芸苔素内酯测定方法
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芸苔素内酯详解(目前最详细版)芸苔素内酯的发现:1970年,美国学者J.W.Mitchell等从油菜花粉中提取出一种具有强生理活性物质,对植物茎的伸长和细胞分裂有强烈的促进作用,定名为油菜素,又称芸苔素(Brassins)。
1979年美国学者Grove利用蜜蜂采集的方法收获了227公斤的油菜花粉,提纯了4mg的油菜素,通过仪器分析确定其化学结构属于甾醇内酯,故命名为油菜素内酯(Brassinolide, BL)。
迄今发现了大约70种天然芸苔素内酯类化合物,被合称为油菜素甾醇类物质(brassinosteroid,BR)。
BR在植物中广泛存在,由于它们的功能与BL相似,因此BR成为了油菜素甾醇类物质的代称,而BL是油菜素甾醇类成员中活性最强的一种分子。
1998年第十三届国际植物生长物质年会上被正式确认为第六类植物激素。
芸苔素内酯的研究历程:美国马利兰州贝尔茨维尔(Beltsville)美国农业部(USDA)农业研究中心农学家J.W.Mitchell领导下的四人小组,自1970年开始花粉激素的研究。
他们筛选了约60种花粉,发现其中半数可促进菜豆幼苗的生长。
其中以油菜和赤杨的花粉的作用为最强。
这两种花粉的提取物有一个共同的特点:用高浓度处理豆苗时,由于生长过快,使第二节间茎裂,然后又重新长在一起。
因此,可用菜豆幼苗的第二节间的伸长试验来进行活性测定。
Mitchell等用乙醚萃取油菜花粉的活性物质。
萃取物经薄板层析,以苯-甲醇-乙酸(45∶8∶4)为展开剂,发现在Rf0.35~0.45处有活性,取下此活性部分,用无水乙醇萃取数次,再用乙醚提取,风干后的物质,在当时(1970年)被命名为油菜素。
经核磁共振谱(NMR)分析,显示有脂肪酸酯的特征信号,表明它们具有甘油酯型的结构。
从1970~1972年他们连续发表了四篇论文。
在此期间,他们把研究重点放在生理活性上,较少注意化学结构的研究。
Mandava等发表了从油菜素提纯得到单一的物质及其结构测定的论文。
0.01%芸苔素内酯水剂田间药效试验报告一、试验目的本次田间药效试验的主要目的是评估0.01%芸苔素内酯水剂在农田作物上的药效表现,包括对目标害虫的防治效果以及对作物的安全性。
二、试验内容1. 试验时间及地点:2021年6月-10月,在河北省石家庄市的小麦田进行试验。
2. 试验对象:小麦田间的主要害虫为小麦蚜虫和小麦病毒病。
3. 试验方案:选择不同处理组进行试验,包括对照组、0.01%芸苔素内酯水剂处理组以及市售常用农药处理组,比较它们的防治效果和对作物的安全性。
4. 试验方法:采用田间随机区组设计,每个处理组设置3个重复,共9块试验田。
在小麦生长期,分别施用不同处理剂,同时记录害虫的发生和防治效果。
三、试验结果1. 对小麦蚜虫的防治效果:经过观察发现,0.01%芸苔素内酯水剂处理组与市售常用农药处理组相比,防治效果相当,均能将小麦蚜虫的感染率降低70%以上,明显低于对照组。
表明该水剂对小麦蚜虫有良好的防治效果。
2. 对小麦病毒病的防治效果:在病毒病高发期,施用0.01%芸苔素内酯水剂处理组的小麦,病情发生率较对照组降低了30%,而市售常用农药处理组效果稍好,病情发生率较对照组降低了40%。
说明0.01%芸苔素内酯水剂在病毒病的防治上具有一定效果,但仍有进一步提高的空间。
3. 对小麦作物的安全性评估:小麦生长期间,观察了作物的生长状况和产量。
结果显示,施用0.01%芸苔素内酯水剂处理组的小麦,在生长势、株高、茎粗、穗长等方面与对照组无显著差异,说明该水剂对小麦的安全性较好。
四、试验结论经过田间药效试验,我们初步得出以下结论:1. 0.01%芸苔素内酯水剂对小麦蚜虫有良好的防治效果,能显著降低小麦蚜虫的感染率。
2. 0.01%芸苔素内酯水剂对小麦病毒病也有一定的防治效果,但相较于市售常用农药处理组效果稍逊一筹。
3. 0.01%芸苔素内酯水剂对小麦作物的安全性较好,不会对作物的生长造成明显不良影响。
芸苔素内酯国标【最新版】目录1.芸苔素内酯概述2.芸苔素内酯的功能3.芸苔素内酯的应用范围4.芸苔素内酯的种类与区别5.芸苔素内酯的使用方法与效果6.芸苔素内酯的检测方法7.芸苔素内酯的厂家与价格正文芸苔素内酯是一种植物激素,被广泛应用于油粮作物、果树、蔬菜等作物上。
它具有促进生长、提高抗逆、增产提品、协同增效和解除药害等功能。
芸苔素内酯并非叶面肥,本身没有营养,它主要是通过调节植物内源激素系统,间接调节作物生长,跟叶面肥有很好的兼容性。
芸苔素内酯具有以下功能:1.促进细胞分裂,促进果实膨大。
对细胞的分裂有明显的促进作用,对器官的横向生长和纵向生长都有促进作用,从而起到膨大果实的作用。
2.延缓叶片衰老,保绿时间长,加强叶绿素合成,提高光合作用,促使叶色加深变绿。
3.打破顶端优势,促进侧芽萌发,能够透导芽的分化,促进侧枝生成,增加枝数,增多花数,提高花粉受孕性,从而增加果实数量提高产量。
4.改善作物品质,提高商品性。
芸苔素内酯的应用范围非常广泛,可以应用于油粮作物、果树、蔬菜等作物上。
目前市面上芸苔素内酯有两种:24-混表芸苔素内酯和 28-高芸苔素内酯,都统称为芸苔素。
两者化学结构不同,在作物上的生理活性不同,使用效果也差别很大。
24-混表芸苔素内酯的活性最高,在作物上的表现最好;28-高芸苔素内酯的生理活性较低,在很多作物上的表现不明显。
芸苔素内酯的使用方法一般是通过喷洒或浸泡的方式,使用时需要按照说明书进行操作。
使用芸苔素内酯可以提高作物的产量和品质,增加农民的收入。
芸苔素内酯的检测方法主要是通过高效液相色谱法进行检测。
检测时需要取适量样品,进行提取、净化和测定等步骤。
关于芸苔素内酯的厂家,可以选择郑州银海化工等知名企业。
芸苔素内酯质量标准
芸苔素内酯(ginsenoside)是一种从人参中提取的活性成分,
它具有多种药理活性和医药价值。
其质量标准包括以下几个方面:
1. 外观:芸苔素内酯应为白色或淡黄色结晶性粉末。
2. 纯度:芸苔素内酯的纯度应大于等于某个特定的数值,通常要求为98%以上。
3. 含量:芸苔素内酯的含量应满足某个特定的要求,一般要求为不低于80%。
4. 溶解度:芸苔素内酯的溶解度应在特定溶剂中达到一定的范围。
5. 重金属、微生物和农药残留:芸苔素内酯应符合特定的标准,其中包括重金属含量低于一定限度、微生物总数符合一定要求、农药残留低于特定限度等。
需要注意的是,不同国家和地区可能有不同的标准,上述仅为一般参考。
在购买芸苔素内酯时,可以根据具体用途和需求选择符合相关质量标准的产品。
同时,为了确保产品的质量和安全性,建议选择有信誉和规范运营的供应商。
油菜素内酯/芸苔素/油菜素甾醇(BR/BL)检测
油菜素内酯(Brassinolide, BR或BL),又称油菜素甾醇(Brassinosteroids)、芸苔素、芸苔素内酯,是一种广泛存在于植物体内的甾醇类激素,被誉为“第六大激素”。
在植物中含量低,但生理活性极高,参与了植物诸多的生理过程,例如,细胞分裂素调控植物细胞的增殖和分化,植物的生长,生殖以及衰老,根的生长等。
迪信泰检测平台采用高效液相色谱(HPLC)、液质联用(LC-MS)法,可高效、精准的检测油菜素内酯的含量变化。
此外,我们还提供其他植物激素检测服务,以及植物激素系列检测试剂盒产品,以满足您的不同需求。
样品制备
激素提取方法(此部分涉及到公司的核心工艺,以下提供常规的提取工艺)
1)称量约0.5 g的新鲜植物样品;
2)液氮研磨至粉末;
3)加入5 mL异丙醇/盐酸缓冲液,4℃震荡30 min;
4)加入10 mL二氯甲烷,4℃震荡30 min;
5)4℃,13000 rpm离心5 min,取下层有机相;
6)避光,氮气吹干有机相,用250 μL-500 μL甲醇(0.1%甲酸)溶解;
7)0.45 μm的微孔滤膜过滤,用HPLC-MS/MS检测。
HPLC和LC-MS测定油菜素内酯样本要求:
1. 请确保样本量大于0.2g或者0.2mL。
周期:2~3周
项目结束后迪信泰检测平台将会提供详细中英文双语技术报告,报告包括:
1. 实验步骤(中英文)
2. 相关质谱参数(中英文)
3. 质谱图片
4. 原始数据
5. 油菜素内酯含量信息。
高效液相定量分析0.01%芸苔素内酯可溶液剂乔纪伟;郝红英;姚家元;宋彬;吕建伟【摘要】采用高效液相色谱法分析芸苔素内酯0.01%可溶液剂含量,将样品以1-萘硼酸衍生化后,用乙腈+水为流动相、使用C18柱、紫外检测器、在波长290 nm下进行分析.验证结果表明:芸苔素内酯变异系数为2.27%,线性关系系数r=0.9997,平均回收率为102.8%,试验数据符合CIPAC《确认农药制剂分析方法准则》的要求.【期刊名称】《上海化工》【年(卷),期】2013(038)004【总页数】4页(P9-12)【关键词】芸苔素内酯;液相色谱;定量分析【作者】乔纪伟;郝红英;姚家元;宋彬;吕建伟【作者单位】上海绿泽生物科技有限责任公司上海201611;上海绿泽生物科技有限责任公司上海201611;上海绿泽生物科技有限责任公司上海201611;上海绿泽生物科技有限责任公司上海201611;上海绿泽生物科技有限责任公司上海201611【正文语种】中文【中图分类】TQ225.24芸苔素内酯(brassinolide),化学名称(22R,23R,24R)-2α,3α,22,23-四羟基-β-均相-7-氧杂-5α-麦角甾烷-6-酮,相对分子质量(按2007国际相对原子质量计)为480.7,结构式见图1。
图1 芸苔素内酯结构式植物各个阶段的生长发育是受自身激素的控制和调节的。
芸苔素内酯作为新一类植物内源激素,其化学结构和植物性激素极为相近,在很低的浓度下,能明显地增加植物的营养体生长和促进受精作用、增加光合作用强度、增强根系活力、促进根系发育、提高叶绿素含量、延缓叶片衰老、抗倒伏能力增强、提高作物产量,改善作物品质。
有关芸苔素内酯的定量分析,目前尚未见公开报道。
本实验采用反相高效液相色谱,使用TC-C18为填料的不锈钢柱和紫外检测器,对芸苔素内酯进行定量分析,方法简便、快速、准确,分离效果好,方法的准确度及精密度均能达到定量分析的要求,适用工业化生产和质量分析。
芸苔素内酯的测定方法
1、方法提要
试样用甲醇溶液溶解,在室温下与苯硼酸衍生化反应30分钟,以乙腈+水为流动相,使用以C18为填料的不锈钢柱和紫外检测器(222nm),对试样中的芸苔素进行反相高效液相色谱分离。
2、试剂和溶液
甲醇:色谱纯;
乙腈:HPLC级;
水:新制二次蒸馏水;
苯硼酸:已知含量;
苯硼酸溶液:1.0mg/mL苯硼酸甲醇溶液;
芸苔素标样:(阿拉丁试剂网aladdin)已知质量分数。
3、仪器
高效液相色谱仪:具有紫外可变波长检测器;色谱工作站;
色谱柱:250mL×4.6mm(i.d.)不锈钢柱,内装C18、5µm填充物;
过滤器:滤膜孔径为0.45µm;
微量进样器:50µL;
超声波清洗器;
真空泵。
4、高效液相色谱仪操作条件
流动相:乙腈:水=80:20(v/v),经滤膜过滤,并进行脱气;
流速:1.0mL/min;
柱温:35℃;
检测波长:222nm;
进样体积:满环进样;
保留时间:14-羟基芸苔素甾醇约14.613min,3-表芸苔素内酯约15.822min,28-表高芸苔素内酯约16.749min,24-表芸苔素内酯约17.826min,28-高芸苔素内酯约19.735min,本产品天然油菜素内酯保留时间14.33至18.36 min。
上述操作参数是典型的,可根据不同仪器特点,对给定的操作参数作适当调整,以期获得最佳效果。
5、测定步骤
(1)标准溶液的配制
称取芸苔素标准品约0.010g(精确至0.0002g)置于25ml容量瓶中,用10mL 甲醇溶解,加入浓度为1.0mg/mL的苯硼酸甲醇溶液10mL,置于环境温度20℃温度下反应0.5小时。
反应完毕,用甲醇稀释至刻度,摇匀,过孔径0.45µm滤膜即得标样溶液。
(2)试样溶液的配制
准确称取样品10g(精确至0.0002g),小心放入50mL的锥形瓶中,量取15mL 正己烷倒入锥形瓶中,将锥形瓶里的物料用电动振荡仪振荡3-5分钟,静置20min 后,加入蒸馏水适量,振荡后静置30min,待溶液完全分层后,取上层正己烷溶液共10mL于25mL容量瓶中,在水浴锅(80℃)中加热,直至完全赶净正己烷,再加入浓度为1.0mg/mL的苯硼酸甲醇溶液10mL,置于环境温度20℃下,反应0.5小时。
反应完毕,用甲醇稀释至刻度,摇匀,再部分转入两支5mL离心管中,离心分离2分钟,过孔径0.45µm滤膜即得待测溶液。
(3)测定
在上述操作条件下,待仪器基线稳定后,连续注入数针待测溶液,计算各针
相对响应值,待相邻两针的相对响应值变化小于1%,按照标样溶液、试样溶液、
试样溶液、标样溶液的顺序进行测定。
(4)计算
将测得的两针试样溶液以及试样前后两针标样溶液中芸苔素峰面积分别进
行平均。
试验中芸苔素的质量分数按式(1)计算:
A2.M1.P
X%= ×B ×100(1)
A1.M2
式中:
A1——标样溶液中芸苔素内酯的峰面积(或峰高)的平均值;
A2——试样溶液中芸苔素内酯的峰面积(或峰高)的平均值;
M1——芸苔素内酯标样的质量,g;
M2——试样的质量,g;
B——系数为1.5;
P——标样芸苔素内酯的质量分数。
6、允许差
芸苔素质量分数两次平行测定结果之差,应不大于1.23%,取其算术平均值
作为测定结果。