提高牛、羊胚胎冷冻保存效果的措施
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提高牛冷配受胎率的技术措施包括以下几个方面:
优化配种时间:确定牛的受胎窗口期,确保在牛最适宜受胎的时间进行冷配种,从而提高受胎率。
提高冷冻精液的质量:冷冻精液的质量是影响受胎率的关键因素之一。
为了提高受胎率,需要保证使用的冷冻精液质量良好,不含有损伤精子的因素,如抗生素、酸碱度和饮食等。
确定最佳冷冻方案:不同种类和品种的牛可能需要不同的冷冻方案。
冷冻精液的温度、冷却速度、冷却过程中的添加物和附加物等参数都需要优化,以保证冷冻精液的质量,提高受胎率。
采用新技术:采用新技术,如胚胎移植和人工授精,可提高受胎率。
其中胚胎移植技术可以将高质量的胚胎移植到合适的母牛子宫内,从而提高受胎率。
确保适宜的环境和管理:牛的环境和管理对于受胎率也有很大的影响。
牛需要有适宜的饮食和住房条件,以及正确的保健和管理,如及时治疗疾病和管理营养等。
总之,提高牛冷配受胎率需要综合考虑多个因素,采取合适的技术措施和管理方法。
禽畜肉类家庭冷冻储藏的建议禽畜肉类是人们日常饮食中不可或缺的重要食材,为了保持其新鲜和储藏一段较长时间,冷冻是一种常见且有效的方法。
然而,如果不正确地进行冷冻储藏,可能会导致肉类变质和营养价值降低。
因此,在下面的文章中,我会给出一些建议,以确保禽畜肉类在家庭冷冻储藏中保持良好状态。
首先,购买和储藏肉类时应选择新鲜的肉类。
在购买肉类时,应注意其外观和气味。
良好的禽畜肉类外表应该鲜红色、湿润并无明显变质迹象。
另外,肉类应该散发出自然的气味,没有任何异味。
一旦购买到新鲜的肉类,应尽快将其放入冰箱进行冷藏或进行冷冻储藏。
对于家庭冷冻储藏,肉类应首先进行适当的处理。
这包括清洗、切割和包装。
清洗时,应用清水洗净肉类,并将其上的血液、油脂等杂质彻底清除。
接下来,肉类应根据需要进行适当的切割。
切割后的肉块更容易冷冻和解冻,并且可以根据家庭需求进行分割。
最后,应将肉类包装好。
最好使用密封袋或密封盒来包装,以确保肉类不会受到冷冻空气中的湿气和氧气影响。
在包装时,应将尽量多的空气从包装中排出,以减少冷冻的氧气含量。
正确的冷冻和解冻过程对于保持禽畜肉类的质量至关重要。
在进行冷冻储藏时,应注意以下几点。
首先,将肉类放入冷冻温度的环境中,通常是零下18度至零下20度。
这些温度可以有效地阻止细菌的生长和繁殖,从而延长肉类的储藏时间。
其次,肉类应尽快地放入冷冻温度,以防止细菌滋生。
长时间暴露在常温下会增加细菌感染肉类的风险。
最后,冷冻储藏的时间也需要注意。
不同类型的禽畜肉类在冷冻储藏中的时间有所不同。
一般来说,猪肉可以储藏3-4个月,牛肉可以储藏3-4个月,鸡肉可以储藏6-9个月,鱼肉可以储藏6-9个月。
超过这些时间,肉类可能会失去风味和质量。
解冻冷冻肉类时也需要谨慎对待。
首先,应逐渐解冻肉类,避免温度变化过快。
最好将肉类放入冰箱中解冻,因为这样可以保持肉类温度的稳定。
其次,解冻后的肉类不要重新冷冻,因为重新冷冻可能导致肉类质量的下降。
提高母山羊冻配受胎率的四项措施一、做好发情鉴定1.外部观察和阴道检查法相结合:兴奋不安、不断呜叫、强烈摆尾、排尿频繁、食欲减退、反刍停止;子宫颈口开张、呈粉红色,粘液量多、呈胶水样,并逐渐由透明变混浊。
2.试情法:发情初期企图爬跨其他羊,发情旺期接受爬跨,发情末期拒绝爬跨。
二、严格执行冻配操作规程,实行无菌作业1.冻配用的一切器械使用前必须进行高温灭菌消毒,并使其接近羊的正常体温,以减少对母羊阴道粘膜的刺激。
用后先用清水,再用蒸馏水清洗后,放入专用器械箱内保存备用。
2.检验室和配种室应常洒消毒液和清水,保持清洁卫生。
3.配种员在输精前,应将指甲剪净、磨平,手臂用75%的酒精消毒,并涂以稀释液或生理盐水作润滑剂。
4.待配母羊的阴户先用清洗液清洗,再用酒精棉球擦拭消毒或用l%高锰酸钾溶液冲洗消毒。
先用棉球蘸水洗涤,去污垢,再用生理盐水擦干。
5.输精前把母羊两后肢固定在1米长左右的横杆上保定母羊,在开膣器上涂生理盐水或凡士林以增加润滑。
三、重视保精,快速解冻与镜检1.根据液氮罐的性能要求,定期添加液氮,罐内盛装冻精的提筒不能漏在液氮面外。
2.取精时,尽可能用长镊子,不要将提筒或纱布袋提到临界线以上处(罐顶10厘米左右),停留时间(上限)10秒钟。
3.从液氮中取出细管冻精时,要轻轻甩1~2下,将塑料吸管的棉塞放人35~40℃的温水中,把封口端留在水外1~1.3厘米处,待管内精液融化一半时(约10秒),立即取出备用。
4.解冻后的精液镜检时,精子的活力不低于0.3的方可用于输精,这样才能保证正常受精。
5.解冻后的精液应立即输配,不易停放时间过长,应做到现解冻现输精。
四、适时输精母山羊发情持续期一般为24~48小时,正常排卵是在发情结束前,即在发情开始后30~40小时。
卵子在生殖道内保持受精能力的时间约12~24小时。
精子在母羊生殖道内维持受精能力的时间一般为1~2天,且还需要几小时的获能过程,才能与卵子结合受精。
动物配子与胚胎冷冻保存原理及应用动物配子和胚胎冷冻保存是一种通过低温保存方式,将动物种子或胚胎保存在玻璃管或冷冻盒中,以便在未来的时候将其恢复生长和繁殖的技术。
动物配子或胚胎保存可以保证物种的遗传多样性,也可以为动物的保护和培育提供重要的帮助。
近年来,该技术在畜牧业、医学研究以及保存濒危物种等领域得到了广泛的应用。
动物配子和胚胎冷冻保存的原理是通过低温抑制生命体内的活动代谢,达到延缓历程的效果。
在冷冻过程中,配子和胚胎的内部液态会转变成固体所以需要添加抗冻剂来保护细胞和避免冰晶对细胞的伤害。
当冷冻被完成后,这些细胞或组织可以存储在超低温(通常为-196℃)下,以防止它们继续生长或衰老。
当需要将它们恢复到正常生长时,需要将保存的胚胎或配子慢慢加热到它们适合的温度以使其重新开始细胞代谢。
在畜牧业中,动物配子和胚胎的冷冻保存技术被广泛应用。
通过把高质量的家畜的配子和胚胎冷冻保存,可以在未来种群扩增 or 培育需要的时候母猪、牛、马和羊的种群扩增。
生物学家利用高质量的胚胎和配子创建基因改良动物,然后将其冷冻保管。
当需要在生产中培育更多的种群,在需要时就可以于提取原料,并将它们放入深度冷冻中进行保存。
这a对于种群扩增而言是非常重要的工具。
在医学研究领域中,无论是用于治疗不育症,还是利用它来治疗人造生殖植入,动物的配子和胚胎保存技术都是非常重要的技术。
这些技术可以为什么人造受孕程序创建可靠的储备源,这些储备源可以在不必要的情况下补充供体实验。
在保护濒危动物种群和保护野生动物方面,动物配子和胚胎保存技术也有着重要的作用。
通过采集、保存和重新植入野生动物或濒危动物的配子和胚胎,可以创建并保护优良的纯种,有效地保护某些濒危物种。
总之,动物配子和胚胎保存技术为畜牧业、医学研究和濒危物种的保护提供了可靠的参考。
虽然这项技术需要高度技术,但相信经过不断学习和研究,将来它将起到越来越重要的作用。
胚胎移植技术在牛羊品种改良工作中的现状及发展建议作者:乌丽江·巴合达吾列提来源:《畜牧兽医科学》 2018年第6期1?胚胎移植技术在牛羊品种改良中的发展现状20世纪90年代生物工程诞生,经过多年发展,已经成为生命科学中不可缺少的一环,是21世纪的高精尖技术之一。
1890年首次胚胎移植试验,在活体兔子成功完成。
经过无数的试验、校对、更正,几十年后,终于成功的将胚胎移植技术运用到牛羊试验中。
随着胚胎移植技术的不断发展,20世纪60年代,许多发达国家对牛羊的胚胎采集、移植以及保存等关键技术投入了大量的试验,并准备将胚胎移植技术运用到实际生产中。
20世纪70年代,陆续的有发达国家将胚胎移植技术运用到生产的实际应用阶段。
随着胚胎移植技术的不断发展,胚胎移植技术的程序不断得到简化,从最开始的临床试验性质的手术、到常见普通手术、慢慢发展到了农场非手术型,成为牛羊品种改良不可缺少的手段。
首先将供体和受体实施到同期化,确保供体和受体同时进入发情期。
使用FSH、PMSG或其他的促性腺激素适时适量注射,促进供体超数排卵,并由专业的人工授精技术员进行人工配种。
随后在供体接受配种的7?d后,用简单的非手术法移植到受体体内,由于非手术法较简单,且不需要手术进行,可以直接在牛羊舍内进行胚胎移植。
正常情况下母牛的平均冲卵数为每次每只5枚。
目前的受孕率实际情况,鲜胚胎受孕率约为65%,而冷冻胚胎略低约为50%。
而国外的技术相对比较成熟,手术后鲜胚胎受孕率约为80%,非手术鲜胚胎受孕率约为65%,而冷冻胚胎的受孕率相对鲜胚胎的受孕率相对较低。
由于技术的不成熟,按照母牛的平就排卵数,和国内外的胚胎移植技术的受孕率,即每有一只排卵母牛,国外的技术就相对比我国技术多生产一枚受精卵[1]。
但我国的胚胎移植技术的发展较比很多发达国家要晚很多年,有很大的发展空间,随着国家对技术的不断重视,胚胎移植技术得到了迅速发展,胚胎的冷冻、分割等技术成功试验,胚胎性别鉴定、核移植等技术也得到了重大突破。
牛羊胚胎质量检测技术规程一、引言牛羊胚胎质量检测是保障动物繁育成功率的关键环节。
本规程详细介绍了牛羊胚胎质量检测的各个环节,以确保胚胎质量的可靠性和一致性。
通过遵循本规程,将有助于提高胚胎移植的成功率,进而提高畜牧业的经济效益。
二、胚胎收集在进行胚胎质量检测之前,首先需要进行胚胎的收集。
胚胎收集应遵循无菌操作原则,确保胚胎不受外界病原体的污染。
收集后的胚胎应尽快进行质量检测。
三、胚胎形态观察胚胎形态是评价胚胎质量的重要指标。
通过显微镜观察胚胎形态,可初步判断胚胎的健康状况和发育阶段。
正常的胚胎形态应为圆形或椭圆形,细胞密度均匀,无明显的细胞坏死或异常结构。
四、胚胎染色体检测染色体数目和结构是决定胚胎发育潜力的关键因素。
通过染色体检测,可以确定胚胎是否携带异常染色体,为选择性移植提供依据,从而提高繁殖效率。
五、胚胎代谢活性评估代谢活性是反映胚胎活力的关键指标。
通过评估胚胎代谢活性,可判断胚胎是否具有足够的能量进行正常发育。
常用的代谢活性评估方法包括葡萄糖消耗量测定和乳酸产量测定等。
六、胚胎基因组DNA分析基因组DNA分析可用于检测胚胎是否存在与生产性能相关的遗传变异。
通过对基因组DNA进行分析,可以预测胚胎的生长发育、抗病能力和肉质等性状,为选择性移植提供依据。
七、胚胎移植后妊娠诊断在移植后一定时间内,需要对母体进行妊娠诊断,以确定胚胎是否成功着床并继续发育。
常用的妊娠诊断方法包括超声波扫描和血清激素水平测定等。
八、胚胎性别鉴定性别鉴定对于畜牧业生产具有重要意义,因为不同性别的胚胎在生长发育和生产性能方面存在差异。
通过性别鉴定,可以定向选择特定性别的胚胎进行移植,满足生产需求。
常用的性别鉴定方法包括染色体分析和DNA性别决定因子检测等。
九、胚胎冷冻保存与复苏为了延长胚胎的保存期限和提高移植效率,需要进行胚胎的冷冻保存与复苏。
冷冻保存时应选择适当的冷冻保护剂,并采用适当的降温速率将胚胎降至玻璃化状态。
低温冷冻技术在动物繁殖中的应用与优化低温冷冻技术在动物繁殖中的应用与优化近年来,低温冷冻技术在动物繁殖中的应用越来越广泛。
这种技术通过将动物的精液、卵子或胚胎等进行冷冻保存,以便在需要时进行使用。
这种技术的优点在于可以大大提高繁殖效率,同时也可以减少繁殖过程中的风险和成本。
低温冷冻技术的应用范围非常广泛,从家禽、家畜到野生动物都可以应用这种技术。
在家禽繁殖中,低温冷冻技术可以用于保存鸡精液,以便在需要时进行人工授精。
在家畜繁殖中,低温冷冻技术可以用于保存牛、猪、羊等动物的精液、卵子或胚胎,以便进行人工授精或移植。
在野生动物保护中,低温冷冻技术可以用于保存濒临灭绝的野生动物的精液、卵子或胚胎,以便进行人工繁殖。
低温冷冻技术的优化主要包括以下几个方面:1. 选择适宜的低温冷冻方法。
低温冷冻技术有两种方法,即液氮冷冻和干燥冷冻。
液氮冷冻是目前应用最广泛的方法,但干燥冷冻也逐渐得到了广泛的应用。
选择适宜的低温冷冻方法可以大大提高保存效果。
2. 选择适宜的保存容器。
保存容器对于保存效果也有很大的影响。
常用的保存容器有试管、小管、杯子等。
不同的保存容器对于不同的保存物质有不同的适用性。
3. 选择适宜的保存液。
保存液是低温冷冻技术中不可或缺的一部分。
不同的保存液对于不同的保存物质有不同的适用性。
选择适宜的保存液可以大大提高保存效果。
4. 选择适宜的保存时间。
不同的保存时间对于不同的保存物质有不同的适用性。
选择适宜的保存时间可以大大提高保存效果。
总之,低温冷冻技术在动物繁殖中的应用非常广泛,同时也有很多优化空间。
通过选择适宜的低温冷冻方法、保存容器、保存液和保存时间,可以大大提高低温冷冻技术的保存效果,从而提高繁殖效率,减少风险和成本。
提高黄牛冻配受胎率的关键技术大力推广黄牛冷配技术,采取有效措施,提高受胎率,对加速黄牛的改良和促进养牛业的发展有非常重要的意义。
要提高黄牛冻配受胎率,必须掌握以下综合技术。
1.确保冻精的质量与安全贮存细管冻精质量的好坏,是决定受胎率高低的首要问题。
因此,首先要强调生产塑料细管冻精单位选好、养好种公牛,坚持鲜精不好的不冷冻,冻后不合乎标准的不贮存。
在选购细管冻精方面,强调询查细管冻精来源的情况,并对冻精抽样显微镜检查,不合格的坚决不用。
要求精子活力0.3以上。
在给母牛输精时要认真把握好细管冻精质量关。
塑料细管冻精贮存时,要保持液氮罐的液氮在原容积的1/3以上,保证细管冻精浸泡在液氮中。
同时要选用高纯度的液氮,否则,会缩短细管冻精的寿命,对使用的液氮罐要坚持1年清洗1次,以防杂物对细管冻精的破坏污染,保护好液氮罐正确使用,可以延长液氮罐的使用时间。
2.准确掌握母牛发情规律和鉴定方法母牛的发情周期为18~24天,发情持续时间为1~3天。
产后初次发情的时间很不一致,在气候温暖、饲养管理条件良好时,产后第1次发情,一般在分娩后40天(20~60天),在冬季可延长到60~90天。
母牛的发情有强烈外部性行为和内部特征。
内部特征是以生殖激素、生殖器官变化为基础,排卵为本质的生殖生理规律,因此,母牛的发情鉴定应以观察外部性行为为主、触摸卵巢为辅来进行综合判定。
掌握母牛发情规律和鉴定方法的目的,是为适时输精提供依据,一般采用"问、看、查、摸"相结合的方法鉴定母牛发情。
问:询问牛主,开始发情时间及发情过程等情况;看:观察发情母牛外部的表现;查:检查阴道黏膜充血和宫颈外口充血及开张情况;摸:通过直肠触摸卵巢上卵泡发育变化的程度,以此推算母牛发情排卵的时间来确定输精的最适时间。
卵泡发育过程是进行性的变化,由小到大,由硬到软,由无波动到有波动。
由无弹性到有弹性,发情后期卵泡壁变薄而紧张,有一触即破之感,约持续4~8小时即可排卵。
提高牛、羊胚胎冷冻保存效果的措施
作者:佟桂芝宋斌董正德李信涛王伟霞李乃顺
来源:《现代畜牧科技》2018年第07期
摘要:胚胎冷冻保存是胚胎生物技术的一个重要环节。
在质量型畜牧业发展中起着非常关键的作用。
而我国牛、羊体内(外)胚胎冷冻效果还没有达到人们预期的水平,从而限制了胚胎移植技术的商业化推广应用。
需要突破的技术瓶颈问题是胚胎冷冻、解冻过程中受到机械损伤以及保护剂毒性影响。
因此在胚胎冷冻保存中各种抗冻保护剂及冷冻方法要相互结合,取长补短,针对不同发育阶段胚胎而筛选合适的冷冻保护剂及冷冻保存方法,同时简化冷冻一解冻程序,我们应寻找无需昂贵的冷冻设备、操作时间短、易推广的方法。
对于胚胎冷冻胚胎移植流产率高、妊娠率及产仔率低等现象还需进一步研究。
植物抗冻蛋白在猪胚胎玻璃化保存上的成功应用,使得此项技术能在畜牧业生产中得到广泛的应用,研究内容的意义较大。
关键词:牛;羊;胚胎;冷冻;保存;效果
中图分类号:S852.1
文献标识码:A
文章编号:2095-9737(2018)07-0011-01
1 筛选质量优级胚胎进行冷冻保存
冷冻前羊胚胎的内细胞团的质量不高,细胞碎片多,会使每个卵裂球的完整程度差,细胞脱水与冷冻保护剂渗透到细胞过程的平衡遭到破坏。
所以,掌握冷冻前根据胚胎日龄进行羊胚胎质量分级技术是关键技术之一。
胚胎细胞形态是影响冷冻胚胎质量的关键因素,是直接影响移植后胚胎存活率及妊娠率的重要因素。
2 胚胎不同发育阶段
胚胎冷冻能否存活的关键在于细胞脱水和保护剂渗透到细胞的过程是否达到平衡。
用于冷冻保存的牛、羊胚胎是体内(外)受精六七天,处于桑椹、囊胚、扩张囊胚阶段胚胎。
处于不同发育阶段的胚胎形态、细胞数量及特性均有所不同,对冷冻及解冻过程中的机械损伤及保护剂毒性的耐受能力不同。
囊胚和扩张囊胚细胞数比桑椹胚的体积小而细胞数多。
桑椹胚的细胞数少而体积大,胚胎细胞充分脱水难而且慢,胚胎冷冻、解冻后活力低,移植妊娠率和产仔率低。
研究表明,甘油冷冻剂冷冻牛、羊胚胎,采用常规慢速冷冻法时,囊胚、扩张囊胚解冻后移植受胎率,产仔率均明显高于桑椹胚;囊胚和扩张囊胚之间差异不显著。
表明甘油冷冻剂更适合冷冻处于囊胚、扩张囊胚阶段的胚胎。
对于桑椹胚:由于乙二醇冷冻保护剂的分子量小,可以快速渗入胚胎细胞,冷冻胚胎的卵裂球保持了高度的一致性,外部形态特征没有任何的变化;甘油的分子量较大,作为胚胎冷冻保护剂时,桑椹胚卵裂球所处位置与卵裂球受保护程度
有关,桑椹胚卵裂球位于桑椹胚外部的形态保存正常完整,而卵裂球位于桑椹胚内部的容易被破坏。
所以,对于牛、羊不同发育阶段的胚胎建议采用不同的冷冻保护剂进行冷冻保存,处于囊胚、扩张囊胚阶段的胚胎宜采用乙二醇作冷冻剂,桑椹胚宜采用甘油作为胚胎冷冻保护剂效果会更好。
3 胚胎的冷冻方法
胚胎冷冻、解冻时,必须经过冷冻、解冻过程,此时的危险温区是15℃~- 50℃。
如果操作不当、冷冻保护剂选择不当或冷冻方法不当,均能在胚胎内形成的大冰晶,对胚胎细胞造成机械性破坏,损伤蛋白质的硫氢键,发生胚胎死亡。
因此常规的低温冷冻法就是:在冷冻牛、羊胚胎时,筛选几种低毒的保护剂进行搭配使用,采用合适的降温措施,使胚胎细胞内达到玻璃化状态时,使其能在超低温条件下长期保存。
目前已在世界范围内进行人及哺乳动物胚胎的冷冻保存应用。
常规慢速冷冻法的优点是解冻后胚胎的存活率较高,适合规模化胚胎冷冻,但这种方法胚胎冷冻程序较繁琐、费时,成本高。
玻璃化冷冻( Vitrification)不需要昂贵的程序降温仪,因此进行牛、羊胚胎冷冻保存的成本低廉。
细胞外液不生成冰晶,避免了物理性的机械损伤对胚胎细胞造成的死亡,操作简单。
通过筛选毒性更小、渗透性更强的胚胎冷冻保护剂组合,将多种不同类型胚胎冷冻保护剂配合使用,以降低每种保护剂特有的毒性。
采取冷冻剂的浓度逐步添加,当添加最终的高浓度保护剂时,在30 s内将胚胎投入液氮中等措施,从而大大降低了冷冻保护剂的毒性,提高了冷冻胚胎的冻后活力。
3.1 常规慢速冷冻法
将卵母细胞或胚胎放入低浓度抗冻剂的冷冻保护液中,经过2 min平衡、诱发结冰8 min 后,以0.3—0.5℃/min的速率缓慢降温35℃,停留10 min后投入液氮中进行长期保存。
从而使牛、羊胚胎细胞内形成玻璃化状态,卵母细胞或胚胎得以长期保存。
目前,常规慢速冷冻法为大多数动物及人类胚胎学家所广泛接受。
这种方法在国外已经实现了商业化应用,适合大量的冷冻胚胎,但其主要缺点是冷冻程序较繁琐、费时,必须有昂贵的程序冷冻仪;而且冷冻牛、羊卵母细胞及体外胚胎时效果差。
由于需要人工诱发结冰,然后以缓慢的降温速率进行降温,这种胚胎冷冻保存方法虽然可靠,但需要专业的胚胎冷冻仪设备,并且操作程序复杂,时间较长。
且必须由专业技术人员操作,专用脱除抗冻剂的解冻液、体视显微镜和实验室无菌条件,不利于在现场条件下进行操作。
因此制约了牛、羊胚胎移植技术的推广应用和胚胎生物技术的产业化进程。
3.2 玻璃化保存法
长时间以来,牛羊、胚胎玻璃化保存存在颇多争议,研究证明,在各种冷冻方法中,牛、羊等哺乳动物胚胎玻璃化保存是一种有效、实用的方法。
经过近20年研究,发明多种牛、羊体外胚胎玻璃化保存液(解冻液)和保存方法,效果明显优于常规冷冻法,但一直难于走出实验研究阶段,使其真正在生产中得到商业化应用。
玻璃化保存技术不需要昂贵的冷冻设备、操
作程序简单、省时,与传统胚胎冷冻方法相比具有明显优势,有利于加速良种牛、羊的快速扩繁及品种改良进程,缩短世代间隔。
玻璃化冷冻前,胚胎在玻璃化液平衡过程中,环境温度很重要。
室内温度高时,平衡时间短成活率高:温度太低时,平衡时间短并不能使存活率升高。
因为在玻璃化液中,乙二醇的渗透量起到关键作用。
乙二醇的渗透量与环境温度和平衡时间有关。
室温时、乙二醇进入细胞速度快,细胞膜通透性好,需要的平衡时间短。
较高温度下经过一个短时间处理是合适的,一般室温为20℃或25℃。
而在胚胎解冻过程中,环境的温度同样是很关键的因素之一。
太高和太低对解冻胚胎的存活力都是不利的,不利于抗冻剂的脱出及胚胎的复水,室温最好控制在30℃。
牛冷冻胚胎直接移植法可以避免胚胎解冻过程中,脱除冷冻剂过程所带来的形态学检查不精确、操作技术水平的误差等问题,操作省时、简便,不需要任何专门的设备,胚胎解冻直接移植。
牛、羊胚胎冷冻后直接移植的方法能降低应用胚胎移植配套技术推广的费用,提高妊娠率及产仔率,促进了牛、羊胚胎冷冻生产商业化进程,加速了品种改良。
4 冷冻保护剂
应用常规冷冻保存法,在羊胚胎冷冻的过程中,甘油作冷冻保护剂,胚胎放人甘油冷冻剂中与胚胎放人乙二醇冷冻剂中的形态变化行为是不同的。
乙二醇分子量小,渗入胚胎内速度快,在显微镜下几乎观察不到胚胎形态的变化;甘油分子量较大,甘油渗入胚胎的速度慢,胚胎放入甘油冷冻剂中时,胚胎上浮,胚胎皱缩变小,严重脱水,随着甘油的逐渐渗入,胚胎细胞内、外渗透压达到平衡,胚胎才恢复原来的形状,胚胎下沉至培养皿底。
研究证明:牛、羊冷冻胚胎的移植受胎率,甘油和乙二醇作冷冻保护剂的受胎率并没有显著差异,甘油冷冻剂组的移植受胎率略好于乙二醇作冷冻保护剂组,二者作为胚胎冷冻保护剂均是可行的。
羊胚胎冷冻,甘油作冷冻保护剂可以作为首选,因为羊的冷冻胚胎进行移植时,需要进行前装管的处理过程;牛胚胎冷冻,可以首选乙二醇作冷冻保护剂,因为牛冷冻胚胎移植时,不需要重新装管的前处理过程,而是可以采用直接移植法。
总之,在胚胎的冷冻、解冻过程中,探寻最佳的冷冻保护剂组合、解冻后一步法脱出冷冻保护剂或者直接移植法,保证胚胎冻后的存活力,提高冷冻胚胎移植受胎率和产仔率,建立简便、快捷的胚胎冷冻解冻移植程序,加速推广家畜良种化进程,胚胎移植配套技术为牛、羊良种化提供技术保障。