人教版高中生物选修一专题2《微生物的培养与应用》word导学案
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专题2 微生物的培养与应用
尿素分解菌和纤维素分解菌的分离与鉴定的比较
分离选择条件鉴定方
法现象
鉴定原理步骤差异
尿素分解菌尿素为
唯一氮
源
培养基中加入
酚红指示剂,
变红色
细菌等微生物生成脲酶,
使尿素中肽键断裂产生
NH3,使pH升高,加入酚
红变红色
土壤取样→制备培养
基→样品梯度稀释→
涂布平板→培养观察
纤维素分解菌纤维素
为唯一
碳源
在以CMCNa
为碳源的培养
基上,应用刚
果红染色法,
出现透明圈
分解纤维素的微生物产
生纤维素酶,将纤维素分
解为纤维二糖或葡萄糖,
使纤维素—刚果红复合
物降解而出现透明圈
土壤取样→制备培养
基→选择培养→富集
培养→梯度稀释→涂
布培养→刚果红染色
法→挑取菌落→进一
步鉴定。
生物技术实践专题2微生物的培养的应用考纲要求(1)微生物的分离和培养(2)某种微生物数量的测定(3)培养基对微生物的选择作用(4)利用微生物发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用课题1 微生物的实验室培养一、基础知识:(一)培养基概念:按照微生物对的不同需求,配制出供其的营养基质——培养基。
成分:、、、无机盐有的有特殊要求:、特殊物质、氧气例如,培养乳酸杆菌加,培养霉菌PH 性,细菌性或微性,培养厌氧微生物要(二)无菌技术1、无菌技术是围绕什么展开的?包括哪些方面?避免污染主要包括以下几个方面:(1) 空间、衣着、手,和。
(2) 器皿、接种用具和培养基等。
(3) 实验操作在酒精灯附近进行。
(4) 已灭菌的材料用具与周围物品。
2、消毒和灭菌消毒:用较为的物理或化学方法物体表面或内部的微生物(不包括芽孢和孢子)。
灭菌:用强烈的理化因素物体内外所的微生物,包括芽孢和孢子。
【旁栏思考】1、无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外,还有什么目的?2、请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。
如果需要,请选择合适的方法。
(1)培养基与培养(2)玻棒、试管、烧瓶和吸管(3)实验操作者的双手(1)、(2)需要;(3)需要。
二、实验操作:用牛肉膏蛋白胨固体培养基进行大肠杆菌的纯化培养。
(一)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基1、计算2、称量3、溶化4、灭菌:培养基放入锥形瓶,塞上棉花塞,包上牛皮纸,锅中灭菌培养皿用箱灭菌。
5、倒平板:培养基冷却到℃左右,在酒精灯附近倒平板。
2d后观察平板,无杂菌污染才可用来接种.1、培养基灭菌后,需冷却到50 ℃左右时,才能用来倒平板。
你用什么办法来估计培养基的温度?用手触摸锥形瓶,刚刚时2、为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰?防止瓶口的污染3、平板冷凝后,为什么要将平板倒置?使更好挥发,防止皿盖上的水珠落入。
4.在倒平板的过程中,如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位,这个平板还能用来培养微生物吗?为什么?空气中的可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生,最好不用(二)纯化大肠杆菌微生物的接种方法:平板划线法:用接种环在固体培养基表面划线,将聚集的菌种逐步分散,分离到个细胞繁殖的个菌落.稀释涂布平板法:【问题讨论】1、为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环?在划线操作结束时,仍然需要灼烧接种环吗?为什么?第一步:每次划线前:结束时:2、在灼烧接种环之后,为什么要等其冷却后再进行划线?3、在作第二次以及其后的划线操作时,为什么总是从上一次划线的末端开始划线?使菌数随划线次数的增加而,得到个细菌繁殖而来的菌落。
课题:生物选修1专题1基因工程导学案I 编写人: 审核组长: 审核主任:I 温馨寄语: I 【学习目标】11.对科学实验设计进行严谨分析,体验发现生长索的过程、领会其中的科学方法 |2.说出胚芽鞘的生长索的产生部位、运输部位、作用部位 13.槪述植物生长索的产生、运输方式和分布;植物激索的槪念 |4.概述植物生长索的生理作用,通过实例理解生长素作用的两重性 | 5. 了解生长累及类似物在农业生产上的应用〔6.尝试设讣实验探索生长索类似物促进生根的最适浓度。
|7.列举其他植物激素 8.评述植物生长调节剂的作用 I 【知识梳理】| (一)生长素的发现过程 !1.生长素的发现过程结论1、 感受光刺激的部位是 _______C2、 植物向光性的原因是 _______结论:胚芽鞘尖端产生的可以透过琼脂片向下传递。
结论:胚芽鞘弯曲的原因是|拜尔结论:温特的实验进一步证明,造 成胚芽鞘弯曲的化学物质是厂产生生长素部位:自变量①与②结果达尔文③与④詹森n …U③F f ①感光部位: _____________________________________胚芽鞘生长索作用部位:_________________________________________弯曲牛长部位: _______________________________________主长素的成分是: ___________________________ (简写:________________________ );丄光性的原因: ________________________________________________________________________________ 外因: _______________________ —►内因:生长素分布:________________ —►结果:生长状况:____________________________________________________________________ —>植物向光弯曲生长2.___________________________________________________________ 植物激素的概念:在植物体内合成的,从__________________________ 部位运输到 ___________________________ 部位, 并且对植物的生长发育有 ____________________________ 影响的 _________________________ 有机物,统称为植物激素。
高中生物专题二微生物的实验室培养导学案新人教版选修1微生物的培养与应用课题:微生物的实验室培养【本节目标解读】【课程目标】了解培养基的基础知识,进行微生物培养和无菌技术的操作。
【课题重点】无菌技术的操作【课题难点】无菌技术的操作【基础知识】一、培养基1、概念:人们按照微生物对的不同需求,配制出供其的营养基质叫培养基。
可分为培养基和培养基。
2、分类方式:分类标准类型备注培养基的培养基、培养基和半固体培养基培养基中加入凝固剂(有琼脂、明胶、硅胶等)即为培养基。
培养基实验室中最常用的培养基之一微生物的种类细菌培养基、放线菌培养基、酵母菌培养基和霉菌培养培养基的特殊用途基础培养基、加富培养基、选择培养基和鉴别培养基选择培养基:允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。
鉴别培养基:是在培养基中加入某种试剂或化学药品,使培养后会发生某种变化,从而区别不同类型的微生物。
如鉴别大肠杆菌的伊红美蓝培养基,鉴别纤维素分解菌的刚果红培养基。
3、营养构成:各种培养基一般都含有、、和,此外还要满足微生物生长对、以及的要求。
4、培养乳酸杆菌时需在培养基中添加、培养霉菌时需将培养基PH调至、培养细菌时需将PH调至、培养厌氧微生物则需提供条件。
5、E、coli指。
〖思考1〗从细胞的化学元素组成来看,培养基中为什么都含有这些营养成分?【补充】碳源:如CO2、糖类、脂肪酸等有机物,构成微生物的结构物质和分泌物,并提供能量。
氮源:如N2、氨盐、硝酸盐、牛肉膏、蛋白胨等,主要用来合成蛋白质、核酸及含氮代谢物等。
含有C、H、O、N的化合物既可以作为碳源,又可以作为氮源,如氨基酸等。
二、无菌技术:1、关键防止的入侵。
围绕如何避免杂菌的污染展开。
2、无菌技术(1)对实验操作的、操作者的和进行。
(2)将用于微生物培养的、和等器具进行。
(3)为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在附近进行。
(4)实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与相接触。
专题2 微生物的培养与应用课题1 微生物的实验室培养教学准备1. 教学目标1.1 知识与技能:了解有关培养基的基础知识;掌握培养基的分类、成分及用途,无菌技术等基本操作技术。
1.2过程与方法:分析实验思路的确定和形成的原因,分析实验流程,对比前面的实验设计,归纳共性,分析差异,增加印象。
1.3情感、态度与价值观:形成勇于实践、严谨求实的科学态度和科学精神。
2. 教学重点/难点2.1 教学重点:培养基的分类、成分及用途及无菌技术的操作2.2教学难点:无菌技术的操作3. 教学用具多媒体、板书4. 标签教学过程引入新课在传统发酵技术的应用中,都利用了微生物的发酵作用,其中的微生物来自于制作过程中的自然感染。
而在工业化生产中,为了提高发酵的质量,需要获得优良菌种,并保持发酵菌种的纯度。
这就要涉及到微生物的培养、分离、鉴别等基本技术。
现在我们开始学习微生物的培养和应用专题。
课题背景到目前为止,几十项Nobel生理学和医学奖,化学奖都与微生物学有关。
微生物基础知识:微生物的分类见课件。
进行新课1.微生物基础知识微生物包括五类:病毒、细菌、放线菌、真菌、原生动物特点:结构都相当简单,个体多数十分微小.通常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到,有的甚至没有细胞结构.且体内一般不含有叶绿素.不能进行光合作用.1.培养基培养基(培养液)是由人工方法配制而成的,专供微生物生长繁殖使用的混合营养液。
1.1培养基的类型和用途(1)按物理状态来分:培养基可分为固体培养基和液体培养基。
其中固体培养基用于菌种分离、鉴定菌落等。
(2)按功能来分,可分为选择培养基和鉴别培养基。
(3)按成分来分,可分为天然培养基和合成培养基。
1.1.1按物理状态来分1.液体培养基:增菌2.固体培养基:菌落,菌苔纯化,增菌3.半固体培养基:半固体培养基:动力检测,保种(可用于观察微生物的运动,保存菌种)思考:琼脂的来自哪种生物?从红藻中提取的化学成分是什么?多糖在配制培养基中有什么用途?用作为凝固剂1.1.2按功能来分1.选择培养基:回答下列培养基可以分离获得哪种微生物或细胞?加入青霉素的培养基:分离酵母菌、霉菌等真菌加入高浓度食盐的培养基:分离金黄色葡萄球菌不加氮源的无氮培养基: 分离固氮菌不加含碳有机物的无碳培养基:分离自养型微生物加入青霉素等抗生素的培养基: 分离导入了目的基因的受体细胞加入氨基喋呤、次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷的培养基:分离杂交瘤细胞2. 鉴别培养基:回答下列培养基可以鉴别哪种微生物?加入伊红美蓝的培养基:鉴别大肠杆菌加入尿素酚红的培养基:鉴别尿素分解菌3.用途:选择培养基:筛选并选择培养某种微生物鉴别培养基: 用来鉴别某种微生物的存在1.1.3按成分来分1.合成培养基:根据细胞生存所需物质的种类和数量,用人工方法模拟合成的。
《微生物的培养与应用》导学案含教学反思案例说课稿人教版高中生物选修一专题2微生物的培养与应用第5课时微生物的实验室培养目标导航1.了解有关培养基的基础知识,掌握无菌操作技术的有关内容。
2.了解消毒和灭菌常用的方法及二者的区别。
3.学会以大肠杆菌为材料进行微生物培养与分离纯化的方法。
一、培养基与无菌技术1.培养基(1)概念:人们按照微生物对________________的不同需求,配制出供其________________的________________。
(2)成分:一般含有______、________、________、________,此外还要满足微生物对__________________(即生长因子)、________以及氧气的需求。
病毒的是活鸡胚。
2.无菌技术(1)概念:防止一切外来杂菌的侵入,并保持灭菌物品及无菌区域不再被污染的方法,称为无菌技术。
注意在微生物的实验室培养中,无菌技术的核心是________________,________________。
(2)无菌技术的具体内容①对实验操作的________、操作者的________________进行清洁和消毒。
②将用于微生物培养的__________、接种用具和培养基等进行________。
③为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在________________进行。
④实验操作时应避免已________处理的材料用具与周围的物品相接触。
(3)消毒和灭菌的概念①消毒:消毒是指使用________的物理或化学方法杀死物体表面或内部的________________(不包括芽孢和孢子)。
②灭菌:灭菌是指使用__________的理化因素杀死物体内外________________,包括____________。
③消毒与灭菌的区别:两者最大的区别是________________________。
拓展深化某些细菌在其生长发育后期,可在细胞内形成一个圆形的抗逆性休眠体,称为芽孢。
第2讲微生物的培养与应用课标导航3.1.1阐明在发酵工程中灭菌是获得纯净的微生物培养物的前提3.1.2阐明无菌技术是在操作过程中,保持无菌物品与无菌区域不被微生物污染的技术3.1.3举例说明通过调整培养基的配方可有目的地培养某种微生物3.1.4概述平板划线法和稀释涂布平板法是实验室中进行微生物分离和纯化的常用方法3.1.5概述稀释涂布平板法和显微镜计数法是测定微生物数量的常用方法一、微生物的实验室培养1.培养基2.无菌技术3.大肠杆菌的纯化培养二、土壤中分解尿素的细菌的分离三、分解纤维素的微生物的分离1.实验原理2.实验流程[基础微点练清]1.判断正误(1)培养基中的营养物质浓度越高,对微生物的生长越有利[新人教版选择性必修3 P14“概念检测”T1(1)](×)(2)消毒和灭菌的杀菌程度存在差异(√)[新人教版选择性必修3 P14“概念检测”T1(2)](3)微生物的纯培养物就是不含有代谢废物的微生物培养物[新人教版选择性必修3 P14“概念检测”T1(3)](×)(4)消毒的原则是既能杀死材料表面的微生物,又要减少消毒剂对细胞的伤害(√)(5)无菌操作的对象只要是没有生物活性的材料(如培养基、接种环等)都可采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌(×)(6)相对于未被污染的土壤,从被石油污染的土壤中更容易分离到石油降解菌(√)[新人教版选择性必修3 P20“概念检测”T1(3)](7)用稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时,只要稀释度足够高,就可在培养基表面形成单个菌落(√)2.下列有关微生物培养的叙述,错误的是()A.测定土壤样品中的细菌数目,常用稀释涂布平板法进行菌落计数B.在对微生物进行培养前,需要对微生物和培养基进行灭菌C.酵母菌发酵过程产生的酒精,对其他微生物生长有一定的抑制作用D.分离能分解尿素的细菌,要以尿素作为培养基中唯一的氮源解析:选B在对微生物进行培养前,需要对培养基进行灭菌,不能对所培养的微生物进行灭菌。
中学高效课堂高二生物导学案利用,而是首先通过土壤中的细菌将尿素分解为,这是因为细菌能合成。
2、教材22页上的培养基配方中,为微生物的生长提供碳源的是,提供氮源的的是,琼脂的作用是。
该培养基对微生物(具有,不具有)选择作用。
如果具有,其选择机制是。
3、选择培养基:在微生物学中,将允许种类的微生物生长,同时和其他种类微生物生长的培养基,称作选择培养基。
4、配制选择培养基的依据根据选择培养的菌种的生理代谢特点加入某种物质以达到选择的目的。
例如,培养基中不加入有机物可以选择培养型微生物;培养基中不加入氮元素,可以选择培养的微生物.加入高浓度的食盐可选择培养金黄色葡萄球菌等。
5、在统计菌落数目时,常用来统计样品中活菌数目的方法是。
除此之外,也是测定微生物数量的常用方法。
6、采用稀释涂布平板法统计菌落数目时,培养基表面生长的一个菌落,来源于。
通过统计,就能推测出样品中大约含有多少活菌。
为了保证结果准确,一般选择菌落数在的平板进行计数。
7、统计的菌落数比活菌的实际数目。
这是因为当两个或多个细胞在一起时,平板上观察到的只是菌落。
因此,统计结果一般用来表示。
8、对照实验是指除了的条件外,其他条件都的实验。
满足该条件的称为,未满足该条件的称为组。
【合作探究】1、教材22页左上角培养基配方为本课题使用的培养基,该培养基是固体培养基还是液体培养基?为什么?2、该培养基为什么能分离出分解尿素的细菌?4、为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度?5、培养过程中培养基的PH是否有变化?如何观察出PH有变化?6、如果某同学用教材22页左上角培养基配方(但不加尿素)也在培养基上发现菌落产生,这些菌落是分解尿素的细菌吗?为什么?当堂检测1.不同的微生物对营养物质的需要各不相同。
下列有关一种以CO2为唯一碳源的自养微生物营养的描述中,不正确的是( )A.氮源物质为该微生物提供必要的氮素 B.碳源物质也是该微生物的能源物质C.无机盐是该微生物不可缺少的营养物质 D.水是该微生物的营养要素之一2.下列说法正确的是( )A.培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质B.培养基只有两类:液体培养基和固体培养基C.除水以外的无机物只能提供无机盐D.无机氮源不可能提供能量3.在缺乏氮源的培养基上,大部分微生物无法生长;在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌的生长;在培养基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌的生长。
2019-2020年人教版高中生物选修1专题2微生物的培养与应用复习(教案)复习要点1.培养基的制备2.无菌技术3.平板划线法和稀释涂布平板法的比较4.分离分解尿素的细菌和分离分解纤维素的微生物方法比较5. 稀释涂布平板法计数复习过程一、培养基的制备【知识点讲解】1.基本成分(1)碳源:提供碳元素的物质,如CO2、NaHCO3、糖类、脂肪酸、石油、花生粉饼等。
(2)氮源:提供氮元素的物质,如N2、NH3、氨盐、硝酸盐、尿素、牛肉膏、蛋白胨等。
(3)水:细胞生命活动必不可少的物质,主要来源于培养基、大气、代谢产物。
(4)无机盐:提供除碳、氮元素以外的各种重要元素,包括某些大量元素的物质,主要来源于培养基、大气。
【方法点拨】不同种类的微生物对培养基中营养物质的需求不同(1)自养型微生物所需的主要营养物质是无机盐,碳源可来自大气中的CO2,氮源可由含氮无机盐提供。
(2)异养型微生物所需的营养物质主要是有机物,即碳源必须由含碳有机物提供,氮源也主要是由有机物提供,部分异养型微生物也可以利用无机氮源。
2种类(1)目的要明确:配制时应根据微生物的种类、培养目的等确定配制的培养基种类。
(2)营养要协调:注意各种营养物质的浓度和比例。
(3)pH要适宜:细菌为6.5~7.5,放线菌为7.5~8.5,真菌为5.0~6.0,培养不同微生物所需pH 不同。
4.培养基的制备计算→称量→溶化→灭菌→倒平板【例题讲解】高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。
研究者从热泉中筛选出了能高效生产高温淀粉酶的嗜热菌,其筛选过程如下图所示。
(1)Ⅰ号培养基从物理状态来看,属于固体培养基,配制时要加入________作为凝固剂,从用途来看属于选择培养基,应以________作为唯一碳源。
(2)配置固体培养基的基本步骤是( )A.计算、称量、倒平板、溶化、灭菌B.计算、称量、溶化、倒平板、灭菌C.计算、称量、溶化、灭菌、倒平板D.计算、称量、灭菌、溶化、倒平板(3)溶化时,烧杯中加入琼脂后要不停地________,防止琼脂糊底引起烧杯破裂。
专题2微生物的培养与应用第5课时微生物的实验室培养目标导航 1.了解有关培养基的基础知识,掌握无菌操作技术的有关内容。
2.了解消毒和灭菌常用的方法及二者的区别。
3.学会以大肠杆菌为材料进行微生物培养与分离纯化的方法。
一、培养基与无菌技术1.培养基(1)概念:人们按照微生物对________________的不同需求,配制出供其________________的________________。
(2)成分:一般含有______、________、________、________,此外还要满足微生物对__________________(即生长因子)、________以及氧气的需求。
注意病毒目前不能利用人工培养基来培养,需接种在动、植物组织细胞中才能繁殖。
常用于培养病毒的是活鸡胚。
2.无菌技术(1)概念:防止一切外来杂菌的侵入,并保持灭菌物品及无菌区域不再被污染的方法,称为无菌技术。
注意在微生物的实验室培养中,无菌技术的核心是________________,________________。
(2)无菌技术的具体内容①对实验操作的________、操作者的________________进行清洁和消毒。
②将用于微生物培养的__________、接种用具和培养基等进行________。
③为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在________________进行。
④实验操作时应避免已________处理的材料用具与周围的物品相接触。
(3)消毒和灭菌的概念①消毒:消毒是指使用________的物理或化学方法杀死物体表面或内部的________________(不包括芽孢和孢子)。
②灭菌:灭菌是指使用__________的理化因素杀死物体内外________________,包括____________。
③消毒与灭菌的区别:两者最大的区别是________________________。
拓展深化某些细菌在其生长发育后期,可在细胞内形成一个圆形的抗逆性休眠体,称为芽孢。
每个细菌细胞仅形成一个芽孢,故它无繁殖功能。
芽孢有极强的抗热、抗辐射、抗化学药物和抗静水压的能力。
芽孢的休眠能力十分惊人,可保持几年到几十年的生活力。
孢子是微生物产生的一种有繁殖或休眠作用的细胞。
一般是单细胞,个体微小,通常是适应于从不利环境条件中存活下来,并在条件改变时产生新的营养体,能直接发育成新个体。
(4)消毒与灭菌的常用方法二、实验操作(一)配制培养基1.配制原则(1)____________(根据微生物的种类、培养目的等),如培养基可由简单的无机物组成;生产用培养基内可加入化学成分不明确的天然物质,而分类鉴定用培养基内必须加入已知化学成分的物质。
(2)____________,注意各种营养物质的浓度和比例。
(3)____________,各种微生物适宜生长的pH范围不同,细菌6.5~7.5、放线菌7.5~8.5、真菌5.0~6.0。
注意①不同微生物对营养需求不同,因此,首先根据不同微生物的营养需求配制针对性强的培养基。
②营养物质浓度过低不能满足微生物营养需要,过高对微生物的生长有抑制作用,另外,培养基中各营养物质浓度比直接影响微生物的生长繁殖和代谢产物的形成和积累,其中碳氮比(C/N)的影响较大。
例如,在谷氨酸生产中,当培养基中的碳源与氮源的比为4∶1时,菌体大量繁殖,而产生的谷氨酸少;当碳源与氮源的比为3∶1时,菌体繁殖受抑制,但谷氨酸合成量大增。
2.配制方法(以制备牛肉膏蛋白胨固体培养基为例)(1)(2)实验流程提醒合格的培养基必须灭菌效果好。
培养基配制好后,要放在恒温箱中保温1~2 d,若无菌落生长则说明制备的培养基是合格的。
(二)纯化大肠杆菌纯化大肠杆菌就是为了获得大肠杆菌的纯种菌落,这需在培养时,尽量使菌落中的菌体来自于一个大肠杆菌的分裂,即这个菌落的细菌群体由一个大肠杆菌繁殖而来,这就需接种时尽量接种单个的大肠杆菌。
1.微生物接种的方法微生物接种的方法最常用的是__________和______________两种。
(1)____________通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
①将________放在酒精灯火焰上灼烧,直到接种环烧红。
②在火焰旁冷却接种环,并打开盛有菌液的试管的______。
③将试管口通过酒精灯的________。
④将已冷却的接种环伸入菌液中,________一环菌液。
⑤将试管口通过酒精灯的火焰,并迅速塞上棉塞。
⑥________将培养皿皿盖打开一条缝隙,________将沾有菌种的接种环迅速伸入________,划三至五条平行线,盖上皿盖。
注意不要划破培养基。
⑦灼烧接种环,待其冷却后,从第一区域划线的末端开始往第二区域内划线。
重复以上操作,在三、四、五区域内划线。
注意不要将____________的划线与________相连。
⑧将____________,放入培养箱中培养。
(2)________________则是将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。
①系列稀释操作a.取盛有9 mL水的6支试管灭菌,并按101~106的顺序编号。
b.用________吸取1 mL培养的菌液,注入101倍稀释的试管中。
用手指轻压移液管上的橡皮头,吹吸三次,使菌液与水充分混匀。
c.从101倍稀释的试管中吸取1 mL稀释液,注入102倍稀释的试管内吹吸均匀,获得102倍液。
依此类推。
②涂布平板操作a.将________浸在盛有酒精的烧杯中。
b.取不超过0.1 mL的________,滴加到培养基表面。
c.将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃,待酒精燃尽后,冷却8~10 s。
d.用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。
涂布时可转动培养皿,使菌液分布均匀。
2.注意事项(1)平板划线法①操作第一步即取菌种之前及每次划线之前都需要进行________________,划线操作结束时,仍需灼烧________。
②从第二次以后的划线操作总是从________________开始,能使细菌的数目随着划线次数的增加逐渐减少,最终得到由单个细菌繁殖而来的菌落。
(2)稀释涂布平板法稀释涂布平板的操作比较复杂,且各个细节均需保证“________”,应特别注意:①酒精灯与培养皿的距离要合适。
②吸管头不要接触任何其他物体。
③吸管要在酒精灯火焰周围使用。
3.微生物分离纯化培养的结果作出分析与评价(1)培养未接种培养基的作用是对照,若有菌落形成,说明培养基灭菌不彻底。
(2)在肉汤培养基上,大肠杆菌菌落呈白色,为圆形,光滑有光泽,边缘整齐。
(3)培养12 h和24 h后的菌落大小不同,菌落分布位置相同。
原因是时间越长,菌落中细菌繁殖越多,菌落体积越大,而菌落的位置不动,只是菌落数增多。
(4)频繁使用的菌种利用临时保藏法保存,长期保存菌种的方法是甘油管藏法。
前者利用固体斜面培养基培养后,保存在4℃冰箱中,第3~6个月转种培养一次,缺点是保存时间较短,菌种容易被污染或产生变异;后者将菌种与无菌甘油等量混合后保存在-20℃的冷冻箱中。
4.菌种的保存为了保持菌种的纯净,需对菌种进行保藏。
对于频繁使用的菌种,我们可以采用________________法;对于需要长期保存的菌种,可以采用________________法。
将菌种放在低温环境中保藏的目的是________________________,但时间长了菌种还是要老化的,因此对临时保存的菌种________个月后需重新接种。
知识点一培养基与无菌技术1.不同的微生物对营养物质的需要各不相同。
下列有关一种以CO2为唯一碳源的自养微生物营养的描述中,不正确的是()A.氮源物质为该微生物提供必要的氮素B.碳源物质也是该微生物的能源物质C.无机盐是该微生物不可缺少的营养物质D.水是该微生物的营养要素之一2.下列说法正确的是()A.培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质B.培养基只有两类:液体培养基和固体培养基C.除水以外的无机物只能提供无机盐D.无机氮源不可能提供能量知识点二大肠杆菌的纯化培养3.有关平板划线操作的叙述,不正确的是()A.第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物B.每次划线前,灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后,接种环上的菌种C.在第二区域内划线时,接种环上的菌种直接来源于菌液D.划线结束后,灼烧接种环,能及时杀死接种环上的菌种,避免细菌污染环境和感染操作者4.下列为某同学在培养金黄色葡萄球菌实验中的部分操作步骤,其中正确的是() A.培养基中蛋白胨、牛肉膏溶化后,直接补充蒸馏水至100 mLB.培养基配制完毕可直接使用C.加压至100 kPa之前,要彻底排出锅内的冷空气D.将接种环放在酒精灯火焰上灼烧,灭菌后立即伸入菌液试管内挑取少量菌种一、选择题1.关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基,叙述错误的是()A.操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌B.将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯C.待培养基冷却至50℃左右时进行倒平板D.待平板冷却凝固约5~10 min后,将平板倒过来放置2.金黄色葡萄球菌有很强的致病力,常引起骨髓炎等,还可能引起食物中毒,下述实验结束后的做法错误的是()A.对接种环进行灼烧处理B.带菌培养基必须经高压蒸汽灭菌锅灭菌后才能倒掉C.带菌培养基必须经加热后才能倒掉D.接种后双手必须经肥皂洗净,再用75%的酒精棉球擦拭3.防止杂菌入侵,获得纯净的培养物,是研究和应用微生物的前提。
下列叙述错误的是() A.实验室里可以用紫外线或化学药物进行消毒B.接种环、接种针等金属用具,直接在酒精灯火焰的内焰部位灼烧灭菌C.在实验室中,切不可吃东西、喝水,离开实验室时一定要洗手,以防止被微生物感染D.使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理,以免污染环境4.下列叙述错误的是()A.右手拿装有培养基的锥形瓶,左手拔出棉塞,为避免污染需放在酒精灯火焰附近B.倒平板整个过程应在火焰旁进行C.打开培养皿盖,右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿,左手立即盖上培养皿的皿盖D.为避免水滴滴入培养基,平板应倒过来放置5.有关稀释涂布平板法的说法中,错误的是()A.用移液管把菌液从一支试管转移到下一支试管后,要用手指轻压移液管的橡皮头,吹吸三次,目的是使菌液与水充分混匀B.移液管需经过灭菌C.试管口与移液管应在离火焰1~2 cm处D.涂布时可转动涂布器,使菌液涂布均匀6.以下关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作顺序正确的是()A.计算→称量→倒平板→溶化→灭菌B.计算→称量→溶化→倒平板→灭菌C.计算→称量→溶化→灭菌→倒平板D.计算→称量→灭菌→溶化→倒平板7.为了保持菌种的纯净,需要进行菌种的保藏,下列有关叙述不正确的是()A.对于频繁使用的菌种,可以采用临时保藏的方法B.临时保藏的菌种一般是接种到试管的斜面培养基上C.临时保藏的菌种容易被污染或产生变异D.对于需要长期保存的菌种,可以采用低温-4℃保藏的方法8.有关平板划线操作的叙述,正确的是()A.使用已灭菌的接种环、培养皿,操作过程中不再灭菌B.打开含菌种的试管需通过火焰灭菌,取出菌种后需马上塞上棉塞C.把皿盖打开,将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内,划三至五条平行线即可D.最后将平板倒置,放入培养箱中培养二、简答题9.某学校打算开辟一块食用菌栽培基地,以丰富学生的劳动技术课内容。