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《支气管肺泡灌洗液细胞形态学检验中国专家共识（2020）》要点支气管肺泡灌洗液（BALF）是通过纤维支气管镜对支气管以下肺段、亚肺段水平用无菌生理盐水反复灌洗，回收获取的肺泡表面衬液样本。
BALF 的细胞形态学、病原学、免疫学及分子生物学等一系列检查，在呼吸系统疾病，尤其是下呼吸道疾病的诊断、疗效观察、预后判断及发病机制研究等方面有着重要的意义。
1 检验目的计数BALF中细胞数量（红细胞、有核细胞）及各类有核细胞所占百分比，准确识别BALF中各类细胞、寄生虫、结晶，发现细菌或真菌及其它有形成分，为临床对疾病的诊断、鉴别诊断、治疗效果和预后评估提供检验诊断依据。
2 标本采集BALF由临床医生采集，在常规纤维支气管镜检查气道后，在活检和刷检前获得。
标本采集结束后，贴好标本信息标签，室温2h内送检。
3 标本接收与处理3.1 标本接收3.2 标本处理4 检验程序4.1 标本预处理4.2 理学检查及细胞计数4.3 标本离心4.4 制片4.5 染色4.6 阅片及细胞分类5 报告5.1 报告名称及模式5.2 报告内容5.3 BALF常规报告5.4 BALF细胞学报告5.5 有条件的单位推荐出具BALF常规细胞学检查图文报告5.6 让步检验报告5.7 主动及时报告6 涂片保存7 生物参考区间有核细胞数（90～260）×106/L，肺泡巨噬细胞85%～96%，淋巴细胞6%～15%，中性粒细胞≤3%，嗜酸粒细胞<1%，鳞状上皮细胞/纤毛柱状上皮细胞≤5%。
8 生物安全防护8.1 BALF标本的采集、运送必须符合生物安全要求，防止溢出。
8.2 检验人员在处理BALF标本时，需做好个人防护，严格执行生物安全管理程序，对表明有传染性疾病的BALF 标本按级别进行防护。
9 临床意义9.1 淋巴细胞计数>15%，中性粒细胞>3%，嗜酸性粒细胞>1%，或肥大细胞>0.5%，则分别称为BALF淋巴细胞增多型（即淋巴细胞为主型）、中性粒细胞增多型（即中性粒细胞为主型）、嗜酸性粒细胞增多型（即嗜酸性粒细胞为主型）和肥大细胞增多型（即肥大细胞为主型）。
支气管肺泡灌洗(BAL)的临床应用与实验室检查一．定义：支气管肺泡灌洗（bronchoalveolar lavage,BAL）是一种经纤维支气管镜获取肺泡的细胞与生化成份的广为实用而安全的方法。
注意: BAL的操作规范BAL灌洗液的处理规范BAL的非细胞成份指标尚不能作为有用的临床参考二．用途：●疾病诊断：特异性诊断；重要诊断工具。
●疗效与预后评价●治疗●研究➢对于某些特殊疾病，BAL可以做出特异性的诊断●机会性肺部感染：卡氏肺囊虫性肺炎，巨细胞病毒性肺炎，肺结核，肺真菌感染●尘肺，石棉肺，肺出血●铍肺（阳性淋巴细胞转换试验）●支气管肺泡细胞癌，恶性淋巴瘤等（肿瘤细胞）●肺泡蛋白沉着症（对氨基水扬酸－阳性小体）●组织细胞增多症 X (Histiocytosis X)➢对于一些间质性肺病，BAL是重要诊断手段结节病，外源性过敏性肺泡炎，闭塞性细支气管炎伴机化性肺炎（BOOP），特发性肺纤维化(IPF)，慢性嗜酸细胞肺炎等。
三．应用指征1.间质性渗出改变：结节病，外源性过敏性肺泡炎，药物性肺泡炎，特发性肺纤维化，胶原血管疾病，组织细胞增多症 X，尘肺，癌性淋巴管炎等。
2.肺泡渗出改变：肺炎，肺泡出血，肺泡蛋白沉着症，BOOP，嗜酸细胞肺炎等3.免疫缺陷病人并肺渗出病变：HIV感染，化疗或放疗，免疫抑制剂治疗，器官移植四．BAL副反应：发生率为0-2.3%，当同时进行经支气管镜肺活检(TBLB)，副反应为7%，尚无因 BAL死亡报道，因TBLB死亡0.2%，因开肺活检(OLB)死亡1.8%。
1.副反应发生形式与时间2.副反应的预防：副反应随着灌注量及灌注肺段的增加而增加，仔细操作，特别注意能使并发症减少到最小程度。
●全面了解病史，进行肺功能试验，血气分析，血小板计数，出凝血时间，心电图，胸部放射片●ECG，氧饱和度监测并予吸氧●BAL后24小时观察●限制灌洗量到最小需要量●适当的操作前用药，必要时使用ß-受体激动剂等●特殊病人严格掌握适应征3.BAL时副反应发生的危险因素●>50%的肺野渗出实变PaO2<60mmHg●SaO2<90%，支气管反应性PC20<2ug/ml乙酰甲胆碱●FEV1<60%预计值，或FEV1<1L Prothrombin time<50%●血小板计数低于20,000/ml 明显异常的ECG●对镇静剂敏感或不能耐受严重的伴发症PC20：FEV1降低20%所需的最低乙酰甲胆碱浓度五．ＢＡＬ操作绝大多数在局麻下使用纤维支气管镜进行。
支气管肺泡灌洗技术及其临床应用支气管肺泡灌洗（bron choalveolar lavage, BAL ）是经纤维支气管镜获取下呼吸道主要是肺泡来源的细胞与生化成分，分析探讨肺脏疾病病理学过程的一种比较安全而实用的技术。
BAL不同于以获取大气道来源的样本进行病原学和肿瘤细胞学检查而采用少量液体（10〜30 ml）进行的支气管冲洗，也不同于治疗性灌洗，如采用少量液体进行的支气管冲洗，以移出支气管哮喘、支气管扩张等患者气道内的黏稠分泌物采用大量液体（10〜30 L）进行的全肺灌洗技术，以治疗肺泡蛋白沉积症。
自从20世纪70年代开始应用BAL研究肺脏疾病局部的免疫反应和炎症机制以来，无论是BAL的操作技术，还是支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid, BALF的检测手段、检测项目及其应用范围都有了长足的进步。
许多国家的医学团体包括我国还先后制定并发表了指南性意见，规范了BAL的技术操作及BALF实验室处理过程，使其结果更加标准可靠，从而进一步促进了BAL的发展和应用，使其作为研究肺脏疾病的一种检查手段得到了广泛的认可。
最新发布的关于结节病和特发性肺纤维化（idiopathic pulmo nary fibrosis, IPF ）的诊断和治疗的国际性联合声明也将BAL推荐为常规诊断手段。
第一节支气管肺泡灌洗的应用指征因为相对无创，没有明显的并发症，病人容易耐受，所以BAL目前已经成为肺活检的替代或补充手段，用于各种原因引起的弥漫性实质性肺疾病的临床诊断、疗效判断、预后的评价以及病理和发病机制的研究。
临床上，BAL检查主要用于感染性原因、非感染性原因、免疫性原因和肿瘤性原因引起的弥漫性实质性肺疾病（diffuse pare nchyma lung disease, DPLD或间质性肺疾病（in terstitial lu ng disease, ILD ）的诊断和鉴别诊断（表15-1 ）。
支气管肺泡灌洗(BAL) 操作方法：一、术前准备同纤维支气管镜(纤支镜) 术前准备,常规在纤支镜气道检查后于活检刷检前做BAL。
局部麻醉剂为2 %利多卡因。
二、BAL 操作技术1.灌洗部位选择:对弥漫性间质性肺疾病选择右肺中叶(B1或B5 ) 或左肺舌段，局限性肺病变则在相应支气管肺段进行BAL2. BAL 操作步骤◎首先在要灌洗的肺段经活检孔通过一细硅管注入2 %利多卡因1～2ml ,做灌洗肺段局部麻醉◎然后将纤支镜顶端紧密楔入段或亚段支气管开口处,再经活检孔通过硅胶管快速注入37 ℃灭菌生理盐水,每次25～50ml ,总量100～250ml ,一般不超过300ml◎立即用50 ～100mmHg(1mmHg = 0. 133kPa) 负压吸引回收灌洗液, 通常回收率为40 %～60 %◎将回收液体立即用双层无菌纱布过滤除去粘液,并记录总量◎装入硅塑瓶或涂硅灭菌玻璃容器中(减少细胞粘附) ,置于含有冰块的保温瓶中,立即送往实验室检查支气管肺泡灌洗液(BALF) 实验室检查一、BALF 细胞总数和分类计数检测1.将上述回收灌洗液装入塑料离心管内, 在4 ℃下以1 200r/ min 离心10min ,上清(原液或10 倍浓缩) - 70 ℃储存,用做可溶性成分的检测。
2. 经离心沉淀的细胞成分用Hank’s液(不含Ca2+、Mg2+ ) 在同样条件离心冲洗2 次, 每次5min。
弃去上清后Hank’s 液3～5 ml 制成细胞悬液。
也可以应用灌洗原液以减少细胞丢失3. 在改良的Neubauer 计数台上计数BALF 中细胞总数,一般以1 ×109/ L表示。
如果细胞数过高时,再用Hank’s液稀释,调整细胞数为5 ×109/ L ,并同时将试管浸入碎冰块中备用4. 细胞分类计数:采用细胞离心涂片装置,加入备用细胞悬液(细胞浓度为5 ×109/ L) 100μl ,在4 ℃下以1 200 r/min 离心10 min通过离心作用将一定数量的BALF 细胞直接平于载玻片上。
第十八章痰液与支气管灌洗液检验本章考点1.痰液检查2.支气管肺泡灌洗液检查一、痰液检查（一）标本采集与处理痰液理学检验以清晨第一口痰标本最适宜。
细胞学检验以上午9〜10时留痰最好。
做漂浮或浓集结核杆菌检验时，应采集12〜24h内的痰液。
测定24h痰量或观察分层情况时，容器可加少量石炭酸防腐。
用于细菌培养的标本，必须无菌采集，并先用无菌水漱口，以避免口腔内正常菌的污染。
为了防止痰液污染，用过的标本应灭菌后再处理。
（二）理学检查1.量：正常人无痰或仅有少量泡沫样或粘液样痰。
痰量增多常见于支气管扩张、肺脓肿、肺水肿和慢性支气管炎，有时甚至超过100ml/24h。
在疾病治疗过程中，如痰量减少，一般表示病情好转；但若发生支气管阻塞而使痰液不能排出时可见痰量减少，反而表明病情加重。
2.颜色与形状：正常人仅有少量白色或灰白色粘液痰，病理情况下痰液颜色可发生改变，但特异性较差，其颜色和形状改变见表1-18-1、1-18-2。
病理情况下常见的异物及临床意义见表1-18-3。
表表表表3.气味：正常人的新鲜痰液无特殊气味。
血腥味见于肺癌、肺结核等。
粪臭味见于膈下脓肿与肺相通时。
恶臭见于肺脓肿、晚期肺癌或支气管扩张等。
（三）显微镜检查直接涂片检验为常规方法，简便、快速，对临床诊断帮助较大。
涂片染色检验主要用于细胞学检验和细菌学检验。
正常痰液中无红细胞，有少量中性粒细胞和少量上皮细胞。
病理性痰液可见较多的红细胞、白细胞及其他有形成分，其临床意义见表1-18-4。
（四）质量控制1.标本采集：应注意：①注意标本留取时间：一般检验以早晨第一口痰为宜；做细胞学检验以上午9〜10h留痰液为好；浓缩法找结核杆菌时，则应留取24h痰液。
②留取痰液标本时，先用清水嗽口，用力咳出气管深处的痰液，注意勿混入鼻咽分泌物。
③细菌学培养时应无菌采集痰标本。
④及时送检。
2.显微镜检验的质量控制（1）检验人员：要加强责任心，掌握痰液中正常和异常有形成分形态特点、数量变化，提高阳性检出率。
第二节支气管肺泡灌洗液检查痰液检查虽可对呼吸道疾病的诊断提供帮助，但不够灵敏与特异且对疾病定位帮助不大。
支气管肺泡灌洗术（bronchoalceolar lavage,BAL）中在纤维支气管镜基础上发展起来的一项新技术。
BAL是应用纤维支气管镜进行支气管肺泡灌洗，采取肺泡表面衬液进行炎症与免疫细胞及可溶性物质检查的方法。
与支气管冲洗少量液体注入支气管信灌注大量的液体进行支气管肺泡灌洗不同，利用支气管肺泡灌洗液进行细胞学、微生物学、寄生虫学和免疫学等方面的各项检验，对一些下呼吸道疾病和诊断、病情观察和预后判断开辟了一条新途径。
支气管肺泡灌洗术分全肺灌洗和肺段亚肺段灌洗。
前者多用于治疗，后者多用于采集检验标本。
一、标本采集和处理通常于局部麻醉后将纤维支气管镜插入右肺中叶或左肺舌段的支气管，将其项端契入支气管分支开口，经气管活检孔缓缓少入37摄氏度灭菌生理盐水，每次30-50毫升，总量100-250毫升，不应超过300毫升。
每次注液后以-13.3~-19.95kpa负压吸出，要防止负压过大，过猛。
分别收集于用硅油处理进的容器中，容器周围宜用冰块包围，并及时送检。
记录回收液量，至少应回收30-40%以上，BALF方能进行分析。
分别注入的液体每次回收后混合一起进行试验。
第一份回收的标本往往混支气管内成分，为防止其干扰，也可将第一份标本与其它标本分开检查。
首先用单层纱布过滤以除去粘液，将滤液离心后分离上清液供生化检查和免疫学测定，沉淀物供细胞检查。
微生物学检查的标本须严格遵守无菌操作；合适的BALF应要求：①达到规定的回收比例；②不混有血液，红细胞数小于10%；③不应混有多量的上皮细胞（一般小于3%）。
二、细胞学检查1．有核细胞计数和分类计数：计数除上皮细胞及红细胞以外的所有细胞，经每毫升回收液的细胞总数表示。
细胞分类可用沉淀物制定涂片或用细胞离心器进行，正常非吸烟者BALF细胞数见表13-1，正常人的BALF含有核细胞为（5-10）×106/L。
第二节 支气管肺泡灌洗液检查
痰液检查虽可对呼吸道疾病的诊断提供帮助，但不够灵敏与特异且对疾病定位帮助不大。
支气管肺泡灌洗术（bronchoalceolar lavage,BAL ）中在纤维支气管镜基础上发展起来的一项新技术。
BAL 是应用纤维支气管镜进行支气管肺泡灌洗，采取肺泡表面衬液进行炎症与免疫细胞及可溶性物质检查的方法。
与支气管冲洗少量液体注入支气管信灌注大量的液体进行支气管肺泡灌洗不同，利用支气管肺泡灌洗液进行细胞学、微生物学、寄生虫学和免疫学等方面的各项检验，对一些下呼吸道疾病和诊断、病情观察和预后判断开辟了一条新途径。
支气管肺泡灌洗术分全肺灌洗和肺段亚肺段灌洗。
前者多用于治疗，后者多用于采集检验标本。
一、标本采集和处理
通常于局部麻醉后将纤维支气管镜插入右肺中叶或左肺舌段的支气管，将其项端契入支气管分支开口，经气管活检孔缓缓少入37摄氏度灭菌生理盐水，每次30-50毫升，总量100-250毫升，不应超过300毫升。
每次注液后以-13.3~-19.95kpa 负压吸出，要防止负压过大，过猛。
分别收集于用硅油处理进的容器中，容器周围宜用冰块包围，并及时送检。
记录回收液量，至少应回收30-40%以上，BALF 方能进行分析。
分别注入的液体每次回收后混合一起进行试验。
第一份回收的标本往往混支气管内成分，为防止其干扰，也可将第一份标本与其它标本分开检查。
首先用单层纱布过滤以除去粘液，将滤液离心后分离上清液供生化检查和免疫学测定，沉淀物供细胞检查。
微生物学检查的标本须严格遵守无菌操作；合适的BALF 应要求：①达到规定的回收比例；②不混有血液，红细胞数小于10%；③不应混有多量的上皮细胞（一般小于3%）。
二、细胞学检查
1．有核细胞计数和分类计数：计数除上皮细胞及红细胞以外的所有细胞，经每毫升回收液的细胞总数表示。
细胞分类可用沉淀物制定涂片或用细胞离心器进行，正常非吸烟者BALF 细胞数见表13-1，正常人的BALF 含有核细胞为（5-10）×106/L 。
2．淋巴细胞亚群分析：BALF 中淋巴细胞增多，可用单克隆抗体进行淋巴细胞亚群分析。
例如CD3、CD4、CD8、HLA-DR 等以有助于发病机制的研究。
正常人非吸烟者 BALF 中淋巴细胞表面抗原表型见表13-2。
3．癌细胞：支气管肺癌患者的BALF 沉淀物检出癌细胞，有助于肺癌诊断。
表13-1 正常非吸烟者BALF 细胞
作者 年 例数 注入量 回收量（ %） 总细胞数（× 106）
细胞（× 106/ml ）
Mac Lym Neut Eos
Hunninghske 1983 8 100 52 14 ．0 26 ．9 93 7 0 0
北医大三院 1987 10 150 62 13 ．4 14 ．7 86 13 0 ．9 0 ．05 Ettensohn 1988 78 120 63 7 ．3 9 ．4 95 4 1 0 注：Mac 巨噬细胞； Lym 淋巴细胞；Nuet 中性粒细胞；Eos 噬酸性细胞
表13-2 正常非吸烟者 BALF 中淋巴细胞表面抗原表型
作者 年 例数 淋巴细胞（ %） 总 -?/FONT>T
TH TS H ：S B 细胞
Yamada 1986 25 13 ．8 63 ．0 45 ．4 25 ．3 1 ．90 5 ．3 Wallaert 1987 12 7 ．7 66 ．4 48 ．4 27 ．5 1 ．8 ?/FONT>
三、可溶性物质检查
BALF 离心液的上清液中含有复杂的可溶性成份，例如各种蛋质、酶类、脂类等（表 13-3）。
这些成分的来源有：①被动漏出者（如白蛋白、血清类粘蛋白）；②主动转运者；③局部产
生分泌成分。
这些物质反映肺泡表面衬液成份，其测定对了解某些肺部疾病的病变特征，研究发病机制提供重要手段。
表13-3 BALF检测的可溶性物质
溶质浓度近似值溶质浓度近似值
总蛋白70 μg/ml纤维连接蛋白30-150ng/ml
白蛋白70 μg/ml白细胞弹性蛋白酶+
免疫球蛋白胶原酶+
IGG 2.5-10 μg/ml血管紧张素转换酶+
IGA 2.5-6 μg/ml极性脂质78 μg/ml
IGM 100ng/ml 非极性脂质45 μg/ml
IGE 0.06-0.3 μg/ml前列腺素E 200-2000pg/ml
α 1-抗胰α蛋白酶1-2 μg/ml血栓素B 25-85pg/ml
α 2-巨球蛋白0.04 μg/ml
癌胚抗原0.8ng/ml
转铁蛋白 4 μg/ml
四、微生物学检查
1．涂片BALF不像痰液那样易受上呼吸道杂菌的污染，也不含气管和左右大支气利害的分泌物，含非病原性阿菌很少，故其涂片检菌的意义较大。
取BALF沉淀物进行本兰氏染色与抗酸染色检查，对结核分支杆菌的检查有较大意义。
2．培养：严格无菌操作采BALF进行增菌培养或取其沉淀物直接分离培养，是检查支气管和肺部感染的重要方法，不仅适用于对细菌和真菌等检查，也适用于对支原体的培养和病毒分离，当培养的细菌为105CGU/ml时被认为有诊断意义。
但标本采集方法复杂。
五、寄生虫学检查
1．卡氏肺孢子虫：人类一般受感染后多无明显症状。
但若患者的免疫功能低下，特别是AIDS 患者和大量使用免疫抑制剂的患者易受感染，并可引起严重的间质性肺炎。
于患者痰中不易查到寄生虫，而BALF沉淀物检出的阳性率较高。
2．卫氏并殖吸虫卵：轻型肺吸虫病患者痰中可能查不到虫卵，而可从BALF沉淀物中查到。
除以上各项检查外，还可检查BALF 中有无其它异特。
若在BALF 沉淀物中查到石棉小体，有助石棉肺的诊断。
六、临床应用
由于BAL 能获取肺泡表面衬液，因此对其内容物的检查有助于肺部疾病的诊断、治疗、预后判断及发病机制研究。
其应用范围越来越广，此处钗做重点介绍：
1．肺部感染的病原学诊断：BAL检查在下呼吸道感染的检查中占有重要的地位。
BAL 可以收集较大范围肺实质的肺泡表面衬液标本，可进行原虫、病毒及细菌学等检查。
对于普通细菌感染者其细菌培养大于等于105cfu/ml时为确定感染的阈值。
但对于某些特殊感染，如在BALF中分离出结核分支杆菌、军团菌即可做出诊断。
BALF对免疫功能低下合并肺感染的诊断也很有帮助，如对巨细胞病毒感染的敏感性达96%，对肺孢子虫的感染敏感性为85-90%。
2．BALF 检查：诊断呼吸道原发性或继发性恶性肿瘤有较好效果，也包括周围性肺癌、弥漫性肺恶性肿瘤（如支气管肺泡癌）、小细胞肺癌等。
但BALF检查结果受癌类型和肿瘤大小的影响，以腺癌和肺泡癌阳性率最高。
3．对间质肺疾病的诊断、治疗评价及预后提供帮助
（1）外源性变应性肺泡炎：急性期BALF细胞总数明显增加，达对照组4倍。
急性期早期肥大细胞增多，恢复后降至正常。
淋巴细胞亦明显增多，其亚群以CD8+增多为主，
CD4/CD8比值降低，CD57+ 和CD16+ 也增加。
临床上认为BAL 是外源性变应性肺泡炎最敏感的检测手段。
优于X线胸片及肺功能检查。
（2）结节病：BALF细胞总数增高，主要为T细胞增多，以CD4+ 为主。
CD4/CD8 比值明显增高，这些变化有重要的诊断意义。
中性粒细胞和肥大细胞的增多预示病人闰变的有可能发展为纤维化。
（3）特发性肺间质纤维化：BALF中主要为中性粒细胞增多，嗜酸性粒细胞也可能增加，据此与以淋巴细胞增多为主的其它崩牙肿肺疾病鉴别。
BAL做为一种特殊的检查方法对某些其它肺疾患如支气管哮喘，成人呼吸窘迫综合征、弥漫性肺出血、肺泡蛋白沉着症（BALF外观呈乳状）等的临床意义也处于研究和观察之中。
BALF检查中细胞计数和分类包括T淋巴细胞亚群分类，经过多年的研究已基本标准化了，但对可溶性物质检查还存在某些问题，主要是灌洗液量与方法不同，对肺衬液稀释程度影响测定结果，尚须进一步的研究。
BAL应用越来越广泛，虽然其操作复杂，有上些生理性改变及轻度并发症，但只要选好适应的证，操作正确，还是一种安全有效的检查方法。
进行BAL检查的禁忌证有：①严重的肺功能损害者；②新近发生急性心肌梗死患者；③新近发生大咳血者；④活动性肺结核未经治疗者等。
