糜胰蛋白酶水解蛋白部位
- 格式:doc
- 大小:177.00 KB
- 文档页数:3
蛋白酶酶切位点木瓜蛋白酶巯基蛋白酶具有广泛特异性TPCK,TLCK,抑蛋白酶醛肽α-巨球蛋白,烷化剂胃蛋白酶酸蛋白酶广泛特异性胃蛋白酶抑制素胰蛋白酶丝氨酸蛋白酶在K或R之后TLCK,PMSF,抑蛋白酶醛肽抑肽酶,α巨球蛋白人体20种氨基酸及其英文缩写名称三字符号单字符号丙氨酸Ala A精氨酸Arg R天冬氨酸Asp D半胱氨酸Cys C谷氨酰胺Gln Q谷氨酸Glu/Gln E组氨酸His H异亮氨酸Ile I甘氨酸Gly G天冬酰胺Asn N亮氨酸Leu L赖氨酸Lys K甲硫氨酸Met M苯丙氨酸Phe F脯氨酸Pro P丝氨酸Ser S苏氨酸Thr T色氨酸Trp W酪氨酸Tyr Y缬氨酸Val V【生化】特异性蛋白酶的酶切位点胰蛋白酶ar g、lys,得到以arg、lys为C末端残基的肽段。
胰凝乳蛋白酶phe、trp、tyr 等疏水aa。
胃蛋白酶ph e、trp、tyr等疏水aa。
木瓜蛋白酶a rg、lys。
葡萄球菌蛋白酶,磷酸缓冲液p h7.8时断裂gl u、asp。
碳酸氢铵缓冲液ph7.8或醋酸铵缓冲液ph4.0时断裂gl u。
梭菌蛋白酶a rg,用于不溶性蛋白的长时间裂解。
CNBr断裂Met。
羟胺断裂as n—gly间的肽键。
二硫键可以用巯基化合物还原法或者过甲酸氧化法断裂.。
木瓜蛋白酶(Papain),又称木瓜酶,是一种蛋白水解酶。
木瓜蛋白酶是番木瓜(Cariea papay a)中含有的一种低特异性蛋白水解酶,广泛地存在于番木瓜的根、茎、叶和果实内,其中在未成熟的乳汁中含量最丰富。
木瓜蛋白酶的活性中心含半胱氨酸,属于巯基蛋白酶,它具有酶活高、热稳定性好、天然卫生安全等特点,因此在食品、医药、饲料、日化、皮革及纺织等行业得到广泛应用。
木瓜蛋白酶是一种蛋白水解酶,分子量为23406,由一种单肽链组成,含有212个氨基酸残基。
胰蛋白酶简介一、介绍胰蛋白酶(C6H15O12P3)为蛋白酶的一种。
在脊椎动物中,作为消化酶而起作用。
在胰脏是作为酶的前体胰蛋白酶原而被合成的。
作为胰液的成分而分泌,受肠激酶,或胰蛋白酶的限制分解成为活化胰蛋白酶,是肽链内切酶,它能把多肽链中赖氨酸和精氨酸残基中的羧基侧切断。
它不仅起消化酶的作用,而且还能限制分解糜蛋白酶原、羧肽酶原、磷脂酶原等其它酶的前体,起活化作用。
是特异性最强的蛋白酶,在决定蛋白质的氨基酸排列中,它成为不可缺少的工具。
牛的胰蛋白酶氨基酸残基223个,分子量23800,活性部位的丝氨酸残基是不可缺少的丝氨酸蛋白酶。
除存在于脊椎动物外,还存在于蚕、海盘车、蝲姑、放线菌等范围广泛的生物体中。
另外与高等动物的血液凝固和炎症等有关的凝血酶、纤溶酶、舒血管素等蛋白酶在化学结构和特异性等方面与胰蛋白酶具有密切的关系,可以认为这些酶是从共同的祖先酶在进化过程中分化而来的。
胰糜蛋白酶与弹性蛋白酶在结构和催化机制方面也具有密切关系,但其特异性则完全不同。
胰蛋白酶系自牛、羊或猪胰中提取的一种蛋白水解酶。
中国药品标准规定按干燥品计算,每1mg 的效价不得少于2500单位。
由牛、羊、猪胰脏提取而得的一种肽链内切酶,只断裂赖氨酸或精氨酸的羧基参与形成的肽键。
白色或米黄色结晶性粉末。
溶于水,不溶于乙醇、甘油、氯仿和乙醚。
分子量24 000,pI 10.5,最适pH值7.8~8.5左右。
pH>9.0不可逆失活。
Ca2+对酶活性有稳定作用;重金属离子、有机磷化合物、DFP、天然胰蛋白酶抑制剂对其活性有强烈抑制。
临床用于抗炎消肿,工业上用于皮革制造、生丝处理、食品加工等。
胰蛋白酶的分子量与其酶原接近(23300),其等电点约为pH10.8,最适pH7.6~8.0,在pH=3时最稳定,低于此pH时,胰蛋白酶易变性,在pH>5时易自溶。
Ca2+离子对胰蛋白酶有稳定作用。
重金属离子,有机磷化合物和反应物都能抑制胰蛋白酶的活性,胰脏、卵清和豆类植物的种子中都存在着蛋白酶抑制剂。
糜蛋白酶水解氨基酸位点摘要:1.糜蛋白酶的概述2.糜蛋白酶水解氨基酸位点的原理3.糜蛋白酶水解氨基酸位点的应用4.糜蛋白酶水解氨基酸位点的研究进展正文:【1.糜蛋白酶的概述】糜蛋白酶(Trypsin)是一种消化酶,属于胰蛋白酶家族,主要在胰脏中产生。
糜蛋白酶的作用是分解蛋白质,将其转化为小分子的肽和氨基酸,从而在消化系统中发挥重要作用。
在生物学和生物技术领域,糜蛋白酶被广泛应用于蛋白质水解和氨基酸序列分析等实验中。
【2.糜蛋白酶水解氨基酸位点的原理】糜蛋白酶水解氨基酸位点是指在蛋白质分子上,糜蛋白酶能够识别并水解特定氨基酸残基的位置。
这个过程是通过糜蛋白酶与蛋白质结合,形成酶- 底物复合物,然后糜蛋白酶在特定氨基酸残基附近发挥水解作用,将蛋白质分解为小分子的肽和氨基酸。
【3.糜蛋白酶水解氨基酸位点的应用】糜蛋白酶水解氨基酸位点的应用主要体现在以下几个方面:(1)蛋白质序列分析:通过糜蛋白酶水解氨基酸位点,可以获得蛋白质分子中特定氨基酸残基的信息,从而用于蛋白质序列分析。
(2)生物活性物质的筛选:在药物研发领域,糜蛋白酶水解氨基酸位点可用于筛选具有特定生物活性的物质。
(3)生物技术:糜蛋白酶水解氨基酸位点在基因工程、蛋白质工程等领域具有重要应用价值。
【4.糜蛋白酶水解氨基酸位点的研究进展】随着科学技术的发展,糜蛋白酶水解氨基酸位点的研究取得了一系列进展。
例如,研究人员已经成功解析了糜蛋白酶与蛋白质结合的结构,揭示了糜蛋白酶水解氨基酸位点的机制。
此外,针对不同蛋白质分子,研究人员还开发了高效的糜蛋白酶水解方法,以满足各种研究需求。
总之,糜蛋白酶水解氨基酸位点在生物学、生物技术和药物研发等领域具有广泛应用。
蛋白酶酶切位点木瓜蛋白酶巯基蛋白酶具有广泛特异性TPCK,TLCK,抑蛋白酶醛肽α-巨球蛋白,烷化剂胃蛋白酶酸蛋白酶广泛特异性胃蛋白酶抑制素胰蛋白酶丝氨酸蛋白酶在K或R之后TLCK,PMSF,抑蛋白酶醛肽抑肽酶,α巨球蛋白人体20种氨基酸及其英文缩写名称三字符号单字符号丙氨酸Ala A精氨酸Arg R天冬氨酸Asp D半胱氨酸Cys C谷氨酰胺Gln Q谷氨酸Glu/Gln E组氨酸His H异亮氨酸Ile I甘氨酸Gly G天冬酰胺Asn N亮氨酸Leu L赖氨酸Lys K甲硫氨酸Met M苯丙氨酸Phe F脯氨酸Pro P丝氨酸Ser S苏氨酸Thr T色氨酸Trp W酪氨酸Tyr Y缬氨酸Val V【生化】特异性蛋白酶的酶切位点胰蛋白酶arg、lys,得到以arg、lys为C末端残基的肽段。
胰凝乳蛋白酶phe、trp、tyr 等疏水aa。
胃蛋白酶phe、trp、tyr等疏水aa。
木瓜蛋白酶arg、lys。
葡萄球菌蛋白酶,磷酸缓冲液ph7.8时断裂glu、asp。
碳酸氢铵缓冲液ph7.8或醋酸铵缓冲液ph4.0时断裂glu。
梭菌蛋白酶arg,用于不溶性蛋白的长时间裂解。
CNBr断裂Met。
羟胺断裂asn—gly间的肽键。
二硫键可以用巯基化合物还原法或者过甲酸氧化法断裂.。
木瓜蛋白酶(Papain),又称木瓜酶,是一种蛋白水解酶。
木瓜蛋白酶是番木瓜(Carieapapaya)中含有的一种低特异性蛋白水解酶,广泛地存在于番木瓜的根、茎、叶和果实内,其中在未成熟的乳汁中含量最丰富。
木瓜蛋白酶的活性中心含半胱氨酸,属于巯基蛋白酶,它具有酶活高、热稳定性好、天然卫生安全等特点,因此在食品、医药、饲料、日化、皮革及纺织等行业得到广泛应用。
木瓜蛋白酶是一种蛋白水解酶,分子量为23406,由一种单肽链组成,含有212个氨基酸残基。
至少有三个氨基酸残基存在于酶的活性中心部位,他们分别是Cys25、His159和Asp158,另外六个半胱氨酸残基形成了三对二硫键,且都不在活性部位。
蛋白酶酶切位点蛋白酶的分类及作用位点蛋白酶分类作用位点已知抑制物,,氨基肽酶金属蛋白酶带有自由氨基的L-氨基酸氨基末端,22双吡啶,1,1()-菲咯啉不分解由X-Pro、D或Q组成的肽键菠萝蛋白酶巯基蛋白酶无特异性α2巨球蛋白,TPCK,TLCK,烷化羧肽酶A 锌金属蛋白酶带有自由氨基酸的L-氨基酸羧基端,EDTA,EGTA不能分解R、P或羟脯氨酸羧肽酶B 锌金属蛋白酶 K- Lys,R- Arg羧基端 EDTA,EGTA,碱性氨基酸羧肽酶Y 丝氨酸羧肽酶氨基酸羧基端 PMSF组织蛋白酶C 琉基蛋白酶氨基端双肽,可通过K,R或P氨基醋酸碘, 甲醛端作为第二或第三个氨基酸封闭胰凝乳蛋白酶丝氨酸蛋白酶在F- Phe,T- Thr或Y- Tyr之后抑肽酶,PMSF,TPCK,α-巨球蛋白胶原酶金属蛋白酶在P-X-G-P肽链中X之后EDTA,EGTA,还原剂,但无血清存在2+dispase 金属蛋白酶无特异性 EDTA,EGTA,Hg,重金属内肽酶Arg-C 丝氨酸蛋白酶在R- Arg之后α巨球蛋白,TLCK 内肽酶Asp-N 金属蛋白酶在D- Asp和C-Cys半胱氨酸之前EDTA,α菲咯啉内肽酶Glu-C 丝氨酸蛋白酶在E- Glu/Gln 或D- Asp之后α巨球蛋白,TLCK 内肽酶Lys-C 丝氨酸蛋白酶在K- Lys之后TLCK,抑肽酶,抑蛋白酶醛肽肠激酶丝氨酸蛋白酶在D-D-D-D-K-肽链中K之后Xa因子丝氨酸蛋白酶在R- Arg之后 PMSF,APMS,大豆胰蛋白酶抑制物无花果蛋白酶琉基蛋白酶无特异性TPCK,TLCK,α-巨球蛋白激肽释放酶丝氨酸蛋白酶在一些R- Arg之后抑肽酶,抑蛋白酶醛肽木瓜蛋白酶巯基蛋白酶长期孵育时具有广泛特异性arg、lys TPCK,TLCK,抑蛋白酶醛肽α—、gly、L-Citrulline 巨球蛋白,烷化剂胃蛋白酶酸蛋白酶广泛特异性phe、trp、tyr等疏水aa 胃蛋白酶抑制素纤溶酶丝氨酸蛋白酶在K- Lys或R- Arg之后 PMSF,TLCK,抑肽酶,α-巨球蛋白链霉蛋白酶混合型无特异性 B,M,完整药片蛋白酶K 丝氨酸蛋白酶广泛特异性 PMSF,PefablocSc 枯草杆菌蛋白酶丝氨酸蛋白酶无特异性PMSF,α巨球蛋白,苯甲脒热溶素锌金属蛋白酶在非极性残基之前 EDTA凝血酶丝氨酸蛋白酶在K- Lys之后 TLCK,PMSF,抑蛋白酶醛肽抑肽酶,α巨球蛋白,苯甲脒胰蛋白酶丝氨酸蛋白酶在K- Lys或R -Arg之后arg、lys TLCK,PMSF,抑蛋白酶醛肽抑肽酶,α巨球蛋白蛋白酶分类作用位点已知抑制物木瓜蛋白酶巯基蛋白酶具有广泛特异性 TPCK,TLCK,抑蛋白酶醛肽α-巨球蛋白,烷化剂胃蛋白酶酸蛋白酶广泛特异性胃蛋白酶抑制素胰蛋白酶丝氨酸蛋白酶在K或R之后 TLCK,PMSF,抑蛋白酶醛肽抑肽酶,α巨球蛋白人体20种氨基酸及其英文缩写1名称三字符号单字符号丙氨酸 Ala A精氨酸 Arg R天冬氨酸 Asp D半胱氨酸 Cys C谷氨酰胺 Gln Q谷氨酸 Glu/Gln E组氨酸 His H异亮氨酸 Ile I甘氨酸 Gly G天冬酰胺 Asn N亮氨酸 Leu L赖氨酸 Lys K甲硫氨酸 Met M苯丙氨酸 Phe F脯氨酸 Pro P丝氨酸 Ser S苏氨酸 Thr T色氨酸 Trp W酪氨酸 Tyr Y缬氨酸 Val V【生化】特异性蛋白酶的酶切位点胰蛋白酶arg、lys,得到以arg、lys为C末端残基的肽段。
蛋白酶酶切位点木瓜蛋白酶疏基蛋白酶具有广泛特异性TPCKJLCK,抑矍白酶醛肽6巨球蛋白,烷化剂胃蛋白酶酸蛋白酶广泛特异性胃矍白酶抑制素胰蛋白酶丝氨酸蛋白酶在K或R之后TLCXPMSF■抑蛋白酶醛肽抑肽酶Q巨球蛋白名称 三字符号单字符号Ala A Arg RGlu/GIn E His H lie I Gly G Asn NLeu L Lys Met Phe Pro Ser Thr Trp Tyr Vai胰蛋白酶lys,得到以mg 、lys 为C 末端残基的肽段。
胰凝乳蛋白酶phe 、trp. tyr 等疏水OQ 。
胃蛋白酶phe 、trp 、tyr 等疏水QQ 。
木瓜蛋白酶arg s lys o 葡萄球菌堂白 酶,磷酸缓冲液Ph7.8时断裂glu 、aspo 碳酸氢钱缓冲液ph7.8或醋酸钱缓冲液ph4.0 时断裂glu 。
梭菌蛋白酶org,用于不溶性蛋白的长时间裂解。
CNBr 断裂Met 。
羟胺断 裂asn —gly 间的肽键。
二硫键可以用铳基化合物还原法或者过甲酸氧化法断裂・。
o 木瓜蛋白酶是番木瓜(Carieapapaya)中含有的一种低特异性蛋白水解酶,广泛地存 在于番木瓜的根、茎、叶和果实内,其中在未成熟的乳汁中含量最丰冨。
木瓜蛋白酶的活性 中心含半胱氨酸,属于蔬基蛋白酶,它具有酶活高、热稳定性好、天然卫生安全等特点,因 此在食品、医药、饲料、日化、皮革及纺织等行业得到广泛应用。
木瓜蛋白酶是一种蛋白水解酶,分子量为23406,由一种单肽链组成,含有212个氨基酸 残基。
至少有三个氨基酸残基存在于酶的活性中心部位,他们分别是Cys25、His 159和 Aspl5&另外六个半胱氨酸残基形成了三对二硫键,旦都不在活性部位。
纯木瓜蛋白酶制品 可含有:(1)木瓜蛋白酶,分子S 21000,约占可溶性蛋白质的10%; (2)木瓜凝乳蛋 白酶,分子量26000,约占可溶性愛白质的45%; (3)溶菌酶,分子fi 25000,约占可溶 性蛋白质的20%;及纤维素酶等不同的酶。
人体内酶的最适ph值人体内酶的最适pH值酶是一种生物催化剂,它们在人体内发挥着极为重要的作用。
人体内酶的最适pH值是指在哪个pH值下,酶活性最高,反应速率最快。
本文将介绍人体内常见酶的最适pH值及其相关知识。
1. 蛋白酶蛋白酶是一类能够水解蛋白质的酶,包括胰蛋白酶、胃蛋白酶等。
它们的最适pH值在不同的酶中略有不同,但一般在8-9之间。
这是因为蛋白酶的活性部位中含有大量的组氨酸、精氨酸等碱性氨基酸,而在弱碱性环境下,它们的离子化程度较低,更易于发挥催化作用。
2. 淀粉酶淀粉酶是一类能够水解淀粉、糖类等多糖的酶,包括唾液淀粉酶、胰淀粉酶等。
它们的最适pH值一般在6-7之间。
这是因为在弱酸性环境下,淀粉酶的活性部位中含有大量的谷氨酸、天冬氨酸等酸性氨基酸,而在弱酸性环境下,它们的离子化程度较高,更易于发挥催化作用。
3. 脂肪酶脂肪酶是一类能够水解脂肪的酶,包括胆固醇酯酶、甘油三酯酶等。
它们的最适pH值一般在7-8之间。
这是因为在中性或弱碱性环境下,脂肪酶的活性部位中含有大量的酪氨酸、色氨酸等中性氨基酸,而在这种环境下,它们的离子化程度较低,更易于发挥催化作用。
4. 糖酶糖酶是一类能够水解糖类的酶,包括葡萄糖酶、果糖酶等。
它们的最适pH值一般在6-7之间。
这是因为在弱酸性环境下,糖酶的活性部位中含有大量的酪氨酸、色氨酸等中性氨基酸,而在这种环境下,它们的离子化程度较高,更易于发挥催化作用。
人体内酶的最适pH值是与酶的种类及其活性部位中氨基酸的性质有关的。
了解不同酶的最适pH值,有助于我们更好地理解人体内生化反应的机理,也对临床医学及药物研发有一定的指导意义。
山西高校硕士探讨生入学考试试题科目:生物化学1997年试题一.是非题〔20分〕A、B两条肽链是通过链间两条二硫键连接而成.2.蛋白质多肽分子中,连接氨基酸残基共价键只有肽键.3.利用氨基酸分析仪,可将酸分解某一蛋白质氨基酸组成全部测出.ΔS降低.2×10^-3mol/LA酶比Km为2×10^-5B酶催化反响速度慢.6.双关酶和双功能酶都能催化一个以上化学反响.7.有两种核酸酶制剂,AA260/A280=2.0,BA260/A280=1.0,所以A比B纯度高. β转角也是由3.6个氨基酸残基组成.9.hnRNA是蛋白质基因表达初级产物.10.生物体内全部编码蛋白质基因都可根据其核甘酸序列推导出蛋白质中氨基酸序列.11.能以mRNA拷贝酶是DNA聚合酶.12.糖原分解与合成主要靠肾上腺素调整.13.当脂肪组织发动时,产生大量游离脂肪酸可间接抑制三羧酸循环和脂肪酸生物合成.14.酪氨酸代谢中,缺乏尿黑酸氧化酶可引起白化病,苯丙氨酸代谢障碍在儿童时期可引起智力迟钝.15.排尿素动物在肝脏切除后,就不再有尿素排出.16.生物体内mRNA链上起始密码子都是AUG.17.原核生物DNA转录中,不同启动子须要不同σ因子.18.真核生物第一个基因家族全部成员都位于同一染色体上.19.氨基酰-tRNA合成酶存在于细胞质中.20.染色体中DNA主要是以组蛋白结合成复合体形式存在,并形成串珠核小体构造.二.选择题(14分)1.蛋白质变性是由于( )2.常用于测量多肽链氨基末端试剂为( )3.胰核糖核酸酶水解RNA得到产物为( )A.3’-核苷酸B.5’-核苷酸C.3’4.不以酶原形式分泌酶是( )5.催产素和加压素构造稳定性取决于分子中( )6.在合适条件下,核酸分子两条链牢靠以下哪种作用互相杂交形成双螺旋( ).7.与双链DNA分子结合产生猛烈荧光物质是( ).8.细胞色素氧化酶抑制剂是( ).A.9.在多糖和寡糖生物合成中,葡萄糖活性形式是( ).10.脂肪酸合成中,参与链延长物质是( ).11.血糖浓度较低时,脑仍靠摄取葡萄糖,而肝脏那么不能,因为( ).A.G激酶Km低B.己糖激酶Km低12.DNA复制须要以下酶参与:①DNA聚合酶Ⅲ②解链蛋白③DNA聚合酶Ⅰ④DNA 指导RNA聚合酶⑤DNA连接酶,它们作用依次为( ).A.④③①②⑤B.④②①⑤③C.②④①③⑤D.②③④①⑤13.假设翻译时可以从任一核苷酸起始读码,人工合成(AAC)n(n为整数)多聚核苷酸,能翻译出几种多聚氨基酸( ).14.真核生物RNA转录场所是( ).三.填空题(36分)1.羧肽酶A不能水解蛋白质或多肽分子C-末端_____、_____和______.2.Cech和Altman因发觉核酶而获得____年诺贝尔化学奖.3.有一个含100个氨基酸多肽链,其中α-螺旋占60%,剩余部分全为伸展状态,该肽长度为______.4.与大多数蛋白质相比,胶原中____和____氨基酸含量最高.5.很多酶在体外发挥作用须要金属离子协助,如羧肽酶需Zn2+,________酶需Mg2+.6.别构酶活性中心负责酶对底物______和催化,别构中心那么负责调整酶反响速度.7.核酸变性是指核酸________________________,并不涉及_______断裂.8.限制性内切酶是分析DNA解剖刀,也是DNA__________技术重要工具.9.人皮肤含有__________________,经过紫外线激活后转化为维生素____,维生素E化学名称为_______,它与试验动物生育有关.10.肾上腺素是第一个在分子程度上已经理解其作用机理激素,通过________作用不仅使血糖__________,也使脂肪组织形成____________.11.糖类物质氧化分解时所产生二氧化碳和所消耗______是相等,所以糖呼吸商为_______.12.猛烈运动时,酵解作用是重要产能方式,而积累在肌肉中______可由血液运至肝中生成__________.13.酮体是肝中____________氧化时正常中间代谢物,是肌肉尤其是_________组织重要能源.14.乙酰CoA是体内合成脂肪酸原料,但在合成过程中干脆参与合成仅有___分子,其它均需羧化生成_______________之后才参与合成.Ⅰ除具有3’→5’核酸外切酶活性外,还兼有_________酶作用,3’→5’核酸外切酶起着________功能.16.蛋白质生物合成中,除了形成肽键外,每个主要步骤都与______水解为______和无机磷有关.17.阻遏作用是指小分子物质与___________________结合后形成复合物对转录抑制,结果使蛋白质和酶合成也受到抑制.四.问答题(30分)1.乳酸脱氢酶和醇脱氢酶均以NAD+为辅酶,肌肉组织中含丰富乳酸脱氢酶,肝脏中含丰富醇脱氢酶,分析以下体系中反响能否进展,并说明.(1)乳酸+透析后肌肉匀浆→(2)乳酸+煮沸肝匀浆→2.蛋白质化学探讨中常用试剂有以下一些:尿素、β-巯基乙醇、异硫氢酸苯酯、2,4-二硝基氟笨、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶等,请选用最相宜一种试剂完成以下试验,并说明缘由.(1)一个小肽氨基酸依次测定(2)一个没有二硫键蛋白质可逆变性(3)碱性氨基酸残基羧基一侧肽链水解.3.什么是解链温度影响核苷酸分子Tm值大小因素是什么试说明4.什么是酶RNA有何生物学意义5.说明生物进化过程中,为何不干脆将己酸氧化生成二氧化碳而要选择三羧酸循环(至少提两种缘由).6.说明SDS-PAGE别离蛋白质作用原理及运用范围.1998年试题1.蛋白质磷酸化和去磷酸化是互为逆反响,该可逆反响有同一种酶催化.2.全部别构酶都是寡聚酶.3.在酶催化反响中,要使[S]>>[E],[S]必需相当于20Km.4.His构造上咪唑基可以在PH6.5解离,是因为基上氢原子具有推动作用.5.变性剂、脲胍等物质可以破坏蛋白质氢键、疏水键、范德华力等,从而导致构造分散.6.胰岛素在体内是先分别合成A、B两链,再通过二硫键连接起完好分子.7.Z-DNA分子是一种左手螺旋构造,每圈螺旋约含12个bp.8.具有对底物切割功能都是蛋白质.9.某蛋白质在大于PIPH中电泳向阳极移,小于时向阴极移.10.DNA连接酶能将两条游离DNA单链连接起来.α-螺旋形成,它可以使α-螺旋转变,在肌红蛋白和血红蛋白多肽链中,每个转弯并不肯定有脯氨酸,但是每个脯氨酸处都有一个转弯.12.全部来自HMP途径复原力都是在循环前三步反响中产生.全部编码蛋白质基因都可根据其核苷酸序列推导出蛋白质中氨基酸序列.14.将凝胶上RNA转移到硝酸纤维素膜上技术叫Southern印迹.15.DNA复制时,前导链可以是连续合成,也可以是不连续合成,而后随链总是不连续合成.16.核糖体是细胞内蛋白质合成部位.17.真核细胞内DNA聚合酶一般都不具有核酸外切酶活性.18.信息大分子DNA合成与生物小分子不同,除需底物、能量、酶外,还须要模板.19.无论在体内还是在体外,RNA聚合酶都能使DNA两链同时进展转录.20.假如在线粒体内ADP浓度较低时参与解偶联剂,将减慢电子传递速度.1.胰蛋白酶专一水解蛋白质中肽链部位是( )2.RNA经NaOH水解后,其产物是( )A.5’-核苷酸B.2’-核苷酸C.3’-核苷酸D.2’和3’核苷酸混合物3.以下四种DNA分子分子量一样,电泳时谁跑得快( )4.热变性DNA特征是( )C.260nm处光汲取下降、粘度下降5.线粒体基质中脂酰辅酶A脱氢酶辅酶是( )A.NAD+B.FADC.NADP+D.GSSG(氧化型谷胱甘肽)6.细胞色素氧化酶抑制剂是( )7.血氨上升缘由是( )8.丙二酸对琥珀酸脱氢酶抑制效应是( )9.E.coli在乳酸作为唯一细胞源培育基上生长,基因型是,然后参与G会发生( )A.无变更c RNA不再合成C.E.coli不再利用lac10.对一个克隆DNA纯度作物理图谱分析须要用( )Ⅰ1.首次测定一级构造蛋白质是_____________,含____个氨基酸,为_________完成.2.Rtbozyme理论试验是___________和___________完成,因此获诺贝尔奖.3.构造域是蛋白质三级折叠中一个层次,与三级构造相比,它仅仅是________实体,最常见构造域约含__________个氨基酸残基.4.血红蛋白是___聚体,与肌红蛋白相比,其功能除运输___外,还能运输___和___5.有机溶剂引起蛋白质沉淀主要缘由是______________和脱去水化层.6.酶可逆抑制中最主要是______________,其抑制可逆过程______________7.温度上升使DNA变性时,称为__________,其变性特点是__________________, 常用Tm表示_____________.8.限制性内切酶生物学功能在于降解________,而不是降解____________,主要缘由是_______________________________________________.9.当肝细胞内____供应足够时,酵解途径中限速酶_____________被抑制,从而使________作用增加.10.真核基因表达调控一个主要环节是将断裂基因转录产物通过拼接,去除_______和________成为连续序列.11.在PH=0.3时,用________离子交换树脂别离氨基酸,与树脂结合最牢固是__________,因此最先洗脱下来是______________.12.用PCR扩增DNA片段,在反响中除了DNA作为模板外,还需假入_______、________和_________.13.不同代谢途径通过穿插关系代谢中间物进展转化.在糖、脂、蛋白质和核酸互相转化过程中,三个最关键代谢中间物是__________、_________、_______ 14.E.coli染色体DNA有______bp,分子量为______D,DNA分子松散时长度约为_________.15.真核细胞中mRNA前体加工成熟时,一般需___________________、_________、______________主要步骤.四.问答.1.以抑制剂队对酶促反响影响,说明有机磷酸农药中毒和解毒反响.2.运用糖代谢有关学问,说明下面试验结果.(1)把C4标记丙酮酸加到肝脏可溶性抽提物中,经C4匀称标记三软脂酰甘油.(2)当把柠檬酸加到上述抽取物中时,能加速软脂酸合成.3.简述DNA半保存不连续复制过程及相关酶作用.4.从激素作用原理,简述糖尿病发病机理.5.假如在PH2.0、6.5、10.0三种不同条件下进展电泳,试分析以下四肽泳动方向.(1)Lys-Gly-Ala-Gly (2)Lys-Gly-Ala-Glu(3)His-Gly-Ala-Glu (4)Arg-Lys-Ala-Glu1999年试题一.是非题(20分)1.Edman降解能顺着多肽链氨基端将残基一个一个地脱下来.2.溴化氰只在甲硫氨酸残基羧基端水解多肽链.3.蛋白质分子亚基也称构造域.4.肌红蛋白和血红蛋白亚基在一级构造上有明显同源性,它们构象和功能非常相像,所以它们氧结合曲线也是相像.5.黄嘌呤氧化酶底物是黄嘌呤,也可以是次黄嘌呤.6.核糖体是体内进展蛋白质合成部位.7.DNA分子中两条链在体内都可能转录成RNA.8.酶促反响中,低物类似物抑制作用和过量底物抑制作用机理根本上是一样.9.变构酶并不遵循米氏方程式.10.氧化作用和磷酸化作用是由质子梯度偶联起来.11.糖异生作用并非糖酵解作用逆转.12.羧肽酶A是一个含锌蛋白水解酶.13.核酸两个不同制剂A和B,AA260/A280比BA260/A280大,因此可推断制剂A纯度比制剂B纯度高.14.ATP是磷酸果糖激酶底物,因此高浓度ATP可以加快磷酸果糖激酶催化F-6-P生成F-1,6-2P.15.当DNA样品枯燥时,其长度会缩短.16.当【S】<<Km时,酶促反响速度取决于该反响体系中底物浓度.17.全部生物染色体DNA复制都是在一个起点上开始.18.与DNA复制不同,RNA转录起始可以随机地在DNA模板上进展.19.Ribozyme是一类核酸性酶统称.20.某些病毒基因是由RNA组成.二.填空(30分)1.蛋白质中20种氨基酸,除_____外,在生理PH下都没有明显缓冲容量,因为这些氨基酸PK值都不在PH___旁边.2.镰刀状细胞贫血病是由于正常血红蛋白β6位上____被____替代而引起分子病.3.蛋白质中二硫键可被__________试剂所复原,用______可防止反响体系中二硫键生成.4.酶活性中心基团可分为______和______,前者确定酶_______,后者确定酶_________.5.一个酶活力国际单位定义为___________________________________,在酶学探讨及消费中通常用来比较每单位重量酶蛋白催化实力时可采纳________表示.6.用PCR方法扩增DNA片段,在反响中除了用该DNA片段作为模板外,还须要参与_________、__________和__________.7.核酸变性后理化性质主要有_______________和_______________变更.8.生物体内一些维生素可以作为辅酶,如苹果酸脱氢酶辅酶为______,转氨酶辅酶为____________.9.电子传递呼吸链在原核细胞中存在于__________上,在真核细胞中存在于___内膜上.10.糖酵解与糖异生限制点是_________________转化,糖酵解和糖异生作用中有___个点可能产生无效循环.11.Gln是中性物质,简单通过细胞膜,是体内___主要运输形式.12.基因组能独立进展复制单位称为________,复制方向大多是______.13.蛋白质生物合成中,tRNA在识别密码子时接头作用主要是指______和_______.三.选择题(15分)1.一个tRNA分子上反密码子是UGA,可识别以下哪个密码子( )2.假尿苷中糖苷键是( ),3.以下单股DNA片段中哪一种在双链状态下可形成回文构造( )4.以下因素中哪项不能加快酶促反响速度( )A.底物存在于酶外表5.唾液淀粉酶经透析后,水解淀粉实力明显下降,其缘由是( )α-螺旋( )7.向卵清蛋白溶液中参与适当浓度NaOH使溶液呈碱性,加热至沸腾后马上冷却,此时( )8.有一样品,由两种蛋白质组成,其等电点分别为4.9和6.8,在以下哪种PH条件下电泳,别离效果会最好( )5.9 C9.胰岛素对物质代谢有广泛调整作用,在生理浓度下,它不能引起以下哪一种作用增加( )A.G通过细胞膜B.G氧化C.脂肪合成D.糖异生10.1mol/L琥珀酸脱氢生成延胡索酸,脱下氢通过呼吸链传递,在KCN存在时,可生成多少个ATP及H2O( )11.血糖浓度低时闹仍可摄取G,肝脏那么不能,缘由是( )β-氧化不能生成以下哪一种化合物( )13.大肠杆菌在乳糖为唯一碳源培育基中生长,基因型为i z y,然后参与G,会发生以下哪种状况( )14.逆转录酶是一种( )15.与大多数蛋白质相比,胶原中哪种蛋白质含量较高( )四.问答题(35分)1.指出采纳不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳别离蛋白质时,以下各物质作用分别是什(1)TEMED (2)过硫酸铵 (3)40%蔗糖2.说明酶促反响体系中增加酶浓度时,为什么1/[S]对1/[V]作图所得直线斜率会减小3.说明DNATm值主要受哪些因素影响为什么用所给方法处理后得到产物,说明理由.(1)Pro-Phe-Arg-Ala 胰蛋白酶(2)Tyr-Gly-Val-Lys 羧肽酶A(3)pApCpUpGpA-OH RNaseA5.在甘油、乙酰CoA、乳酸和丙酮酸中何者既是G分解产物,又是异生为G原料简述其转变过程.6.说明在绝大多数蛋白质氨基酸组成中,为什么Met和Trp含量较少Cys和His 次之,Leu和Ser含量较多2000年试题一.是非题1.用SDS-PAGE法通常可以测定自然蛋白质分子量。
蛋白质的消化与吸收摘要:本文针对蛋白质营养过程中消化和吸收两个环节及蛋白质的消化率、利用率进行介绍。
正文:蛋白质是不同氨基酸以肽键相连所组成的具有一定空间结构的生物大分子物质。
蛋白质是构成机体和生命的重要物质基础它具有催化机体新陈代谢、条街生理机能、参与羊的运输、进行遗传控制等重要的生理功能,还能够建造新组织和修补更新组织,为有机体提供能量的功能。
机体中的每一个细胞和所有重要组成部分都有蛋白质参与。
蛋白质存在于所有的生物中,没有蛋白质就没有生命。
因此,蛋白质是与生命及与各种形式的生命活动紧密联系在一起的物质。
食入的蛋白质在体内经过消化被水解成氨基酸被吸收后,重新合成人体所需蛋白质,同时新的蛋白质又在不断代谢与分解,时刻处于动态平衡中。
因此,食物蛋白质的质和量、各种氨基酸的比例,关系到人体蛋白质合成的量,在生命的任何时期,身体的成长、发育和维持健康都离不开蛋白质,尤其是青少年的生长发育、孕产妇的优生优育、老年人的健康长寿,都与膳食中蛋白质的量有着紧密的关系。
营养的全过程包括摄食、消化、吸收、中间代谢、排泄等环节,通常指从消化道中间代谢的过程、大多数的营养素在进入代谢过程之前,都必须先经过消化、一种食物的营养价值,不仅取决于其所含的营养素,也取决于其可消化性和可吸收性、食物中的蛋白质等大分子成分,先经由消化系统消化吸收后进入体内,由血液循环被运送到全身各处,并在体内发生分解、合成或转化等代谢,从而发挥其生理作用、能够说,营养素在体内的消化与代谢过程就是其完成生理功能的过程。
从人体解剖的角度来看,人的消化道是由相互延续的空腔器官构成,上端通过口腔、下端由肛门与外界相通。
因此,从严格意义上来时,人体摄入的食物并没有真正进入到人体内,人体的组织与细胞也不能利用消化道内的食物,即便消化道本身,也需要由从心脏来源的血液提供氧气和养料。
可见,食物只有经过消化吸收进入人体后才能发挥其生理作用。
本篇报告主要讨论蛋白质的消化与吸收的两个过程。
生化简答题1.简述脂类的消化与吸收。
脂类的消化部位主要在小肠,小肠内的胰脂酶、磷脂酶、胆固醇酯酶及辅脂酶等可以催化脂类水解;肠内PH值有利于这些酶的催化反应,又有胆汁酸盐的作用,最后将脂类水解后主要经肠粘膜细胞转化生成乳糜微粒被吸收。
2.何谓酮体?酮体是如何生成及氧化利用的?酮体包括乙酰乙酸、β-羟丁酸和丙酮。
酮体是在肝细胞内由乙酰CoA经HMG-CoA转化而来,但肝脏不利用酮体。
在肝外组织酮体经乙酰乙酸硫激酶或琥珀酰CoA转硫酶催化后,转变成乙酰CoA并进入三羧酯循环而被氧化利用。
3.为什么吃糖多了人体会发胖(写出主要反应过程)?脂肪能转变成葡萄糖吗?为什么?人吃过多的糖造成体内能量物质过剩,进而合成脂肪储存故可以发胖,基本过程如下:葡萄糖→丙酮酸→乙酰CoA→合成脂肪酸→酯酰CoA葡萄糖→磷酸二羧丙酮→3-磷酸甘油脂酰CoA+3-磷酸甘油→脂肪(储存)脂肪分解产生脂肪酸和甘油,脂肪酸不能转变成葡萄糖,因为脂肪酸氧化产生的乙酰CoA不能逆转为丙酮酸,但脂肪分解产生的甘油可以通过糖异生而生成葡萄糖。
4.简述脂肪肝的成因。
肝脏是合成脂肪的主要器官,由于磷脂合成的原料不足等原因,造成肝脏脂蛋白合成障碍,使肝内脂肪不能及时转移出肝脏而造成堆积,形成脂肪肝。
5.写出胆固醇合成的基本原料及关键酶?胆固醇在体内可的转变成哪些物质?胆固醇合成的基本原料是乙酰CoA.NADPH和ATP等,限速酶是HMG-CoA 还原酶,胆固醇在体内可以转变为胆计酸、类固醇激素和维生素D3。
6.脂蛋白分为几类?各种脂蛋白的主要功用?脂蛋白分为四类:CM、VLDL(前β-脂蛋白)、LDL(β-脂蛋白)和HDL(α-脂蛋白),它们的主要功能分别是转运外源脂肪、转运内源脂肪、转运胆固醇及逆转胆固醇。
7.写出甘油的代谢途径?甘油→3-磷酸甘油→ (氧化供能,异生为糖,合成脂肪再利用)8.简述饥饿或糖尿病患者,出现酮症的原因?在正常生理条件下,肝外组织氧化利用酮体的能力大大超过肝内生成酮体的能力,血中仅含少量的酮体,在饥饿、糖尿病等糖代谢障碍时,脂肪动员加强,脂肪酸的氧化也加强,肝脏生成酮体大大增加,当酮体的生成超过肝外组织的氧化利用能力时,血酮体升高,可导致酮血症、酮尿症及酮症酸中毒。
生化测试一:蛋白质化学一、填空题1.氨基酸的结构通式为 H 3N CH C O OR -+a 。
2.氨基酸在等电点时,主要以 兼性/两性 离子形式存在,在pH>pI 的溶液中,大部分以阴 离子形式存在,在pH<pI 的溶液中,大部分以阳离子形式存在。
3.生理条件下(pH7.0左右),蛋白质分子中的Arg 侧链和 Lys__侧链几乎完全带正电荷,但 His 侧链带部分正电荷。
4.测定蛋白质紫外吸收的波长,一般在280nm ,要由于蛋白质中存在着Phe 、 Trp 、 Tyr 氨基酸残基侧链基团。
5.皮肤遇茚三酮试剂变成 蓝紫 色,是因为皮肤中含有 蛋白质 所致。
6.Lys 的pk 1(COOH-α)=2.18,pk 2(3H N +-α)=8.95,pk 3(3H N +-ε)=10.53,其pI 为 9.74 。
在pH=5.0的溶液中电泳,Lys 向 负 极移动。
7.实验室常用的甲醛滴定是利用氨基酸的氨基与中性甲醛反应,然后用碱(NaOH )来滴定 NH 3+/氨基 上放出的 H 。
8. 一个带负电荷的氨基酸可牢固地结合到阴离子交换树脂上,因此需要一种比原来缓冲液pH 值 小 和离子强度 高 的缓冲液,才能将此氨基酸洗脱下来。
9. 决定多肽或蛋白质分子空间构像能否稳定存在,以及以什么形式存在的主要因素是由 一级结构 来决定的。
10. 测定蛋白质中二硫键位置的经典方法是___对角线电泳 。
11. 从混合蛋白质中分离特定组分蛋白质的主要原理是根据它们之间的 溶解度 、 分子量/分子大小 、 带电性质 、 吸附性质 、 生物亲和力 。
12. 蛋白质多肽链主链构象的结构单元包括__α-螺旋__、_β-折叠__、__β-转角__等,维系蛋白质二级结构的主要作用力是__氢__键。
13. 蛋白质的α—螺旋结构中, 3.6 个氨基酸残基旋转一周,每个氨基酸沿纵轴上升的高度为 0.15 nm ,旋转 100 度。
糜蛋白酶种类
糜蛋白酶是一类能够分解蛋白质的酶,也被称为蛋白酶、蛋白酶裂解酶等。
这些酶在生物体内发挥着重要的生理和生化功能。
以下是一些主要种类的糜蛋白酶:
1.胃蛋白酶(Pepsin):主要存在于胃液中,起主要作用于胃部对蛋白质的初步裂解。
2.胰蛋白酶(Pancreatic Protease):由胰腺分泌,包括胰蛋白酶、胰蛋白酶和胰蛋白酶等,对蛋白质进行更彻底的分解,分别在小肠中的不同部位活跃。
3.糜蛋白酶A(Chymotrypsin A):是一种由胰腺分泌的酶,对酪蛋白等底物有特异性裂解。
4.糜蛋白酶B(Chymotrypsin B):也是由胰腺分泌的一种糜蛋白酶,对蛋白质有特异性裂解作用。
5.弹性蛋白酶(Elastase):在胰腺分泌的蛋白酶中,对弹性蛋白等底物有特异性裂解作用。
6.胰蛋白酶胶原酶(Collagenase):能够裂解胶原蛋白,主要参与组织重塑和修复。
7.胰蛋白酶卵白酶(Trypsinogen):是一种由胰腺分泌的酶,可以被转化为活性的胰蛋白酶,参与蛋白质的分解。
高级生物化学试题佃97级一、单项选择1. 下列单链DNA片段中哪一个在双链状态下可以形成回文结构?__________①ATGCCGTA ② ATGCTACG ③ GTCATGAC ④ GTATCTAT2. 蛋白质的分子量可以用沉降系数S表示,1S=10 X10-3 _④____① s ② cm ③ cm/s ④秒3. 某酶有四种底物(S),其km值分别如下,该酶的最适底物为 ________① 5 X10-5②1 X0-5③10 X10-5④0.1 相-54. 胰岛素受体和一些生长因子受体也是一种酶,它是 ________①酪氨酸激酶②丝氨酸或苏氨酸激酶③腺苷酸环化酶④硝酸化酶….5.在接近中性pH的条件下,下列哪种基因既可作为H +的受体,又可作为『的供体? _①His-咪唑基②Lys-*-氨基③Arg-胍基④Cys-巯基6. 氨基酸生物合成的调节,主要依靠 __________①氨基酸合成后的化学修饰② 氨基酸合成后的脱氨基和转氨基作用③ 氨基酸合成途径中,酶的别构效应和阻遏效应7. 物质跨膜主动运输是指传送时 ____①需要ATP②需要有负责传送的蛋白质③消耗能量(不单是ATP)④在一定温度范围内传送速度与绝对温度的平方成正比8. 用双脱氧末端终止法测定DNA序列,要除去DNA聚合酶中的 ________ 活性。
①核酸内切酶②5, 3外切酶③3, -5,外切酶④核酸酶9. 遗传密码中第几个碱基常常很少或不带遗传信息?_______① 第一个② 第二个③ 第三个④ 第四个10. ____________________________________ 有一个环肽的组成是Ala、Asp、Gly、Phe、Leu、Vai,下列方法中你首先选用什么方法作为你测定这一个肽的序列的第一步?① 胰蛋白酶水解② 胰凝乳蛋白酶水解③ 溴化氢裂解④ 羧肽酶水解二、是非题1. 一般讲,从DNA分子的三联体密码中可以推定氨基酸的顺序,相反,从氨基酸的顺序也可以毫无疑问的推出DNA顺序。
第一章蛋白质(一)名词解释1.两性离子(dipolarion)2.必需氨基酸(essential amino acid)3.等电点(isoelectric point,pI)4.稀有氨基酸(rare amino acid)5.非蛋白质氨基酸(nonprotein amino acid)6.构型(configuration)7.蛋白质的一级结构(protein primary structure)8.构象(conformation)9.蛋白质的二级结构(protein secondary structure)10.结构域(domain)11.蛋白质的三级结构(protein tertiary structure)12.氢键(hydrogen bond)13.蛋白质的四级结构(protein quaternary structure)14.离子键(ionic bond)15.超二级结构(super-secondary structure)16.疏水键(hydrophobic bond)17.范德华力( van der Waals force)18.盐析(salting out)19.盐溶(salting in)20.蛋白质的变性(denaturation)21.蛋白质的复性(renaturation)22.蛋白质的沉淀作用(precipitation)23.凝胶电泳(gel electrophoresis)24.层析(chromatography)(二)填空题1.蛋白质多肽链中的肽键是通过一个氨基酸的_____基和另一氨基酸的_____基连接而形成的。
2.大多数蛋白质中氮的含量较恒定,平均为___%,如测得1克样品含氮量为10mg,则蛋白质含量为____%。
3.在20种氨基酸中,酸性氨基酸有_________和________2种,具有羟基的氨基酸是________和_________,能形成二硫键的氨基酸是__________.4.蛋白质中的_________、___________和__________3种氨基酸具有紫外吸收特性,因而使蛋白质在280nm处有最大吸收值。
蛋白质氧化分解的场所
蛋白质氧化分解的场所主要发生在细胞内的线粒体和内质网。
线粒体是细胞内的能量生产中心,通过氧化磷酸化反应将葡萄糖和
脂肪酸氧化分解产生ATP,而蛋白质也可以在线粒体内参与氧化分
解过程。
内质网则是细胞内蛋白质合成的主要场所,同时也是蛋白
质的后翻译修饰和折叠的地方,一些异常的蛋白质可能会在内质网
中被降解。
此外,细胞内的蛋白酶也参与了蛋白质的氧化分解过程,这些蛋白酶可以在细胞质和溶酶体中发挥作用,将蛋白质降解为氨
基酸或肽段。
总的来说,蛋白质氧化分解的场所涉及细胞内的线粒体、内质网和蛋白酶等部位。
一、糜胰蛋白酶水解蛋白部位
胰蛋白酶 胰脏 Arg ,Lys
糜蛋白酶
胰脏
Tyr ,Phe ,Trp
Leu
,Met ,His ,Asu ,Gln
二、糜蛋白酶激活条件及检测原理
1. 糜蛋白酶原激活原理
牛的α-胰凝乳蛋白酶的氨基酸残基数245个,分子量约2.5万,第57位组氨酸、102位天冬氨酸、195位丝氨酸等三个残基在催化作用中起着中心作用。
195位丝氨酸受二异丙基氟磷酸(DFP )的作用受特异的修饰而丧失活性,即所谓丝氨酸蛋白酶。
糜蛋白酶原
A
α-糜蛋白酶
+
两个二肽
2. 糜蛋白酶和底物(BAEE)反应原理
PH7.0 25℃
三、胰蛋白酶激活条件及检测原理
1.胰蛋白酶原激活原理
胰蛋白酶原胰蛋白酶+ 六肽
牛的胰蛋白酶氨基酸残基223个,分子量为23300,活性部位的丝氨酸残基是不可缺少的丝氨酸蛋白酶。
胰蛋白酶受肠激酶或胰蛋白酶本身的激活,第6位赖氨酸与第7位异亮氨酸残基之间的肽键被切断,水解掉一个六肽,酶分子空间构象发生改变,产生酶的活性中心,于是胰蛋白酶原变成了有活性的胰蛋白酶
2.胰蛋白酶与底物(BTEE)反应原理。