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医学院药学院2011届药学本科学位论文静注人免疫球蛋白抗补体活性（ACA）测定影响因素的探讨学生：年级： 2011级专业：药学指导教师：制药工程硕士研究生；副主任技师实习地点：2014 年 03月 10日目录摘要 (2)1. 前言 (2)2. 材料与方法 (2)3. 结果 (4)4. 讨论 (5)参考文献 (5)静注人免疫球蛋白抗补体活性（ACA）测定影响因素的探讨摘要：静注人免疫球蛋白(pH 4)(IVIG)是XXXX有限公司生产的具有多种抗体活性的血液制品，因具有广泛的应用价值而受到临床重视。
其低pH 值能更好地保证Fc段生物学活性，一般认为少量的IgG 多聚体能暴露出Fc段补体结合位点，从而促使抗补体活性(ACA)产生[1-2]。
ACA 是IVIG中一项重要的指标，它指IVIG 中IgG 多聚体在没有结合抗原的情况下，激活补体的能力。
IgG 多聚体通过激活补体使补体消耗，从而使机体的免疫防御能力下降。
头痛、潮红、颤抖、背痛、恶心是较常见的不良反应症状[3]。
因此，ACA的高低对IVIG 的质量起着至关重要的作用。
据文献报道[4]，影响ACA 的因素可能与IgG 多聚体含量、Na 浓度、pH 值、葡萄糖的浓度有关。
据此，我们进行了研究。
另外，还研究发现枸橼酸含量对ACA 也有一定影响。
本文就以上因素对其进行实验分析。
关键词：静注人免疫球蛋白(IVIG) 抗补体活性（ACA）1.前言静注人免疫球蛋白（PH4）主要组成成分本品蛋白质中95%以上为免疫球蛋白，为无色或浅黄色澄清液体，可带轻微乳光。
含有广谱抗病毒、细菌或其他病原体的IgG抗体，另外免疫球蛋白的独特型和独特型抗体能形成复杂的免疫网络，所以具有免疫替代和免疫调节的双重治疗作用。
经静脉输注后，能迅速提高受者血液中的IgG水平，增强机体的抗感染能力和免疫调节功能。
静注人免疫球蛋白抗补体活性含量检测按《中国药典》2010版三部附录IX K进行测定。
静注人免疫球蛋白ph4具有抗体活性的动物蛋白,是由淋巴细胞（B细胞）产生的一种糖蛋白。
主要存在于血浆中，也见于其他体液、组织和一些分泌液中。
人血浆内的免疫球蛋白大多数存在于丙种球蛋白（γ-球蛋白）中。
可分为五类，即免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白M（IgM）、免疫球蛋白D（IgD）和免疫球蛋白E（IgE），IgG，IgA和IgM还有亚类。
IgG，IgD，IgE均为单体，分泌液中IgA（SIgA）是双体，IgM 是五聚体。
其中IgG是最主要的免疫球蛋白，约占人血浆丙种球蛋白的70%，分子量约15万，含糖2～3%。
尽管免疫球蛋白千变万化，但都有类似的结构。
抗体分子是由两对长短不同的多肽链所组成，四条链通过链间二硫键构成Y型基本结构（H2L2）。
IgG分子由4条肽链组成。
其中分子量为2.5万（23kD）的肽链，称轻链（L链），分子量为5万的肽链（50～60kD），称重链（H链）。
轻链与重链之间通过二硫键（—S—S—）相连接。
H和L链上都有可变区，同类重链和同型轻链的近N端约110个氨基酸序列的变化很大，其他部分的氨基酸序列相对恒定，据此可将轻链和重链区分为可变区(V)和恒定区(C)。
VH和VI。
各有3个区域的氨基酸组成和排列顺序高度变化，称为高变区(HVR)或互补决定区(CDR)，分别为CDRl、CDR2和CDR3。
CDR以外区域的氨基酸组成和排列顺序相对不易变化，称为骨架区(FR)。
VH和VI。
各有113和107个氨基酸残基，组成4个FR(分别为FRl、FR2、FR3和FR4)和3个CDRs。
VH和VI-中的各氨基酸可编号，一些保守的氨基酸都有其固定的编号位置，将不同序列和已编号的序列进行对比以后，在某个位置上多出来氨基酸编号为A、B、C等，如27A、27B、27C、106A等。
VH和VL的3个CDR共同组成Ig的抗原结合部位，识别及结合抗原，并决定抗体识别的特异性。
免疫球蛋白轻、重链可变区氨基酸顺序的编号重链和轻链的C区分别称为CH和CL，不同型别(x或入)CI。
不溶性微粒检查法本法系用以检查静脉用注射剂（溶液型注射液、注射用无菌粉末、注射用浓溶液）及供静脉注射用无菌原料药中不溶性微粒的大小及数量。
本法包括光阻法和显微计数法。
当光阻法测定结果不符合规定或供试品不适于用光阻法测定时，应采用显微计数法进行测定，并以显微计数法的测定结果作为判定依据。
光阻法不适用于黏度过高和易析出结晶的制剂，也不适用于进入传感器时容易产生气泡的注射剂。
对于黏度过高，采用两种方法都无法直接测定的注射液，可用适宜的溶剂稀释后测定。
试验环境及检测试验操作环境应不得引入外来微粒，测定前的操作应在洁净工作台进行。
玻璃仪器和其他所需的用品均应洁净、无微粒。
本法所用微粒检查用水（或其他适宜溶剂），使用前须经不大于1.0μm的微孔滤膜滤过。
取微粒检查用水（或其他适宜溶剂）符合下列要求：光阻法取50ml测定，要求每10ml含lOμm及10μm以上的不溶性微粒数应在10粒以下，含25μm 及25μm以上的不溶性微粒数应在2粒以下。
显微计数法取50ml测定，要求含10μm及10μm以上的不溶性微粒数应在20粒以下，含25μm及25μm以上的不溶性微粒数应在5粒以下。
第一法（光阻法）测定原理当液体中的微粒通过一窄细检测通道时，与液体流向垂直的人射光，由于被微粒阻挡而减弱，因此由传感器输出的信号降低，这种信号变化与微粒的截面积大小相关。
对仪器的一般要求仪器通常包括取样器、传感器和数据处理器三部分。
测量粒径范围为2～100μm，检测微粒浓度为0～10000个/ml。
仪器的校准所用仪器应至少每6个月校准一次。
（1）取样体积待仪器稳定后，取多于取样体积的微粒检查用水置于取样杯中，称定重量，通过取样器由取样杯中量取一定体积的微粒检查用水后，再次称定重量。
以两次称定的重量之差计算取样体积。
连续测定3次，每次测得体积与量取体积的示值之差应在±5%以内。
测定体积的平均值与量取体积的示值之差应在±3% 以内。
静脉注射用人免疫球蛋白说明书静脉注射用人免疫球蛋白适用于原发性免疫球蛋白缺乏症，如X 联锁低免疫球蛋白血症，常见变异性免疫缺陷病，免疫球蛋白G亚型缺陷病等;下面是店铺整理的静脉注射用人免疫球蛋白说明书，欢迎阅读。
静脉注射用人免疫球蛋白商品介绍通用名：静脉注射用人免疫球蛋白生产厂家: 上海莱士批准文号：国药准字S1*******药品规格：2.5g,50ml药品价格：￥690元静脉注射用人免疫球蛋白说明书【商品名】伽玛莱士静注人免疫球蛋白(pH4)【通用名】静注人免疫球蛋白(pH4)【汉语拼音】JingZhuRenMianYiQiuDanBai(pH4)【主要成份】蛋白质中95%以上为免疫球蛋白。
系由健康人血浆提取，辅料麦芽糖。
【性状】无色或浅黄色澄清液体，可带轻微乳光。
【适应症】1、原发性免疫球蛋白缺乏症，如X联锁低免疫球蛋白血症，常见变异性免疫缺陷病，免疫球蛋白G亚型缺陷病等。
2、继发性免疫球蛋白缺陷病，如重症感染，新生儿败血症等。
3、自身免疫性疾病，如原发性血小板减少性紫癜，川崎病。
【用法用量】用法：只限于肌内注射，不得用于静脉输注。
用量：1、预防麻疹：为预防发病或减轻症状，可在与麻疹患者接触7日内按每kg体重注射0.05～0.15毫升，5岁以下儿童注射1.5～3.0毫升，6岁以上儿童大注射量不超过6毫升。
一次注射预防效果通常为2～4周。
2、预防传染性肝炎：按每kg体重注射0.05～0.1毫升或成人每次注射3毫升，儿童每次注射1.5～3毫升，一次注射预防效果通常为一个月左右。
【药理毒理】注射免疫球蛋白是一种被动免疫疗法。
它是把免疫球蛋白内含有的大量抗体输给受者，使之从低或无免疫状态很快达到暂时免疫保护状态。
由于抗体与抗原相互作用起到直接中和毒素与杀死细菌和病毒。
因此免疫球蛋白制品对预防细菌、病毒性感染有一定的作用。
【不良反应】一般无不良反应，少数人会出现注射部位红肿、疼痛反应，无需特殊处理，可自行恢复。
冻干静注人免疫球蛋白（pH4）Donggan Jingzhu Ren Mianyiqiudanbai（pH4）Human Immunoglobulin（pH4）forIntravenous Injection，Freeze-dried本品系由健康人血浆，经低温乙醇蛋白分离法或经批准的其他分离法分离纯化，去除抗补体活性并经病毒灭活处理、冻干制成。
含适宜稳定剂，不含防腐剂和抗生素。
1基本要求生产和检定用设施、原料及辅料、水、器具、动物等应符合“凡例”的有关要求。
2制造2.1原料血浆2.1.1血浆的采集和质量应符合“血液制品生产用人血浆”的规定。
2.1.2低温冰冻的血浆保存期应不超过3年。
2.1.2每批投产血浆应不少于1000人份。
每批应由1000名以上供血浆者的血浆混合而成。
2.1.3组分Ⅱ、组分Ⅱ+Ⅲ沉淀或组分Ⅰ+Ⅱ+Ⅲ沉淀应冻存于-30℃以下，并规定其有效期。
2.2原液2.2.1采用低温乙醇蛋白分离法或经批准的其他分离法制备。
所采用的生产工艺应能使制品中IgG亚类齐全，其值与正常人血清IgG亚类分布相近（正常人血清IgG亚类分布参考值IgG1：60.3%～71.5%；IgG2：19.4%～31.0%；IgG3：5.0%～8.4%；IgG4：0.7%～4.2%）；应能保留IgG的Fc段生物学活性。
生产过程中不得加入防腐剂或抗生素。
2.2.2经纯化、超滤、除菌过滤后即为人免疫球蛋白原液。
2.2.3原液检定按3.1项进行。
2.3半成品2.3.1配制按成品规格配制，使成品中蛋白质含量不低于50g/L，并加入适量麦芽糖或其他经批准的适宜稳定剂。
2.3.2半成品检定按3.2项进行。
2.4成品2.4.1分批应符合“生物制品分批规程”规定。
2.4.2分装及冻干应符合“生物制品分装和冻干规程”规定。
分装后应及时冰冻，冻干过程制品温度不得超过35℃，真空封口。
2.4.3规格每瓶含蛋白质1g（20ml）、1.25g(25ml)、2.5g(50ml)、5g(100ml)、10g.(200ml)。
静注人免疫球蛋白（pH4）的稳定性研究黄军民;梁小明;何淑琴;张丽铃;黄璠【摘要】Objective Investigate the stability of human immunoglobulin (pH4) for intravenous injection. Methods The three batch of human immunoglobulin(pH4) for intravenous injection were carried on the long term stability test of 3 years in 2~8℃. Tested the inspection product in accordance with the“drug stability test guiding principle”of the Chinese Pharmacopeia(Volume Ⅱ , 2005 edition)in appendix XIX C and“stability principle of raw material medicine and drug"of the Chinese Pharmacopeia(VolumeⅡ, 2010 edition)in appendix XIX C. Results In the long term stability of the test process, visible foreign matter, purity, pH value, IgG content, protein content, molecular size distribution have no obvious variation trend. Conclusion Human immunoglobulin (pH4) for intravenous injection has good stability, after 3 years of long term stability test, the quality is still in accordance with the requirements of Chinese Pharmacopeia(VolumeⅢ, 2010 edition).%目的：考察静注人免疫球蛋白(pH4)的稳定性。
核准日期：2002年12月18日2005年09月07日修改日期：2005年08月02日2005年09月15日2005年12月08日静注人免疫球蛋白（pH4）说明书请仔细阅读说明书并在医师指导下使用【药品名称】通用名称：静注人免疫球蛋白（pH4）英文名称：Human Immunoglobulin（pH4）for Intravenous Injection汉语拼音：Jingzhu Ren Mianyiqiudanbai(pH4)【成份】主要组成成份：本品蛋白质中95%以上为人免疫球蛋白。
辅料：麦芽糖。
【性状】无色或浅黄色澄清液体，可带轻微乳光。
【适应症】1.原发性免疫球蛋白缺乏症，如X联锁低免疫球蛋白血症，常见变异性免疫缺陷病，免疫球蛋白G亚型缺陷病等。
2.继发性免疫球蛋白缺陷病，如重症感染，新生儿败血症等。
3.自身免疫性疾病，如原发性血小板减少性紫癜，川崎病。
【规格】1.25g/瓶，5%2.5g/瓶，5%5g/瓶，5%10g/瓶，5%【用法用量】用法：静脉滴注或以5%葡萄糖溶液稀释1～2倍作静脉滴注，开始滴注速度为1.0ml/分（约20滴/分），持续15分钟后若无不良反应，可逐渐加快速度，最快滴注速度不得超过3.0ml/分（约60滴/分）。
儿童滴速酌情减慢。
用量：遵医嘱。
推荐剂量：1.原发性免疫球蛋白缺乏或低下症：首次剂量：400mg/kg体重；维持剂量：200～400mg/kg体重，给药间隔时间视病人血清IgG水平和病情而定，一般每月一次。
2.原发性血小板减少性紫癜：每日400mg/kg体重，连续5日；维持剂量每次400mg/kg体重，间隔时间视血小板计数和病情而定，一般每周一次。
3.重症感染：每日200～300mg/kg体重，连续2～3日。
4.川崎病：发病10日内应用，儿童治疗剂量2.0g/kg体重，一次输注。
【不良反应】一般无不良反应，极个别病人在输注时出现一过性头痛、心慌、恶心等不良反应，可能与输注速度过快或个体差异有关。
医疗科技公司不溶性微粒检验操作规程1.目的：为了规范不溶性微粒检查的操作过程，保证检验结果的准确性，依据《中国药典》2010版特制订本规程。
2.范围：适用于本公司植入物产品不溶性微粒的检验。
3.职责：3.1实验室试验人员必须严格按本操作规程进行检验，以保证测试结果的准确；3.2质量部经理负责监督实验室人员对该规程的执行情况。
4.操作步骤（显微计数法）4.1 采样数量：10件样品。
4.2 仪器装置：包括层流净化台、显微镜、微孔滤膜及滤器、平皿等。
显微镜为双筒大视野金相显微镜，目镜内附标定的测微尺（每格0.05～0.1mm）。
坐标轴前后、左右移动范围应大于30mm，显微镜装置内附有光线投射角度、光强度均可调节的照明装置。
检测时放大倍数不小于100倍。
微孔滤膜及滤器为玻璃抽滤系统，选用滤膜孔径为0.45um、直径50mm的白色微孔滤膜，膜上如有15um以上的不溶性微粒，应在5粒以下，并不得有25um以上的微粒，必要时，可用微粒检查用水冲洗使其符合规定。
4.3 试验环境要求：试验操作环境不得导入明显的微粒，测定前的操作应在层流净化台中进行。
玻璃仪器和其他所需的用品均应洁净、无微粒。
本法所用微粒检查用水，使用前须经孔径不大于0.45um的微孔滤膜滤过。
4.4 试验环境及检验用水的检测：取试验用的清洁容器，加入50ml微粒检查用水，按显微计数法试验，抽滤所有50ml供试液。
每50ml中含15um 以上的不溶性微粒应在20粒以下，含25um以上的不溶性微粒应在5粒以下。
否则表明微粒检查用水、玻璃仪器和试验环境不适于进行微粒检查，应重新处理，检测符合规定后方可进行供试品检查。
4.5 测定前准备：试验环境检测符合规定后，在净化台上将滤器用微粒检查用水冲洗至洁净，用平头无齿镊子夹取测定用滤膜，用微粒检查用水冲洗后，置滤器托架上，固定滤器，倒置，反复用微粒检查用水冲洗滤器内壁，沥干后安装在抽滤瓶上，备用。
4.6样品的测定：将供试品置于已经4.4检验过的清洁容器中，取适量的微粒检验用水（能够充分洗脱样品的水量），将容器振摇80次，使样品能充分得到洗脱。
