Takara说明书
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takara反转录试剂盒说明书Takara反转录试剂盒是一种用于研究RNA分子的试剂盒。
该试剂盒可以用于DNA的反转录,将RNA转录成DNA,并进行后续的PCR扩增。
反转录试剂盒在生命科学领域中起着非常重要的作用,因此在使用过程中需仔细阅读说明书并按照说明书进行操作。
一、试剂盒组成Takara反转录试剂盒主要包含以下拉玛:1.反转录酶:外源的M-MLV反转录酶,具有高度的反转录活性和优异的扩增效率等优良特性。
2.反转录缓冲液:针对反转录酶的酶切优化反转录缓冲液。
3.引物:随机9mers引物,适用于多种RNA逆转录的应用。
4.对照RNA:In Vitro转录的任意序列的RNA,用于反转录和后续PCR扩增反应的质控。
二、试剂盒使用方法1. RNA提取:在使用Takara反转录试剂盒之前,需要从样品中提取RNA。
2. 反转录反应:将RNA测序专用随机引物、针对反转录酶的反转录缓冲液、反转录酶和RNA样品混合,进行逆转录反应。
3. PCR扩增:反转录完成后,可以利用PCR扩增技术对转录所得DNA进行扩增,完成DNA序列的检测和分析。
三、试剂盒注意事项1. 避免多次冻融。
为保证试剂的稳定性,反转录试剂盒必须储存于-20℃及以下的冰箱中,避免多次冻融。
2. 操作时需佩戴手套。
操作时需佩戴手套,尽量避免手汗或皮脂的污染,影响试剂盒的效率和准确性。
3. 注意反转录缓冲液的稀释量。
反转录缓冲液的稀释量会影响反转录效果,因此需要按照说明书进行操作,精准稀释。
4. 注意反转录酶的用量。
不同反转录酶的最优用量不同,需要根据实验需要按照说明书或文献进行调整。
5. 确认对照RNA引物的扩增效果。
在进行PCR扩增前,需要先进行对照RNA引物的扩增,以确认反转录反应的正确性,避免因为反应偏差而引起的实验结果的偏差。
4. 根据实验需要进行调整。
反转录试剂盒虽然具有大量的优良特性,但是实验环境和实验条件的不同,会对反转录试剂盒的效果产生较大的影响,因此需要根据实验需要进行调整。
TP600型PCR仪使用说明目 录一.外观及功能介绍----------------------------------------------------------------------------------------2二.性能一览表----------------------------------------------------------------------------------------------3三.操作方法------------------------------------------------------------------------------------------------3 1.概述------------------------------------------------------------------------------------------------3 2.使用现有程序进行PCR反应-----------------------------------------------------------------4 3.建立新程序---------------------------------------------------------------------------------------7 4.修改现有程序------------------------------------------------------------------------------------9 5.注册新用户---------------------------------------------------------------------------------------9 6.应用扩展模式-----------------------------------------------------------------------------------10 7.工具栏的使用-----------------------------------------------------------------------------------12一. 外观及功能介绍TaKaRa PCR Thermal Cycler Dice Model TP600TP600型PCR 仪是T aKaRa 公司推出的多功能,高性能的梯度PCR 仪。
T a K a R a提取R N A说
明书
-CAL-FENGHAI.-(YICAI)-Company One1
TaKaRa Code TaKaRa MiniBEST Plant RNA Extration Kit 说明书
一、制品说明
本试剂盒是小量提取植物组织Total RNA 的试剂盒。
试剂盒采用了独特的裂解系统,可以对各种简单的植物材料(叶片、茎、幼苗等)富含多糖多酚的植物组织材料(果实、种子)、真菌等进行RNA的提取,适用范围广。
按照标准流程使用本试剂盒可以有效提取分子量大于200nt的RNA,也可以按照可选步骤提取得到包含Small RNA(<200nt)的Total RNA。
试剂盒中包含了RNA提取所需的全部是局,无需额外购买其他试剂。
本试剂盒具有高效、快速、方便的特点,组织或自爆裂解后,提取操作仅需要30min 便可完成操作。
提取过程中无需苯酚氯仿抽提等步骤。
利用该试剂盒提取的RNA纯度高,基本不含蛋白质及及基因组DNA污染。
本试剂盒可以从50mg—100mg植物组织中纯化得到多至数十微克的高纯度RNA。
提取得到的RNA可以直接用于Northern杂交、斑点杂交、mRNA纯化、体外翻译、RNA分解酶的保护分析、RT-PCR、Real Time PCR、构建cDNA文库等各种分子生物学实验。
二、制品内容(50次量)
本试剂盒分两部分|Part 1和Part 2。
(1)Part 1 (-20℃保存)
2。
takara反转录试剂盒说明书说明书一、产品简介takara反转录试剂盒是一种高效、可靠的反转录试剂盒,适用于转录RNA为cDNA的实验操作。
本试剂盒由takara公司制造,经过严格的质量控制,确保产品的稳定性和可靠性。
二、试剂盒组成本试剂盒包含以下组分:1. 反转录酶:高效反转录酶,能在广泛的实验条件下进行反转录反应。
2. 基质:提供反应所需的核酸和其他辅助物质。
3. 标记物:用于标记反转录产物的荧光染料或放射性同位素。
4. 缓冲液:维持试剂盒中酶的活性,调节反应条件的缓冲体系。
5. 控制样品:用于检验试剂盒的反应效果和稳定性。
三、实验操作1. 准备工作在进行实验前,请准备所需的实验仪器和试剂,确保实验环境的清洁和无菌,避免污染对实验结果的影响。
2. RNA提取使用适当的方法提取目标RNA样本,并在提取过程中避免RNA的降解。
3. 反转录反应将提取的RNA样本与反转录试剂盒中的反转录酶、基质和缓冲液按推荐比例混合,并在适当的温度下进行反应。
反应时间根据样本的RNA含量和实验要求确定。
4. 停止反应通过停止反应来终止反转录反应,一般使用热敏感性酶来达到这个目的。
5. 产物处理反转录产物可以直接用于下游实验,如实时定量PCR、聚合酶链式反应等,也可以进行储存和后续处理。
四、实验结果解读根据试剂盒的使用目的和实验设计,对反转录产物进行相应的分析和解读。
常见的分析方法有凝胶电泳、实时定量PCR和测序等。
根据实验结果,可以得到RNA的表达情况、差异表达基因等相关信息。
五、注意事项1. 试剂保存:请按照试剂盒上的说明保存试剂,避免暴露在高温、冻融循环和光照等不利条件下。
2. 操作规范:请按照本说明书中提供的实验操作步骤进行操作,避免实验误差对结果的影响。
3. 质量控制:在每次实验中,请使用合适的阳性和阴性对照样品,以确保实验结果的准确性和可靠性。
4. 废弃物处理:请将使用过的试剂和实验废弃物按照相关规定进行处理,避免对环境造成污染。
TP600型PCR仪使用说明目 录一.外观及功能介绍----------------------------------------------------------------------------------------2二.性能一览表----------------------------------------------------------------------------------------------3三.操作方法------------------------------------------------------------------------------------------------3 1.概述------------------------------------------------------------------------------------------------3 2.使用现有程序进行PCR反应-----------------------------------------------------------------4 3.建立新程序---------------------------------------------------------------------------------------7 4.修改现有程序------------------------------------------------------------------------------------9 5.注册新用户---------------------------------------------------------------------------------------9 6.应用扩展模式-----------------------------------------------------------------------------------10 7.工具栏的使用-----------------------------------------------------------------------------------12一. 外观及功能介绍TaKaRa PCR Thermal Cycler Dice Model TP600TP600型PCR 仪是T aKaRa 公司推出的多功能,高性能的梯度PCR 仪。
操作流程1. 使用TAE缓冲液或TBE缓冲液制作琼脂糖凝胶,然后对目的DNA进行琼脂糖凝胶电泳。
2. 在紫外灯下切出含有目的DNA的琼脂糖凝胶,用纸巾吸尽凝胶表面的液体。
此时应注意尽量切除不含目的DNA部分的凝胶,尽量减小凝胶体积,提高DNA回收率。
胶块超过300 mg时,请使用多个Column进行回收,否则严重影响收率。
注)切胶时请注意不要将DNA 长时间暴露于紫外灯下,以防止DNA损伤。
3. 切碎胶块。
胶块切碎后可以加快操作步骤6的胶块溶解时间,提高DNA回收率。
4. 称量胶块重量,计算胶块体积。
计算胶块体积时,以1 mg=1 μl 进行计算。
5. 向胶块中加入胶块溶解液Buffer GM,Buffer GM的加量如下表:凝胶浓度Buffer GM使用量1.0%3个凝胶体积量1.0%~1.5%4个凝胶体积量1.5%~2.0%5个凝胶体积量6. 均匀混合后室温15-25℃溶解胶块(胶浓度较大或比较难溶时可以在37℃加热)。
此时应间断振荡混合,使胶块充分溶解(约5~10分钟)。
7. 当凝胶完全溶解后,观察溶胶液的颜色,如果溶胶液颜色由黄色变为橙色或粉色,向上述胶块溶解液中加入3 M醋酸钠溶液(pH5.2)10 μl,均匀混合至溶液恢复黄色。
当分离小于400 bp的DNA片段时,应在此溶液中再加入终浓度为20%的异丙醇。
8. 将试剂盒中的Spin Column安置于Collection Tube上。
9. 将上述操作步骤7的溶液转移至Spin Column中,12,000 rpm离心1分钟,弃滤液。
注)如将滤液再加入Spin Column中离心一次,可以提高DNA的回收率。
10. 将700 μl 的Buffer WB加入Spin Column中,室温12,000 rpm离心30秒钟,弃滤液。
注)请确认Buffer WB中已经加入了指定体积的100%乙醇。
11. 重复操作步骤10。
12. 将Spin Column安置于Collection Tube上,室温12,000 rpm离心1分钟。
TaKaRa Code N0.9769 TaKaRa MiniBEST Plant RNA Extration Kit 说明书
一、制品说明
本试剂盒是小量提取植物组织Total RNA 的试剂盒。
试剂盒采用了独特的裂解系统,可以对各种简单的植物材料(叶片、茎、幼苗等)富含多糖多酚的植物组织材料(果实、种子)、真菌等进行RNA的提取,适用范围广。
按照标准流程使用本试剂盒可以有效提取分子量大于200nt的RNA,也可以按照可选步骤提取得到包含Small RNA(<200nt)的Total RNA。
试剂盒中包含了RNA提取所需的全部是局,无需额外购买其他试剂。
本试剂盒具有高效、快速、方便的特点,组织或自爆裂解后,提取操作仅需要30min 便可完成操作。
提取过程中无需苯酚氯仿抽提等步骤。
利用该试剂盒提取的RNA纯度高,基本不含蛋白质及及基因组DNA污染。
本试剂盒可以从50mg—100mg植物组织中纯化得到多至数十微克的高纯度RNA。
提取得到的RNA可以直接用于Northern杂交、斑点杂交、mRNA纯化、体外翻译、RNA分解酶的保护分析、RT-PCR、Real Time PCR、构建cDNA文库等各种分子生物学实验。
二、制品内容(50次量)
本试剂盒分两部分|Part 1和Part 2。
Code No. RR036A 研究用PrimeScript™RT Master Mix(Perfect Real Time)说明书v201605Da目录内容页码●制品说明1●制品内容 1 ●试剂盒外必备材料 1 ●保存 1 ●特长 1 ●使用注意 2 ●操作方法 2 ● Real Time PCR 2 ●实验例 5 ●附录 5 ●关联产品7●制品说明本制品是2 Step Real Time RT-PCR用的理想反转录反应试剂。
5×PrimeScript RT Master Mix中含有定量RT-PCR的反转录反应所需的所有试剂(PrimeScript RTase、RNase Inhibitor、Random 6 mers、Oligo dT Primer、dNTP Mixture、反应Buffer),加入模板RNA和水即可迅速进行反应。
使用具有较强延伸能力的PrimeScript RTase,与制品PrimeScript RT reagent Kit(Perfect Real Time)(Code No. RR037Q/A/B)相同,可以在较短时间内高效合成Real Time PCR用模板cDNA。
本制品合成的cDNA可以用于SYBR® Green qPCR分析法和探针分析法,可以根据实验目的与SYBR Premix Ex Taq™II (Tli RNaseH Plus)(Code No. RR820Q/A/B)、SYBR Fast qPCR Mix(Code No. RR430S/A/B)和Probe qPCR Mix(Code No. RR391S/A/B)等定量试剂配合使用,能够进行高性能的基因表达分析。
注意:Takara Bio使用SYBR Green I作为研究试剂已得到Molecular Probes Inc.的许可。
●制品内容(10 μl反应×200次)1. 5×PrimeScript RT Master Mix(for Real Time)*1 400 μl2. RNase Free dH2O 1 ml×2支3. EASY Dilution(for Real Time PCR)*2 1 ml*1:含有PrimeScript RTase、RNase Inhibitor、Random 6 mers、Oligo dT Primer、dNTP Mixture、反应Buffer(含有Mg2+)。