酵母菌和霉菌的检验

霉菌和酵母菌检测方法
GB 4789.15-2010
一、稀释
1、无菌吸管吸取25ml样品至装有225ml无菌蒸馏水的无菌锥形瓶中，充分混
匀。

2、吸取1ml混匀的样品，缓慢注入装有9ml稀释液的无菌试管中（枪头不要
接触液面），混匀。

3、按步骤2制备10倍系列稀释样品，每次更换无菌枪头。

4、根据估计，选择合适的2~3个样品匀液，吸取1ml至无菌平皿，每个梯度
做两个平皿，同时用1ml稀释液做空白对照。

5、将15~20ml冷却至46℃左右的马铃薯-葡萄糖-琼脂培养基倾注平皿，转动
混匀。

二、培养
1、琼脂凝固后倒置28℃±1℃培养5d，观察记录。

三、计数
1、选择菌落数在10~150之间的平皿，根据菌落形态分别计算霉菌和酵母数。

霉菌蔓延生长整个平板记录多不可计。

菌落数应采用两个平皿的平均数。

四、报告
1、计算两个平皿菌落的平均值，再将平均值乘以相应稀释倍数计算。

2、若所有平皿菌落数均大于150，则对稀释度最高的平皿进行计算，其他平皿
可记录为多不可计，结果按最高稀释倍数计算结果报告。

3、若所有平皿菌落数小于 10，则对稀释度最低的平皿进行计算。

4、若所有平皿均无菌落生长，则以小于1乘以最低稀释度计算，如为原液，
则以小于1计算。

5、小于100菌落数时，四舍五入原则取两位有效数字。

大于或等于100菌落
数时，第三位四舍五入原则，取前两位，剩余位数为0。

6、空白对照有菌落生长，结果无效。

实验二酵母菌的形态观察、霉菌的形态观察酵母菌和霉菌都是微生物，通过观察这两种微生物的形态特征可以确定它们的种类。

在实验室中，通常用显微镜观察微生物的形态，以帮助区分微生物的种类。

在本实验中，将观察酵母菌和霉菌的形态，以帮助区分它们。

实验步骤：1.准备显微镜，然后准备两种微生物样本：酵母菌和霉菌。

2.上照相纸，把每种样品的一小部分放在照相纸上。

3.用显微镜观察未涂抹物质的样品。

4.把溶液放在样品上，涂抹照相纸，再放入显微镜观察它们。

酵母菌的形态：在不涂抹任何物质的情况下，酵母菌呈流线形，由单个、多个的条状成分构成，在高倍镜下观察时呈多条状也可以看到酵母菌有两极分布的特点。

涂抹染色液后，酵母菌的特点是单个、多个长条状悬浮物，它们是由许多一样的小球状物体组成的，小球状物体有链分子状的特点，且在高倍镜下具有清晰的轮廓。

不涂抹染色液时，霉菌呈马尾形，有单个、多个马尾形条状成分。

马尾形较长，比酵母菌要长。

涂抹染色液后，霉菌的形态有许多变化，形状如贴壁小细节一样，贴壁小细节略微弯曲，表现在高倍镜下长条形，上面有明显的螺旋纹路。

总结：本实验中，通过显微镜观察了酵母菌和霉菌的形态，结果表明：酵母菌与染色液无关时呈流线形，由单个、多个的条状成分构成，在有染色液的情况下，它的特点是单个、多个长条状悬浮物，是由许多一样的小球状物体组成的，而霉菌不涂抹染色液时呈马尾形，有单个、多个条状成分，涂抹染色液后它的形状如贴壁小细节一样，贴壁小细节略微弯曲，表现在高倍镜下长条形，上面有明显的螺旋纹路。

本实验中，把酵母菌和霉菌的形态作了比较，两者存在明显的区别。

因此，可以从形态上来区分酵母菌和霉菌。

观察酵母菌和霉菌的实验报告单一、实验目的本实验旨在观察酵母菌和霉菌在不同环境条件下的生长情况，了解其生长特点，为进一步研究微生物提供基础知识。

二、实验材料与方法2.1 实验材料酵母菌和霉菌样品、琼脂培养基、无菌试管、移液器、无菌手套、无菌培养皿等。

2.2 实验方法2.2.1 酵母菌的培养准备好琼脂培养基并用自来水冲洗干净无菌培养皿，装入琼脂后进行无菌操作。

取少量酵母菌样品，接种于琼脂培养基表面，用移液器将接种口火焰消毒后放回无菌培养皿中，封好口，并进行恒温培养。

2.2.2 霉菌的培养准备好琼脂培养基并用自来水冲洗干净无菌培养皿，装入琼脂后进行无菌操作。

取少量霉菌样品，接种于琼脂培养基表面，用移液器将接种口火焰消毒后放回无菌培养皿中，封好口，并进行恒温培养。

2.2.3 环境条件的变化分别将霉菌和酵母菌培养皿放置于不同的环境条件下，如高温、低温、强光照射等，观察其生长情况并进行记录。

三、实验结果与分析3.1 酵母菌的生长情况酵母菌在琼脂培养基上表现出快速生长的特点，生长周期约为24-48小时。

在高温环境下，酵母菌的生长速度加快，但数量较少；在低温环境下，酵母菌的生长速度变慢，但数量增多。

在强光照射下，酵母菌的生长受到抑制，数量较少。

3.2 霉菌的生长情况霉菌在琼脂培养基上表现出缓慢生长的特点，生长周期约为3-5天。

在高温环境下，霉菌的生长速度加快，但数量较少；在低温环境下，霉菌的生长速度变慢，但数量增多。

在强光照射下，霉菌的生长受到抑制，数量较少。

四、实验结论在合适的环境条件下，酵母菌和霉菌都表现出较快的生长速度，且在不同环境下的生长特点有所不同。

研究微生物的生长特点，可以为工业生产、医药研究等方面提供参考和指导。

五、参考文献无。

观察酵母菌和霉菌实验报告观察酵母菌和霉菌实验报告在生物学实验室中，我们进行了一项关于酵母菌和霉菌的观察实验。

本次实验的目的是探究酵母菌和霉菌在不同条件下的生长和繁殖情况，以及它们对环境的适应能力。

实验开始时，我们准备了两个培养皿，分别用于培养酵母菌和霉菌。

为了保证实验的准确性，我们在实验室中保持了相对恒定的温度和湿度。

首先，我们在两个培养皿中分别加入了适量的培养基。

酵母菌培养基含有葡萄糖和酵母粉，而霉菌培养基则是以淀粉和琼脂为主要成分。

接下来，我们将培养皿放置在恒温箱中，分别设定了两个不同的温度条件。

一个培养皿的温度保持在25摄氏度，而另一个则设定在30摄氏度。

这样，我们可以观察到酵母菌和霉菌在不同温度下的生长差异。

经过一段时间的观察，我们发现在25摄氏度的条件下，酵母菌的生长速度较快，而霉菌则相对较慢。

酵母菌在培养基上形成了许多小而圆的菌落，而霉菌则呈现出分枝状的菌丝结构。

这表明酵母菌对于较低温度的适应能力较强，而霉菌则更适应较高温度的环境。

在30摄氏度的条件下，我们观察到了截然不同的结果。

酵母菌的生长速度显著减慢，而霉菌则迅速繁殖并形成了大量的菌落。

这说明酵母菌对于较高温度的适应能力较弱，而霉菌则能够在高温环境下迅速繁殖。

除了温度，我们还对湿度对酵母菌和霉菌的生长影响进行了观察。

我们在实验室中调节了湿度，分别设定了较高和较低的湿度条件。

结果显示，在较高湿度下，酵母菌和霉菌的生长速度都增加了。

而在较低湿度下，两者的生长速度明显减慢。

通过这次实验，我们不仅观察到了酵母菌和霉菌在不同温度和湿度条件下的生长情况，还了解到了它们对环境的适应能力差异。

这对于我们理解微生物的生态学行为以及它们在不同环境中的应用具有重要的意义。

总结起来，酵母菌和霉菌在不同温度和湿度条件下的生长和繁殖情况存在明显的差异。

酵母菌对于较低温度和较高湿度的环境适应能力较强，而霉菌则对于较高温度和较低湿度的环境更为适应。

这些观察结果为我们进一步研究微生物的适应性和生态学行为提供了重要的参考。

“观察酵母菌和霉菌”实验报告单本次实验目的是通过观察和比较酵母菌和霉菌的形态、生长和繁殖方式，深入了解微生物的特性，并掌握基本的实验技能。

实验器材：显微镜、草片、大肠杆菌培养基、酵母菌培养基、土豆切块、霉菌培养基、培养皿、移液管、吸球、pH计、注射器、火柴、无菌针、细菌培养皿、灭菌器等。

实验方法：1. 检查实验器材及培养基是否完好无损、无菌，若有问题应先进行处理。

2. 取出霉菌培养皿，观察其中的霉菌形态，用无菌针在培养皿中取一小块霉菌，并涂摸在草片上，扔掉实验垃圾。

3. 取出酵母菌培养皿，观察酵母菌的形态，并用注射器吸取酵母菌悬液。

4. 取一块土豆，在表面涂抹少量酵母菌悬液，培养10-15天。

5. 取一块往外突出的土豆为“观察石”，悬挂在显微镜活塞上，并加上少量剪碎的土豆。

6. 按照酵母菌培养基的制备方法，制备适量的酵母菌干粉。

7. 用适当的比例将酵母菌干粉加入大肠杆菌培养基中，制备不同浓度的酵母菌溶液。

8. 向高、中、低浓度的酵母菌溶液中分别加入不同量的酵母菌悬液。

9. 制备好的酵母菌溶液加入细菌培养皿中，培养一定时间，观察酵母菌繁殖、生长情况。

实验结果：1. 通过观察发现，霉菌的形态多样，有些像毛发，有些像小鼠的尾巴，有些则类似于扇形。

而酵母菌的形态则较为单一，呈现球形或椭圆形状。

2. 观察土豆上的酵母菌生长情况，发现酵母菌在养分较为充足的土豆中能够快速生长并进行繁殖。

3. 在观察“观察石”的过程中，我们发现酵母菌在土豆上的生长情况不均匀，部分区域出现了大量的酵母菌生长，而其他区域的酵母菌数量则较少。

4. 直接将酵母菌加入细菌培养皿中，观察到酵母菌会通过二元分裂的方式进行繁殖，并且在营养充足的情况下生长得更快。

5. 向霉菌培养基中加入霉菌悬液后发现，霉菌会在一定时间内飞快地进行繁殖，并最终完全覆盖整个培养皿。

经过本次实验，我们对酵母菌和霉菌的特性有了更加深入的了解。

我们发现酵母菌的特点是形态比较单一，繁殖方式是通过二元分裂进行，喜欢在营养充足的环境中生长繁殖。

霉菌和酵母菌检测方法
常见的霉菌和酵母菌检测方法包括以下几种：
1. 直接镜检法：采集被检物表面样品，然后在显微镜下直接观察样品中是否存在霉菌和酵母菌。

2. 培养法：将样品分别接种在含有适当营养物质的培养基中，然后在一定条件下培养，观察生长情况，判断其中是否有霉菌和酵母菌。

3. PCR检测法：对样品中的霉菌和酵母菌的特定基因进行PCR扩增，并通过电泳等技术检测扩增产物的种类和数量。

4. 气相色谱法：通过分析样品中的挥发性有机化合物，判断其中是否存在霉菌和酵母菌。

5. 快速检测法：利用特定化学试剂或生物标记物，在短时间内快速检测样品中的霉菌和酵母菌。

方法验证报告方法验证报告一、方法依据/原理1.1方法依据：化妆品安全技术规范（2015）第五章 6 霉菌和酵母菌检验方法1.2原理：化妆品检样在一定条件下培养后，1g或1mL化妆品中所污染的活的霉菌和酵母菌数量，藉以判明化妆品被霉菌和酵母菌污染程度及其一般卫生状况。

本方法根据霉菌和酵母菌特有的形态和培养特性，在虎红培养基上，置28℃±2℃培养5d，计算所生长的霉菌和酵母菌数。

二、使用范围2.1适用于化妆品霉菌和酵母菌的测定。

三、设备情况表1使用仪器设备一览表表2标准物质和关键物料登记表四、环境条件情况表3环境条件五、人员能力情况表4相关人员六、方法验证/确认情况6.1 实验步骤6.1.1样品前处理6.1.1.1液体样品：水溶性的液体样品，用灭菌吸管吸取 10mL 样品加到 90mL 灭菌生理盐水中，混匀后，制成 1：10检液。

6.1.1.2油性液体样品：取样品10g，先加5mL灭菌液体石蜡混匀，再加10mL灭菌的吐温80，在40℃—44℃水浴中振荡混合10min，加入灭菌的生理盐水75mL（在40℃—44℃水浴中预温），在40℃—44℃水浴中乳化，制成1：10的悬液。

6.1.1.3膏、霜、乳剂半固体状样品：亲水性的样品：称取10g，加到装有玻璃珠及90mL灭菌生理盐水的三角瓶中，充分振荡混匀，静置 15min。

用其上清液作为 1:10 的检液。

疏水性样品：称取10g，置于灭菌的研钵中，加10mL灭菌液体石蜡，研磨成粘稠状，再加入10mL灭菌吐温 80，研磨待溶解后，加70mL灭菌生理盐水，在40℃—44℃水浴中充分混合，制成 1：10 检液。

6.1.1.4固体样品：称取10g，加到90mL灭菌生理盐水中，充分振荡混匀，使其分散混悬，静置后，取上清液作为1：10 的检液。

使用均质器时，则采用灭菌均质袋，将上述水溶性膏、霜、粉剂等，称10g 样品加入90mL灭菌生理盐水，均质1min—2min；疏水性膏、霜及眉笔、口红等，称10g样品，加10mL灭菌液体石蜡，10mL吐温80，70mL 灭菌生理盐水，均质3min—5min。

知识点：果汁中酵母菌、霉菌测定情境：微生物检测技术任务：酵母菌、霉菌测定课程：食品微生物技术酵母菌、霉菌测定原理一、霉菌、酵母菌什么叫霉菌、酵母菌？❞霉菌：为丝状真菌的统称。

凡是在营养基质上能形成绒毛状、网状或絮状菌丝体的真菌（除少数外），统称为霉菌。

❞酵母菌：一些单细胞真菌。

一种肉眼看不见的微小单细胞微生物，能将糖发酵成酒精和二氧化碳，分布于整个自然界，是一种典型的兼性厌氧微生物，在有氧和无氧条件下都能够存活，是一种天然发酵剂。

二、霉菌、酵母菌测定原理❞霉菌和酵母菌菌数的测定是指食品检样经过处理，在一定条件下培养后，所得1g或1mL检样中所含的霉菌和酵母菌菌落数（粮食样品是指1g粮食表面的霉菌总数）。

❞霉菌和酵母数主要作为判定食品被污染程度的标志，以便对被检样品进行卫生学评价时提供依据。

本方法适用于所有食品。

酵母菌、霉菌测定原理与菌落总数测定类似，选用平板菌落计数法。

平板菌落计数法是将待测样品经适当稀释之后，其中的微生物充分分散成单个细胞，取一定量的稀释样液接种到平板上，经过培养，由每个单细胞生长繁殖而形成肉眼可见的菌落，即一个单菌落应代表原样品中的一个单细胞。

统计菌落数，根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出样品中的含菌数。

酵母菌、霉菌测定步骤1.液体样品稀释以无菌吸管吸取25 mL样品至盛有225mL无菌稀释液（蒸馏水或生理盐水或磷酸盐缓冲液）的适宜容器内（可在瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠）或其他无菌均质袋中，充分振摇或用拍击式均质器拍打1 min～2min，制成1:10 的样品匀液。

2.梯度稀释❞取1 mL 1:10 样品匀液注入含有9 mL 无菌稀释液的试管中，另换一支1 mL 无菌吸管反复吹吸，或在漩涡混合器上混匀，此液为1:100 的样品匀液。

❞按上述操作程序，制备10 倍系列稀释样品匀液。

每递增稀释一次，换用1 次1 mL 无菌吸管或吸头。

四、倒平板❞根据对样品污染状况的估计，选择2 个～3 个适宜稀释度的样品匀液（液体样品可包括原液），在进行10 倍递增稀释时，吸取1 mL 样品匀液于无菌平皿内，每个稀释度做两个平皿。

细菌、霉菌、酵母菌检查标准操作规程细菌、霉菌、酵母菌检查是微生物学实验室常用的一项技术，用于确定食品、饮料、药品、环境样品等中是否存在这些微生物。

细菌、霉菌、酵母菌都是常见的微生物，它们在生物学和工业上具有重要的作用。

本文将以标准操作规程的形式详细介绍细菌、霉菌、酵母菌检查的步骤和要求。

一、实验前准备1.环境准备：实验室环境要保持清洁、无尘、无飞虫等干扰因素，确保实验的准确性。

2.器材准备：准备好必要的实验器材，包括培养基、试剂、仪器设备等。

3.样品准备：样品应遵循卫生标准及实验要求，确保样品的可靠性和代表性。

二、样品处理1.样品消毒：将样品进行适当的消毒处理，以消除外源性微生物的干扰。

2.预培养：将样品接种到含有适宜培养基的试管中，进行预培养，以增加微生物的数量。

三、分离与纯化1.罩口接种：将样品中微生物接种到含有相应培养基的平板上，通过罩口接种的方式，避免次生污染。

2.培养条件：根据微生物的特性，设置适宜的培养温度、时间和培养基组成等条件，促进微生物的生长。

3.单菌分离：观察接种后的菌落形态和特征，选取单菌落转接到新的培养基上，以实现纯化。

四、鉴定与检测1.形态观察：观察菌落形态、边缘、颜色、透明度等特征，与已知细菌、霉菌、酵母菌的特征进行比对。

2.生理生化试验：通过一系列的生理生化指标和试验，如盖氏染色、革兰氏染色、培养基反应等，对菌株进行进一步鉴定。

3.分子生物学检测：采用PCR、序列比对等分子生物学技术，对菌株进行分子水平的鉴定。

五、结果处理与分析1.定量分析：根据菌落的数量和菌落形状比例，计算并报告样品中细菌、霉菌、酵母菌的数量。

2.图像记录：对鉴定结果进行拍照记录，确保结果的真实性和可追溯性。

六、质量控制1.消毒控制：实验室应定期对实验环境进行消毒处理，保持无菌状态。

2.正负对照：每次实验都应设置正、负对照，确保实验结果的准确性和可靠性。

3.重复实验：对怀疑结果的样品可以进行重复实验，验证结果的可靠性。

霉菌和酵母菌介绍及检测方法一、霉菌和酵母菌介绍：霉菌和酵母菌及其检验酵母菌是真菌中的一大类,通常是单细胞，呈圆形，卵圆形、腊肠形或杆状。

霉菌也是真菌，能够形成疏松的绒毛状的菌丝体的真菌称为霉菌。

霉菌和酵母广泛分布于自然界并可作为食品中正常菌相的一部分。

长期以来,人们利用某些霉菌和酵母加工一些食品，如用霉菌加工干酪和肉，使其味道鲜美;还可利用霉菌和酵母酿酒、制酱；食品、化学、医药等工业都少不了霉菌和酵母。

但在某些情况下,霉菌和酵母也可造成中腐败变质。

由于它们生长缓慢和竞争能力不强，故常常在不适于细菌生长的食品中出现,这些食品是pH低、湿度低、含盐和含糖高的食品、低温贮藏的食品，含有抗菌素的食品等。

由于霉菌和酵母能抵抗热、冷冻，以及抗菌素和辐照等贮藏及保藏技术，它们能转换某些不利于细菌的物质，而促进致病细菌的生长;有些霉菌能够合成有毒代谢产物－霉菌毒素.霉菌和酵母往往使食品表面失去色、香、味.例如,酵母在新鲜的和加工的食品中繁殖，可使食品发生难闻的异味，它还可以使液体发生混浊，产生气泡，形成薄膜，改变颜色及散发不正常的气味等。

因此霉菌和酵母也作为评价食品卫生质量的指示菌,并以霉菌和酵母计数来制定食品被污染的程度。

目前已有若干个国家制订了某些食品的霉菌和酵母限量标准.我国已制订了一些食品中霉菌和酵母的限量标准。

二、检验方法：霉菌和酵母的计数方法,与菌落总数的测定方法基本相似。

主要步骤为：将样品制作成10倍梯度的稀释液，选择3个合适的稀释度，吸取1mL于平皿，倾注培养基后，培养观察，计数.对霉菌的计数，还可以采用显微镜直接镜检计数的方法。

具体检测标准参见：GB4789.15—94，《中华人民共和国国家标准食品卫生微生物检验霉菌和酵母计数》三、说明：1．样品的处理。

为了准确测定霉菌和酵母数，真实反映被检食品的卫生质量，首先应注意样品的代表性。

对大的固体食品样品，要用灭菌刀或镊子从不同部位采取试验材料,再混合磨碎.如样品不太大，最好把全部样品放到灭菌均质器杯内搅拌2min。