Ⅱ型谷氨酰胺转氨酶对缺氧骨肉瘤MG-63细胞凋亡的影响
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低氧诱导因子-2α基因沉默对骨肉瘤细胞株MG-63生物学行为的影响朱波;林珊珊;崔春萍;谢明均【期刊名称】《天津医药》【年(卷),期】2014(42)8【摘要】Objective To investigate the effect of HIF-2a silencing by transfection of siRNA into MG-63 cells un-der hypoxia. Methods HIF-2αexpression level in MG-63 cells under hypoxia was determined by Western Blot. Small in-terfering RNA (siRNA) was used to construct MG-63/siHIF-2α(siHIF-2α)cells and control MG-63/scramble (NC) cells. The expression levels of HIF-2α, Vascular endothelial growth factor (VEGF), p-Erk/ErK and Mcl-1 in MG-63, NC and si-HIF-2αcells was determined by Western Blot. NC and siHIF-2αcells were cultured under hypoxia. Cell viability was as-sessed by MTT assay. Migration was identified by scratch migration assay. Tumor formation was identified by clone formation assay. Nude mouse subcutaneous xenograft model was used to investigate tumor development in vivo. Results Hypoxia im-proved HIF-2αexpression in MG-63 cells in a time-dependent manner (F=2 037.412,P<0.001). HIF-2αexpression un-der hypoxia in siHIF-2αc ells was lower than that in NC cells (P<0.01). Cell viability of siHIF-2αcells under hypoxia for 12 h and 24 h were lower than that in NC cells (P<0.05 or P<0.01). The relative width of scratch in siHIF-2αgroup under hypoxia for 12 h and 24 h were larger t hanthat in NC group (P<0.01 or P<0.01). When cell counts reach 1 000-5 000, the clone formation rates of siHIF-2αcells were lower than that in NC cells (P<0.05 or P<0.01). The expression of VEGF, p-Erk/Erk and Mcl-1 protein under hypoxia in siHIF-2αcells was lower than that in NC cells(P<0.01). Tumor sizes, weights and density of siHIF-2α group in nude mice were suppressed compared with those in NC group (P<0.01). Conclusion Blocking HIF-2αsignal pathway warrants its investigation as a potential strategy in osteosarcoma treatment.%目的:探讨低氧诱导因子-2α(HIF-2α)基因沉默对低氧状态下骨肉瘤MG-63细胞的影响。
shRNA`-Slit2对骨肉瘤MG63细胞迁移增殖和凋亡影响引言骨肉瘤是一种高度侵袭性的肿瘤,常见于儿童和青少年,对治疗的挑战很大。
细胞迁移、增殖和凋亡是骨肉瘤发展的关键过程。
Slit2是一种神经系统发育中的分子,已经被发现在多种癌症中高表达,包括骨肉瘤。
本实验旨在研究shRNA-Slit2对骨肉瘤MG63细胞迁移、增殖和凋亡的影响,为骨肉瘤的治疗提供新的思路。
材料与方法1.细胞培养:将MG63细胞分装在含有10% FBS的DMEM培养基中,培养于37℃的带有5% CO2的细胞培养箱中。
2.shRNA转染:使用Lipofectamine 2000将shRNA-Slit2转染至MG63细胞,转染时间为48小时。
3.细胞迁移实验: 使用Transwell小室进行细胞迁移实验,观察并统计shRNA-Slit2转染前后MG63细胞的迁移能力。
4.增殖实验:使用MTT法和克隆形成实验,评估shRNA-Slit2转染前后MG63细胞的增殖能力。
5.凋亡实验:利用PI/Annexin V双染法和TUNEL法检测shRNA-Slit2转染前后MG63细胞的凋亡情况。
结果1. 细胞迁移实验显示,shRNA-Slit2转染后,MG63细胞的迁移能力显著减弱。
2. 增殖实验结果表明,shRNA-Slit2转染后,MG63细胞的增殖能力明显下降。
3. 凋亡实验显示,转染shRNA-Slit2后,MG63细胞的凋亡率明显增加。
讨论本实验结果表明,shRNA-Slit2对骨肉瘤MG63细胞的迁移、增殖和凋亡均有显著影响。
这提示Slit2在骨肉瘤细胞的活动中可能发挥着重要的作用。
Slit2可能通过调节细胞迁移和增殖来影响骨肉瘤的发展,而且可能通过促进细胞凋亡来抑制骨肉瘤的生长。
针对Slit2的治疗策略可能有望成为治疗骨肉瘤的新途径。
还需要进一步的研究来明确Slit2在骨肉瘤中的作用机制,以及其在临床治疗中的应用前景。
结论本研究发现,shRNA-Slit2转染可以显著抑制骨肉瘤MG63细胞的迁移、增殖,并促进其凋亡。
shRNA`-Slit2对骨肉瘤MG63细胞迁移增殖和凋亡影响1. 引言1.1 背景骨肉瘤是一种来源于骨组织的恶性肿瘤,常见于青少年和年轻成年人。
骨肉瘤的发病机制复杂,目前治疗效果并不理想。
迁移、增殖和凋亡是肿瘤发展过程中关键的生物学特征,因此探究影响这些过程的分子机制对于骨肉瘤治疗具有重要意义。
Slit2是一种由神经元细胞表达并在神经系统中发挥作用的蛋白质,最近的研究表明Slit2在肿瘤中也起着重要的调控作用。
通过干扰Slit2的表达,可以影响肿瘤细胞的迁移、增殖和凋亡,从而影响肿瘤的发展和转移过程。
针对Slit2的调控可能成为治疗骨肉瘤的新策略。
本研究旨在探究shRNA`-Slit2在骨肉瘤MG63细胞中对迁移、增殖和凋亡的影响,并进一步揭示其潜在的分子机制,为开发针对Slit2的治疗策略提供实验依据。
通过对shRNA`-Slit2在骨肉瘤中的作用进行深入研究,有望为骨肉瘤的治疗带来新的突破。
1.2 研究目的骨肉瘤是一种常见的原发性骨肿瘤,具有高度侵袭性和恶性生长的特点,常常导致患者出现严重的并发症和生存率下降。
Slit2是一种神经系统中的分子信号蛋白,在多种肿瘤中起着重要的调控作用。
关于shRNA`-Slit2对骨肉瘤MG63细胞的影响研究还相对不足。
本研究旨在探究shRNA`-Slit2对骨肉瘤MG63细胞迁移、增殖和凋亡的影响,以及相关的分子机制,为开发新的治疗策略提供实验依据。
具体研究目的包括:1.探究shRNA`-Slit2对骨肉瘤MG63细胞迁移的抑制作用及其可能的分子机制;2.研究shRNA`-Slit2对骨肉瘤MG63细胞增殖的作用及其潜在的抑制机制;3.分析shRNA`-Slit2对骨肉瘤MG63细胞凋亡的促进作用及其可能的信号通路;4.探讨shRNA`-Slit2在临床治疗骨肉瘤中的潜在应用前景。
通过这些研究,我们希望能更深入地了解shRNA`-Slit2在骨肉瘤中的作用机制,为开发新的治疗策略提供实验基础。
虫草素对人骨肉瘤MG-63细胞凋亡的影响及其机制研究梅红军;刘洋【摘要】目的研究虫草素对人骨肉瘤MG-63细胞凋亡的影响及其机制.方法采用CCK-8实验检测不同浓度虫草素作用于MG-63骨肉瘤细胞24h和48h后对癌细胞增殖的抑制作用;采用流式细胞术分析虫草素对MG-63细胞周期分布及凋亡的影响;采用Western blot法检测虫草素对MG-63细胞凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、cleaved caspase-9、cleaved caspase-3及NICD1、Hesl蛋白表达的影响.结果虫草素对人骨肉瘤MG-63细胞有明显的增殖抑制作用,导致MG-63细胞周期阻滞于G0/G1期并诱导细胞凋亡;虫草素可上调Bax、cleaved caspase-9和cleaved caspase-3蛋白的表达并下调Bcl-2,NICD1和Hesl蛋白的表达.结论虫草素通过抑制骨肉瘤细胞增殖,诱导细胞周期阻滞于G0/G1期并通过线粒体凋亡途径诱导MG-63细胞凋亡从而发挥抗骨肉瘤作用,可能骨肉瘤细胞中Notch信号通路活性下调有关.【期刊名称】《医学研究杂志》【年(卷),期】2018(047)012【总页数】4页(P75-78)【关键词】虫草素;MG-63细胞;凋亡;Notch信号通路【作者】梅红军;刘洋【作者单位】430050 武汉市第五医院骨科;430050 武汉市第五医院骨科【正文语种】中文【中图分类】R2骨肉瘤是常发于青少年的恶性肿瘤,其生物学行为高度恶性,容易转移和复发,预后差[1,2]。
随着新辅助化疗的出现,骨肉瘤患者的5年生存率明显提高,但仍无法令人满意,并且,由于化疗药物的毒性不良反应以及肿瘤耐药的发生,大大降低了常用化疗药物的作用效果[3]。
因此,寻找新的抗肿瘤药物显得尤为重要,而从祖国传统医学里面寻找抗肿瘤新药无疑有着巨大前景。
虫草素,又称为虫草菌素,是一种来自于冬虫夏草的天然产物,也是冬虫夏草的主要活性成分,然而目前已有研究报道体外合成虫草素的方法[4]。
谷氨酰胺转移酶2基因在副腺素E2调控肿瘤发生中的作用副腺素E2是一种重要的生物活性物质,它在调节炎症反应、细胞增殖、代谢调节等方面发挥着重要的作用。
而谷氨酰胺转移酶2基因(GSTM2)作为负责转移和代谢内源性和外源性化合物的酶基因,也对肿瘤的发生、发展和侵袭起到了一定的作用。
最近的研究表明,GSTM2基因在副腺素E2调控肿瘤发生中发挥着重要的作用。
一、副腺素E2的生物学作用副腺素E2是一种亚硫酸酯类物质,它主要由环氧化酶-2(COX-2)催化合成。
副腺素E2在调节身体炎症反应、细胞增殖、代谢调节等方面发挥着重要作用。
在生理状态下,副腺素E2的产生和代谢保持平衡。
但在疾病状态下,如癌症、心脏病等,副腺素E2的水平往往会升高,从而对身体产生负面影响。
因此,在研究肿瘤等疾病时,副腺素E2的生物学作用成为了研究的重点之一。
二、GSTM2基因在肿瘤中的作用GSTM2基因是谷氨酰胺转移酶家族中的一种,它参与内源性和外源性化合物的代谢和转移。
GSTM2基因在肿瘤的发生、发展和侵袭中起着重要的作用,其表达水平的高低有可能影响肿瘤的生长和转移。
许多研究表明,GSTM2基因的表达水平与肿瘤的生长和转移密切相关。
例如,一项研究发现,在乳腺肿瘤、胃癌、肺癌等多种癌症中,GSTM2基因的表达水平均显著降低。
而对于结肠癌、肾细胞癌等其他类型的癌症,GSTM2的降低也被发现。
这些研究表明,GSTM2可能对肿瘤的发生和发展起着重要的作用。
三、GSTM2基因在副腺素E2调控肿瘤发生中的作用最近的研究表明,GSTM2基因在副腺素E2调控肿瘤发生中发挥着重要的作用。
副腺素E2能够调节肿瘤干细胞的增殖和转化,从而对肿瘤的发生和发展起到促进作用。
而GSTM2基因的表达水平能够影响副腺素E2的代谢和转移,从而影响肿瘤的生长和转移。
一项最近的研究发现,在小鼠体内,副腺素E2能够诱导肝癌的发生和发展。
而GSTM2基因的缺失会导致副腺素E2的代谢和转移异常,从而加速肝癌的生长和转移。
补骨脂素对人成骨肉瘤MG-63细胞增殖及凋亡的影响芦艳丽;姚立东;孟庆才;董先杰;马玲【期刊名称】《新疆医科大学学报》【年(卷),期】2010(033)008【摘要】目的体外观察补骨脂素对人成骨肉瘤MG-63细胞的抑制增殖和促进凋亡作用.方法将浓度为640、320、160 μmol/L的补骨脂素与MG-63细胞体外培养, 采用苔盼蓝染色法绘制细胞生长曲线,噻唑蓝(MTT)比色法测定药物的细胞毒作用,倒置相差显微镜下观察细胞的形态变化,Hoechst33258细胞荧光染色法观察细胞凋亡的形态变化.结果细胞生长曲线表明细胞增殖数量变化与药物浓度及时间有显著依赖性;MTT测定补骨脂素在72 h对MG-63细胞抑制率分别为77.74%、71.05%、61.15%,细胞荧光染色观察到MG-63细胞形态改变.结论补骨脂素抑制体外培养骨肉瘤MG-63细胞增殖,并可诱导其细胞凋亡.【总页数】3页(P888-890)【作者】芦艳丽;姚立东;孟庆才;董先杰;马玲【作者单位】新疆医科大学附属中医医院骨科,新疆乌鲁木齐830000;武警新疆总队医院骨科,新疆乌鲁木齐830000;新疆医科大学附属中医医院骨科,新疆乌鲁木齐830000;武警乌鲁木齐市支队,新疆乌鲁木齐830000;新疆医科大学附属中医医院骨科,新疆乌鲁木齐830000【正文语种】中文【中图分类】R365%R738.1【相关文献】1.补骨脂素对人成骨肉瘤MG-63细胞增殖的影响 [J], 芦艳丽;孟庆才;方锐;邓迎杰;艾力江·阿斯拉;史亮2.ELL2在人成骨肉瘤中的表达及对MG-63细胞增殖的影响 [J], 张平安;王晓伟;郭向好3.薏苡仁酯对人成骨肉瘤MG-63细胞增殖和凋亡的影响 [J], 张菁菁;张久亮;李左安4.薏苡仁酯对人成骨肉瘤MG-63细胞增殖和凋亡的影响 [J], 张菁菁;张久亮;李左安5.人参皂甙Rg1、肉桂酸和丹参酮IIA组合对成骨肉瘤MG-63细胞增殖与相关基因表达的影响 [J], 石松林;王国红;李祺福;马宗源;林昌健;赵振利因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
人参皂苷 Rh2对人骨肉瘤细胞 MG-63凋亡的影响王立民【期刊名称】《中国病理生理杂志》【年(卷),期】2015(000)009【摘要】目的:探讨人参皂苷Rh2对人骨肉瘤细胞MG-63凋亡的影响,并初步探讨可能的分子机制。
方法:采用流式细胞术Annexin V-PI双染法和MTT法检测MG-63细胞的凋亡变化;免疫印迹法检测Bcl-2、Bax、Cyt C和激活型caspase-3的蛋白水平。
结果:流式细胞术和MTT法结果显示人参皂苷Rh2呈浓度依赖性促进MG-63细胞的凋亡。
免疫印迹法结果表明,与空白对照组相比,给药组细胞Bax的蛋白表达显著增加,Bcl-2的蛋白表达显著减少,Bcl-2/Bax比值减少;线粒体中Cyt C蛋白表达显著减少,而胞浆中表达显著增加;激活型caspase-3蛋白水平显著增加(P<0.05)。
结论:人参皂苷Rh2呈浓度依赖性促进MG-63细胞的凋亡,其凋亡过程可能与调控线粒体凋亡通路相关蛋白有关。
【总页数】5页(P1715-1719)【作者】王立民【作者单位】胜利石油管理局胜利医院骨科,山东东营257055【正文语种】中文【中图分类】R730.23【相关文献】1.不同浓度白藜芦醇对人骨肉瘤细胞MG-63增殖、凋亡的影响及机制研究 [J], 舒洋;陈实2.浅谈人参皂苷Rh2对肿瘤细胞增殖周期和凋亡的影响 [J], 郭志廷;王鲁;褚秀玲;王春元;韦旭斌3.三氧化二砷对人骨肉瘤细胞MG-63增殖和凋亡的影响 [J], 张卫华; 刘思源; 华长城4.丹皮酚与顺铂联用对人骨肉瘤细胞MG-63增殖、凋亡及PI3K/Akt/mTOR信号通路的影响 [J], 吴琪;陈运中;吴高明5.槲皮素对人骨肉瘤细胞系MG-63中凋亡相关因子caspase-3的表达影响 [J], 黄祚瑶;刘晓宁;李建;何春水因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
谷氨酰胺对缺氧复氧损伤人小肠上皮细胞谷胱甘肽的影响戴定威;吴圣楣;戚秋芬;李敏;陈惠金;蔡威【期刊名称】《中国病理生理杂志》【年(卷),期】1999(015)002【摘要】目的:探讨谷氨酰胺(GLN)对缺氧复氧损伤人小肠上皮细胞(IEC)内还原型谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)的影响.方法:采用原代培养人IEC作为实验模型,用荧光法测定体外培养IEC内GSH和MDA含量.结果:正常对照组GSH含量最高,在对照组加入GLN并不影响GSH含量(P>0.05).缺氧60 min或90 min复氧30 min损伤IEC细胞内GSH含量均显著低于正常对照组(P<0.05),预先应用GLN可显著阻止缺氧复氧损伤IEC细胞GSH含量下降(P<0.05).相反,正常对照组MDA 含量最低,缺氧60 min复氧30 min IEC细胞内MDA水平显著高于正常对照组(P <0.01),预先应用GLN可显著降低缺氧复氧损伤IEC细胞内MDA水平(P<0.05).结论:补充GLN可维持缺氧复氧损伤IEC细胞GSH水平,减轻细胞膜脂质过氧化.【总页数】3页(P128-130)【作者】戴定威;吴圣楣;戚秋芬;李敏;陈惠金;蔡威【作者单位】上海市儿科医学研究所,上海第二医科大学附属新华医院,上海200092;上海市儿科医学研究所,上海第二医科大学附属新华医院,上海200092;上海市儿科医学研究所,上海第二医科大学附属新华医院,上海200092;上海市儿科医学研究所,上海第二医科大学附属新华医院,上海200092;上海市儿科医学研究所,上海第二医科大学附属新华医院,上海200092;上海市儿科医学研究所,上海第二医科大学附属新华医院,上海200092【正文语种】中文【中图分类】R363【相关文献】1.紫芪方对IEC-6小肠上皮细胞缺氧复氧损伤后细胞凋亡及线粒体膜电位的影响[J], 史成和;陆松敏;刘建仓;龙在云;伊远学;李萍2.丙氨酰-谷氨酰胺预处理对氧化应激猪小肠上皮细胞活力和自噬的影响 [J], 辛向荣;贺琴;游金明;叶亚玲;邓宸玺3.人小肠上皮细胞缺氧复氧损伤的预防研究 [J], 戴定威;吴圣楣4.益生菌联合丙氨酰谷氨酰胺对脓毒血症急性肠黏膜损伤及谷胱甘肽和谷氨酰胺水平的影响 [J], 李易晨5.谷氨酰胺对体外培养人小肠上皮细胞缺氧复氧损伤的保护作用 [J], 戴定威;吴圣楣;李敏;陈惠金;蔡威因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
抑癌基因PTEN对人骨肉瘤MG-63细胞凋亡的影响曹坤;尹宗生;胡勇;王明丽【期刊名称】《安徽医科大学学报》【年(卷),期】2007(042)005【摘要】目的探讨外源性PTEN基因稳定转染对人骨肉瘤MG-63细胞凋亡的影响.方法应用质粒pCMV-Tag3BPTEN和pCMV-Tag3B空载体质粒,以脂质体转染法转染体外培养的人骨肉瘤细胞株MG-63,以未转染组为对照.应用RT-PCR分析目的基因表达,MTT法分析细胞生长增殖,Annexin V-FITC和PI双染流式细胞术检测细胞凋亡,荧光染色法观察细胞形态.结果 pCMV-Tag3B-PTEN转染组有外源目的基因的整合和相应mRNA表达.MTT检测表明,pCMV-Tag3B-PTEN转染组转染组活细胞数低于未转染组和pCMV-Tag3B细胞转染组.流式细胞术显示pCMV-Tag3BPTEN转染组凋亡率高于未转染组和pCMV-Tag3B细胞转染组.荧光染色观察到pCMV-Tag3B转染组部分细胞呈现典型的凋亡细胞形态.结论外源性PrEN基因稳定转染可诱导人骨肉瘤细胞凋亡.【总页数】4页(P516-519)【作者】曹坤;尹宗生;胡勇;王明丽【作者单位】安徽医科大学第一附属医院骨二科,合肥,230022;安徽医科大学第一附属医院骨二科,合肥,230022;安徽医科大学第一附属医院骨二科,合肥,230022;安徽医科大学微生物教研室,合肥,230032【正文语种】中文【中图分类】R738.1;R394.2;R349.12【相关文献】1.Ⅱ型谷氨酰胺转氨酶对缺氧骨肉瘤MG-63细胞凋亡的影响 [J], 马薇;张书勤;魏柏;丰小敏2.牛蒡子苷元对人骨肉瘤MG-63细胞增殖及细胞凋亡的影响 [J], 顾启滨;邓立明;钟诚3.JAK2/STAT3信号对二氢杨梅素诱导骨肉瘤MG-63细胞凋亡及其迁移的影响[J], 吴倩;江波4.虫草素对人骨肉瘤MG-63细胞凋亡的影响及其机制研究 [J], 梅红军;刘洋5.JAK2/STAT3信号对二氢杨梅素诱导骨肉瘤MG-63细胞凋亡及其迁移的影响[J], 吴倩;江波;因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
缺氧条件下骨肉瘤MG-63细胞中TG2通过线粒体途径调节细胞凋亡的机制蔡文涛;夏虹;陈安民【期刊名称】《肿瘤防治研究》【年(卷),期】2015(0)2【摘要】目的探讨缺氧条件下TG2在骨肉瘤MG-63细胞凋亡中的作用以及TG2通过阻止细胞色素C的释放和调节Caspase-3的表达及活性抑制细胞凋亡的机制。
方法建立骨肉瘤细胞体外缺氧培养模型,设立四组:(1)常氧组;(2)单纯缺氧组;(3)对照si RNA缺氧组;(4)TG2 si RNA缺氧组。
观察各组在缺氧培养不同时相(6、12、24、48、72 h)骨肉瘤MG-63细胞TG2、Caspase-3表达、胞核和胞质细胞色素C的变化以及细胞凋亡率。
结果与常氧组比较,单纯缺氧组及对照si RNA缺氧组的TG2活性、m RNA及蛋白表达水平明显增强(P<0.01),且随缺氧时间延长明显升高;Caspase-3活性未见明显增加,而Caspase-3及细胞质内细胞色素C蛋白的表达水平和细胞凋亡率轻度增加。
与前三组比较,在TG2 si RNA缺氧组,当通过转染TG2 si RNA抑制TG2的表达时,Caspase-3的活性及胞质内细胞色素C蛋白表达水平明显增强(P<0.01);细胞凋亡率也显著增加(P<0.01)。
结论缺氧条件下,MG-63骨肉瘤细胞TG2表达增强,并且可以阻止细胞核内细胞色素C向胞质释放,从而降低Caspase-3的表达及活性,抑制肿瘤细胞的凋亡。
【总页数】6页(P130-135)【关键词】骨肉瘤;Ⅱ型谷氨酰胺转氨酶;细胞色素C;Caspase-3;细胞凋亡【作者】蔡文涛;夏虹;陈安民【作者单位】海南省人民医院骨科二区;南方医科大学研究生院;广州军区广州总医院骨科医院;华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科【正文语种】中文【中图分类】R738.1【相关文献】1.TG2对缺氧条件下骨肉瘤MG-63细胞凋亡的影响 [J], 王建新2.Ⅱ型谷氨酰胺转氨酶对缺氧骨肉瘤MG-63细胞凋亡的影响 [J], 马薇;张书勤;魏柏;丰小敏3.TG2在缺氧条件下骨肉瘤MG-63细胞凋亡中的作用及可能机制 [J], 蔡文涛;林明侠;夏虹;陈安民;陈丽娟4.miR-495在骨肉瘤细胞中表达变化、对MG-63细胞增殖的影响及其机制 [J], 王美凤;邢国英;宫锦蕾;孙英华;夏海;王复超;张兆卿5.利多卡因对骨肉瘤细胞MG-63恶性增殖、侵袭及线粒体呼吸作用的调节 [J], 陈益;曹华;蔡玲芳;陈本;陈明坤因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。