酵母菌-霉菌二合一测试片产品说明书

食品中霉菌和酵母菌的快速测定测试片法1范围本标准规定了霉菌和酵母（molds and yeasts）的快速测定测试片方法。

本标准适用于食品中霉菌和酵母的快速测定。

2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。

其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB4789.15食品安全国家标准食品微生物学检验霉菌和酵母计数AOAC OMA2014.05《食品中霉菌酵母菌计数测定方法3M™Petrifilm™快速霉菌酵母计数测试片方法》3术语和定义GB4789.15界定的术语和定义适用于本文件。

4设备和材料除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其它设备和材料如下：4.1培养箱：２８℃±１℃4.2恒温水浴锅：46℃±１℃4.3天平：感量为0.1g4.4均质器及均质袋4.5振荡器4.6无菌吸管：1mL（具0.01mL刻度）、10mL（具0.1mL刻度）或微量移液器及吸头4.7无菌锥形瓶：容量500mL4.8放大镜或3M测试片判读仪（PPRA）用于辅助判读5.培养基和试剂5.13M快速霉菌酵母测试片和压板：见附录A5.2磷酸盐缓冲液：见附录B中B.1；无菌生理盐水：见附录B中B.26检验程序检验程序见图1。

检样25g（或25mL）样品+225mL稀释液，均质10倍系列稀释选择2个～3个适宜稀释度样品匀液，各取1mL分别加入测试片内，压好培养28℃±1℃48±2h计算各测试片菌落数计算总的菌落数报告图1霉菌和酵母平板计数法的检验程序7操作步骤7.1样品的稀释7.1.1固体和半固体样品：称取25g样品置于盛有225mL磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌均质杯内，8000r/min～10000r/min均质1min～2min，或放入盛有225mL稀释液的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1min～2min，制成1:10的样品匀液。

Copyright 3M China Ltd.
Microbiology
国家汽车产业政策的相继出台和落实 ，势必 对汽车 消费起 到了拉 动作用 ；而银 行汽车 消费信 贷的推 出和实 现，则 是汽车 消费市 场快速 成长和 发展不 可或缺 的重要 手段。
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Microbiology
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什么是肠杆菌科？
好氧或兼性厌氧发酵型G-杆菌
氧化酶阴性
氧化酶阳性
肠杆菌科
乳糖发酵
非乳糖发酵
3M PetrfilmTM 肠杆菌科测试片法
检样 25g(ml)样品＋225ml 稀释，接种Petrifilm测试片
371°C, 24 2h
菌落计数
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结果报告
Microbiology
国家汽车产业政策的相继出台和落实 ，势必 对汽车 消费起 到了拉 动作用 ；而银 行汽车 消费信 贷的推 出和实 现，则 是汽车 消费市 场快速 成长和 发展不 可或缺 的重要 手段。
Microbiology
国家汽车产业政策的相继出台和落实 ，势必 对汽车 消费起 到了拉 动作用 ；而银 行汽车 消费信 贷的推 出和实 现，则 是汽车 消费市 场快速 成长和 发展不 可或缺 的重要 手段。
背景
1870年以来，大肠菌群检测一直用于 食品工业中卫生状况的监控
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国家汽车产业政策的相继出台和落实 ，势必 对汽车 消费起 到了拉 动作用 ；而银 行汽车 消费信 贷的推 出和实 现，则 是汽车 消费市 场快速 成长和 发展不 可或缺 的重要 手段。

细菌总数测试片该手册能指导你熟练掌握3M TM Petrifilm Aerobie Count Plants的使用，你可与3M微生物产品代理接洽会得到更多的信息。

[贮藏]1、未开封时，冷藏于≤8℃（≤46℉），并在保存期内用完，高温度时，凝固水可以排除，包装物最好于室温启开。

2、已开封的，将封口以胶带封紧。

3、保存再封的袋于≤25℃（≤77℉）和温度<50％，不要冷藏已开启的包装袋，并于一个月内使用完。

[样品制备]4、制备1：10和更大稀释的食物样品稀释液，0称取或吸取食物样品，置入适宜的无菌容器内，如均质袋、稀释瓶、WhirlPak bag 或者其他灭菌容器内.5、加入适量的无菌稀释液,包括Buffered peptonephopsphate buffer ,用0.0425g/L的KH2PO4调PH7.2) 、0.1%的蛋白胶水(ISO方法6887) 、缓冲蛋白胶水(ISO方法6579) 、盐溶液(0.85-0.90%)、bisulfite-free letheenbroth或蒸馏水.6、搅拌或均质样品。

[接种]7、将测试片置于平坦表面处，揭开上层膜。

8、使用吸管将1mL样液垂直滴加在测试片的中央处。

9、允许使用上层膜直接落下，切勿向下滚动上层膜。

10、使用压板隆起面底朝下，放置在上层膜中央处。

11、轻轻的压下，使样液均匀覆盖于圆形的培养面积上，切勿扭转压板。

12、拿起压板，静置至少1分钟以使培养基凝固。

[培养][解释]13、测试片的透明面朝上，可堆叠至20片，对有一定湿度养箱能保持最少份损失是需要的。

14、可目视及用标准菌落计数器或其它的照明放大镜计数，并可参考判读卡计算菌落数。

15、可以分离菌落作进一步鉴定，即掀起上层膜，由培养胶上判读卡Aerobic bacteria count=152测试片中含有一种红色指示染剂可使菌落着色,计算所有红色菌落(不论其大小和颜色深浅均计算之).Count=0在petrifilm AC测试片上,很容易解释,图2测试片上没有任何菌落生长.Count=16图3示有不多的菌落.Count=143Petrifilm AC测试片菌落数适宜计数范围是25-250,见图4Count=560测试片面积约为20cm2,当菌落数超过250个,如图5所示,为了估计菌落数,可选择其中一个或数个有代表性菌落的小方格(1cm2),计算平均菌落数,再乘以20可得到整个测试片上的菌落数.Count=tntc(estimated count=103)图6所示petrifilm AC测试片上菌落太多而无法计数(tntc)count=tntc(Estimated count=105)有很多高数量菌落,使整个生长区变粉色,如图7所示,你仅可在生长区边缘现观察到单个菌落,应计录为菌落太多无法计数(TNTC)count=tntc(Estimated count=103)有时菌落分布出现不均衡,如图8所示,这也记录为TNTC.Count=tntc(Estimated count=107)在图9中petrifilm AC测试片上的菌落,最先粗略一看是可计数的,然而,你密切注意到生长区边缘,能看到高密度的菌落,应记录为TNTC Estimated count=160很少数菌种会液化petrifilm AC测试片上的培养基,如图10所示.若有这种现象发生,可选择没有液化区的几个有代表性菌落的小方格(1cm2),计算平均菌落数.不要计数液化区内的红点.Count=83因为在petrifilm AC测试片上菌落是红色的,你会和不透明的不规则形状的事物颗粒区分开,见圆圈1和2.霉菌和酵母菌检验测试片Petrifilm and Mold count Mold TM测试片为预先制备好的培养基系统,它含有一种冷水可溶性的凝胶剂，营养基和一种指示染剂，可提供对比，利于菌落计数。

心
菌落扁平
通常菌落中心颜色深暗
3
PDF 文件使用 "pdfFactory" 试用版本创建
Years and mold count=0
Yeast count=12
图 3 所示在 PYM 测试片上没有霉菌和 Mold count=4
酵母菌菌落.
图 4 所示在 PYM 测试片上有少数量的
图 7 所示,在测试片上霉菌菌落出现 图 8a 和图 8b 为同一样品的测试结果.
堆挤和彼此覆盖,为了方便计数,可将 图 8a 为 1:10 样品稀释液,菌落小、虚
测试片分成几个区域,计算每个有明 弱暗淡、数量多、计数困难。图 8b
显暗色中心的菌落.所划的方形区内 为 1：100 样品稀释液，生长菌落数
霉菌和酵母菌检验测试片 一、操作方法
Petrifilm and Mold count MoldTM 测试片为预先制备好的培养基系统,它含有 一种冷水可溶性的凝胶剂，营养基和一种指示染剂，可提供对比，利于菌落 计数。
[贮藏]
1、未开封时，冷藏于≤8 2、已开封的，将封口以 3、保存再封的袋于≤25
℃（≤46℉），并在保存期 胶带封紧。
积上，切勿扭转压板。
[培养]
[解释]
13、测试片的透明面朝上，14、可目视及用标准菌落
可堆叠至 20 片，于
计数器或其它的照明放大
21-25℃（70-77℉）培养 镜计数，并可参考判读卡
3-5 天。
计算菌落数。
大的或快速生长的霉菌在
培养 5 天后会呈现含混模
糊的菌落，应在培养 3 天
2
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