Biotek和Thermo滤光片型酶标仪对比分析
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酶标仪选购的几个关键参数酶标仪作为一个常用的仪器,其基本功能不外乎一个比色测定,与比色计所不同的是在测定波长范围、吸光度范围、光学系统、检测速度、震板功能、温度控制、定性和定量测定软件功能等方面的差异,当然全自动酶免疫分析系统还具有自动洗板、温育、加样等功能。
我们在选购酶标仪时应该考虑如下几个关键参数:滤光系统酶标仪最简单的是用滤光方式来划分。
一般来说,可以分为滤光片型和光栅型两大类。
也有一些酶标仪里面同时装上了滤光片和光栅。
但是滤片和光栅并不能同时完成同一个检测,本质上还只是把滤片和光栅放在了一起,并没有使两者糅合而产生新的技术突破。
光栅型滤光系统具有使用方便,可以进行光谱扫描,灵活性等优点。
当然,滤光片系统也有其显著的优势,例如价格较为便宜,检测灵敏度高,带宽的可选择性,可以进行快速的滤光片切换,可配备有自动加样系统,在化学发光检测中光线的透过率高。
目前,滤光片系统应用更广,因为它可以让实验者完成更多的试验。
测定波长一般酶标仪的测定波长在400~750nm或800nm之间,完全可以满足ELISA的显色测定。
目前国内常见的ELISA试剂盒所使用的标记用酶均为辣根过氧化物酶(HRP),底物通常为四甲基联苯胺(TMB)和邻苯二胺(OPD),其在过氧化氢溶液的存在下,经HRP作用,分别氧化为2,2,—二氨基偶氮苯(DAB)和联苯醌。
当pH值为5.0左右时,DAB在450nm波长处有最大吸收,当pH值降为L 0时,最大吸收波长移至492 nm,同时摩尔消光系数变大,显色加深,因而常用强酸如硫酸或盐酸终止反应。
TMB的氧化产物联苯醌在波长450nm处有最大消光系数,如果HRP量少,H:O:和TMB过量时,则形成蓝色的阳离子根。
降低pH,即可使蓝色的阳离子根转变为黄色的联苯醌,使用硫酸作为终止剂可使产物稳定90min。
因此,450nm和492 nm 两个波长是目前ELISA测定最常用的。
各种酶标仪都配有放置滤光片的可自动转换的部件,可以同时安装6~8片滤光片,所配备的滤光片均应包括上述两个波长,有的酶标仪以490nm滤光片替代492nm滤光片,影响不大。
血糖仪自1968年由汤姆•克莱曼斯发明至今,经历了不同的技术发展阶段,出现了采血便携血糖仪,动态血糖仪,表式血糖仪等等不同原理的血糖仪,现在我们的糖尿病患者大部分购买的都是便携式血糖仪。
那么,究竟如何根据自己的需要来选购血糖仪呢?血糖仪的发展阶段有“五个阶段”的说法,但血糖仪从工作原理上有两种分别,一种是光电型,一种是电极型。
光电血糖仪有一个光电头,但探测头暴露在空气里,很容易受到污染,影响测试结果,使用寿命比较短,一般在两年之内是比较准确的,两年后需要定期做校准;电极型的测试原理比较科学,电极口内藏,可以避免污染,并且测试的精读比较高,正常使用的情况下,不需要校准,寿命长。
现在多数血糖仪都是破损型的,就是需要采血来测定血糖值,虽然现在有无破损的表式血糖仪问世,但价格非常昂贵,维护方面的费用也相当惊人,所以绝大部分的患者不会做此考虑。
采血型的便携式血糖仪从采血方式上有两种,一种是滴血式(也叫抹血式),一种是吸血试。
滴血式的血糖仪一般采血量比较大,疼痛感很强,患者比较痛苦。
这一类型的血糖仪采血量要掌握好,如果采血偏多,会影响测试结果,如果采血量不够,操作失败则会浪费试纸,这种血糖仪多为光电式的。
目前市场上销售最多的就是强生的稳步倍加型和罗氏乐康全系列血糖仪。
吸血式的血糖仪,试纸自己会控制血量,不会因为血量的问题出现偏差,操作方便,用试纸采血的部位轻触血滴的液面即可。
目前市场上销售得比较多的是:强生稳豪、随手测,罗氏优越,京都1640,怡成JPS5型和雅培的血糖仪(包括利舒坦)。
血糖仪的技术目前已经不是什么秘密了,所以目前市场上的血糖仪犹如雨后春笋般冒出来很多,特别是台湾生产的一些血糖仪,更是数不胜数,所有的血糖仪品牌加起来都有二三十个,强生、罗氏、京都、雅培、怡成、三诺、会好、瑞特、唐博士、贝朗、拜耳、脉道、施家乐、台欣、安蜜、金鹊、五鼎、聿新、艾康、厚美德、康培、泰德、威望、Hypoguard和BD血糖监测仪等等。
•浅谈多功能酶标仪选择的要素•近年来,随着多功能酶标仪在国内各高校实验室逐渐推广开来,多功能酶标仪品牌和型号也逐渐多了起来,乱花渐欲迷人眼。
除了三大传统优势品牌PE、MD和TECAN,还出现了众多后来者插足此市场,如收购了芬兰雷勃的Thermo、从发光起家的Berthold、针对药筛领域的BMG以及新兴的BioTek等品牌.各品牌都有各自的一个甚至多个系列产品线,特性各不相同,选购时各种技术参数、技术指标令人眼花缭乱本文尝试从用户实际使用的角度,探讨应该如何看待花样繁多的参数特性,希望能帮助大家找到真正合适自己的多功能酶标仪。
一、滤片Vs光栅多功能酶标仪的分类方法众多,但最简单的莫过于用他们的滤光方式来作分界线。
一般来说,可以分为滤光片型和光栅型两大类。
当然也有一些型号,例如Synergy4和EnVision 等,一台机器里面同时装上了滤光片和光栅。
但是滤片和光栅并不能同时完成同一个检测,还是想用光栅的时候用光栅,该用滤片的时候用滤片;还有一些实验非用其中一个不可,另一模块实现不了的.所以这类仪器本质上还只是把滤片和光栅放在了一起,并没有使两者糅合而产生新的技术突破。
总体来说,滤片技术由于发展已久,配合二向色镜(其实也就是另一模式的滤光反光滤镜)等光路系统,可以实现大部分实验的需要.目前常规多功能酶标仪中最高的检测灵敏度就是用滤光片型做出来的,例如TECAN Infinite F500的荧光检测的灵敏度可以达到0。
04 fmol/孔(荧光素,384孔/80ul)。
但是滤光片型仪器由于受限于滤片的波长和数量限制,不可能满足日益增加的实验类型的检测需要,而且有时需要对物质的吸收、激发和发射光谱进行研究,所以后来就诞生了光栅型的仪器。
最先推出光栅的是MD公司,其光栅习惯上称为单光栅.由于光纯度的不足,在光栅的后面又加入了一组带阻滤片,再把杂光过滤一遍,达到了5×10-4的杂光率,基本与纯粹的滤光片系统一致。
酶标仪哪个品牌好酶标仪(Microplate Reader)是常用的生物实验设备,主要用于检测和分析微量物质的含量和质量,例如蛋白质、核酸等。
在选择酶标仪时,品牌是一个重要的考虑因素。
以下是常见的酶标仪品牌及其特点:•BioTek:BioTek是一家领先的生物科技公司,其酶标仪以数据准确性、可靠性和速度著称。
BioTek的Infinite 200 PRO系列酶标仪具有高灵敏度、高吞吐量、系统可扩展等特点,广泛应用于蛋白质组学、细胞分析和基因表达分析等领域。
•Thermo Fisher Scientific:Thermo Fisher Scientific 是一家全球领先的生命科学公司,其酶标仪产品线包括VersaMax ELISA Microplate Reader和Multiskan GO Microplate Reader等系列。
这些酶标仪具有高灵敏度、宽线性范围、用户友好性等特点,适用于临床研究、生命科学等领域。
•Tecan:Tecan是一家专注于实验室自动化和检测设备的公司,其酶标仪产品线涵盖Spark系列和Infinite系列。
这些酶标仪具有高速度、灵敏度和自动化等特点,广泛应用于医学检测、环境监测和农业领域等。
从品牌方面考虑,我们可以结合实验需求和经费预算,选择合适的酶标仪品牌。
同时,我们还需要注意一些操作和保养规程,以确保酶标仪的安全使用和维护。
安全操作规程酶标仪是一种精密的仪器,需要严格的操作维护。
以下是酶标仪安全操作规程:1. 工作场所准备在操作酶标仪前,应该确保工作场所整洁、干净,以及符合安全性、卫生性要求。
此外,还需要确保仪器周围没有易燃和易爆物品,确保实验区间距合适,并保持良好的通风。
2. 基本操作技能使用酶标仪前,应该熟悉酶标仪的基本操作步骤和技能。
例如样品适量、配制标准曲线、设置吸光度值、存储作图等。
此外,还应该学会正确连接和使用样品板,确保选择正确的滤波器和读取光线。
近年来,随着多功能酶标仪在国内各高校实验室逐渐推广开来,多功能酶标仪品牌和型号也逐渐多了起来,乱花渐欲迷人眼。
除了三大传统优势品牌PE、MD和TECAN,还出现了众多后来者插足此市场,如收购了芬兰雷勃的Thermo、从发光起家的Berthold、针对药筛领域的BMG以及新兴的BioTek等品牌。
各品牌都有各自的一个甚至多个系列产品线,特性各不相同,选购时各种技术参数、技术指标令人眼花缭乱。
本文尝试从用户实际使用的角度,探讨应该如何看待花样繁多的参数特性,希望能帮助大家找到真正合适自己的多功能酶标仪。
1.滤片Vs光栅多功能酶标仪的分类方法众多,但最简单的莫过于用他们的滤光方式来作分界线。
一般来说,酶标仪可以分为滤光片型和光栅型两大类。
当然也有一些型号,例如Synergy4和EnVision等在一台机器里面同时装上了滤光片和光栅。
但是滤片和光栅并不能同时完成同一个检测,还是想用光栅的时候用光栅,该用滤片的时候用滤片;还有一些实验非用其中一个不可,另一模块实现不了的。
所以这类仪器本质上还只是把滤片和光栅放在了一起,并没有使两者糅合而产生新的技术突破。
总体来说,滤片技术由于发展已久,配合二向色镜(其实也就是另一模式的滤光反光滤镜)等光路系统,可以实现大部分实验的需要。
目前常规多功能酶标仪中最高的检测灵敏度就是用滤光片型做出来的,例如TECAN Infinite F500的荧光检测的灵敏度可以达到0.04 fmol/孔(荧光素,384孔/80ul)。
但是滤光片型仪器由于受限于滤片的波长和数量限制,不可能满足日益增加的实验类型的检测需要,而且有时需要对物质的吸收、激发和发射光谱进行研究,所以后来就诞生了光栅型的仪器。
最先推出光栅的是MD公司,其光栅习惯上称为单光栅。
由于光纯度的不足,在光栅的后面又加入了一组带阻滤片,对杂光进行二次过滤,达到了5×10-4的杂光率,基本与纯粹的滤光片系统一致。
后来TECAN又发展出了双光栅技术,通过两次光栅滤光,杂光率降到了10-6。
酶标仪的分类方式酶标仪是实验室常用的一种仪器,酶标仪的分类方式一般可以按照滤光方式的不同和功能的不同进行划分。
一。
酶标仪基于滤光方式的不同可分为滤光片式的酶标仪和光栅式酶标仪。
滤光片式酶标仪采用滤光片来进行波长的选择,酶标仪内置滤光片轮,可选择试验所需的不同波长的滤光片来进行分光,光源发出的全波谱光经过滤光片后,大部分被过滤,只剩下滤光片本身允许的波长通过,这样就可就通过滤光片来获得特定的波长。
滤光片轮一般包含4-6 块滤光片,通过选择不同的滤光片可获得不同的波长,但是获得的波长都是固定的,受到一定的限制,不能获得任意所需的波长,而且更换滤光片价格比较昂贵。
一般波长固定的滤光片有405,450,490,630NM。
光栅式酶标仪是美国分子仪器公司最先发明使用的(Versamax),虽然才出现短短十年,但是发展非常迅猛,现在已经是主流的酶标仪。
它采用光栅进行分光,光源发出的全波谱光线经过光栅后,通过光栅上面分布的一系列狭缝的分光,就可以获得任意波长的光,波长连续可调,一般递增量为1nm.光栅式酶标仪使用方便灵活,可以通过软件选择任意波长的光,而且可以进行全波长的扫描,通过全波长扫描可以获得未知样品的吸收峰,从而可以达到检测未知样品的目的,在实验室中很受欢迎,可以进行更多实验的检测。
因此目前在国内的普及程度很高。
二。
按照功能的划分,酶标仪可以分为光吸收酶标仪,荧光酶标仪,化学发光酶标仪和多功能的酶标仪。
光吸收酶标仪是用来进行可见光与紫外光吸光度的检测。
特定波长的光通过微孔板中的样品后,光能量被吸收,而被吸收的光能量与样品的浓度呈一定的比例关系,由此可以用来定性和定量的检测。
光吸收的检测技术成熟,成本低,操作简单,但是动态范围窄,灵敏度比较低,。
厂家Thermo Biotek
产品ELx800ELx808MK3ELx808IU Multiskan FC Multiskan Ascent 图片
价格3-4万4-6万 2.5-3万5-6万5-6万3-5万
波长范围(nm)400-750nm400-750nm400-700/340-750nm(紫外可选装)340-900nm340-850nm340-850
带宽(nm)10nm10nm10nm3-9nm(半带宽)3-6nm (半带宽)
读数范围0-3.0 OD0-4 OD0-3.5 OD0-4 OD0-6 OD0 – 6.0Abs
线性范围0-3.0 OD<1%at 2.5 OD405nm,0-2.000Abs±2%<1%at 2.5 OD 405 nm
0-3Abs,96孔板,快速测量模式
0-4Abs,96孔板,标准测量模式
线性(96孔板) 0-4Abs,1/-1%
0-3Abs,1/-1%,340nm及450nm
0-3Abs,1/-1%,连续进板方式
线性(384孔板) 0-3Abs,±1%,
0-2Abs,1/-1%,连续进板方式
准确性0-2.0Abs±1%±0.010<1% at 2.5 OD±1%(0-2.0 OD)<1% at 2.5 OD ±1%(0-3Abs)
±2%(3-4 Abs)(405nm)
±1%或0.003Abs时准确性值更高
±2%(2-3Abs)
可重复性± 0.5% ± 0.005 (0-2.0OD)< 0.5% at 2.5 OD<0.5%(0-1.5 OD)< 0.5% at 2.5 OD CV≤0.2%(0-3 Abs)
CV≤1.0%(3-4 Abs)(405nm)
步进模式:
CV<0.2%(0-3Abs)
CV<1.0%(3-4Abs)
连续模式:
CV<0.2%(0-2Abs)
CV<0.4%(2-3Abs)
标配滤光片(nm)4块:405、450、490、630nm4块:405、450、490、630nm4块:405;450;492;6304块:340、405、450、490、630nm标配3块滤光片:405nm、450nm和
620nm,其他滤光片可选配
4块标准滤光
片,406nm,450nm,492nm,620nm
滤光轮可承载滤光片数568688
读数模式单、双波长单波长/双波长单、双、多波长单波长/双波长
测读分辨率0.001OD0.001OD0.001OD0.001OD0.001Abs0.001Abs
测读模式终点法,动力学法终点法,动力学法,线性扫描法终点法;动力学法;终点法,动力学法,线性扫描法
微孔板类型6- ,12-,24-, 48-, 96- 孔板96孔板96孔板96和384孔板96和384孔板检测通道18+1多通道光纤测量系统8+1
读板时间单波长 30秒(终点法)快速
单波长/双波长:8/13sec/96孔,
动力学检测96孔板 6秒
96孔 :5秒
快速
单波长/双波长:8/13sec/96孔,
动力学检测96孔板 6秒
快速测量模式:6s,96孔板;11s,
384孔板
标准测量模式:12s,96孔板;33s,
384孔板
96 孔板:6 s
384 孔板:14 s
振荡有4速(低、中、高、变速)线性振荡,三种速度可选有4速(低、中、高、变速)线性振荡,三档速度可选线性振荡,三档速度可选
控温孵育无无无温控至50℃,温控均一性±0.5℃
@37℃室温 +4°C 至50°C(选配)孵育器(选配):温控范围:室温+4℃-50
℃
光源卤素灯卤素灯卤素灯卤素灯卤素灯石英卤素灯
用户界面25键触摸按键,仪器自带2×24字
LED显示屏
25键触摸按键,仪器自带2×24字
LED显示屏
30键触摸按键,仪器自带2 × 20 字
液晶显示屏
仪器自带2×24字LED显示屏
高分辨彩色显示屏,分辨率为480×
272像素
高分辨率(480×272)彩色显示屏
Biotek和Thermo滤光片型酶标仪对比
Biotek Thermo
ELx808
4-6万
400-750nm
10nm
0-4 OD
<1%at 2.5 OD
<1% at 2.5 OD
< 0.5% at 2.5 OD
4块:405、450、490、630nm
6
单波长/双波长
0.001OD
终点法,动力学法,线性扫描法
96孔板
8+1
快速
单波长/双波长:8/13sec/96孔, 动力学检测96孔板 6秒
有4速(低、中、高、变速)
卤素灯
仪器自带2×24字LED显示屏。