透明质酸(HA)测定试剂盒(化学发光免疫分析法)产品技术要求beifang

透明质酸测定试剂盒（上转发光法）
适用范围：用于体外定量测定人血清或血浆中透明质酸(HA)的含量。

1.1 包装规格：40人份/盒。

1.2 主要组成成分：
2.1 外观
液体组分应澄清透明、无沉淀或絮状物，铝箔袋应无破损漏气现象。

2.2 准确度
检测透明质酸（HA）纯品，其回收率应在(85%～115%)范围内。

2.3 线性
[5,1000]ng/mL范围内，相关系数（r）应不低于0.9900。

2.4 精密度
2.4.1 批内变异系数（CV）应不高于15.0%。

2.4.2 批间变异系数（CV）应不高于15.0%。

2.5 空白限
空白限应不大于5ng/mL。

2.6 特异性
与人血清白蛋白（HSA）、胆红素无显著交叉反应。

表1 与其它物质的交叉反应数据
2.7 溯源性
根据GB/T21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》及有关规定提供校准信息的来源、赋值过程以及测量不确定度等内容，校准信息溯源至企业内部工作校准品，并与已上市产品比对赋值。

2.8 稳定性
本产品有效期18个月，取到效期产品在2个月内进行检测，测定结果应符合上述2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6项要求。

1性能指标
1.1外观
外观应符合如下要求：
a)磁珠包被物R1摇匀后应为棕褐色悬浊液；静止久后，棕褐色磁珠沉降于底部，上清液应为无色液体；酶标记物R2应为无色液体，无沉淀或絮状物；校准品和质控品应为外观均匀，成形完整，呈乳白色的冻干品，复溶后较清亮，无浑浊及沉淀；
b)试剂盒各组分应齐全、完整，液体无渗漏；
c)中文包装标签清晰，无磨损。

1.2准确度
将具有溯源性的两个浓度准确度参考品进行检测，检测结果与标定浓度的相对偏差在±10%范围内。

1.3空白限
不大于 5.0ng/mL。

1.4线性
在（20.0-2000.0）ng/ml 浓度范围内，线性相关性系数（r）绝对值应大于0.9900。

1.5重复性
变异系数CV≤8%。

1.6批间差
变异系数CV≤10%。

1.7校准品
1.7.1校准品准确度
测定校准品，C1，C2 测定结果的相对偏差在±10%范围内。

1.7.2校准品瓶内均一性
校准品C1，C2 瓶内均一性≤8%。

1.7.3校准品瓶间均一性
校准品C1，C2 瓶间均一性≤5%。

1.8质控品
1.8.1瓶内均一性
变异系数CV≤8.0%。

1.8.2瓶间均一性
变异系数CV≤5.0%。

1.8.3靶值及靶值范围
每批质控品均应提供本批产品的靶值单，并应提供赋值方法程序文件。

质控品的测试值应在靶值范围内。

透明质酸（HA）测定试剂盒（化学发光免疫分析法）
适用范围：用于体外定量测定人血清中透明质酸的含量。

1.1 本试剂盒由8种组分、封板膜、自封袋和说明书组合而成，由硬纸板包装盒进行包装。

8种组分中除HA包被板组分为真空包装的微孔板外，其他7种组分均为塑料瓶包装的液体组分。

试剂盒包装规格为96人份/盒，具体组成见表1：
表1试剂盒主要组成成分
2.1物理性能
液体组分应澄清，无沉淀或絮状物；所有组分应无包装破损。

各组分装量不少于表1中要求。

2.2准确性
回收率应在90.0～110.0%范围内。

2.3线性
用Log-Logit（四参数logistic、样条曲线）数学模型拟合，在20～1000ng/ml 范围内，剂量-反应曲线相关系数（r）的绝对值应不低于0.9900。

2.4精密度
2.4.1批内精密度（CV%）应不高于15%。

2.4.2批间精密度（CV%）应不高于20%。

2.5最低检测限
应不大于10ng/ml。

2.6质控血清测定值
每次检测结果均应在允许范围内。

2.7特异性
检测浓度为2000ng/ml的LN结果不大于20ng/ml；
检测浓度为2000ng/ml的CIV结果不大于20ng/ml；
检测浓度为2000ng/ml的PIIINP结果不大于20ng/ml。

2.8稳定性
试剂盒在2～8℃保存12个月，测定结果应符合上述2.1、2.2、2.3、2.4.1、2.5要求。

透明质酸检验操作规程透明质酸（hyaluronic acid，简称HA）检验操作规程一、实验目的：通过透明质酸检验，了解样品中透明质酸的含量，判断其质量和纯度。

二、实验原理：透明质酸是一种由N-乙酰-D-葡萄糖胺和D-葡萄糖醛酸通过β-1,3-和β-1,4-糖苷键连接而成的聚糖。

其含量的测定一般采用比色法或溶胀法。

三、实验材料：1. 透明质酸标准溶液2. 待测样品3. 0.1mol/L盐酸溶液4. 稀释剂5. 甲醇6. 氢氧化钠溶液7. 硫酸8. 硫酸铵四、实验步骤：1. 准备工作：（1）将透明质酸标准溶液稀释至一定浓度，制备浓度梯度。

（2）准备待测样品，确保其干燥和无杂质。

2. 比色法测定透明质酸含量：（1）取透明质酸标准溶液的一定体积，加入试管中。

（2）加入足够的稀释剂将溶液稀释至合适浓度。

（3）加入甲醇溶液溶解样品，使其溶解均匀。

（4）加入适量的氢氧化钠溶液，使溶液呈现碱性。

（5）加入硫酸铵溶液，使溶液呈现酸性。

（6）酸性溶液与盐酸溶液反应生成甲胺。

（7）甲胺与硫酸反应生成氮气。

（8）利用氮气生成的浑浊度与透明质酸含量成正比关系，通过比色计测定溶液的浑浊度。

（9）将待测样品按照相同的步骤进行测定。

（10）根据透明质酸标准曲线，计算出待测样品中透明质酸的含量。

3. 溶胀法测定透明质酸含量：（1）取一定量的待测样品，加入容量瓶中。

（2）加入足够的溶胀剂溶解样品，使其溶解均匀。

（3）将容量瓶体积定至一定体积，充分摇匀。

（4）取一定体积的溶液进行取样。

（5）通过比重计或其他方法测定样品的溶液密度。

（6）将样品的溶液密度与标准溶液的溶液密度进行比较，根据比例关系计算出透明质酸的含量。

五、实验注意事项：1. 实验过程应严格按照操作规程进行，避免误差的产生。

2. 透明质酸标准溶液的稀释要根据实验需求进而进行，避免过高或过低的浓度对实验结果的影响。

3. 样品的制备要求干燥和纯净，避免水分和杂质的干扰。

4. 比色法和溶胀法的选择要根据实验要求进行，确保结果的准确性。

血清透明质酸测定试剂盒(化学发光法)
2.性能指标
2.1外观
试剂盒各组分应齐全、完整，液体无渗漏；
中文包装标签应清晰，无磨损；
磁珠试剂组分为含棕色固体微粒的液体，磁珠无板结，液体无絮状物，无异物；
其他试剂组分应为清澈均匀的液体，无沉淀，无絮状物。

2.2最低检测限
不大于2.0ng/mL。

2.3准确度
用浓度为100.0ng/mL（±20%）、500.0ng/mL（±20%）和1000.0ng/mL（±20%）的企业准确度参考品进行测定，其测量结果的相对偏差应在±10.0%范围内。

2.4重复性
用浓度分别为100.0ng/mL（±20%）、500.0ng/mL（±20%）的重复性参考品进行测定，各测定10次，其变异系数（CV）应不大于10.0%。

2.5批间差
使用3个批号试剂分别测定浓度为100.0ng/mL（±20%）、500.0ng/mL（±20%）的重复性参考品，3个批号试剂之间的批间变异系数（CV）应不大于15.0%。

2.6线性
用线性参考品进行测定，在2.0ng/mL~2000.0ng/mL范围内，相关系数r≥0.9900。

2.7特异性
当层粘连蛋白浓度=1000ng/mL时，透明质酸浓度<10.0ng/mL。

1。

透明质酸（HA）测定试剂盒（电化学发光免疫分析法）适用范围：本试剂盒用于体外定量测定人体血清样本中透明质酸（HA）的含量。

1.1包装规格： 50人份/盒、100人份/盒。

1.2主要组成成分试剂盒由磁分离试剂（M）、试剂a（Ra）、试剂b（Rb）和定标品（HA-Cal）（选配）组成。

组成及含量见下表：注：1、定标品靶值批特异，详见靶值单。

2、试剂盒条码卡内含主校准曲线。

2.1 外观2.1.1 试剂盒各组分应齐全、完整、液体无渗漏；2.1.2 磁分离试剂摇匀后应为棕色含固体微粒的均匀悬浊液，无明显凝集、无絮状物；2.1.3 其它液体组分应澄清，无异物，沉淀物或絮状物；2.1.4 包装标签应清晰、无磨损、易识别。

2.2 空白限应不大于10.0ng/mL。

2.3 准确度将已知浓度的HA标准溶液加入到血清中，其回收率应在(85%～115%)范围内。

2.4 线性在[20.0，1000.0] ng/mL范围内，线性相关系数（r）应不小于0.9900。

2.5 精密度2.5.1 分析内精密度在试剂盒的线性范围内，浓度为（100.0±20.0ng/mL）和（300.0±60.0ng/mL）的样品检测结果的变异系数（CV）应不大于8%。

2.5.2 批间精密度在试剂盒的线性范围内，用3个批号试剂盒分别检测浓度为（100.0±20.0ng/mL）和（300.0±60.0ng/mL）的样品，检测结果的变异系数（CV）应不大于15%。

2.6 效期末稳定性本产品效期为15个月，试剂盒在2～8℃下保存至有效期末进行检测，检测结果应符合2.1、2.2、2.3、2.4、2.5.1的要求。

2.7 特异性试剂盒与表1中有关潜在交叉反应物应无显著的交叉反应表1 交叉反应2.8 溯源性依据GB/T 21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》的要求提供透明质酸（HA）定标品的来源、赋值过程以及测量不确定度等内容，定标品溯源到企业工作校准品。

透明质酸ELISA试剂盒产品编号：SEKH-0509该试剂盒用于定量检测血清、血浆或细胞上清等样本中Hyaluronan的浓度仅供研究，不用于临床诊断订购热线:400-968-6088﹡技术支持邮箱:公司官网:目录背景介绍 (1)检测原理 (1)检测原理图 (2)注意事项 (2)技术要点 (3)试剂盒组成及储存 (4)自备实验器材（不提供，可代购） (4)样本收集及储存 (5)试剂准备 (6)检测步骤 (8)操作流程图 (10)结果计算 (11)典型数据 (11)常见问题及解决方法 (14)相关产品 (15)发表优秀文献 (15)透明质酸，又称透明质酸(HA)或透明质酸钠，是一种天然存在的线性聚合物。

透明质酸是一种糖胺聚糖(GAG)，广泛存在于所有脊椎动物的细胞外基质中，也存在于链球菌的某些菌株的囊中。

哺乳动物透明质酸是由三种不同的透明质酸合成酶(HAS1、2和3)之一合成的，它们产生不同链长和不同合成速率的HA聚合物。

高分子量HA(>；500kDa)具有抗血管生成、抗炎和免疫抑制作用，低分子量HA(10-500kDa)具有高血管生成和促炎作用。

HA寡聚体具有抗凋亡和上调热休克蛋白表达的作用。

在功能上，透明质酸分子对于维持组织中高度水化的细胞外基质很重要，它参与细胞粘附，支持细胞迁移。

检测原理Solarbio（Solarbio®）ELISA试剂盒采用基于双抗体夹心法的酶联免疫吸附检测技术。

将抗Hyaluronan单克隆抗体包被在酶标板上；分别加入梯度稀释的标准品和预稀释的样本，标准品和样本中的Hyaluronan 会与酶标板上的包被抗体充分结合；洗板后加入生物素化抗Hyaluronan 抗体，该抗体会与板子上包被抗体捕获的标准品和样本中的Hyaluronan 发生特异性结合；洗板后加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的链霉亲和素，生物素与链霉亲和素会发生高强度的非共价结合；洗板后加入显色剂底物TMB，若反应孔中样品存在不同浓度的Hyaluronan，则HRP会使无色TMB变成不同深浅（正相关）的蓝色物质，加入终止液后反应孔会变成黄色；最后，在λmax=450nm（OD=450nm）处测定反应孔样品吸光度（OD），样本中的Hyaluronan浓度与OD成正比，通过绘制标准曲线和四参数拟合软件便可计算出样本中Hyaluronan的浓度。

大鼠透明质酸(HA)酶联免疫分析ELISA试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用—北京奇松生物科技有限公司产品编号：QS42052预期应用ELISA法定量测定大鼠血清、血浆以及蛋清和蛋黄中透明质酸（HA）含量。

实验原理本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中透明质酸水平。

用纯化的透明质酸结合蛋白(HABP)包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入透明质酸、生物素化的抗大鼠透明质酸结合蛋白（HABP）、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。

TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的透明质酸呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

试剂盒组成及试剂配制1.酶联板：一块（96孔）标准品（冻干品）：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为100 nmol/L，做系列倍比稀释后，分别稀释成100 nmol/L，50 nmol/L ，25 nmol/L，12.5 nmol/L，6.25 nmol/L，3.12 nmol/L，1.56 nmol/L，其原液直接作为最高标准浓度，样品稀释液直接作为标准浓度0 nmol/L，临用前15分钟内配制。

如配制50 nmol/L标准品：取0.5ml 100 nmol/L的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。

2.样品稀释液：1×20ml/瓶。

3.检测稀释液A：1×10ml/瓶。

4.检测稀释液B：1×10ml/瓶。

5.检测溶液A：1×120ul/瓶（1：100）临用前以检测稀释液A1：100稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（每孔100ul），实际配制时应多配制0.1-0.2ml。

如1ul 检测溶液A加99ul检测稀释液A的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。

透明质酸测定试剂盒（化学发光免疫分析法）
适用范围：本试剂盒用于体外定量测定人血清中透明质酸（HA）的含量。

1.1包装规格：96人份/盒
1.2主要组成成分
表1 产品的主要组分
注：校准品和质控品具有批特异性，具体浓度见瓶签。

2.1外观
2.1.1试剂（盒）各组份应齐全、完整，液体应为透明溶液，无渗漏，无混浊，无未溶解物；
2.1.2包装标签应清晰，无磨损。

2.2 准确度
回收率应在85%~115%范围内。

2.3空白限
试剂盒的空白限不大于93 μg/L。

2.4 线性
在[186，3730]μg/L线性范围内，试剂盒的相关系数r应不低于0.990。

2.5 重复性
批内变异系数（CV）应不大于15.0%。

2.6 批间差
批间变异系数（CV）应不大于20.0%。

2.7 稳定性
2℃～8℃保存，有效期12个月。

取失效期的试剂盒检测其准确度、空白限、线性和重复性，应符合2.2-2.5的要求。

2.8 校准品溯源性
应根据GB/T 21415—2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》及有关规定，提供所用企业产品校准品来源、赋值过程以及测量不确定度等内容，校准品溯源至企业工作校准品，工作校准品与已上市产品比对赋值。

人血清透明质酸（HA）竞争ELISA定量检测说明书1.试剂：透明质酸酶免诊断试剂盒（4℃保存3~6月质量稳定）① HA包被板8孔×12② HA标准品：HA standard 3200ng/ml 1管③标准品稀释液：Standard diluents 1瓶④ HA酶结合物：HA Enzyme tracer 1.1 ml 1管⑤洗涤缓冲液：（10ml），用蒸馏水20倍稀释1瓶⑥ p-NPP：（少量白色粉末，需闭光保存）1管⑦ HA底物缓冲液：使用前将1管p-NPP加至1瓶底物缓冲液中混匀备用。

剩余者于-20℃保存，下次室温溶解后直接使用。

1瓶2.操作程序：步骤内容操作步骤条件、时间★（试剂配制）按试剂组成说明操作标准曲线H1~A1加【标准品稀释液】 100µl，取【HA 标准品】100µl 自H1→B1依次倍比稀释。

A1为空白孔。

①加样待测血清100µl 待测血清加10 µ lHA酶结合物充分混匀！37℃，60min（洗板） PBS（每孔加400µl，摔干）5次②（HA底物）配制好的底物缓冲液110µl（或2滴）37℃，15～30min左右3.结果判断：酶标仪A405nm测定。

酶标仪定量（设立程序）或电脑软件定量。

4.正常参考值：（<110 ng/ml）青年：47.6±22ng/ml；中年：76.1±51.8ng/ml；老年：108.5±74.6ng/ml人血清三型前胶原蛋白（PcIII）ELISA定量检测说明书1.试剂：PcIII酶免诊断试剂盒组成（按相应条件保存）① PcIII包被板（需-20℃保存！），使用前洗涤2次。

8孔×12② PcIII标准品：PcIII standard (2000ng/ml，长期保存在-20℃) 。

1管③标准品稀释液：Standard diluents1瓶④ PcIII酶结合物：PcIII Enzyme tracer (1.1 m l，长期保存在-20℃) 1管⑤洗涤缓冲液：（10ml），用蒸馏水20倍稀释1瓶⑥显色液A / 显色液B（6 ml）各1瓶⑦终止液1瓶3.结果判断：酶标仪A450nm测定。