胚胎冷冻及复苏移植120个周期临床效果分析

胚胎冷冻保存技术摘要; 胚胎冷冻保存技术可使胚胎移植不受时间地点的限制，从而达到提高胚胎移植效率的目的。

研究和优化胚胎冷冻保存技术对胚胎工程的发展有重要的意义。

关键词：胚胎冷冻保存为便于长途运输和随时供移植使用，将那些６～７日龄已有２０～３０个细胞的新鲜活胚胎（或分割后的半胚胎、１／４胎）在－１９６℃的超低温下冷冻贮存就是胚胎冷冻保存技术。

这是在冷冻精子的技术基础上进一步发展起来的一项新技术。

目前用冷冻胚胎移植的成功率约为鲜胚胎的７０％～８０％，胚胎冷冻保存技术可使胚胎移植不受时间地点的限制，从而达到提高胚胎移植效率的目的。

现有的胚胎冷冻保存方法有四种：一、常规冷冻法常规冷冻法：也叫慢速冷冻法、逐步降温法。

将采集到的胚胎用培养液洗涤后置入有不同冷冻保护剂(甘油或二甲亚枫(DMSO)等)浓度的三种冷冻液中(冷冻液浓度由低到高，最终浓度1．4M)，每种冷冻液中平衡5分钟，然后将胚胎和冷冻液装入细管中封口、标记，放入冷冻仪中进行冷冻。

冷冻速率先以1～3~C／分下降至-6～-7℃，在此温度诱发结晶，平衡10分钟，然后，以0．3℃／分的速率降温至-35～_38℃，之后投入液氮中保存。

胚胎解冻后，需按胚胎进入冷冻液时的相反浓度，即从高到低浓度脱除冷冻保护剂，每步5分钟，最后置入含20％血清的PBS保护液中洗涤3次，彻底脱除冷冻保护剂。

或者将解冻后的胚胎放入0．5M(或1．0M)的蔗糖溶液中平衡10分钟，再用上述PBS液洗涤3次。

二、一步冷冻法一步冷冻法：也叫一步细管法。

该方法是由慢速冷冻法改进而来，细管内的冷冻液和蔗糖液是分开的，因此，在细管内用蔗糖液可一步脱除甘油抗冻剂，从而利于在生产中推广应用。

三、程序冷冻法程序冷冻法主要采用低浓度冻结保存剂梯度脱水,经程序冷冻仪缓慢降温。

主要操作步骤包括:将细胞顺序放入一系列逐渐增加保存剂浓度的溶液中梯度脱水,置入程序冷冻仪快速降温至-6℃植冰(人工诱导冰晶形成),然后程序冷冻仪缓慢降温至-30℃~-80℃后液氮贮存。

载杆玻璃化冷冻法与程序冷冻法对人早期胚胎冷冻复苏的效果对比发表时间：2017-06-21T16:56:26.703Z 来源：《健康世界》2017年第8期作者：潘湘阳[导读] 载杆玻璃化冷冻法对人早期胚胎冷冻复苏的效果优于程序冷冻法，可明显提升胚胎植入率与妊娠率，更值得推广。

湖南省妇幼保健院湖南长沙 410008摘要：目的：对比载杆玻璃化冷冻法与程序冷冻法对人早期胚胎冷冻复苏的效果。

方法：收集并整理人早期胚胎冷冻复苏的相关资料，根据冷冻法的不同把他们分成研究组A和研究组B，研究组A采用载杆玻璃化冷冻法，研究组B采用程序冷冻法，周期数依次为122、64个。

对比两组胚胎复苏的相关指标。

结果：研究组A的胚胎复苏率、胚胎完整率依次为97.1%、94.5%，研究组B依次为75.1%、70.8%，研究组A都比研究组B高；研究组A的胚胎丢失率的1.5%，研究组B是3.8%，研究组A比研究组B低，对比差异都较大（P＜0.05）。

研究组A 的胚胎植入率、临床妊娠率分别是29.1%、59.8%，研究组B分别是18.0%、37.1%，研究组A都比研究组B高，对比差异较大（P＜0.05）。

结论：载杆玻璃化冷冻法对人早期胚胎冷冻复苏的效果优于程序冷冻法，可明显提升胚胎植入率与妊娠率，更值得推广。

关键词：载杆玻璃化冷冻法；程序冷冻法；人早期胚胎；冷冻复苏胚胎冷冻法是辅助生殖技术的一大进步，载杆玻璃化冷冻法与程序冷冻法是现在应用最多的两种冷冻法【1】。

本研究为了进一步对比这两种胚胎冷冻法对人早期胚胎冷冻复苏的效果，收集并整理了2016年1月到12月的人早期胚胎冷冻复苏的相关资料进行回顾性分析，见下述总结汇报。

1资料与方法1.1一般资料收集并整理人早期胚胎冷冻复苏的相关资料，均为I~III级胚胎，冷冻186个周期。

病患年龄25~47岁，平均（30.6±5.1）岁；不孕时间1~8年，平均（5.3±3.2）年。

根据冷冻法的不同人早期胚胎分成研究组A和研究组B，研究组A的周期数为122个，研究组B的周期数为64个。

复苏周期单囊胚移植与双囊胚、双卵裂胚移植的临床结局比较目的探討復苏周期单囊胚移植与双囊胚、双卵裂胚移植的不同临床结局。

方法回顾性分析2016年1～12月在本中心第一次行FET，年龄≤38岁的320例患者的临床结局。

其中单囊胚组98例，双囊胚组90例，双卵裂胚组132例，比较各组患者的临床妊娠率、胚胎着床率和多胎率。

结果单囊胚组和双卵裂胚组患者的临床妊娠率均低于双囊胚组，差异有统计学意义（P＜0.05）。

单囊胚组和双囊胚组患者的胚胎着床率均显著高于双卵裂胚组，差异有统计学意义（P＜0.01）。

单囊胚组患者的多胎率显著低于双囊胚组及双卵裂胚组，差异有统计学意义（P＜0.05）。

结论对年龄≤38岁的患者，建议其第一次冻融移植周期行单囊胚移植，在显著降低多胎率的同时能够获得与双卵裂胚相似甚至更好的临床结局；不建议移植双囊胚，以避免过高的多胎率。

[Abstract]Objective To discuss the different clinical outcomes of single blastocyst transplantation，double blastocyst and double cleavage embryo transplantation.Methods The clinical outcomes of 320 patients with first implementation of FET and the age of no more than 38 years old from January to December 2016 in our center were retrospectively analyzed.All patients were divided into single blastocyst transplantation group （n=98），double blastocyst transplantation group （n=90）and double cleavage embryo transplantation group （n=132）.The clinical pregnancy rate，embryo implantation rate and multiple pregnancy rate among three groups were compared.Results The clinical pregnancy rate of the single blastocyst transplantation group and the double cleavage transplantation group were lower than the double blastocyst transplantation group，and the differences were statistically significant （P＜0.05）.The rate of embryo implantation in the single blastocyst transplantation group and the double blastocyst transplantation group were significantly higher than that in the double cleavage embryo transplantation group，and the difference was statistically significant （P＜0.01）.The multiple pregnancy rate of single blastocyst transplantation group was significantly lower than the double blastocyst transplantation group and the double cleavage embryo transplantation group，the difference was statistically significant （P＜0.05）.Conclusion For patients whose age no more than 38 years old，the first freeze-thaw transplantation cycle is recommended for single blastocyst transplantation which can obtain a similar clinical outcome or even better compared with double cleavage embryo transplantation，at the same time significantly decreases the multiple birth rate.The double blastocyst transplantation is not advisable in order to avoid too high multiple pregnancy rate.[Key words]Resuscitation cycle；Single blastocyst transplantation；Double blastocyst transplantation；Double cleavage embryo transplantation；Multiple pregnancy rate人类辅助生殖技术历经30多年的发展，为世界众多不孕不育家庭带去了福音。

广"#$2020年1月第42卷第1期93病例报告冻融移植胚胎培养第%天囊胚成功获得活产1例！阮秋燕唐秀法公方强方伟芬乃东红牛向丽(广西壮族自治区计划生育研究中心生殖医学科,南宁市530021,电子邮箱:qiuyanruan@)【摘要】目的探讨冻融移植胚胎培养第7天囊胚的移植效果及妊娠结局。

方法回顾性分析1例行第2周期体外受精胚胎移植术患者的临床资料，总结其治疗过程，并分析其移植效果及妊娠结局。

结果于单精子卵胞浆注射后第3天获得9枚优质胚胎(包括10CG21枚,7CG11枚,7CG23枚,6CG24枚)，均进行囊胚培养；胚胎培养第5天胚胎为卵裂期样胚胎，第6天形成2枚融合期胚胎，第7天形成2枚3BC囊胚，进行胚胎冷冻；女方内膜准备好后，经胚胎复苏，顺利移植，最终成功获双胎妊娠，母婴结局均良好。

结论患者进行囊胚培养时，在第5~6天未形成囊胚，可视胚胎情况将胚胎延长培养至第7天，若发育成可用囊胚则可进行冻融移植，能够获得一定概率的妊娠和活产。

【关键词】冻融囊胚移植；囊胚培养；第7天囊胚；活产；病例报告【中图分类号】R321.3【文献标识码】B DOI：10.11675/j.issn.0253-4304.2020.01.26囊胚培养技术是目前评估胚胎发育潜能较为普遍的一种方法，胚胎在培养第5~7天能够形成囊胚被视为具有较高的发育潜能［I］O发育缓慢被认为是胚胎发育潜能低下的标志之一,这可能是胚胎发育异常和非整倍体率高造成的，是胚胎植入失败的危险因素［2"3］%目前，大部分生殖中心(以下简称中心)常规选择移植或冷冻胚胎培养后第5~6天的囊胚，丢弃在第6天仍未形成可用囊胚的胚胎，较少有中心观察胚胎至第7天，第7天囊胚的临床应用价值还存在较大争议。

本文报告1例冻融移植胚胎培养第7天囊胚获得活产的病例，旨在为胚胎发育缓慢、在第5~6天未获得可移植胚胎的病例提供参考。

1资料资料1.1一般资料及病史女方32岁，男方34岁，婚后10年未孕，因女方“盆腔炎性疾病后遗症”于2017年3月在我院行辅助生殖技术助孕％女方体重指数26.22kg/m2，平素身体健康，月经规律,B超监测排卵提示正常,基础性激素检查正常。

冻融卵裂期胚胎当日解冻与提前解冻移植对临床妊娠结局的影响李维娟;李彦奇;张坤【摘要】目的探讨解冻移植周期中卵裂期胚胎当天解冻移植和提前解冻过夜培养后移植对临床妊娠结局的影响.方法回顾性分析2017年1-4月在该院生殖中心接受冻融卵裂期胚胎移植治疗的277例患者,即277个冻融卵裂期胚胎移植周期.根据解冻后胚胎培养时间分为当日解冻组(A组162个周期)和提前解冻组(B组115个周期);根据患者的年龄,A组B组分别分成3组,即A1、B1:年龄<30岁,A2、B2:年龄30～<35岁和A3、B3:年龄≥35岁,比较各组间的移植结局.结果 A组与B组临床妊娠率分别为38.27％、43.48％,着床率分别为24.68％、26.98％,差异无统计学意义(P>0.05).A3、B3分别与A1、B1,A2、B2相比,其临床妊娠率和着床率均明显降低,差异有统计学意义(P<0.05).结论冻融卵裂期胚胎提前解冻培养后再进行移植并不能改善妊娠结局,但随着女性年龄的增高,临床妊娠率和着床率均会随之下降.【期刊名称】《检验医学与临床》【年(卷),期】2018(015)021【总页数】3页(P3249-3250,3253)【关键词】冻融卵裂期胚胎;复苏;妊娠率;着床率【作者】李维娟;李彦奇;张坤【作者单位】新疆佳音医院 IVF 胚胎实验室 ,乌鲁木齐 830001;新疆佳音医院 IVF 胚胎实验室 ,乌鲁木齐 830001;新疆佳音医院 IVF 胚胎实验室 ,乌鲁木齐 830001【正文语种】中文【中图分类】R711.6冻融胚胎移植(FET)是将胚胎置于超低温的液氮(-196 ℃)中冷冻保存，并在适宜时间解冻胚胎，进行分期、分批、可多次移植的一项技术，胚胎冷冻-解冻的过程称之“冻融”。

1983年世界上首例冻融胚胎成功妊娠，1985年世界首例由FET获得的健康婴儿诞生。

目前FET技术已广泛应用于临床，并成为辅助生殖技术中不可缺少的一部分。

卵裂期胚胎和囊胚冻融移植的妊娠结局比较【摘要】目的：对比分析卵裂期胚胎以及囊胚冻融移植后的妊娠结局差异。

方法：以长沙市妇幼保健院生殖中心在2014年5月-2016年6月实施玻璃化冻融复苏移植的不孕不育患者为研究对象，结合患者冻融胚胎阶段将其分为两组（卵裂期胚胎组、囊胚组），统计评估两组患者314个周期的妊娠情况，包括临床妊娠率和胚胎着床率。

囊胚组根据移植囊胚个数分为单囊胚移植组和双囊胚移植组。

结果：卵裂胚胎组与囊胚组患者自身年龄、不孕时间以及HCG日子宫内膜厚度、平均胚胎移植数量等均无显著性差异（P＜0.05）。

囊胚组患者复苏率、流产率、异位妊娠率等与卵裂期胚胎组患者相比均无显著性差异（P＞0.05），而囊胚组患者临床妊娠率、胚胎种植率与卵裂胚胎组患者相比均存在显著性差异且均高于卵裂胚胎组（P＜0.05）。

单囊胚移植组移植胚胎数少于双囊胚移植组，多胎率低于双囊胚移植组，均存在显著性差异（P＜0.05）。

结论：囊胚冻融移植的妊娠结局优于卵裂期胚胎，单囊胚移植保证了患者妊娠率时，也有效降低了多胎率。

【关键词】卵裂期胚胎；囊胚；玻璃化冷冻在体外受精－胚胎移植（IVF-ET）过程中，冻融胚胎移植是辅助生殖技术的重要组成部分［1］。

冻融胚胎移植在实践应用过程中对促进患者胚胎利用、临床妊娠等均有良好效果，同时是降低新鲜周期控制性超排卵所导致的并发症发生率的重要措施。

而玻璃冷冻技术是当前临床公认的最有效、最稳定的胚胎冷冻方法之一，是卵裂期胚胎及囊胚冷冻过程中的主要方法。

基于以上，本次研究特地以不孕不育患者为研究对象，分析冻融单囊胚和双囊胚移植的妊娠结局差异。

1、资料与方法1.1一般资料：以长沙市妇幼保健院生殖中心在2014年5月-2016年6月实施玻璃化冻融复苏移植的不孕不育患者为研究对象，统计评估两组患者314个周期的妊娠情况。

根据移植冻融胚胎类型分为2组：卵裂期胚胎组：冻融卵裂期胚胎移植，共213周期，囊胚组：冻融囊胚移植，共102个周期。

冻融卵裂期优质胚胎过夜培养后形成桑椹胚对临床妊娠结局的影响雷鑫;冯晓琴;任文娟【期刊名称】《生殖医学杂志》【年(卷),期】2022(31)4【摘要】目的探讨冻融卵裂期优质胚胎过夜培养后形成桑椹胚对临床妊娠结局的影响。

方法回顾性分析2014年1月至2019年12月在本中心行冷冻复苏双胚胎移植的311个周期。

根据过夜培养后胚胎卵裂球是否分裂生长分为2组:A组(生长组,n=275)和B组(未生长组,n=36);并根据冻融优质胚胎过夜培养后是否发育成桑椹胚以及达到桑椹胚的胚胎个数将A组分为A0组(均未发育为桑椹胚,n=82)、A1组(1枚胚胎达到桑椹胚,n=105)和A2组(2枚胚胎均达到桑椹胚,n=88)。

比较各组移植后的临床妊娠结局。

结果纳入的311个周期中,临床妊娠周期数为177个,临床妊娠率56.9%。

A组的胚胎种植率(40.7%vs.20.8%)、临床妊娠率(59.6%vs.36.1%)以及活产率(50.2%vs.30.6%)均显著高于B组(P<0.05)。

亚组分析中,相较于无桑椹胚形成的A0组,A1组和A2组胚胎种植率(41.9%,51.7%vs.27.4%)、临床妊娠率(61.0%,70.5%vs.46.3%)、多胎妊娠率(37.5%,46.8%vs.18.4%)以及活产率(52.4%,59.1%vs.37.8%)均显著升高(P<0.05);A2组多胎妊娠率高于A1组(46.8%vs.37.5%),但无显著差异(P>0.05);3个亚组间流产率、早期流产率以及早产率均无显著性差异(P>0.05)。

结论冻融卵裂期优质胚胎过夜培养后发育为桑椹胚,预示有更好的临床妊娠结局;复苏2枚冻融优质胚胎过夜培养后均发育为桑椹胚者,可以考虑选择性单胚胎移植,以减少多胎妊娠发生。

【总页数】5页(P453-457)【作者】雷鑫;冯晓琴;任文娟【作者单位】山西省人民医院生殖医学科【正文语种】中文【中图分类】R711.6【相关文献】1.冻融卵裂期胚胎移植中过夜培养对临床妊娠结局的影响2.过夜培养对早卵裂期冻融胚胎移植妊娠结局的影响3.非优良胚胎形成的囊胚与卵裂期优良胚胎的冻融胚胎移植的临床结局比较4.胚胎冻融对卵裂期行植入前遗传学诊断或筛查后可移植胚胎临床结局的影响5.冻融卵裂期优质胚胎发育速度对临床妊娠结局的影响因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

不同胚胎冷冻方法对人类早期胚胎解冻后的复苏效果及临床结局的影响王星星;江莉;毛文琪;张季阳;翟丹梅;杭馥;陆丹【摘要】目的比较玻璃化冷冻与程序化冷冻对人类早期胚胎解冻后复苏效果及临床结局的影响.方法辅助生殖技术获取的剩余可利用人类胚胎2 884枚,其中采用玻璃化冷冻复苏666个周期,解冻胚胎1 516枚、复苏1 383枚、移植胚胎1 375枚;程序化冷冻复苏506个周期,解冻胚胎1 368枚、复苏1 090枚、移植1 077枚.比较两种方法的复苏效果及临床结局.结果玻璃化冷冻组胚胎复苏率、胚胎完整率分别为92.02％、92.11％,高于程序化冷冻组的79.68％、69.63％(P＜0.05);两组种植率、临床妊娠率、周期取消率、多胎妊娠率、早期流产率、新生儿胎龄、早产率、新生儿出生体重、出生缺陷率比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论玻璃化冷冻较程序化冷冻有更高的胚胎复苏率及胚胎完整率,胚胎利用率高,两种冷冻方法的临床结局相似,适用于人类胚胎的冷冻.【期刊名称】《广西医学》【年(卷),期】2016(038)002【总页数】3页(P175-177)【关键词】胚胎冷冻;玻璃化冷冻;程序化冷冻;胚胎移植;妊娠结局;复苏【作者】王星星;江莉;毛文琪;张季阳;翟丹梅;杭馥;陆丹【作者单位】广西医科大学第一附属医院生殖中心,南宁市530021;广西医科大学第一附属医院生殖中心,南宁市530021;广西医科大学第一附属医院生殖中心,南宁市530021;广西医科大学第一附属医院生殖中心,南宁市530021;广西医科大学第一附属医院生殖中心,南宁市530021;广西医科大学第一附属医院生殖中心,南宁市530021;广西医科大学第一附属医院生殖中心,南宁市530021【正文语种】中文【中图分类】R711.6在人类辅助生殖技术中，胚胎冷冻技术旨在经过冷冻和复苏后，胚胎仍能保持原有的生物学活性。

胚胎冷冻技术提高了每一卵巢刺激周期累积妊娠率，减少多胎妊娠率，预防卵巢过度刺激综合征。

山西医科大学学报，2020年-月，第51卷第-期-1967-囊胚解冻移植周期中胚胎形态学评分对临床妊娠结局的影响王瑾，吕睿，陈海霞，穆晓环，白晓红*（天津医科大学总医院妇产科生殖医学中心，天津市女性生殖健康与优生实验室,天津300057;*通讯作者,E-mail:bxPj j@）摘要：目的探讨囊胚解冻移植中第3天（D3）卵裂期和囊胚期形态学评分对临床妊娠结局的影响。

方法回顾性分析2012年1月至2020年4月在天津医科大学总医院生殖医学中心行647个解冻移植周期，移植D3优质胚胎为D3组（478例）,移植囊胚共-2例，其中D3形态学高评分为HD3B组（58例），低评分为LD3B组（66例/根据囊胚形态学评分，从高到低将HD3B组和LD3B组分为4个亚组（H1C和L1C）。

比较D3组、HD3B组和LD3B组解冻周期的临床基本情况及种植率和临床妊娠率等指标。

结果新鲜周期—3形态学高评分的胚胎囊胚形成率为60.51%,低评分的胚胎为14-74%；解冻移植周期中D3组种植率、临床妊娠率、流产率分别为36.20%,48.-%,2630%；HD3B组分别为64.52%,63.79%,—.22%；LD3B组分别为5/-%,67.73%,-.79%。

LD3B组的种植率明显高于D3组,且差异有统计学意义（P<0.01-,LD3B组的临床妊娠率与HD3B组相比差异无统计学意义（P>0.05）。

HD3B组和LD3B组的4个亚组间比较种植率、临床妊娠率和流产率差异无统计学意义（P>0.05）。

结论D3形态学评分低的胚胎仍有行囊胚培养的价值，所形成的囊胚在解冻移植周期中仍然有较高的种植率和妊娠率。

关键词：囊胚；解冻移植；形态学评分；妊娠结局中图分类号：R714.c文献标志码：A文章编号：1097-666（2929）12-1497-06DOI：19.13753/j.Rw.1097-666.2929.12.927Effect of embryo morphology scare on clinicai preynancy outcome during thawed blastocyst transfee cycleWANG Jin,LU Rui,CHEN Haixia,MU Xiaohuan,BAI Xiaohong*(Reprofuctioo皿€0£Centee ef Departmegt sf Gynecology ang ObstePiot,Tiatgin Ke,Laloratoro of Femaie Repofucme Health ang Eugeniat,Gnerai Hospital of Tianjin MePical UniversPh,Tiarjin 330052,China；'i Correspogging o I ov,E-mail:6xhjj@)Abstract:ObjePhe To explore the inUueuco of morpholocicai scores of D3cleavaye stay”and blashcyst stay”on clinical preguauch ochome in the blastocyst thawing cycle.Methors A Ptai of647thaweh transplanWhon cycles were mtospecthely analyzeX in the Rep/Cuc/ve Mehicine Ceuter of the Geuerai Hospimi of TPujiu MePical U/iveoity from Janua/20—to Ap/i2020.The paheuts were divibeP into day3(D3)cleavaye-sWye emb/os as D3youp(g=478-,blastocysts from high quality emb/os on D3as HD3B yrocu(g=53)and blashcysts from poor qua/tp emb/os on D3as LD3B ymup(g二66).According to the qua/tp of blashcysts, HD3B yrocp and LD3B ymup were divideO into4suUymcps(H1C and L1C).The basic information,the implanW/on rate,and the clinical preguauch rate were compareh betweeu the three y/cps.Results The rate of blashcyst formation was60.51%for high qua-/X emb/os on D3and14.74%for the poor quahty emb/os.The implanWhon rate,the clinical preguauch rate and the miscar/aye rate per transfer were36.20%,48.—%and6634%in D3ymup,64.52%,63.67%and19.22%in HD3B ymup,and59.—%, 57.78%and13.29%in LD3B yrocp,ospec/vee.The implanW/on rate was significan/y higher in LD3B yrocp than in D3yrocp (P<0.0—.The clinical preguanch rate was uot significan/y diRereut betweeu LD3B ymup and D3ymcp(P<0.05).The ixpeuto-Pon rate,the clinical preyuauch rate and the miscar/aye rate were uot significan/y diRereut betweeu four suUyrocps in HD3B yrocp and LD3B ymcp(P>0.05).Conchior Poor quahty embryos on D3a-cleavaye staye have value to be cbltureh to blashcysts because of higher implanWhon rate and clinical preguauch rate.Key words:blashcyst,thawing tonspentathn,morpholoyy score；clinical preguauch ochome随着辅助生殖技术的进步、冷冻保存技术的改进以及胚胎移植时间的选择，使得过去近22年来冷冻胚胎移植的使用大大增加［］。