病原性球菌的检验.

病原性球菌及检验● 考点葡萄球菌属、链球菌属、肠球菌属、奈瑟菌属生物学性状微生物学检查法临床意义（致病性、所致疾病）【内容讲解】普及共性，单记个性生物学性状形态与结构：革兰染色性，菌体形态，大小，排列状态，特殊结构。

培养特性：对气体需求，营养要求，最适pH值，最适温度，在培养基中的生长现象。

生化反应：特殊生化。

抗原：分类：致病性致病物质所致疾病微生物学检查：针对生物学性状和致病性。

一、葡萄球菌属一群革兰阳性球菌，因常堆聚成葡萄串状而得名。

（一）生物学特性1.形态与结构G+，球形，0.5～1.5μm，呈葡萄串状成堆排列（在脓汁、肉浸液培养物中，可见单个，成对或短链排列），无鞭毛和芽胞，某些菌株能形成荚膜。

2.培养特性需氧或兼性厌氧，营养要求不高，最适pH为7.4，最适温度为35～37℃。

普皿：圆形、凸起、表面光滑湿润、边缘整齐并且不透明的菌落，直径为2～3mm。

可产生不同的脂溶性色素，如金黄色、白色、柠檬色色素。

血琼脂平板：几乎所有的葡萄球菌可产生α、β、γ和δ溶血素。

液体培养基：生长迅速呈均匀混浊状。

3.生化反应触酶试验（+）；多数能分解葡萄糖、麦芽糖及蔗糖，产酸不产气；分解甘露醇产酸、液化明胶和产生血浆凝固酶（多数致病性葡萄球菌）。

4.抗原（1）蛋白抗原：为完全抗原，有种属特异性，无型特异性。

存在于葡萄球菌的表面，结合在细胞壁的粘肽部分，具有抗吞噬作用，称葡萄球菌A蛋白（SPA）。

（2）多糖抗原：是半抗原，具有型特异性，有三种：①A型多糖抗原；②B型多糖抗原；③C型多糖抗原。

5.分类（1）《伯杰系统细菌学手册》（2）古典分类法6.抵抗力对理化因素抵抗力强，耐热，耐干燥，耐高盐。

是抵抗力最强的无芽胞细菌。

（二）临床意义葡萄球菌感染的特点是感染部位组织的化脓、坏死和脓肿形成。

金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌是引起临床感染最常见的葡萄球菌。

（1）金黄色葡萄球菌致病物质：血浆凝固酶；葡萄球菌溶血素；杀白细胞素；肠毒素；表皮溶解毒素；毒性休克综合征毒素。

病原性球菌的检验一、葡萄球菌属Staphylococcus⏹广泛存在于自然界，多数是不致病的腐物寄生菌。

⏹致病性葡萄球菌可引起化脓性炎症、败血症、食物中毒等。

分类与分型1）金黄色葡萄球菌(S. aureus)：多数致病。

（2）表皮葡萄球菌(S. epidermidis)：偶可致病。

（3）腐生葡萄球菌(S. saprophyticus)：不致病。

（4）致病性菌株能产生黄色或柠檬色素。

（5）多数金黄色葡萄球菌可被相应噬菌体裂解，表皮葡萄球菌不敏感。

金黄色葡萄球菌的致病性⏹用噬菌体可将金葡萄菌分为4群23个型。

⏹肠毒素型食物中毒由Ⅲ和Ⅳ群金葡萄菌引起，Ⅱ群菌对抗生素产生耐药性的速度比Ⅰ和Ⅳ群缓慢很多。

⏹造成医院感染严重流行的是Ⅰ群中的52、52A、80和81型菌株。

⏹引起疱疹性和剥脱性皮炎的菌株经常是Ⅱ群71型。

金黄色葡萄球菌的流行病学⏹作为人和动物的常见病原菌，其主要存在于人和动物的鼻腔、咽喉、头发上，50%以上健康人的皮肤上都有金黄色葡萄球菌存在。

因而，食品受其污染的机会很多。

金黄色葡萄球菌及其检验⏹革兰氏阳性球状，排列呈葡萄串状。

无芽胞、鞭毛，大多数无荚膜，个别形成荚膜。

致病性葡萄球菌（金黄色葡萄球菌）菌体较小、约0.5~1um., 普通0.4~1.2um。

培养及生化特性1.在普通培养基上生长良好（需氧或兼性厌氧，最适生长温度37℃、pH7.4 ，对营养要求不高，加少量葡萄糖或血液生长更旺盛。

），在麦康凯琼脂平板不生长。

2. 血平板上生长更佳，致病菌株β溶血3. 产生金黄色色素4. 高度耐盐: 可在7.5~15%NaCl肉汤中生长。

5. 分解葡、乳、麦、蔗糖，产酸不产气，触酶阳性，致病菌株能分解甘露醇。

6. 金黄色葡萄球菌能产生的毒素和酶（致病因素P149）1）溶血毒素2）杀白细胞素3）血浆凝固酶：区分葡萄球菌是否具有致病性的重要标志。

4）脱氧核糖核酸酶：5）肠毒素6）溶纤维蛋白酶7）透明质酸酶抗原性1. 多糖抗原：具有群特异性，存在于细胞壁，借此可分群。

医学微生物学实验设计姓名：***学号：**********班级：10级临床十一班病原性球菌的鉴定姚淑宝（石河子大学医学院石河子832000）摘要：球菌是细菌中的一大类，其中对人类有致病性的球菌包括分属葡萄球菌属、链球菌属、肠球菌属和奈瑟菌属的一些细菌。

本次实验设计以掌握病原性球菌的形态和培养特性，熟悉病原性球菌的分离和鉴定程序为目的。

对脓汁中的葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌、脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌进行鉴别。

一、鉴定思想本次鉴定试验，先将脓汁标本直接镜检，再分离培养，观察镜下菌体的形态特征以及形成菌落的形态特征确定待测菌的菌属。

然后，对可疑菌落纯培养，通过不同生化反应对同一菌属中的不同细菌进行区别。

（具体见图1-1）分离纯化葡萄球菌属奈瑟菌属血浆凝固酶试验胆汁溶菌试验麦芽糖发酵试验二、鉴定方法（一）直接镜检将脓汁标本涂片进行革兰染色，然后在显微镜下观察细菌菌体的形态、排列、染色性并作出初步诊断。

葡萄球菌属：革兰染色阳性，球形，无芽胞、无鞭毛，呈葡萄串状排列。

链球菌属：革兰染色阳性，球形或椭圆形，无芽胞、无鞭毛，呈链状或成双排列。

肺炎链球菌具有荚膜双球的典型形态。

奈瑟菌属：革兰染色阴性，无芽胞、无鞭毛，常成双排列。

脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌大多于中性粒细胞内外分布。

通过直接镜检可以确定脓汁标本中细菌的菌属。

在确定菌属的基础下再对脓汁标本中的细菌分离纯化，然后挑取可以菌落通过再次涂片染色镜检、致病物质检查、生化反应、血清学鉴定等方法进行菌属内的区别。

（二）分离纯化用分区划线法将脓汁中的细菌接种在血琼脂平板培养基或巧克力色培养基上并在5%二氧化碳、37℃的条件下培养18~48小时。

观察菌落的形态。

葡萄球菌属：在血平板上形成圆形凸起、表面光滑、润湿、边缘整齐、不透明的菌落。

形成金黄色、白色和柠檬色脂溶性色素，多数金黄色葡萄球菌菌落周围有β溶血现象。

链球菌属：在血平板上形成灰白色、圆形凸起、半透明或不半透明的细小菌落。

第十三章病原性球菌及检验一、A11、与淋病奈瑟菌无关的性状是（）。

A、革兰阴性肾形双球菌B、营养要求高C、初次分离需5%～10%CO2D、普通培养基上即可生长E、氧化酶试验阳性2、甲氧西林金黄色葡萄球菌是（）。

A、MRSAB、MRSEC、MRSD、MRCNSE、SPA3、抗链“O”试验可以辅助诊断（）。

A、结核病B、肺炎C、流脑D、百日咳E、急性肾小球肾炎4、有关细菌学检验的描述选项中错误的是（）。

A、原则上所有标本均应作病原分离培养B、脑膜炎奈瑟菌初次培养需用巧克力培养基C、结核杆菌需2～6周才长成菌落D、葡萄球菌分离培养的阳性率一般比直接涂片镜检的阳性率为低E、布氏杆菌初次培养时需5%～10%的CO25、下列何种细菌为革兰阴性球菌（）。

A、乙型溶血性链球菌B、肺炎链球菌C、铜绿假单胞菌D、脑膜炎奈瑟菌E、肺炎克雷伯菌6、有关肺炎链球菌不正确的描述（）。

A、革兰阳性双球菌B、有自溶现象C、对optochin敏感D、均对青霉素敏感E、可引起脑膜炎7、肺炎链球菌在血平板上生长，菌落周围的颜色是（）。

A、红色B、褐色C、绿色D、黑色E、金黄色8、卡他布兰汉菌在形态方面与下列哪种细菌相似（）。

A、流感嗜血杆菌B、淋病奈瑟菌C、军团菌D、放线菌E、支原体9、脑膜炎球菌侵入机体繁殖后，因自溶或死亡而释放内毒素，内毒素的主要作用是引起（）。

A、菌血症B、血小板解聚C、血液白细胞减少D、细菌素产生E、血管坏死和血栓形成，周围血管出血10、某患者餐后数小时出现头晕、恶心、腹痛、呕吐等症状。

呕吐物接种到血液琼脂平皿培养，出现完全溶血环，金黄色菌落。

培养滤液幼猫腹腔注射4小时后出现呕吐，此病可诊断为（）。

A、金黄色葡萄球菌引起的食物中毒B、产气荚膜梭菌引起的食物中毒C、肠沙门菌引起的食物中毒D、肉毒梭菌引起的食物中毒E、鼠伤寒沙门菌引起的食物中毒11、甲型溶血性链球菌生长时，菌落周围常出现溶血环，此现象称为（）。

A、α溶血B、β溶血C、γ溶血D、δ溶血E、ε溶血12、脑膜炎奈瑟菌属于（）。

球菌检验报告解释引言球菌是一类常见的细菌，以其球状细胞形态而得名。

球菌广泛存在于自然界中，包括土壤、水体、皮肤以及呼吸道等部位。

虽然大部分的球菌对人体没有害处，但某些特定的球菌却可能引起严重的感染和疾病。

为了准确诊断和治疗球菌感染，医疗机构常常进行球菌检验。

本篇文档将解释球菌检验报告的相关内容。

检验项目球菌检验报告通常包括以下几个主要项目：1.病原菌培养鉴定：通过将样本在适当的培养基上进行培养，可以分离出其中的球菌。

培养后，医学实验室将对分离出的菌株进行鉴定，确定其是否为球菌以及具体属种。

2.药敏试验：这一项目主要用于测试球菌对不同抗生素的敏感性。

医学实验室将在培养基上施加不同类型的抗生素，观察菌落的生长情况，以确定当前球菌对哪些药物敏感，哪些药物耐药。

3.血清学检测：通过检测患者体内的球菌相关抗体来判断球菌感染的存在与程度。

通常，这项检测用于检测球菌感染是否为初次感染，或者用于跟踪治疗效果。

报告解释球菌检验报告通常会提供以下信息：1.菌株鉴定：报告会详细说明培养出的球菌菌株的属种和亚种信息。

这对医生来说非常重要，因为不同的球菌可能导致不同类型和严重程度的感染。

2.抗生素敏感性：报告会列出球菌对不同抗生素的敏感性结果。

通常使用一个字符表示，例如“S”表示敏感，“R”表示耐药，或者使用数字来表示具体的抗生素最低抑菌浓度。

这些信息有助于医生选择合适的抗生素治疗感染。

3.血清学检测：如果进行了血清学检测，报告中会包含血清学结果。

这通常是一些数字或特定单位表示的抗体水平。

医生可以根据这些结果判断球菌感染的程度和临床治疗的效果。

结论球菌检验报告是诊断和治疗球菌感染的重要工具。

通过对球菌菌株的鉴定、抗生素敏感性和血清学结果的分析，医生可以制定相应的治疗方案，以最大程度地控制感染并促进患者康复。

在解读球菌检验报告时，医生需要全面了解每个项目的结果，并综合考虑患者的临床病情。

这样，才能做出准确的诊断和治疗决策。

第八章病原性球菌检验一、名词解释1．游离凝固酶2．CAMP试验3．化脓性球菌4．PRNG二、选择题【A1型题】1.含杂菌的标本中分离金黄色葡萄球菌的培养基是A、SS平板B、巧克力琼脂培养基C、卵黄甘露醇培养基D、高盐甘露醇培养基E、卵黄双培养基2.葡萄球菌A蛋白能与以下哪个结合A、IgAB、IgMC、IgG的Fc段D、IgG的Fab段E、单体IgM3.凝固酶阳性表示葡萄球菌的A、生化反应活跃B、致病性强C、抗原性强D、抵抗力强E、耐药性强4.耐甲氧西林的葡萄球菌是因为产生了A、β内酰胺酶B、乙酰基转移酶C、青霉素结合蛋白2aD、凝固酶E、DNA酶5.结合型凝固酶以下描述错误的是A、又称聚集因子B、又称协同因子C、用玻片法检测D、结合在葡萄球菌表面E、中间型葡萄球菌阳性6.耐热核酸酶试验阴性的菌种是A、金黄色葡萄球菌B、施氏葡萄球菌C、中间葡萄球菌D、猪葡萄球菌E、腐生葡萄球菌7.CAMP试验的溶血特征是A、点状B、箭头状C、弯曲状D、月牙型E、双层状8.引起猩红热的细菌是A、甲型溶血性链球菌B、乙型溶血性链球菌C、表皮葡萄球菌D、肠球菌E、脑膜炎奈瑟菌9.杆菌肽试验敏感的菌株可初步鉴定为A、A群链球菌B、B群链球菌C、C群链球菌D、D群链球菌E、E群链球菌10.无乳链球菌具有A、B群抗原B、A、C、G群抗原C、α溶血特性D、不溶血特性E、D群抗原11.可作为B群链球菌初步鉴定的试验是A、CAMP试验B、杆菌肽试验C、optochin试验D、胆汁七叶苷水解试验E、山梨醇发酵试验12.链球菌与葡萄球菌的区别主要是A、凝固酶试验B、触酶试验C、氧化酶试验D、DNA酶试验E、葡萄糖发酵试验13.肺炎链球菌的主要致病物质是A、外毒素B、内毒素C、荚膜D、自溶酶E、菌毛14.甲型溶血性链球菌与肺炎链球菌的区别主要是A、形态大小B、optochin试验C、触酶试验D、溶血特征E、菌落大小15.感染后的变态反应性疾病如急性肾小球肾炎、风湿热等是由以下哪群引起A、A群链球菌B、B群链球菌C、C群链球菌D、D群链球菌E、E群链球菌16.临床标本中分离最常见的肠球菌是A、粪肠球菌B、屎肠球菌C、鸟肠球菌D、鸡肠球菌E、黄色肠球菌17.肠球菌的特征以下不正确的是A、10℃和45℃均能生长B、可出现α、β溶血或不溶血C、所有菌株在含6.5%NaCl肉汤中能生长D、在40%胆汁培养基中能分解七叶苷E、含细胞色素氧化酶和触酶18.关于肠球菌的临床意义不正确的是A、常栖居在人、动物的肠道和女性生殖道B、为医院感染的重要病原菌C、近年来对万古霉素耐药菌株增多D、毒力强E、所致感染最多见于尿路感染19.常用于金黄色葡萄球菌肠毒素检测的动物是A、豚鼠B、家兔C、大白鼠D、幼猫E、乳鼠20.新生霉素耐药的菌株是A、金黄色葡萄球菌B、表皮葡萄球菌C、溶血葡萄球菌D、腐生葡萄球菌E、沃氏葡萄球菌21.脑膜炎奈瑟菌的主要致病物质是A、胞外酶B、菌毛C、荚膜D、外毒素E、脂多糖22.为了分离脑膜炎奈瑟菌，咽拭子或鼻咽拭子等标本应接种在A、Thayer-Martin（MTM）B、羊血琼脂平板C、巧克力琼脂D、普通琼脂E、血清肉汤23.关于脑膜炎奈瑟菌错误的是A、需要5%～10%CO2B、氧化酶试验阴性C、对寒冷干燥抵抗力弱D、对青霉素敏感E、我国流行的主要是A群24.淋病奈瑟菌发酵以下哪种糖类试验阳性A、葡萄糖B、乳糖C、麦芽糖D、蔗糖E、甘露醇25.脑膜炎奈瑟菌与淋病奈瑟菌在以下哪种糖类发酵试验时不同A、葡萄糖B、乳糖C、麦芽糖D、蔗糖E、甘露醇26.卡他莫拉菌与奈瑟菌的区别是A、氧化酶阳性B、触酶阳性C、不发酵糖类D、革兰阴性双球菌E、巧克力琼脂平板上生长27.脑膜炎奈瑟菌与淋病奈瑟菌可以共同发酵以下哪种糖类A、葡萄糖B、乳糖C、麦芽糖D、蔗糖E、甘露醇【A2型题】28.某患者急性发病，高热、咳嗽，呼吸困难，胸片提示大叶性肺实变。

病原性球菌及检验球菌种类很多，根据革兰氏染色的不同，分为G-、 G+两类球菌。

G+有：葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌和微球菌。

G-有：脑膜炎奈瑟氏菌、淋病奈瑟氏菌、卡他布兰汉氏菌等。

对人体致病的球菌称病原性球菌，因能引起机体化脓性炎症，故又称为化脓性球菌。

常见的有葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌、脑膜炎奈瑟氏菌、淋病奈瑟氏菌。

一、葡萄球菌属(一)形态与染色葡萄球菌呈不规则堆集排列，形似葡萄串状，也可见单个、成对或短链排列。

为G+性球菌，直径0.5-1.5um，（致病性葡萄球菌菌体较非致病性葡萄球菌菌体小）无芽胞，无鞭毛、无荚膜；无动力。

(二)分类 1965年按血浆凝固酶分为：血浆凝固酶阴性葡萄球菌，血浆凝固酶阳性葡萄球菌。

1.血浆凝固酶阴性葡萄球菌包括：表皮、腐生葡萄球菌。

2.血浆凝固酶阳性葡萄球菌包括：金黄色、中间型、家畜葡萄球菌。

(三)抗原本菌水解后，用沉淀法可获两种抗原即蛋白抗原和多糖抗原。

1.蛋白抗原：是一种表面抗原，为完全抗原；有种特异性，无型特异性。

存在葡萄球菌细胞壁的表面，结合在细胞壁的粘肽部分，具有抗吞噬作用，称葡萄球菌A蛋白。

2.多糖抗原：是半抗原，存在于细胞壁上，是金黄色葡萄球菌的重要抗原。

有型特异性，分A、B、C三型。

(四)标本接种1.脓汁、尿道分泌物、脑脊液沉淀物，通常直接接种在血琼脂上，经37℃24-48h培养，可见直径2-3mm，产生不同色素的菌落。

2.粪便、呕吐物应接种卵黄高盐、高盐甘露醇琼脂平板上，经37℃24-48h培养可形成细小菌落，48h后形成典型菌落。

3.疑为败血症者，抽取静脉血5ml，注入50ml葡萄糖肉汤培养基中。

(五)培养特性需氧或兼性厌氧，对营养要求不高。

在20%CO2环境中，有利于毒力产生。

最适温度37℃，最适PH7.4。

DNA中G+C含量：30-39%。

1.在普通琼脂平板上，经37℃、24-48h培养，可形成圆形，凸起、边缘整齐、表面光滑、湿润、有光泽、不透明、脂溶性色素的菌落，直径一般为1-2mm，但大者也有4-5 mm的菌落。