发酵菌种的制备

①首先将乳酸菌的浓缩培养基加适量的水煮沸5分钟以上（大家记住一定要煮沸5分钟以上），杀灭其中所有的微生物。

如果不到5分钟，没有煮沸，那么做出来的杂菌可能就比较多。

①补充无菌水到330kg，或者做直接的产品，那你就直接补到990kg。

①加入菌种开始培养，培养的过程把培养液的温度保持在35-40①，建议直接在温度控制开关上把它调整到38①，这是最合适的。

④在38①恒温条件下培养36-48个小时，基本上可以完成培养。

如果你要做稀释的，那在这个时候再加入660公斤无菌水就可成为乳酸菌的成品，灌装或者直接使用。

发酵菌的制作方法
发酵菌（也称为酵母菌或发酵剂）可以通过以下步骤来制作：
1. 准备食材：选用高质量的发酵菌菌种，如干酵母或活性酵母。

同时准备适量的营养基质，如糖、面粉、水等。

2. 培养基的制备：按照菌种所需的营养要求制备培养基。

一般的培养基可以使用面粉、水、糖混合而成。

具体的比例可以参考菌种的使用说明。

3. 混合菌种和培养基：将选用的发酵菌菌种加入到制备好的培养基中。

4. 培养发酵菌：将混合好的菌种和培养基放入一个温度适宜的环境，一般在28-32摄氏度之间。

同时保持适当的湿度和通风条件。

5. 观察生长情况：注意观察发酵菌的生长情况，包括菌体的形态、色泽和菌液的气味等。

6. 收获发酵菌：根据需要，可以在发酵菌达到一定的生长量后进行收获。

可以将生长好的发酵菌过滤出来，或者直接使用整体菌体。

以上是制作发酵菌的一般步骤，具体的制作方法可能会因不同的发酵菌种和用途而有所不同。

在进行发酵菌的制作过程中，应注意卫生和操作的规范性，以确保
发酵菌的质量和安全性。

另外，特殊的发酵菌种或应用需要专门的培养条件和方法，请根据具体的要求进行操作。

青霉素的发酵生产流程一、菌种选育与保存青霉素的生产首先始于优良菌种的选育。

选育出的高产、稳定且遗传性能好的菌种是青霉素生产的基础。

一旦获得理想菌种，必须妥善保存以防退化。

常用的保存方法包括冷冻干燥、斜面低温保藏和砂土管保藏等。

二、生产菌活化在进行大规模发酵生产前，需要对保存的菌种进行活化。

活化过程通常在适宜的培养基和温度下进行，目的是使菌种从休眠状态复苏，恢复其生理活性。

三、孢子制备活化后的菌种进一步制备成孢子悬液。

孢子作为青霉素发酵的种子，其质量直接影响发酵效果。

孢子制备过程中要注意控制营养条件、温度和湿度等，以获得数量多、质量好的孢子。

四、种子制备种子制备是将孢子接入适宜的培养基中，进行一定时间的培养，使其繁殖成足够数量的菌丝体。

这一过程中要严格控制培养条件，如温度、pH值、通气量等，以确保菌丝体健康、生长迅速。

五、发酵培养发酵培养是青霉素生产的核心环节。

将种子接入发酵罐中，在严格控制的培养条件下进行大规模的培养。

通过调节培养基成分、温度、pH值、溶氧量等参数，促进青霉素的合成和积累。

六、发酵液预处理发酵结束后，发酵液需要进行预处理，以去除其中的杂质和固体颗粒，为后续的萃取与分离创造条件。

预处理通常包括离心、过滤、沉淀等步骤。

七、萃取与分离萃取与分离是将青霉素从发酵液中提取出来的关键步骤。

常用的萃取剂有醋酸丁酯、正丁醇等。

通过萃取，青霉素可以被转移到有机相中，再经过分离纯化得到较为纯净的青霉素。

八、脱色与结晶经过萃取与分离后得到的青霉素溶液需要进行脱色处理，以去除其中的有色杂质。

脱色后，再通过结晶操作，使青霉素以晶体的形式析出，便于后续的干燥和包装。

九、成品检验与包装最后，对结晶得到的青霉素进行质量检验，包括纯度、活性等指标。

合格的青霉素产品进行干燥、粉碎后，进行包装。

包装材料要求无菌、防潮、避光，以保证青霉素在存储和运输过程中的稳定性和有效性。

整个青霉素的发酵生产流程需要严格控制各个环节的条件和操作，以确保最终产品的质量和产量。

发酵菌种：菌种建库流程及管理安全性问题1. 菌种建库流程1.1菌种筛选菌种筛选是微生物菌种建库的第一步，其目的是从自然环境、生物体或实验室保存的菌种中，筛选出具有特定生理生化特征或能够合成特定代谢产物的菌株。

这一过程包括样品采集、菌种分离、初筛和复筛等环节。

1. 样品采集：从目标环境（如土壤、水、空气）或目标生物体（如植物、动物）中采集样品。

2. 菌种分离：将采集的样品经过适当的处理（如稀释、培养、纯化），分离得到单一菌株。

3. 初筛：通过生理生化实验，对分离得到的菌株进行初步筛选，以选择具有特定特征的菌株。

4. 复筛：对初筛中具有特定特征的菌株进行进一步的筛选，以确定最佳菌株。

1.2菌种鉴定在筛选出具有特定特征的菌株后，需要对菌种进行鉴定，以确定其分类学地位和生物学特性。

菌种鉴定主要包括形态学鉴定、生理生化鉴定和分子生物学鉴定等方法。

1. 形态学鉴定：观察菌株的形态、大小、结构、染色等特征，以确定其分类学地位。

2. 生理生化鉴定：对菌株进行一系列生理生化实验，如对碳源、氮源的利用，pH、温度等生长条件的适应性，以及代谢产物等的分析，以了解其生物学特性。

3. 分子生物学鉴定：通过基因序列测定、多态性分析等方法，对菌株进行分子水平的鉴定，以更准确地区分不同微生物物种。

1.3基因组测序基因组测序是微生物菌种建库的重要环节，其目的是获得菌株的全部基因组序列，从而为后续的基因组分析提供基础数据。

基因组测序一般采用第二代测序技术（如Illumina HiSeq、MiSeq等）或第三代测序技术（如PacBio RS II等）。

1. 基因组提取：从菌株中提取高质量的基因组DNA。

2. 测序建库：将基因组DNA构建成适合测序的文库。

3. 测序：将文库上机进行高通量测序。

4. 质控：对测序得到的原始数据进行质量控制，去除低质量序列和噪声。

5. 拼接：将高质量的序列拼接成完整的基因组序列。

1.4数据库构建数据库是微生物菌种建库的核心部分，其目的是将菌株的基因组数据存储起来，以便后续的数据分析和挖掘。

枯草芽孢杆菌的发酵枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）是一种广泛存在于自然环境中的厌氧菌，其代谢能力强，能够在不同的温度和pH值下生长并在发酵产生多种有益的代谢产物。

枯草芽孢杆菌的发酵技术具有操作简单、生长迅速、有益代谢产物多等优点，成为目前工业上比较常用的微生物发酵技术之一。

下面将介绍枯草芽孢杆菌的发酵及其应用方面的情况。

枯草芽孢杆菌的发酵过程需要一种含有能量、有机物质和无机盐等基本的营养物质的培养基。

其中碳源可为糖类、醇类、油脂以及淀粉等，氮源可为氨基酸、蛋白质等，而微量元素例如镁、钾、钙、铁、锌、硫等的添加也十分重要。

根据细胞生长的需要，在培养基中添加不同的诱导剂，如硫酸亚铁、纤维素、海藻酸等，可促进枯草芽孢杆菌发酵产生酶和多糖等有益代谢产物。

同时添加辅助营养因子如维生素、核酸、脂类和氨基酸等也有利于菌体的生长。

枯草芽孢杆菌的发酵过程一般可分为以下几个步骤：1. 发酵菌种的制备：从保存好的枯草芽孢杆菌菌株中挑选一株适宜的为发酵菌种，通过预培养、扩大培养等步骤得到高活力的发酵菌种。

2. 发酵罐内的生长：高活力的发酵菌种被接种到发酵罐内的含有营养物质的培养基中，通过连续搅拌和恒温等方式进行发酵罐内的生长。

在此过程中，要注意控制罐内的氧气和水分等因素，并根据菌株的特性选择适宜的温度和pH值等条件，确保菌体的生长和代谢过程可以连续持续。

3. 代谢产物的制备：随着菌体的生长，枯草芽孢杆菌将产生一系列的代谢产物，包括酶类、多糖、抗生素、代谢物以及酸等。

其中酶类和多糖等有益代谢产物有广泛的应用前景，因此在发酵过程中需要采用适当的条件刺激和引导，以更好地促进糖基化、多糖生成等反应。

4. 收获和处理：发酵过程通常需要持续数日至数周不等，当代谢产物达到预期质量和产量后，需要将发酵罐内的培养液收获出来，通过中和、破细胞、浓缩等方式进行处理，得到纯净的有益代谢产物。

枯草芽孢杆菌具有多种的应用前景，如在食品、饲料、医药、环境保护等诸多领域中均有广泛的应用。

菌种选育发酵菌种的自然选育发酵菌种的自然选育一、实验目的1. 学习从自然环境中分离工业微生物菌株的方法。

2. 熟悉无菌操作技术。

二、实验原理土壤是微生物是微生物生长的大本营，水体是微生物生长的第二场所。

自然界中微生物种类繁多，而且都是混在一起的，要获得发酵菌株，首先必须把它们从混杂的微生物群体中分离出来。

分离微生物菌株最基本的方法就是稀释法。

将样品放于无菌水中，通过振荡，使微生物悬浮于液体中，然后静止一段时间，由于样品沉降较快，而微生物细胞体积小沉降慢，会较长时间悬浮在液体中。

通过对微生物细胞悬浮液的进一步稀释和选择性培养，就可以分离出我们需要的目的菌株。

基本特征：⑴能在廉价原料制成的培养基上迅速生长，并能生成较多的发酵产物。

⑵培养条件如温度、渗透压等易控制⑶抗杂菌和抗噬菌体能力较强。

⑷遗传稳定性高、不易退化。

⑸不产生有害的生理活性物质或毒素（食品或医药微生物菌株）。

本实验以土壤或淡水微生物的分离为例，介绍发酵菌株的自然选育方法，若要筛选海洋微生物，在配制培养基及无菌水时应用陈海水代替蒸馏水和生理盐水，其他操作都一样。

三、实验器材与试剂1. 样品土壤、水、苹果2. 培养基⑴Zobell 2216E 琼脂培养基：蛋白胨5g，酵母膏1g，FePO40.01g，NaCl 10g，琼脂20g，加水至1000mL，pH 7.2~7.4。

⑵营养琼脂培养基:蛋白胨10g，牛肉膏3g，NaCl 5g，琼脂20g，加水至1000mL，pH7.2~7.4。

⑶高氏一号培养基：可溶性淀粉20g，KNO3 1g，K2HPO40.5g，MgSO4·7H2O 0.5g，NaCl 0.5g，FeSO4·7H2O 0.01g，琼脂20g，加水至1000mL，pH 7.2~7.4。

⑷苹果培养基:马铃薯（去皮）200g，煮沸20 min后过滤，滤液中加蔗糖20 g和琼脂20 g，补水至1000mL，pH自然。

若要筛选海洋微生物，上述培养基用陈海水（或2%海盐）配制。

不同食用菌种类的液体菌种发酵种配方（1）平菇配方：马铃薯100克，红糖15克，葡萄糖10克，麦麸30克，蛋白胨1.5克，磷酸二氢钾1.5克，硫酸镁0.75克，维生素B11片，聚氧丙稀甘油0.3毫升，pH 值自然；（2）金针菇配方：马铃薯100克，红糖15克，葡萄糖10克，麦麸40克，蛋白胨2. 0克，磷酸二氢钾2.0克，硫酸镁1.0克，维生素B11片，聚氧丙稀甘油0.3毫升，pH 值自然；（3）白灵菇配方：马铃薯100克，红糖15克，葡萄糖10克，麦麸40克，蛋白胨2. 0克，磷酸二氢钾2.0克，硫酸镁1.0克，维生素B11片，聚氧丙稀甘油0.3毫升，pH 值自然；（4）香菇配方：马铃薯100克，红糖15克，葡萄糖10克，麦麸40克，蛋白胨2.0克，磷酸二氢钾2.0克，硫酸镁1.0克，维生素B11片，聚氧丙稀甘油0.3毫升，pH 值自然；（5）杏鲍菇配方：马铃薯100克，红糖15克，葡萄糖10克，麦麸40克，蛋白胨2. 0克，磷酸二氢钾2.0克，硫酸镁1.0克，维生素B11片，聚氧丙稀甘油0.3毫升，pH 值自然；（6）榆黄蘑配方：马铃薯100克，红糖12克，葡萄糖10克，麦麸40克，蛋白胨2. 0克，磷酸二氢钾1.5克，硫酸镁0.75克，维生素B11片，聚氧丙稀甘油0.3毫升，p H值自然；（7）茶新菇配方：马铃薯100克，红糖15克，葡萄糖10克，麦麸50克，蛋白胨2. 5克，磷酸二氢钾2.0克，硫酸镁1.0克，维生素B11片，聚氧丙稀甘油0.3毫升，pH 值自然；（8）鲍鱼菇配方：马铃薯100克，红糖15克，葡萄糖10克，麦麸40克，蛋白胨2. 0克，磷酸二氢钾2.0克，硫酸镁1.0克，维生素B11片，聚氧丙稀甘油0.3毫升，pH 值自然；（9）鸡腿菇配方：马铃薯100克，红糖12克，葡萄糖12克，麦麸40克，蛋白胨2. 0克，磷酸二氢钾2.0克，硫酸镁1.0克，维生素B11片，聚氧丙稀甘油0.3毫升，pH 值自然；（10）灵芝配方：马铃薯100克，红糖12克，葡萄糖12克，麦麸40克，蛋白胨2.0克，磷酸二氢钾2.0克，硫酸镁1.0，维生素B11片，聚氧丙稀甘油0.3毫升，pH值自然；（11）黑木耳配方：马铃薯100克，红糖15克，葡萄糖10克，麦麸40克，蛋白胨2. 0克，磷酸二氢钾2.0克，硫酸镁1.0克，维生素B11片，聚氧丙稀甘油0.3毫升，pH 值自然；（12）猴头菇配方：马铃薯100克，红糖15克，葡萄糖10克，麦麸45克，蛋白胨2. 5克，磷酸二氢钾2.0克，硫酸镁1.0克，维生素B11片，聚氧丙稀甘油0.3毫升，pH 值自然；（13）滑菇配方：马铃薯100克，红糖15克，葡萄糖12克，麦麸50克，蛋白胨2.5克，磷酸二氢钾2.0克，硫酸镁1.0克，维生素B11片，聚氧丙稀甘油0.3毫升，pH 值自然；（14）双孢菇配方：马铃薯100克，红糖15克，葡萄糖10克，麦麸50克，蛋白胨2. 0克，酵母膏1.0克，磷酸二氢钾2.0克，硫酸镁1.0克，维生素B11片，聚氧丙稀甘油0.3毫升，pH值自然；（15）灰树花配方：马铃薯100克，红糖15克，葡萄糖15克，麦麸45克，蛋白胨3. 0克，磷酸二氢钾2.0克，硫酸镁1.0克，维生素B11片，聚氧丙稀甘油0.3毫升，pH 值自然；（16）姬松茸配方：马铃薯100克，红糖13克，葡萄糖13克，麦麸50克，蛋白胨1.0克，酵母膏1.5克，磷酸二氢钾2.0克，硫酸镁1.0克，维生素B11片，聚氧丙稀甘油0.3毫升，pH值自然。