尿血红蛋白测定干化学法作业指导书

血、尿液尿素氮（BUN）测定作业指导书1.实验原理Vitros BUN/UREA试剂是一种干燥，多涂层的，在透明的聚合物支撑基片上涂有分析成份的化学干片。

将一滴患者样品滴于干片上，分布层会使之均匀地分布。

水和非蛋白质成份进入下面的试剂层，与尿素酶反应生成氨。

半透膜只允许氨进入呈色反应层，与指示剂发生反应。

经过一段固定的孵育时间后，通过测定呈色剂的反射强度可间接求出尿素氮的含量。

测定方式：比色法波长：670nm测试时间和温度：37℃约５分钟反应过程：尿素酶非蛋白质成份＋水—————→氨+ 二氧化碳氨＋氨指示剂—————→呈色剂2. 标本：2.1 病人准备：血清无特殊要求。

要留取24小时尿样。

2.2 样品类型：血清；肝素锂/钠和EDTA抗凝血浆。

定时收集的，稀释后的尿样。

2.3 标本采集与处理：2.3.1 血清和血浆样品特别要注意的是：血清；肝素锂/钠和EDTA抗凝血浆；不要用氟化钠作防腐剂，因为氟会抑制尿素酶。

样品采集后4小时内要离心标本，吸出血清。

处理样品时要将其当成生物污染品。

2.3.2 尿液样品定时或随时采集的尿液，特别要注意的是：不能使用以下防腐剂：冰醋酸，浓盐酸，硼酸，硼粉或甲酸钠硼酸，样品在测试前要冷藏。

测试前将1份样品加20 份试剂级别的水进行稀释。

将测试结果乘以21，就得到原始样品中尿素氮的浓度。

冷藏的样品不能立即测试。

处理样品时要将其当成生物污染品。

3. 标本的存放：血清、血浆室温下最多1天；4～8℃冷藏最多5天；-18℃冷冻保存可长达6个月。

尿液样品在测试前要冷藏。

4. 标本的运输：样品要放在带盖的容器内以防污染和蒸发。

5. 标本拒收的标准：污染、抗凝剂、防腐剂不符合要求，标本放置时间过长。

6. 试验材料：6.1测试BUN所需的物品包括：Vitros化学定标物Kit1；Vitros特制质控液；Vitros 7%BSA稀释液。

xx厂家提供原装进口，试剂盒外包装上标明了测试项目名称，试剂标签代码，有效期限和储藏温度。

尿血红蛋白测定（干化学法）1.实验原理血红蛋白中的亚铁血红素与过氧化物酶的结构和功能相似，具有弱过氧化物酶活性，能催化过氧化氢释放新生态氧，氧化色原物而呈蓝色，借以检出微量的血红蛋白。

2.标本采集：2.1 标本采集前病人准备：以清晨第一次尿为宜，急诊患者可随时留取。

2.2标本种类：新鲜尿液2.3 标本要求：采集患者尿液标本时，盛尿液的容器必须清洁干燥，要求留取中段尿。

3.标本储存：从排出到检测应在2小时内完成，如不能及时送检或分析，应置4 ℃下冷藏保存，但冷藏时间最长不得超过6小时。

4.标本运输：室温运输5.标本拒收标准：细菌，经血，白带，精液，粪便污染的标本不能做测定。

6.试剂6.1 试剂名称：urit 10A6.2 试剂厂家桂林优利特医疗电子有限公司6.3 包装规格：100Test/kit6.4 试剂盒组成：试纸条：100条6.5 试剂储存条件及有效期：储存温度为2-30℃条件下，可使用至试剂盒所标示有效期。

7.仪器设备7.1仪器名称：优利特尿液分析仪7.2仪器厂家：桂林优利特医疗电子有限公司7.3仪器型号：uritest—1807.4仪器校准程序：在使用过程中，一般是两周校准一次，如超过此期限，仪器会提示“P1ease Ca1ibrate”(请校准)。

通过测定内部参比块，环境温度和光学系统的改变都可被补偿。

当条件改变都可被补偿。

当条件改变很大时，比如参比块腐蚀或发光二极管的亮度变暗，仪器将打印出一个错误信息；校准条时有稳定特性的灰白色试条，这些校准条只能使用一次。

校准前，应先清洁试纸托盘与运输臂。

步骤为：在“READY— < START>”显示时，按< Calibrate>键，放上校准条。

再按<Calibrate>键，校准条被送入机器内，屏幕显示“Calibrating”(正在校准)，约一分钟后，标准结果将被打印出。

“Calibrating O. K”,表示校准成功。

尿液干化学实验流程下载温馨提示：该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。

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ISO15189-2012质量管理体系文件（作业指导书）临检室作业指导书文件编号：TJDX-3-LJ-01~50第C版编制：审核：批准：生效日期：2018年01月01日TJDX附属协和医院检验科目录修订页血红蛋白电泳检查（电泳法）1. 原理血红蛋白是由两对多肽链组成的复杂分子。

每一条链含有血红素和络合铁原子的卜啉。

所有血红蛋白的血红素部分都是相同的。

所测定的血红蛋白的蛋白部分称之为珠蛋白。

正常人血红蛋白多肽链包括α、β、δ和γ。

血红蛋白的结构、分子特性取决于形成其肽链的氨基酸顺序和性状。

氨基酸不同可形成不同的血红蛋白，其表面电荷不同，在电场中的泳动率不同。

本实验在碱性（PH=8.60）条件下，以琼脂糖凝胶电泳的方法进行，对红细胞洗涤后造成溶血，电泳分离血红蛋白后以氨基黑染色。

多余的染色液用酸性液体洗去。

待琼脂糖凝胶板干燥后，肉眼可直接判别有无电泳条带异常。

运用光密度扫描仪检测准确定量分析电泳条带异常情况。

血红蛋白异常有二种类型：血红蛋白性质或结构的异常称之为血红蛋白病。

血红蛋白中的一条链合成减少引起血红蛋白性质异常，称之为地中海贫血。

2. 标本采集2.1 标本采集前病人准备：受检者应空腹。

2.2 标本种类：抗凝血2.3 标本要求：抗凝剂选用EDTA，柠檬酸或肝素均可，避免碘乙酸。

常规静脉采血1.8ml，加入含有109mmol/L枸橼酸钠溶液0.2ml的干燥。

清洁试管中，充分混匀。

4. 标本储存：储存于2-8℃冰箱中，5天。

5. 标本运输：储存于2-8℃状态下的冰壶或泡沫箱密封运输。

6. 标本拒收标准：细菌污染、溶血或脂血标本不能作测定。

7. 试剂7.1 试剂名称：血红蛋白电泳检查试剂7.2 试剂生产厂家：法国Sebia公司7.3 包装规格：150tests7.4 试剂盒组成琼脂糖凝胶10块溶血素1瓶缓冲液条带10包×2条薄滤纸1×10张氨基黑（浓缩液）1瓶×100ml 点样模具滤纸10条×1盒7.5 试剂储存条件及有效期：贮存于室温（15～30℃）或冰箱（2～8℃），不能冷冻。

尿液干化学分析一、检验目的：尿液干化学分析，包括尿蛋白（PRO）、酸碱度（PH）、比重（SG）、隐血（BLD）、亚硝酸盐（NIT）、胆红素（BIL）、尿胆原（URO）、酮体（KET）、白细胞（LEU）、尿糖（GLU）、维生素C（VitC）11项，用于解尿液中上述化学成份的变化。

二、原理：1.各项目原理（1）尿蛋白（PRO）：蛋白误差法，蛋白质与指示剂的离子（溴甲酚蓝、四溴酚蓝二脂）结合生成复合物，引起指示剂进一步电离，超过尿液的缓冲能力，指示剂发生颜色变化。

颜色深浅与蛋白质含量成正比。

（2）酸碱度（PH）：干化学试带测试模块区含有甲基红（PH4.6-6.2）和溴射香草酚蓝（PH60.-7.6），两种碱指示剂适量配合可测定尿液酸碱度。

（3）比重（SG）：干化学试带上载有预先处理过的甲乙烯酸/马来酐和指示剂溴射香草酚蓝，前者系一高分子电解质，其电离常数的负对数（pKa）与尿中离子成分的浓度按一定比例变化，在低比密尿液中此高分子电解质的COOH--基与尿内电解质离子发生反应，置换出的H+浓度低，PH增高，指示剂溴射香草酚蓝呈深蓝绿色。

随离子浓度增高指示剂颜色从绿色到黄绿色。

（4）隐血（BLD）：血红蛋白类过氧化物酶催化过氧化氢烯钴和色素原，后者脱氢氧化而呈色，颜色深浅与红细胞或血红蛋白成正比。

（5）亚硝酸盐（NIT）：亚硝酸盐与对氨基苯砷酸反应生成重氮化合物，重氮化合物与萘基乙二胺二盐酸结合呈现出桃红色。

（6）胆红素（BIL）：在强酸介质中结合胆红素与2，4-二氯苯胺重氮盐起偶联反应，生成红色复合物，膜块发生黄色到红色的颜色变化。

（7）尿胆原（URO）：尿胆原与对-二甲氨基苯甲醛发生醛化反应，生成樱红色缩合物，试带膜块发生黄色到红色的颜色变化。

（8）酮体（KET）：亚硝基铁氰化钠与乙酰乙酸的丙酮反应，合膜块发生由黄到紫的颜色变化。

（9）白细胞（LEU）：粒细胞中的脂酶作用于吲哚酚酯产生吲哚酚，后者与重氮盐发生反应形成紫色缩合物，膜块发生黄到紫的颜色变化，颜色深浅与白细胞含量成正比。

尿液蛋白质测定（手工法）操作规程sop
一、项目名称：尿液蛋白质定性检查
二、方法：磺基水杨酸法
三、原理：磺基水杨酸为生物碱试剂，在酸性环境下，其阴离子可
与带正电荷的蛋白质结合成不溶性蛋白盐而沉淀。

四、试剂：10%磺基水杨酸乙醇溶液。

五、仪器：手工法
六、操作步骤：
1、取试管加尿液3ml。

2、滴加10%磺基水杨酸溶液3－4滴，形成界面。

3、如尿呈浑浊，表示有蛋白质存在，混浊深浅表示含量的多
少。

七、结果判断：
●阴性：尿液外观仍清晰透明，不呈浑浊。

●微量（+/-）：轻微浑浊，隐约可见。

●阳性（+）：明显的白色混浊，但无颗粒出现。

（++）：稀薄乳样浑浊，出现颗粒。

（+++）：混浊，有絮片状沉淀。

（++++）：絮状混浊，有大凝块下沉。

八、参考范围：正常人为阴性。

九、标本要求：
1、标本应新鲜，并及时送检。

2、尿液标本应避免经血、白带、精液、粪便等混入。

3、容器应清洁、干燥。

十、临床意义：分为功能性、体位性、病理性蛋白尿，后者见于肾
炎、肾病综合症等。

十一、注意事项：
1、此法比较敏感。

2、如尿液浑浊，应先离心或过滤。

3、强碱性尿可出现假阴性，应加5%醋酸溶液数滴酸化后再做试
验。

4、有机碘造影剂、超大剂量使用青霉素等均可致假阳性。

5、尿中含高浓度尿酸或尿酸盐时，可呈假阳性。

十二、参考文献：
全国临床检验操作规程（第3版）
十三、
编写者：
制定日期：
修改日期：
科主任对规程认可：。

干化学尿液分析试纸条检测作业指导书1. 适用范围适用于公司葡萄糖（GLU）、胆红素（BIL）、酮体（KET）、比重（SG）、潜血（BLD）、蛋白质（PRO）、尿胆原（URO）、亚硝酸盐（NIT）、白细胞（LEU）及维生素C（Vc）等原纸半成品的生产检验及干化学尿液分析试纸条的成品最终检验。

2. 成品的生产检验参照产品企业标准：按XXXX进行。

3. 检验要求3.1环境要求：环境温度 18-30℃，相对湿度20%-85% ；避免强自然光直射。

3.1.1 最佳操作条件：环境温度 22℃-26℃，相对湿度30%-60% ；避免强自然光直射。

3.1.2 标准液温度：25℃±3℃。

如果环境温度在25℃±3℃范围内，将标准液平衡至室温；如果环境温度不在25℃±3℃范围内，则需将标准液水浴恒温。

3.2 外观检验3.2.1 半成品外观检验3.2.1.1抽样方法按GB/T2828-87进行抽样检验。

在60W白织灯下，以目测及手感检查试纸条。

检查原纸表面颜色是否均匀、有无污染、原纸有无破损。

合格的原纸，表面颜色均匀、无污染、无破损。

3.2.1.2尺寸要求：长度30CM±1CM；宽度27CM±1CM。

3.2.1.3 包装袋要求：内层真空袋密封完好，无漏气；外层避光袋密封完好，无破损。

3.1.2.4 包装标示：要求标示品名，生产批次号，数量，生产班组，操作员代码。

3.2.2 成品外观检验3.2.2.1抽样方法按GB/T2828-87进行抽样检验。

在60W白织灯下，以目测及手感检查试纸条。

试纸条应外观整齐、无伤痕、无缺损、底胶片边缘无毛刺；测试块与胶片应粘贴紧密、不能有缺损或脱落；测试块各项目排列顺序及间距一致；测试块外观整齐、色泽均匀，无伤痕、无缺损或脱落、无斑点或污渍。

3.2.2.2尺寸要求：试纸条长度114±2mm；宽度5±0.5mm；厚度《 1.8mm；试剂块宽度5±0.5mm，试剂块间距2.4±0.5mm。

尿液干化学检测(一)检验目的对泌尿系统疾病、肝胆疾病、糖尿病等疾病进行辅助诊断与疗效观察，对安全用药进行监护，以及评估健康状态。

(=)测定方法以及体系干化学试带法：包括尿液分析仪，分析仪试剂带；尿的干化学试带可检测的项目有蛋白质、葡萄糖、酮体、隐血、胆红素、尿胆原、亚硝酸盐、比重、pH值等。

快速敏感的干化学试带技术和自动化分析技术在尿液检查中得到普遍应用，上述指标的检测极为简便，而且提高了检验质量，为尿液化学检查开拓了更广阔的领域。

(三)检测原理及干扰因素尿液分析仪检测原理：尿液中相对的化学成分使尿多联试带上各种含特殊试剂的模块发生颜色变化，颜色深浅与尿液中相应物质的浓度成正比；将多联试带置于尿液分析仪比色进样槽，各模块依次受到仪器光源照射并产生不I司反射光，仪器接收不同强度的光信号后将其转换为相应的电信号，再经微处理器由下列公式计算山各测试项目的反射率，然后与标准曲线比较后校正为测定值，最后以定性或半定量方式自动打印出结果。

用于对尿液进行定性和半定量检测。

1．葡萄糖检测(1)原理：尿糖形成的原因和机制为：当血中葡萄糖浓度大于8.8mml/L时，肾小球滤过的葡萄糖量超过肾小管重吸收能力即可出现糖尿。

葡萄糖在葡萄糖氧化酶的作用下生成葡萄糖酸和过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶的作用下释放新生态氧[0]，新生态氧[O]再还原碘化钾，发生颜色变化。

(2)干扰因素：本实验对葡萄糖豹检测是特异性的，大量维生素c可使实验出现假阴性结果；高比重碱性尿，亦可造成糖检出偏低，使低糖浓度尿呈阴性。

2.胆红素检测原理：直接胆红素在酸性条件下与二氯苯胺重氮盐偶联，生成偶氮染料。

干扰因素：(1)标本必须新鲜，以免胆红素在阳光照射下成为胆绿素；(2)尿液中含高浓度维生素C和亚硝酸盐时，抑制偶氮反应使胆红素测定呈假阴性；(3)检验对象接受大剂量氯丙嗪治疗或尿中含有盐酸苯偶氮吡啶的代谢产物时呈假阳性。

3.酮体检测原理：乙酰乙酸、丙酮在碱性条件下与亚硝基铁氰化钠反应．生成紫红色化合物。