支气管肺泡灌洗术的操作方法
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支气管肺泡灌洗术操作规范一、概述支气管肺泡灌洗术(bronchoavleolar lavage)通过纤维支气管镜对支气管以下肺段或亚肺段水平,反复以无菌生理盐水灌洗、回收,对其进行一系列检测和分析,从而获得下呼吸道病变的性质特点和活动程度,有助于确立诊断。
二、适应症(一)肺部感染,特别是免疫受损、免疫缺陷肺部感染的病原学诊断(二)弥漫型和周围型肺部肿瘤的细胞学诊断(三)间质性肺疾病,如结节病、特发性肺间质纤维化、外源性变应性肺泡炎、肺泡蛋白沉着症、胶原血管伴肺纤维化等的诊断、治疗、疗效和预后估计。
(四)以纤维支气管镜对支气管以下肺段或亚肺段水平,反复以无菌生理盐水灌洗、回收的一项技术,对其回收液进行细胞学、生化学、酶学和免疫学等一系列检测和分析。
1.全肺灌洗:用于肺泡蛋白沉着症、矽肺、肺泡微石症、哮喘持续状态等的治疗。
2.肺段灌洗:主要用于弥漫性间质性肺纤维化、石棉肺和卡氏肺囊虫肺炎的诊断,对弥漫性肺泡癌的诊断,也有重要价值。
三、用物用品准备(一)纤维支气管镜,冷光源,低负压吸引器(≤1(三)3kPa),硅质灌洗液收集瓶,50ml注射器,高频通气机)。
(二)盐酸利多卡因20-40ml,盐酸肾上腺素1mg,0.9%NS 500mL一瓶,0.9%NS250mL一瓶。
常规备用盐酸胺碘酮,西地兰,呋塞米,肾上腺素,甲强龙等抢救药品,简易呼吸气囊,储雾罐,心电监护等物品。
(三)交代病情,签气管镜检查同意书。
四、方法和步骤(一)灌洗部位选择:对弥漫性间质性肺疾病选择右肺中叶(B1 或B5 )或左肺舌段,局限性肺病变则在相应支气管肺段进行BAL。
(二)BAL 操作步骤:1.首先在要灌洗的肺段经活检孔通过一细硅胶管注2 %利多卡因1~2ml ,做灌洗肺段局部麻醉。
2.然后将纤支镜顶端紧密楔入段或亚段支气管开口处,再经活检孔通过硅胶管快速注入37 ℃灭菌生理盐水,每次25~50ml ,总量100~250ml ,一般不超过300ml 。
支气管肺泡灌洗术及注意事项灌洗后7大并发症,防治措施这样做!支气管肺泡灌洗术在间质性肺疾病辨别、GM试验中都起到很大的作用。
而支气管肺泡灌洗术如何正确操作,操作中有哪些注意事项?小界邀请云南省第一人民医院呼吸科孙丹雄医生带来《支气管肺泡灌洗术及注意事项》。
一、操作方法首先一起来看看操作方法:术前准备:•局部麻醉剂为2%利多卡因,尽量减少咳嗽,准备生理盐水、注射器、手套、石蜡油(必要时使用,减少支气管镜损伤)灌洗部位:•病变局限者选择病变段(特别是出现新的或进展性的浸润性病变的叶段)。
•对于肺外周病变,有条件的单位可考虑采用径向超声支气管镜技术进行更准确的定位。
•对于未确诊的间质性肺疾病患者,在接受BAL操作前需要通过HRCT来决定BAL的具体部位,一般推荐在呈观磨玻璃影、大量结节或细网格影的部位进行操作。
•弥漫性病变者选择右肺中叶或左上叶舌段图弥漫性病变者灌洗部位选择局部麻醉:•在灌洗的肺段经活检孔注入2%利多卡因1ml~2ml,行灌洗肺段局部麻醉。
静脉复合麻醉的患者如仍有强烈的气道反应,同样可以注入2%利多卡因1ml~2ml。
•麻醉要充分,咳嗽反射必须得到充分抑制,防止因剧烈咳嗽引起的支气管黏膜损伤出血,影响BALF的回吸收量和检测结果(血液会导致GM试验假阳性)。
图支气管镜方向注入生理盐水:•支气管镜顶端嵌顿在目标支气管段或亚段开口后(嵌顿要紧密,防止大气道分泌物混入或灌洗液外溢),经操作孔道快速注入37℃或室温灭菌生理盐水,总量60ml~120ml,分次注入(每次20ml~50ml)负压吸引:•注入生理盐水后,立即用合适的负压吸引获取BALF,总回收率≥30%为宜。
注意负压不宜过大,以吸引时支气管腔不塌陷为宜。
灌洗液收集:•用于病原学分析的标本需要无菌容器收集;送检量10ml~20ml (≥5ml);•细胞学分析需选择硅化的塑料容器或玻璃容器以减少细胞的黏附;•如考虑为大气道疾病时,建议第一管回吸收液单独处理;•非大气道疾病时,可将所有标本混合后分送。
支气管镜-肺泡灌洗液(BALF)采集技术规范患者咽喉局部麻醉后,导入纤维支气管镜。
通过纤维支气管镜对病灶所在支气管以下肺段或亚肺段水平,用37。
C或室温无菌生理盐水多次灌洗,每次注入20~60πιl(常规进行4~5次),直到总共灌洗100~300ml,并充分吸引回收,从回收液中取出IOml标本,放入无菌管中,旋紧盖子,即刻送达实验室的技术。
【适应证】1.对于疑似肺炎患者,若有机会进行气管镜检查,则可同时采集肺泡灌洗液进行培养。
2.不能进行深部咳痰的患者,也可考虑通过气管镜获取标本。
【禁忌证】不能耐受支气管镜检查者。
【目的】采集肺泡灌洗液进行检测,可减少口咽部菌群的污染,提高检测结果的准确性。
【制度与依据】1.本规范理论部分主要依据:中华预防医学会医院感染控制分会发表于2018年第28卷第20期中华医院感染学杂志的《临床微生物标本采集和送检指南》。
感染性疾病的正确诊治需要以正确的病原学检测作为指导,而正确的病原学检测其前提是采集和送检合格标本。
因此,必须规范微生物标本的采集和运送,避免因标本的不合格,产生错误的病原学检测结果而误导临床治疗。
2.本规范操作部分主要依据:中华人民共和国国家卫生健康委员会2018年12月11日发布,2019年6月1日实施的《临床微生物学检验标本的采集和转运》,是中华人民共和国卫生行业标准,WS/T640—2018o本标准是按照GB/TL1—2009给出的规则起草;起草单位:北京大学人民医院、中日友好医院、安徽省立医院、首都医科大学附属北京友谊医院、北京医院、北京市垂杨柳医院;主要起草人:王辉、刘颖梅、张正、马筱玲、苏建荣、胡云建、宁永忠、王晓娟。
【准备】1.用物准备:医嘱单、痰液标本化验单或标本条形码、负压吸引装置1套、痰液收集器1个、生理盐水500ml、50ml注射器1个,无菌纱布2块,无菌手套、手消液,检查用物的有效期,物品处于备用状态。
2.环境准备:病室安静整洁,光线充足,适宜操作,关闭门窗(或窗帘),请无关人员回避,保护患者隐私。
把小鼠喉咙处皮肤剪开,用镊子把气管周围的组织分离开,气管暴露出来。
注射器7号针头,针尖剪掉,再磨平,把动物仰位固定,针头从嘴巴里进去,伸到气管里。
和平时灌胃一样,只是现在伸到气管。
在甲状腺(气管显得稍宽处)下面,针头就伸到这里,大约甲状腺过3毫米处。
然后拿一根线,从气管下穿过,把针头和气管一起结扎了,其实就是把针头固定在里面,不让它跑出来。
打结时用点力,手拨动针头时明显感觉针头动不了就可以了。
然后注射器吸取液体推进气管,第一次一般吸不完全,没关系,第二次的液体推进去后就能吸出来很多了。
我基本能全部吸出来的。
希望能帮上忙。
标题:小鼠肺泡灌洗标准操作规程关键词:肺泡灌洗;细胞分类计数;细胞因子目的:检查小鼠各种病理生理状态(特别是肺部疾病)下,肺部出现的各种病理改变。
例:哮喘模型中检测嗜酸细胞的分类数有否提高,灌洗液中各种细胞因子,如IL-4,IL-5,IL-10,IFN-r等水平。
主体内容(操作步骤):实验的准备实验的器材、仪器、药品:4℃遇冷的单纯PBS和4℃遇冷的含1%BSA的PBS;手术器械:眼科剪,眼科镊,穿刺针或4号半头皮针;血细胞计数板;低温离心机实验操作规程:灌洗分单侧和双侧。
单侧一般为颈部和胸部解剖,气管和一侧肺叶结扎。
再用穿刺针插入气管上端,0.3mlPBS反复冲洗,一般为3遍,每遍冲洗次数根据需要决定,一般3-5次即可。
双侧灌洗则只需要进行颈部解剖,暴露气管进行插管。
PBS灌洗量增高到0.8ml.灌洗次数同上。
结果判定:1.回收的灌洗液4℃,1500r离心10分钟,回收上清置于-20℃等待进行细胞因子检测;2.用1ml含有1%BSA的PBS重悬细胞沉淀,取10ul重悬液进行细胞计数。
余液再次4℃离心,参数同上;3.离心后去上清,不需太彻底,可根据第二步细胞计数所得结果和需要涂片张数决定需要残留多少上清重悬细胞沉淀。
一般如果细胞总数有10*6次方/ml的话,用80-100ul重悬可以涂三张片,这样玻片上细胞密度比较适中。
纤维支气管检查肺泡灌洗诊疗术操作流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成,希望大家下载以后,能够帮助大家解决实际的问题。
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简述支气管肺泡的灌洗操作方法支气管肺泡灌洗是一种通过灌注洗涤液来清洁和脱除支气管和肺泡内分泌物、痰液等物质的操作方法。
它是一种重要的呼吸道护理方法,可以帮助患者清除呼吸道内的痰液、分泌物等,维持呼吸道通畅,预防呼吸道感染和其他呼吸系统疾病的发生。
支气管肺泡灌洗操作方法相对简单,但需要医护人员严格按照操作规范进行,以确保患者的安全和操作的有效性。
下面将对支气管肺泡灌洗的操作方法进行详细介绍。
第一步:准备工作在进行支气管肺泡灌洗之前,需要进行充分的准备工作。
首先需要准备好洗涤液,通常可以选择理想的液体来进行灌洗。
同时,还需要准备好灌洗器具、吸引器、吸痰器、护士椅等操作所需的设备和器材。
在准备工作之后,要对设备进行清洁消毒,并确认患者的个人信息,了解其相关病史及禁忌症,并与患者进行沟通,告知支气管肺泡灌洗的相关操作流程和风险,并取得患者的同意。
第二步:检查患者在开始灌洗之前,要对患者进行仔细的检查。
主要包括患者的一般情况、呼吸状况、心血管状况等方面的检查。
特别要注意的是患者是否存在支气管痉挛、肺大泡或粘连肺组织等情况,这些都是进行支气管肺泡灌洗时的禁忌症。
如果出现这些情况,应当考虑是否需要暂时中止灌洗操作,或是采用其他的操作方法。
第三步:操作准备操作准备是支气管肺泡灌洗的第一步,包括患者的体位、呼吸道的清洁等。
首先需要找到合适的操作位置,让患者身体舒适并且便于操作。
然后要将呼吸道清洁干净,以减少灌洗时的细菌感染和其他并发症的发生。
第四步:操作方法1.吸痰、抗痰:在进行灌洗之前,首先需要用吸痰器或吸痰管帮助患者吸出口腔、咽喉和气管内的痰液,使呼吸道畅通。
2.灌洗操作:将洗涤液(如理想洗液)装入洗涤器,并通过合适的途径(如口腔、鼻腔)将洗涤液导入患者的呼吸道中。
在导入的过程中要控制好液体的流量和流速,避免刺激患者的呼吸道。
3.洗涤:在洗涤液导入后,洗涤过程会持续一定时间,以便液体与呼吸道内的分泌物充分接触和混合。
儿童支气管肺泡灌洗操作流程
儿童支气管肺泡灌洗操作流程如下:
1. 准备灌洗液:准备适量的生理盐水或温开水,用于灌洗儿童的支气管和肺泡。
2. 麻醉:对儿童进行局部麻醉,以减轻灌洗过程中的不适感。
3. 插入导管:将细小的导管插入儿童的支气管中。
4. 灌洗:通过导管将灌洗液注入儿童的支气管和肺泡内。
5. 吸出灌洗液:轻轻吸出灌洗液,并将灌洗液送至实验室进行检查。
6. 退出导管:完成灌洗后,将导管退出儿童的支气管。
7. 观察:观察儿童是否有任何不适症状,如咳嗽、呼吸困难等。
8. 注意事项:在灌洗后的几天内,注意观察儿童是否有任何异常症状,如发热、咳嗽加剧等。
如有异常症状,应及时就医。
总之,儿童支气管肺泡灌洗是一项专业的医疗操作,需要由经验丰富的医生进行操作。
如果您对儿童支气管肺泡灌洗有任何疑问或需要更多信息,请咨询专业医生。
纤维支气管镜肺泡灌洗和吸痰治疗操作规范
适应症
清除呼吸道内的分泌物
清除气道内积血
清除气管支气管内异物
观察气道通常情况和粘膜充血、水中变化
相对禁忌症
严重低氧血症,SpO2<90%
大咯血
高血压
冠心病、先天性心脏病等严重器质性心脏病
疑有动脉瘤
颅内高压
哮喘发作期
凝血机制异常
术前准备:
签署知情同意书
人工气道气管插管气管切开
机械通气模式和参数 VCV、VT6-10ml/kg、RR16bpm、PEEPOcmH2O、FiO2100%
镇痛镇静
体位准备
器械和药品准备
纤维支气管镜
冷光源
吸引器,吸痰延长管
换药包
生理盐水250ml、无菌石蜡油、无菌纱布、10ml注射器、吸痰收集器等。
操作步骤
1..纤维支气管镜经可吸痰延长管置入主支气管
2.注射利多卡因10ml
3.将纤维支气管镜沿左右主支气管进入各级支气管进行观察、吸痰或肺泡灌洗
4.术毕推出纤维支气管镜
5.机械通气模式和参数设置还原
并发症
1.麻醉药过敏
2.血压降低或升高
3.气道出血
4.气胸
5.心律失常
6.SpO2<90%
7.支气管痉挛
维护清洗和消毒
1.操作过程中避免导光缆扭曲和打圈,避免光纤折断
2.避免用力使用弯曲钮,以免损坏牵引钢丝
3.清水清洗纤维支气管镜表面,管道内吸入清洗
4.清洗消毒
清洗消毒方法:水洗-酶洗-水洗-酸化水清洗-酒精清洗-干吹-悬挂放置。
支气管肺泡灌洗(BAL) 操作方法:一、术前准备同纤维支气管镜(纤支镜) 术前准备,常规在纤支镜气道检查后于活检刷检前做BAL。
局部麻醉剂为2 %利多卡因。
二、BAL 操作技术1.灌洗部位选择:对弥漫性间质性肺疾病选择右肺中叶(B1或B5 ) 或左肺舌段,局限性肺病变则在相应支气管肺段进行BAL2. BAL 操作步骤◎首先在要灌洗的肺段经活检孔通过一细硅管注入2 %利多卡因1~2ml ,做灌洗肺段局部麻醉◎然后将纤支镜顶端紧密楔入段或亚段支气管开口处,再经活检孔通过硅胶管快速注入37 ℃灭菌生理盐水,每次25~50ml ,总量100~250ml ,一般不超过300ml◎立即用50 ~100mmHg(1mmHg = 0. 133kPa) 负压吸引回收灌洗液, 通常回收率为40 %~60 %◎将回收液体立即用双层无菌纱布过滤除去粘液,并记录总量◎装入硅塑瓶或涂硅灭菌玻璃容器中(减少细胞粘附) ,置于含有冰块的保温瓶中,立即送往实验室检查支气管肺泡灌洗液(BALF) 实验室检查一、BALF 细胞总数和分类计数检测1.将上述回收灌洗液装入塑料离心管内, 在4 ℃下以1 200r/ min 离心10min ,上清(原液或10 倍浓缩) - 70 ℃储存,用做可溶性成分的检测。
2. 经离心沉淀的细胞成分用Hank’s液(不含Ca2+、Mg2+ ) 在同样条件离心冲洗2 次, 每次5min。
弃去上清后Hank’s 液3~5 ml 制成细胞悬液。
也可以应用灌洗原液以减少细胞丢失3. 在改良的Neubauer 计数台上计数BALF 中细胞总数,一般以1 ×109/ L表示。
如果细胞数过高时,再用Hank’s液稀释,调整细胞数为5 ×109/ L ,并同时将试管浸入碎冰块中备用4. 细胞分类计数:采用细胞离心涂片装置,加入备用细胞悬液(细胞浓度为5 ×109/ L) 100μl ,在4 ℃下以1 200 r/min 离心10 min通过离心作用将一定数量的BALF 细胞直接平于载玻片上。
支气管肺泡灌洗支气管肺泡灌洗(BAL)是以纤支镜嵌入到肺段或亚段支气管水平,反复以无菌生理盐水灌洗、回收的一项技术,对其回收液(BALF)进行细胞学、生化学、酶学和免疫学等一系列检测和分析,是作为研究肺部疾病的病因、发病机制、诊断、评价疗效和判断预后的一项手段,是纤支镜应用的重要发展。
依灌洗范围和应用的不同,将BAL方法分为两种:全肺灌洗和肺段或亚段灌洗。
(一)全肺灌洗用于肺泡蛋白沉着症、严重哮喘发作、肺尘埃沉着症、肺泡微石症的治疗。
以肺泡蛋白沉着症为例简要说明其操作过程。
在手术室全麻下进行为宜,先经纤支镜引导下Carlen双腔管,吸纯氧10~15min 后,以150cm H2O压力,滴入37 ℃灭菌生理盐水500~1000ml,然后吸出或任其自行流出或虹吸回收,回收的流失量不超过200ml .灌洗应反复进行,直至洗出液完全清亮,总量一般在3~10L ,个别可高达18L .先灌洗一侧,隔2~3 天再灌另一侧。
全肺灌洗技术操作较复杂,有一定风险,为此,根据病人具体情况,可选择小液量选择性肺叶灌洗,每次50~100ml ,反复灌洗和吸出,一侧肺灌洗总量200 ~ 2000ml,隔3~7 天一次,两肺交替进行。
肺泡蛋白沉着症在采用BAL 治疗前,仅有1 / 4 病例病变可安然无恙全消退,死亡率高达32 .4 % ;采用灌洗治疗,约3 / 4 患者症状可获缓解,有效者于灌洗后1~2 天,症状即见改善,胸部X 线表现的改善则较慢,一般需数日~数周。
严重哮喘发作进行灌洗时,可于灌洗液中加溶痰剂,如乙酰半胱氨酸以增加粘液廓清作用;根据病情,可在局麻下进行小容量(250ml)灌洗,效果良好,操作并发症和死亡率很低,据24521 例的统计,分别为0 .08 %和0 .01 %。
全肺灌洗治疗肺尘埃沉着症的操作方法,与肺泡蛋白沉着症基本相同,某组治疗之I~III期硅沉粉病70 余例次,灌洗后症状普遍好转,通过灌洗清除SiO2,典型病例肺通气功能、P(A-a)O2均有明显好转,虽然对已经发生的纤维化改变不能逆转,但对阻止病变继续进展,改善患者长期顶后,肯定会有好处。
简述支气管肺泡灌洗操作方法
支气管肺泡灌洗(bronchoalveolar lavage, BAL)是一种通过支
气管插管将生理盐水注入肺部,并通过抽取灌洗液来获取肺部细胞和炎症细胞的技术。
以下是支气管肺泡灌洗的基本操作步骤:
1. 准备工作:首先需要准备好所需的设备和材料,包括呼吸机、支气管镜、标本袋、注射器、生理盐水等。
同时,准备好操作所需的个人防护装备,如手套、口罩、护目镜等。
2. 麻醉和镇静:将患者置于半卧位,并进行一般麻醉和镇静,以保证患者的舒适和安全。
3. 插入导管:在经过麻醉后,用支气管镜引导下的插管将导管插入患者的支气管。
4. 灌洗:通过插入导管,将预先准备好的生理盐水注入到肺部,一般注入量为20-50毫升。
注入时需要保持缓慢平稳,以免引
起患者不适。
5. 收集灌洗液:将注入的生理盐水通过相同的导管抽取回来,同时收集到标本袋中。
一般来说,重复多次注入和抽取灌洗液,以增加采样的准确性和可靠性。
6. 沉淀和分离:将收集到的灌洗液放置在离心管中,并进行离心分离,使细胞和炎症细胞沉淀到离心管底部。
7. 细胞计数和分析:将沉淀的细胞用适当染色方法染色,并使用显微镜观察和计数细胞数量和类型。
根据需要,可以进行细胞学和化学分析。
支气管肺泡灌洗是一种常见的临床检查方法,用于评估和诊断肺部疾病,如感染、炎症、肺癌等。
在实施过程中,需要注意操作的细致和患者的安全。
支气管肺泡灌洗术(专业知识值得参考借鉴)一概述支气管肺泡灌洗术(bronohoalveolarlavage,BAL)是在纤维支气管镜检查基础上发展起来的一项新技术。
是利用支气管镜向支气管肺泡内注人生理盐水并随即吸出,收集肺泡表面有效液体,检查其细胞成分和可溶性物质的一种方法。
有全麻下经卡伦双腔管行一侧全肺灌洗、经纤维支气管镜灌洗两种方法。
临床用于诊断多种肺部疾病,如肺泡炎、肺纤维化、石棉肺、肺癌、肺囊虫病、肺泡蛋白沉积症等的临床诊断、鉴别诊断以及研究肺部疾病的病因、发病机制、评价疗效和预后等。
二术前准备1.向患者和家属说明肺泡灌洗的目的、方法和要求,说明支气管肺泡灌洗术是目前治疗PAP的主要方法,并强调方法的有效性和安全性,以及患者在手术过程中应如何配合等。
2.完善术前相关检查:血常规、出凝血时间、血气分析、电解质、肺功能、心电图、X线胸片和CT 等检查结果。
3.指导患者进行有效地咳嗽和呼吸功能锻炼,以利于灌洗后肺功能的恢复和肺部分泌物的排除。
4.术前4小时禁饮禁食。
三适应证由于本法无创伤,操作安全,且可多次重复,故在国内许多医院已应用于临床。
1.肺间质疾病的诊断、鉴别诊断及预后评价。
2.肺部感染的病原学检查。
3.肺癌和其他肺部肿瘤的细胞学诊断。
4.其他肺部疾病的诊断,如肺泡蛋白沉积症、肺含铁血黄素沉着症、弥漫性肺泡出血、石棉肺等。
5.清除顽固性肺部感染患者气道内潴留的痰液。
6.支气管哮喘持续状态、支气管扩张时痰液多、慢性支气管炎和间质性肺炎等的治疗。
四禁忌证1.心力衰竭、严重心律失常、新近发生的心肌梗死,重度肺功能不全及急性呼吸衰竭等;2.新近大咯血,排除弥漫性肺泡出血的患者;3.活动性肺结核未经治疗者;4.有明显电解质异常的患者。
五注意事项1.操作时,应当避免创伤和引起患者咳嗽,否则可导致黏液和血液的明显污染。
2.整个灌洗过程中,支气管镜需一直保持适当位置,以防灌洗液溢出及大气道分泌物污染。
支气管肺泡灌洗术定义、作用、实施时机及
注意事项
支气管肺泡灌洗术
洗肺的全称是支气管肺泡灌洗术,它是一项通过支气管镜进行的微创内窥镜技术。
支气管镜是一种带光源和镜头的软镜,操作时将软镜经口或鼻置入从气管进入到支气管中,可以帮助医生直接观察到气管、支气管黏膜、管腔病变的情况。
支气管肺泡灌洗术作用
观察气道情况;
进一步送检诊断;
清理痰液和痰栓。
支气管肺泡灌洗是指通过支气管镜向支气管肺泡内注入规定量的无菌生理盐水,充分吸引获得合格的肺泡灌洗液后进行相关检测,特别是感染病原检测;同时可以对肺炎局部进行冲洗,排出肺炎区域大量的炎性分泌物(痰液),达到对肺部疾病的诊断和治疗目的。
实施时机
支气管肺泡灌洗有严格的操作指征。
如患儿出现肺不张局部实变,甚至有坏死和痰栓形成等非常严重的炎症反应时,可能需要在支气管镜下进行肺灌洗,让气道通畅,同时在镜下也可以看到肺部病变的程度。
支气管镜术特别注意事项
术前需禁食禁水6小时。
术后监测生命体征2小时,短时间内减少说话
术后禁食禁水2小时,2小时后可饮用少量温开水,后恢复至正常饮食。
胸闷、咯血、呼如果出现胸痛、吸困难等情况,需及时告诉医护人员。
把小鼠喉咙处皮肤剪开,用镊子把气管周围的组织分离开,气管暴露出来。
注射器7号针头,针尖剪掉,再磨平,把动物仰位固定,针头从嘴巴里进去,伸到气管里。
和平时灌胃一样,只是现在伸到气管。
在甲状腺(气管显得稍宽处)下面,针头就伸到这里,大约甲状腺过3毫米处。
然后拿一根线,从气管下穿过,把针头和气管一起结扎了,其实就是把针头固定在里面,不让它跑出来。
打结时用点力,手拨动针头时明显感觉针头动不了就可以了。
然后注射器吸取液体推进气管,第一次一般吸不完全,没关系,第二次的液体推进去后就能吸出来很多了。
我基本能全部吸出来的。
希望能帮上忙。
标题:小鼠肺泡灌洗标准操作规程
关键词:肺泡灌洗;细胞分类计数;细胞因子
目的:检查小鼠各种病理生理状态(特别是肺部疾病)下,肺部
出现的各种病理改变。
例:哮喘模型中检测嗜酸细胞的分类数有否提高,灌洗
液中各种细胞因子,如IL-4,IL-5,IL-10,IFN-r等水平。
主体内容(操作步骤):
实验的准备
实验的器材、仪器、药品:4℃遇冷的单纯PBS和4℃遇冷的含1%BSA的PBS;
手术器械:眼科剪,眼科镊,穿刺针或4号半头
皮针;血细胞计数板;低温离心机
实验操作规程:灌洗分单侧和双侧。
单侧一般为颈部和胸部解剖,气管和一侧肺叶结扎。
再用穿刺针插入气管上端,0.3mlPBS反复冲洗,一般为3遍,每遍冲洗次数根据需要决定,一般3-5次即可。
双侧灌洗则只需要进行颈部解剖,暴露气管进行插管。
PBS灌洗量增高到0.8ml.灌洗次数同上。
结果判定:1.回收的灌洗液4℃,1500r离心10分钟,回收上清置于-20℃等待进行细胞因子检测;
2.用1ml含有1%BSA的PBS重悬细胞沉淀,取10ul重悬液进行细胞计数。
余液再次4℃离心,参数同上;
3.离心后去上清,不需太彻底,可根据第二步细胞计数所得结果和需要涂片张数决定需要残留多少上清重悬细胞沉淀。
一般如果细胞总数有10*6次方/ml的话,用80-100ul重悬可以涂三张片,这样玻片上细胞密度比较适中。
4.涂片后待玻片自然晾干,然后置于10%中性甲醛溶液中固定10分钟以上,随后就可以进行常规HE染色。
5。
染色后就可以进行细胞分类计数,计算300个以上细胞,结果就比较可靠了。
使用静脉留置针,颈部解剖显露气管,插入留置针,用细线打结固定,拔出针芯。
链接注射器,即可开始灌洗!本实验室是这么做的,很方便,效果很好。