂盒就不要使用。

虽然小样本量研究中重症患者在临床表现及 实验室指标中均与非重症 有 明 显 差 异 ［9］，但 尚 未 有 大样本量基础上研究预警登革热重症病例发生的 临 床 及 实 验 室 指 标 。 本 研 究 回 顾 性 分 析 484 例 DENV-1 型感染的登革热患者，并 依 据 新 指 南 将 研 究对象划分为重症组与普通组， 比较发现虽然登 革热重症病例不完全符合重症登革热的诊断标 准， 但依然发现两组患者在临床以及实验室检验 上存在明显差异。 研究结果提示，重症病例患者的 持续性呕吐、 束臂实验阳性发生比例明显升高， ALT 或 AST 水平明显升高 ， 提 示 登 革 热 重 症 病 例 合并肝脏炎症损害较明显，结 合 前 期 研 究 ［5］发 现 我 国 10．7％ 、11．8％ 登 革 患 者 的 ALT、AST 水 平 5 倍
4 参考文献 ［1］ Whitehorn J， Farrar J． Dengue ［J］． British Medical Bulletin，
2010 ，95 ：161－171． ［2］ Farrar J， Focks D， Gubler D， et al． WHO ／ TDR Dengue
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登革热IgG 捕获试剂（ELISA ）说明书一、Panbio 产品特点· 结果快速，15分钟出结果。

· 结果值得信赖，敏感性和特异性均>90%· 方式灵活，样本可为全血、血清或血浆· 能区分出登革的原发感染和继发感染· 可进行完整的测试，保存方便，常温2-30℃保存二、产品用途用于定性的快速检测人群血清、血浆或全血中登革病毒的IgM 及IgG 抗体。

可在15分钟内检测结果。

三、产品介绍产品编号产品名称 检测方法 规格 R-DEN03D登革热快速检测试剂 Rapid test 25T四、酶联免疫检测技术原理1、使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性。

2、使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体，这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性，又保留酶的活性。

在测定时，把受检标本（测定其中的抗体或抗原）和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。

用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开，最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。

加入酶反应的底物后，底物被酶催化变为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据颜色反应的深浅刊物定性或定量分析。

由于酶的催化频率很高，故可极大地放大反应效果，从而使测定方法达到很高的敏感度。

五、Panbio 登革热-全线产品产品编号 通用名应用 规格 货量 R-DEN03D 登革热快检板登革热快速检测 25T 现货 E-DEN01P 登革热快检板登革热早期诊断 96T 现货 E-DEN01G 登革热IgG 间接试验试剂ELISA原发登革和血清转化血清流行病学观察 96T 现货 -DEN02G 登革热IgG 捕获试剂 ELISA继发登革热检测 96T 现货 E-DEN01M 登革热IgM 捕获试剂 ELISA 原发登革热检测 96T 现货E-DEN01D 登革热IgG&IgM 联检捕获试剂 剂ELISA原发与继发登革热检测 192T 现货关于panbio1988年成立, 2001年澳大利亚证券交易所上市，2007被英维利斯收购全球关于虫媒感染性疾病及热带感染性疾病的专业供货商产品面向虫媒感染性疾病的监测，在国内疾控系统有非常高的认知去年销售全球400万检测，为30 多种疾病提供诊断革新的历史及面向市场需求提供回应;罗斯河热: 全球第一个商用试剂盒登革热: 全球第一个商用试剂盒，目前拥有最先进，最完善的产品线西尼罗河病毒: 第一个获得FDA批准的试剂盒新产品恙虫热快速日本脑炎-登革联检ELISA 等长久以来，澳大利亚Panbio公司在临床实验室应用的创新性的检测产品开发方面一直保持全球领先的良好记录。

•论著.2019年湖北省首起登革热本地感染疫情病原分子溯源邹文菁，蔡昆，李静，徐军强，彭延湖北省疾病预防控制中心，武汉430079摘要：目的分离培养及鉴定湖北省2019年首起本地感染登革热病例病原体，以确定病毒的血清型和基因型并进行溯源。

方法采集患者血清标本用酶联免疫吸附试验(ELISA)进行IgM和IgG抗体检测;用荧光定量PCR方法鉴定登革热病毒血清型;采用C6/36细胞分离登革热病毒后获取病毒E基因和全基因组序列进行系统进化分析,追溯可能的感染来源。

结果该起疫情病原鉴定为登革热病毒血清I型并分离到登革热I型毒株5株;经系统进化分析属于登革热I型中的基因I型，与2019年广州分离株同源性最高。

结论湖北省2019年首起登革热本地感染疫情由I型登革热病毒的基因I型引起。

关键词:登革热病毒;本地感染;序列分析中图分类号:R183文献标识码:A文章编号：1006-2483(2021)02-0043-04DOI：10.3969/j.issn.1006-2483.2021.02.010Molecular traceability of the pathogen of the first local dengueinfection outbreak in Hubei Province in2019ZOU Wenjing,CAI Kun,LI Jing,XYU Junqiang,PENG YanHubei ProvincialCenter for Diseases Control and Prevention,Wuhan430079,ChinaCorresponding author:PENG Yan,Email：68633845@Abstract:Objective To identify the etiology of the first local dengue infection outbreak in Hubei Province in2019,and to determine the serotype and genotype of the virus and trace its source.Methods Serum samples were collected from dengue fever cases in the acute phase.The IgM and IgG antibodies were detected by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA),and the serotype was determined by fluorescence quantitative PCR.C6/36cells were used to isolate virus and obtain virus E gene and complete genome sequence for systematic evolution analysis to trace the possible source of infection. Results The pathogen of the outbreak was identified as dengue serotype I infection,and five virus strains were isolated. Sequence analysis showed that the virus belonged to genotype I of dengue I,and had the highest homology with the strain isolated in Guangzhou,2019.Conclusion The first local dengue infection outbreak in Hubei Province in2019was causedby genotype I of the type I dengue virus.Keywords：Dengue virus;Local infection;Sequence analysis登革热(dengue fever,DF)是由登革热病毒(dengue virus,DENV)引起的经白纹伊蚊叮咬传播的急性蚊媒传染病[1]o登革热广泛流行于全球热带、亚热带的100多个国家和地区，以东南亚国家最为严重[2]o1978年以来，我国广东、广西、海南和福建等省发生过几次大的流行。