病原性球菌 药敏试验PPT.ppt

– 为免疫学及实验室诊断试剂（协同凝集试验）
• 在体内，SPA与IgG的复合物具有抗吞噬、促细胞分
裂、引起变态反应、损伤血小板等生物活性。
. 29
协同凝集试验
含A蛋白 的金葡菌 IgG类抗体
结合IgG的
金葡菌 抗原
.
凝集
30
• 荚膜：荚膜多糖，粘附细胞或生物合成材料表面
（biofilm）；
• 多糖抗原：具有群特异性，存在于细胞壁
– 可变为L型（Ab）
. 16
.
17
.
18
• 培养特性
– 营养要求不高 • 普通平板、血平板最适生长温度为35℃～37℃，最适pH为7.4-7.6 • 肉汤培养基中，呈均匀混浊生长。 – 需氧或兼性厌氧，肉汤培养基中，呈均匀混浊生长； – 在普通琼脂平板上孵育24~48h后，形成 2～3mm圆形、隆 起、表面光滑、湿润、边缘整齐、不透明菌落。 – 菌落因种不同而出现金黄色、白色或柠檬色等脂溶性色素。 – 典型的排列呈葡萄串状，在脓汁或液体培养基中生长呈双 球或短链状。
医学微生物学
Medical Microbiology
.
1
第二部分 细菌学各论
.
2
各论内容的学习方法要点
• 三性两法+防制
– 生物学特性 – 致病性 – 免疫性 – 微生物学检查法 – 免疫学检测 – 防治、控制
.
3
主 要 内 容
• 病原性球菌 • 致病性肠道杆菌
• 致病性弧菌
• 厌氧性致病菌
• 致病性呼吸道细菌
.
8
球 菌（coccus）
• 指个体形状呈球形或椭圆形的一大类细菌，其中对 •
人类有致病性的称为病原性球菌（pathogenic coccus）。 包括四个属

药敏试验说课教案ppt课件
目录 Contents
• 药敏试验概述 • 药敏试验的步骤 • 药敏试验的临床应用 • 药敏试验的注意事项 • 药敏试验的发展趋势
01
药敏试验概述
药敏试验的定义
药敏试验
是一种检测细菌对抗生素敏感性的试 验，用于指导临床医生选择合适的抗 生素进行治疗。
定义补充
药敏试验通过测量细菌在接触不同浓 度的抗生素时生长情况的变化，来判 断细菌对抗生素的敏感程度，从而帮 助医生选择最有效的抗生素。
接种方法
将制备好的菌液均匀涂布在培养基上， 或使用定量接种环接种。
培养
培养条件
根据不同病原体设定适宜的培养 温度和时间。
培养观察
定期观察培养基上是否有细菌生长， 以及生长情况是否符合预期。
防止污染
确保培养过程的无菌操作，避免杂 菌污染。
结果解读
结果判定
根据培养结果，判断细菌是否对 某种药物敏感或耐药。
耐药性的监测
总结词
药敏试验有助于监测病原微生物的耐 药性变化，为抗生素的更新换代和临 床用药提供依据。
详细描述
随着病原微生物耐药性的不断增加， 药敏试验能够监测耐药性的发展趋势， 及时发现新的耐药菌株，为临床用药 提供更新换代的选择。
治疗效果的评估
总结词
通过药敏试验可以评估治疗效果，及时调整治疗方案，提高治愈率。
THANKS
结果记录
及时、准确地记录实验结果， 为后续数据处理和分析提供依
据。
实验后的数据处理与分析
数据处理
对实验数据进行整理、分类和 统计，确保数据准确无误。
结果分析
根据实验目的和要求，对实验 结果进行分析，得出结论。
结果报告

. 55
☆不完全溶血--溶血圈
☆完全溶血--溶血圈宽
窄，圈内RBC未完全 破坏，呈草绿色 α- 溶血
大，RBC完全溶解溶血 圈透明
.
β-溶血
56
• 2、根据抗原结构不同分类 • 根据多糖抗原不同分20群（其中致病菌株多 属于A群）。 • 各群之间，又按蛋白质抗原不同，分若干型。 如A群—— 分M、T、R…等约100个型 • B群——分 4型 • C群——分13型
. 57
•抵抗力
抵抗力不高 不耐热，55℃灭活 对常用消毒剂及抗生素敏感
青霉素首选
.
58
二、致病性
致 病 物 质
侵袭力 (胞壁成分、酶） 链激酶（溶纤维蛋白酶） 链道酶（DNA酶） 透明质酸酶（扩散因子）
脂磷壁酸 M蛋白
链球菌溶血素O（SLO） 链球菌溶血素 链球菌溶血素S（SLS）
致热外毒素（红疹毒素和猩红热毒素）
. 41
毛囊炎：由金黄色葡萄球菌感染毛囊引 起的炎症
. 42
2、毒素性疾病
由相应的外毒素引起
• 食物中毒：由进食含葡萄球菌肠毒素食物后引起 (毒素吸收作用于呕吐中枢-以呕吐为主） • 烫伤样皮肤综合征：由表皮剥脱毒素引起，多见 于新生儿、婴幼儿。皮肤弥漫性红斑、水疱、脱 落，无化脓性炎症表现。 • 毒性休克综合征：主要由TSST-1引起，综合表现
细菌结构模式图--特有
荚膜
普通菌毛
.
细胞壁 鞭毛
1
正常菌群, 条件致病
致病物质基础
• 侵袭力: 菌毛等特殊结构及酶 • 毒素: 外, 内(LPS, 热原)
.
2
感染常见的全身表现有：
• 毒血症（toxemia）：病原菌侵入机体 后只在局部生长繁殖，不进入血循环， 但其产生的外毒素入血，经血液扩散并 侵害易感的组织细胞，引起特殊的中毒 症状。 • 菌血症（bacteremia）：病原菌由局部 侵入血流，但未在血流中生长繁殖，只 是一过性地经血流到达适宜部位后繁殖 致病。

8
4
2
重要误差
12
258
1
1
12
小误差
敏感 5
1 0.5
1
25
9
0.25 6
8 10 12 细1菌4药敏1试8 验2p0pt课件22 24 26 28 30 32 349
不同国家的判定折点 －可能不同
原因：
用药剂量不同，服药的间隔不同 评价敏感时较保守 更强调检测出耐药株（即特定的耐药群） 技术因素：接种、培养基
* M100 每年更新一次
**M2, M7 每三年更细新菌一药敏次试验 ppt课件
123
药物分组
判断折点
标准菌株质控范围
特殊的耐药监测
细菌药敏试验 ppt课件
13
细菌药敏试验 ppt课件
14
敏感性分类(CLSI的定义)
敏感（Susceptible）
用常规用量治疗有效 常规用药时达到的平均血药浓度超过细菌的
缓冲区：防止操作的系统误差造成重 大结果的判定错误
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16
药敏试验的方法学
半定量…纸片扩散法 (抑菌圈直径) MIC法：
稀释法(肉汤、琼脂) 自动化仪法 抗生素连续梯度法 (Etest ) 流式细胞仪
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纸片扩散法（Kirby-Bauer法）
将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼 脂平板上，纸片中所含的药物吸收琼脂中水分溶解后 不断向纸片周围扩散形成递减的梯度浓度，在纸片周 围抑菌浓度范围内测试菌的生长被抑制，从而形成无 菌生长的透明圈即为抑菌圈。
细菌药敏试验 ppt课件
7
MIC与抑菌圈直径的线性关系
Log2. MIC R I

治疗对基本药物过敏的患者
治疗少见菌的感染
流行病学调查为目的向感染控制部门报告
试验方法—纸片扩散法
改良Kirby-Bauer法(K-B法)
试验材料
培养基 非苛氧菌用Mueller- Hinton（M-H）琼脂 药物纸片 直径6mm纸片，每片吸水量约20μl 菌液比浊管 0.5号麦氏（McFarland）标准比浊管，
抗菌药物敏感性试验(药敏 试验)
目的
指导临床医生针对各类临床感染患者选择 最佳抗菌药物
一定区域内积累对公共卫生有关的重要耐 药的微生物流行病学资料
根据细菌对药物敏感谱进行菌种鉴定
药敏试验原理
纸片扩散法
把含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测 试细菌的琼脂平板上
纸片中药物吸收琼脂水分溶解后通过弥散 作用形成递减的浓度梯度
纸片周围一定距离范围内试验菌生长受抑 制，从而形成无菌生长的透明圈即抑菌环。
抑菌环大小反映测试菌对测定药物的敏感 程度
抑菌环大小除与细菌的敏感性有关外还与 其它诸因素相关。
稀释法
定量测定抗菌药物活性 抗菌药物与肉汤或琼脂培养基混合稀释后
种入试验细菌，孵育过夜。 以能抑制细菌生长的最低浓度为最低抑菌
变形杆菌属的菌株可扩散到某些抗菌药物 的抑菌环内，故在明显抑菌环内有薄膜状 爬行生长可以忽略。
加贴纸片
将接种好的平板敞开盖子倒置在室温下干 燥3-5min 使平板上的水分被琼脂完全吸 收。
用镊子取纸片一张贴在琼脂平板表面，轻 压使其与琼脂完全接触。纸片中心间距 ≥24mm,纸片中心距平皿边缘≥15mm。 直径90mm的平板最好贴6张。
15min内将平板倒置放温箱孵育。
注意
纸片一旦贴下就不可再挪动位置，因纸 片中的药物已扩散到琼脂中。 需要时应在适当的地方贴新纸片

在感染初期或症状明显时 采集样本，以提高检出率。
采集部位
选择病原体含量较高的部 位进行采集，如痰液宜选 自肺部。
样本处理
样本保存
样本量
采集后的样本应尽快送至实验室进行 检测，如不能及时送检，应妥善保存。
保证足够的样本量，以满足后续实验 需求。
样本处理方法
对采集的样本进行适当的处理，如离 心、过滤等，以去除杂质和无关细胞。
结果判断
根据病原体的生长情况，判断其对不同药物的敏 感程度。
报告发布
将实验结果及时报告给临床医生，为治疗提供参 考依据。
04
药敏试验的应用
抗生素选择
抗生素选择
药敏试验能够确定病原体对各种 抗生素的敏感程度，帮助医生选 择最有效的抗生素进行治疗，提 高治愈率并减少耐药性的产生。
耐药性检测
通过药敏试验可以检测病原体对 抗生素的耐药性，了解耐药机制 和传播情况，为制定防控策略提 供科学依据。
在琼脂平板上接种细菌，然后滴 加抗生素溶液，观察抑菌圈的大 小，判断细菌对药物的敏感性。
稀释法
将不同浓度的抗生素与细菌混合培 养，观察细菌的生长情况，确定药 物的最小抑菌浓度（MIC）。
纸片扩散法
将含有一定量抗生素的纸片贴在琼 脂平板上，观察纸片周围抑菌圈的 大小，判断细菌对药物的敏感性。
02
药敏试验的种类
详细描述
E试验法是一种新型的药敏试验方法，通过在药敏试纸上施加连续变化的压力，使药物浓度与细菌生 长曲线呈线性关系，从而快速准确地判断细菌对药物的敏感程度。该方法操作简便，结果准确可靠。
03
药敏试验的步骤
样本采集
采集方法
根据感染部位和病原体类 型，选择合适的采集方法， 如咽拭子、痰液、尿液等。

属细菌时，应选择巧克力色培养基，并提供5%-10%的二氧
化碳气体。
30
脑膜炎奈瑟菌致病性
（一）致病物质 （1）荚膜：增强细菌抗吞噬细胞的吞噬作用
（2）菌毛：增强细菌粘附于易感细胞的表面
（3）内毒素：作用于毛细血管，使血管坏死、出血
31
脑膜炎奈瑟菌的致病性
（二）所致疾病： 1.传播途径：呼吸道传播 2.所致疾病：流行性脑脊髓膜炎 鼻咽部细菌 血流
胞的吞噬作用。
5SPA生物学性状来自Ag信息导向吞噬细胞 吞噬细胞表面Fc受体
葡萄球菌 IgG抗体
吞噬细胞
6
SPA生物学性状
阻断抗原信息的传导
SPA
7
葡萄球菌的生物学性状
5）分类依据 ① 色素（pigment）：金黄色、表皮及 腐生葡萄球菌。 ② 凝固酶（coagulase）：凝固酶阳性与阴性葡萄球菌。 ③ 生化反应：分解甘露醇阳性与阴性葡萄球菌。 6）抵抗力：强于其它无芽胞菌，易产生耐药性变异
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链球菌属细菌 Streptococcus
链球菌生物学性状
链球菌油镜下形态
链球菌电镜下形态
链球菌荧光显微镜下形态
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链球菌属细菌 Streptococcus
乙型溶血环
甲型溶血环
20
肺 炎 链 球 菌 及 其 荚 膜
21
链球菌致病物质
（1）链球菌溶血素（streptolysin）：SLO，SLS （2）致热外毒素（pyrogenic exotoxin） （3）透明质酸酶（hyaluronidase）：扩散 （4）链激酶（streptokinase）：扩散 （5）链道酶（streptodonase）：扩散 （6）M蛋白（M protein）：抗吞噬、变态反应

1、通过药敏结果 2、根据药物的类型及PK/PD参数选用 3、综合分析
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药敏结果分析
原则：
选择S药物可能有效 选择R药物肯定无效 分析结果，推测同类药物 首选A组 次选B/C组 选择MIC远离S折点的药物
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选择哪种药物
屎肠球菌 氨苄西林 青霉素 红霉素 庆大霉素500 链霉素2000 左氧氟沙星 环丙沙星 呋喃妥因 万古霉素 利奈唑胺 替加环素
合格性检查
标本采集
细菌培养
鉴定
细菌分离
药敏试验
结果判断
报告
美国CLSI(Clinical and Laboratory Standards Institute，临床实验室
标准化协会 )制定的标准（每年修订）
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药敏试验方法
纸片扩散法 (K-B法)：测定抑菌圈直径，适合于快速生长的致病菌 MIC法：
耐药折 点
敏感折点
Isolate 3 Isolate 4
MIC 0mg/l
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Same？
在药敏试验报告中MIC越小的抗菌药 物效果越好吗？
感染菌对同一种药物的MIC越小， 效果越好
不同种抗菌药物之间MIC无可比 性
Same？
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通过药敏试验报告如何正确选用抗菌药物？
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抗生素的正确选用
C组，补充性抗菌药物，用于对基本药物药物耐药的流行
菌株、对药物过敏的病人、某些不常见的细菌
U组，仅用于或首选尿道感染的抗菌药物
O组， 该组药物对细菌有临床适应症，但在美国一般不用
做常规试验和报告的候选。
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长期使用抗生素的病人应该怎样做
药敏试验？
长期使用抗生素的病人尤其是住院病人应该经常做药敏试
验。所谓的长期，并不是一个很长的时间概念，住院病人每隔 3-4天就需要做一次细菌学检查。对于ICU病房的病人，可能每
天都要做细菌学检查。因为这些病人多数免疫力较差，容易受
条件致病菌的侵犯，而且反复发作。此外病原菌常呈多重耐药 性，产超广谱β-内酰胺酶的G-杆菌（ESBL）以及耐甲氧西林葡 萄球菌（MRSA和MRSCN）、产AmpC酶的阴沟肠杆菌、铜绿假单胞 菌在ICU病房最为常见。对于长期使用抗生素的病人，其感染有
– 耐甲氧西林葡萄球菌（MRS）的检测 – β-内酰胺酶、超广谱β-内酰胺酶检测等
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五、纸片扩散法（K菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼脂平板上， 纸片所含的药物吸取琼脂中的水分溶解后便不断向纸片周 围区域扩散，形成递减的梯度浓度。在纸片周围抑菌浓度 范围内的细菌生长被抑制，形成透明的抑菌圈。
细菌接种量
细菌接种量应恒定，如太多，抑菌圈变小，能产酶的菌株更可破坏 药物的抗菌活性。
药物浓度
药物的浓度和总量直接影响抑菌试验的结果，需精确配制。商品药 应严格按照其推荐治疗量配制。
培养时间
一般培养温度和时间为37℃ ，8-18小时，有些抗菌药扩散慢如多粘 菌素，可将已放好抗菌药的平板培养基，先置4℃冰箱内2~4小时 ，使抗菌药预扩散，然后再放37℃温箱中培养，可以推迟细菌的 生长，而得到较大的抑菌圈。
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注意事项
1 纸片应分布均匀，中心距离不小于24mm。 2 含菌平板必须避免过浓或过稀。 3 纸片贴完后应在15min内将平板反过来，置于
37度温箱中。 4 纸片一旦接触培养基就不应再挪动位置。 5 要注意无菌操作。

在动物医学中，药敏试验可以帮助兽医选择合适 的抗菌药物对动物进行治疗，提高动物的治愈率 和生存率。
02
药敏试验基本原理
药敏试验的基本原理
药敏试验定义
药敏试验是测定细菌对药物敏感性的实验方法，通过药敏试验可以指导临床 合理使用抗生素，及时有效的控制感染。
药敏试验原理
药敏试验的原理是药物对细菌生长的抑制作用，通过在体外培养细菌，并观 察细菌生长情况来判断细菌对药物的敏感性。
抗生素稀释
为了检测抗生素对不同浓度下细菌的效果，需要对抗生素进行稀释处理。
稀释方法：连续稀释法、棋盘法等。
稀释步骤：计算抗生素的初始浓度→将抗生素溶液按比例稀释至所需浓度→将不同浓度的抗生素溶液分 装到不同的试管或培养皿中。
培养及结果观察
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将接种细菌的培养基和含有不同浓度抗生素的 培养基一同放入培养箱中，按照不同的时间点 进行培养和观察。
药敏试验方法简介ppt
目 录
• 药敏试验概述 • 药敏试验基本原理 • 药敏试验操作流程 • 药敏试验结果解读 • 药敏试验注意事项及改进建议 • 研究展望
01
药敏试验概述
定义与目的
定义
药敏试验是测定细菌对抗生素药物敏感性的实验方法，通过 药敏试验可以了解致病菌对不同抗菌药物的敏感性，为临床 合理选择抗生素提供依据。
加强新型药物筛选
加强基于药敏试验方法的抗菌新药物筛选工作，提高抗菌药物的研发和应用水平。
THANKS
感谢观看
理等。
常见问题及处理
试验结果异常
如果得到的结果与预期差距较大，需要检查每一步操作，寻找可能的原因。
试剂失效
对于试剂的保存和使用需要注意有效期和质量，如发现试剂失效需及时更换。