月季的植物组织培养综述
- 格式:doc
- 大小:30.50 KB
- 文档页数:9
目录摘要 (4)前言 (4)综述 (5)1.外植体 (5)1.1取材部位1.2取材时间1.3取材大小2. 消毒 (8)3. 接种方式 (8)4.培养基 (9)4.1基本培养基4.2激素4.2.1不同激素对诱导愈伤组织的影响4.2.2不同激素对继代培养的影响4.2.3不同激素对生根培养的影响4.3糖浓度的影响4.4无机盐4.5琼脂5.培养基的配置 (13)6.培养条件 (14)7.防褐化 (14)技术路线与实验设计 (15)参考文献 (17)摘要:为了进行月季组织培养实验,我们查阅了相关文献,从多个方面了解影响月季组织培养的因素,如外植体的取材部位、时间、大小、消毒、接种方式、不同阶段激素的配比、培养基成分、培养条件等,以期在实验中调控月季组培的环境,确保实验顺利进行。
基于我们想探究激素对组织培养中细胞的脱分化和再分化的作用这一想法,我们的设计了以NAA浓度、6BA浓度、外植体部位为影响因素的正交实验(L9(34)),并考察NAA与6BA的交互作用。
同时,我们还以接种方式作为单因素考察其对愈伤组织诱导的影响。
关键词:组织培养、影响因素、正交前言在阅读了植物组织培养的相关文献资料后,我们设计了此次组织培养实验方案,考察细胞分裂素浓度、生长素浓度、接种方式、取材部位因素对愈伤组织的形成有何影响,期望寻找出诱导月季愈伤组织的最佳条件;同时探究由愈伤组织诱导出芽及生根所需的最佳浓度配比。
并在月季组织培养过程中,掌握外植体消毒方面要注意的事项,整个培养过程中培养条件的选取与控制,实验过程中出现的现象的观察记录以及分析,在这个过程中不断加强理论与实践的联系,深化对理论知识的理解。
对于外植体选择,我们采用了以往研究者的做法,即选用带腋芽的枝条。
但是,我们的不同之处在于,我们还保留了一部分刚好能包裹住腋芽的叶柄。
这样做的目的是为了在消毒时避免芽受到太大损伤。
参考论文中防褐化多用抗氧化剂和其他抑制剂,减轻外植体在组培中的酶促褐变,我们根据生理生化原理,考虑到酶活性与温度有关、以及外植体内的酚类物质含量有关,因此需对外植体做如下处理:接种前先将外植体用低温水流冲洗24小时;选择晴朗天气采摘外植体。
月季或雏菊的组培快繁实验报告月季组培月季植物组织培养实验报告姓名:张恒玉(天津师范大学 10生乙)摘要:月季(Floribunda roses)为蔷薇科蔷薇属木本植物, 其花姿优美,花型丰富,花色齐备, 树型易修剪,栽培难度小;其花型大,美丽,幽雅,高贵。
在鲜花应用中,月季花的地位和比重与日俱增,是世界上著名的四大切花之一。
植物组织培养主要以绿色植物细胞或组织块为研究主要对象,把植物体上的生活器官、组织块活细胞从整体上离体下来进行人工培养。
以细胞全能性为理论基础对最适月季培养的培养基、激素、培养基质进行筛选,使离体组织经过脱分化和再分化而发育成新的植物个体。
为月季的快繁和新品种的选育提供了新的途径,在月季的改良上显示了很大的应用潜力。
关键词:月季组织培养Rose Plant Tissue Culture Lab ReportName: ZhangHengyu(Tianjin Normal University college of Life Science, Biological Sciences )Abstract: Rose (Floribunda roses) for the woody Rosaceae Rosa, the beautiful flower position, abundant flowers, colors ailable, easy to trim the tree, planting all difficulty; its flowers large, beautiful, elegant, noble. Applications in the flowers, the status and the proportion rose growing is the world's leading one of the four cut flowers. Plant Tissue Culture main object of the green plant cells or tissue blocks for research, Of life on the plant organ, tissue block living cells isolated from the whole down the artificial culture, Cell totipotency theory based on the optimum rose culture medium, hormones, culture media filter, Isolated tissue and develop into new individual plants after dedifferentiation and redifferentiation. breeding of new varieties offer a new way, in the rose show a significant improvement potential applications.Keywords: Rose tissue culture1 月季介绍第1页下一页。
月季新品种培育的方法和途径
答案:
月季新品种的培育主要通过杂交育种、芽变育种和组织培养三种途径实现。
杂交育种是通过选择具有特定性状的亲本进行杂交,以期获得具有优良性状的新品种。
在杂交初期,对亲本的选择具有一定的针对性,例如,若要培育超级微型月季,则选择小型月季作为亲本。
杂交后产生的种子经过播种、生长、筛选等过程,最终筛选出具有优良性状的新品种。
这一过程需要层层筛选,从初选到进一步测试抗性,再到试种,能够保留进入市场的品种非常稀少,可以说是“万里挑一”。
芽变育种则是利用物理或化学手段导致月季产生芽变,从而获得新品种。
芽变的方向是不确定的,可能会产生花型、花色等方面的变异,甚至叶子出现斑点等。
虽然芽变后很快就能发现开花的特性,但大部分芽变并没有意义或不稳定,因此需要大量的苗圃和筛选工作来发现和保留有价值的芽变。
组织培养是一种通过无菌操作,利用植物组织或细胞进行培养,以快速繁殖植物或产生新品种的技术。
在组织培养过程中,选择生长健壮的当年生枝条作为外植体,通过特定的培养基和条件,促使芽萌发和生长,最终形成新的植株。
这种方法在月季新品种的培育中起到了重要作用,能够加速新老品种的更新换代。
综上所述,月季新品种的培育是一个复杂而精细的过程,涉及多种技术和方法的应用,以确保最终培育出的新品种具有优良的性状和观赏价值。
月季的植物组织培养一.实验目的1.掌握蔷薇科月季的组织培养技术2.熟悉、巩固无菌操作技术二.实验器皿及试剂1.仪器及用品:超净工作台、高压蒸汽灭菌锅、电子天平、电热炉酒精灯、镊子、解剖刀、解剖剪、烧杯、三角瓶、培养皿、滤纸、封口膜2.试剂:MS+6BA1+NAA1(诱导)培养基、MS+6BA2+NAA2(继代)培养基、70%酒精、3%次氯酸钠、无菌水3.材料:月季茎段、幼嫩叶片、花萼片、花瓣及花药。
三.实验步骤配制诱导培养基:MS+6BA1+NAA1,1升,灭菌后分装到35个培养1.皿中。
2.取材:将采集的月季茎段、幼嫩叶片、花萼片、花瓣及花药冲洗干净,按不同部位分装到3个500烧杯中,放入超净工作台;先用70%酒精浸没并轻摇10秒进行预消毒;倒出酒精,加入3%次氯酸钠浸没,轻摇11分钟;倒净次氯酸钠,用无菌水冲洗5遍以上,倒出无菌水。
3.将消毒后的外植体放入带有滤纸的无菌平皿中,用解剖剪和解剖刀将嫩叶剪成5mm2大小、茎段长2—3cm每段至少有1 个侧芽、将花苞打开取花药,分别接种到带有培养基的平皿中并封口(每皿3—5个)。
4.标记好后,放入培养室中培养(2周左右)。
5.配制分化培养基:MS+6BA2+NAA2培养基,配制1升,灭菌后分装到35个100ml的三角瓶中。
6.挑选长有愈伤组织的外植体,将其转移到分化培养基中。
在超净工作台中,将培养皿封口膜在酒精灯旁打开,将长有愈伤组织的外植体用灭菌的镊子从平皿中取出,转移到带有分化培养基三角瓶中(每瓶最多)并封口。
7.标记好后,放入培养室培养。
继续观察愈伤组织的生长情况。
四.实验结果茎段出愈率=25根出愈/总接种40根*100%=63%叶片出愈率=5片出愈/总接种30片*100%=17%花药及萼片出愈率=1片出愈/总接种20片*100%=5%通过实验得出月季茎段的出愈率最高,其次是叶片及花药。
接种过程中有三个平皿出现污染现象。
五.问题分析及解决1.三个污染的外植体,两个是叶片内延至周围。
月季育种方法
月季育种方法是指通过人工授粉或其他手段,利用月季植物的遗传材料来培育新品种的过程。
下面介绍一些常见的月季育种方法: 1. 人工授粉法
选择具有良好花型和色彩的月季花作为母本,将其花粉取下,然后将其授粉到另一株月季花的柱头上。
授粉后,要及时将被授粉的花的花瓣掉落,以免对花粉的传递造成阻碍。
授粉完成后,可以在果实成熟时采集种子,进行育种。
2. 繁殖组织培养法
利用月季植物的繁殖组织(如茎尖、叶片、花蕾等)进行体外培养,通过细胞分裂和再生,培育新品种。
这种方法可以大大加快育种速度,同时还能避免病虫害的传播。
3. 自然杂交法
让不同品种的月季植物进行自然交配,产生新品种。
这种方法比较容易实现,但育种效果不稳定,难以掌控。
4. 化学诱变法
通过化学物质的作用,改变月季植物的基因组成,从而培育新品种。
这种方法具有可控性和高效性,但也会带来一定的风险。
以上是一些常见的月季育种方法,育种需要耐心和技巧,希望对月季爱好者有所帮助。
- 1 -。
月季组织培养培养基配方1. 介绍月季是一种常见的花卉植物,广泛应用于观赏园艺领域。
在月季繁殖和培养过程中,培养基配方起着至关重要的作用。
本文将深入探讨月季组织培养培养基配方的要点和方法。
2. 月季组织培养的意义月季组织培养是繁殖月季的一种重要方法。
通过无菌培养、组织再生和快速繁殖,可以大量繁殖优良品种,并用于育种和病毒检测等研究。
因此,合理的培养基配方对月季组织培养的成功至关重要。
3. 月季组织培养培养基的成分月季组织培养培养基的成分包括植物激素、糖类、无机盐和其他添加剂。
3.1 植物激素植物激素在月季组织培养中起到调节生长和分化的作用。
常用的激素包括生长素、细胞分裂素和愈伤组织激素。
它们的浓度和比例对培养基的效果有着重要影响。
3.2 糖类糖类是提供能量和碳源的重要成分。
常用的糖类包括蔗糖、葡萄糖和半乳糖。
不同的月季品种和培养阶段对糖类的需求不同,需要根据具体情况进行调整。
3.3 无机盐无机盐是提供植物所需微量元素的重要来源。
常用的无机盐包括氮、磷、钾等。
它们的浓度和比例需要根据培养阶段的需求进行合理调整。
3.4 其他添加剂除了植物激素、糖类和无机盐外,还可以添加一些其他的添加剂来增强培养基的效果,例如维生素、抗生素、染料等。
这些添加剂的使用需要根据具体实验目的和需求来决定。
4. 月季组织培养培养基配方的优化方法优化月季组织培养培养基配方可以提高培养成功率和培养体系的稳定性。
4.1 脱菌方法月季组织培养需要在无菌条件下进行,因此脱菌方法是非常重要的。
常用的脱菌方法包括酒精消毒、高压蒸汽灭菌和紫外线照射等。
不同的方法有各自的特点和适用范围,需要根据实际情况选择合适的脱菌方法。
4.2 成分优化成分优化是指根据具体需求对培养基的成分进行调整和优化。
通过改变植物激素、糖类和无机盐的浓度和比例,可以提高培养基的适用性和培养效果。
4.3 pH值调节月季对培养基的pH值敏感,过高或过低的pH值都会影响生长和分化。
植物组织培养论文—月季组织培养技术植物组织培养论文植物组织培养是一门专业性、操作性和实践性很强的技术类课程,近年来国内各农林院校的农学、园艺、林学和综合性院校、师范院校的生物和生物技术等本、专科专业都相继开设了植物组织培养课程。
实验教学是《植物组织培养》课程教学的中心和关键环节。
本文从五方面就河池学院近几年《植物组织培养》实验课程教学改革模式进行了探讨和总结。
随着生物技术的迅猛发展,植物组织培养和细胞培养等现代生物技术得到普遍重视和应用,为月季的快繁和新品种的选育提供了新的途径,在月季的改良上显示了很大的应用潜力。
以月季为试材进行组培试验,综述了月季组织培养、快繁的研究技术及进展,并对月季组培的最优条件进行了总结。
本研究探索出的月季组培快速繁殖技术,在试管苗单芽诱导丛生苗、利用代用品培养降低组培成本、试管苗管外扦插生根、试管苗微型化长途运输等方面,较前人有所改进。
月季为蔷薇科蔷薇属木本植物, 其花姿优美,花型丰富,花色齐备, 树型易修剪,栽培难度小;其花型大,美丽,幽雅,高贵。
月季通常采用扦插、嫁接和压条繁殖,但是一些名贵品种扦插不易生根,主要靠芽接繁殖,而芽接速度慢,因而造成优良品种的月季苗供不应求。
一.月季组织培养的研究进展月季是世界栽培种类较多的多年生木本花卉之一。
别名长春花、月月红、斗雪红、瘦客等,蔷薇科蔷薇属植物,其花姿优美,花型丰富,花色齐备, 树型易修剪,栽培难度小。
其花型大,美丽,幽雅,高贵。
在鲜花应用中,月季花的地位和比重与日俱增,是世界上著名的四大切花之一[1]。
月季的花色可编制成完美的连续色谱。
月季是重要的花卉,世界的销售额多年来稳居各类花)卉的第一或第二。
月季的一大优点是分布极广,适应性良好,栽培容易。
月季是四季常青花卉,花期长,花色多,芳香馥郁,由于其特殊的情感内涵和商品价值[2],被广泛应用于园林、庭院装饰,并可制成月季盆景,作切花、花篮、花束等。
此外,月季花可提取香料,根、叶、花均可人药,具有活血消肿、消炎解毒等功效。
月季组织培养分组:12级生技2班3组指导老师:韩文军成员:成晨,江应龙,牟思斯,盛威摘要了解月季组织培养的研究概况,以及组织培养中遇到的相关问题的研究。
外植体的选择为月季枝条,灭菌用75%酒精和10%次氯酸钠,初代培养基为MS+BA 1mg/L,继代培养基为MS+BA1.5mg/L 十N A A 0.05m g/ L。
引言月季是中国十大名花之一,被誉为“花中皇后”,具有极高的观赏价值和商业价值①它是蔷薇科蔷薇属多年生落叶或常绿灌木②,被广泛运用于园林绿化,具有很高的观赏价值和经济价值。
目前月季的繁殖手段除了传统的扦插、嫁接、压条之外,还有月季的组织培养技术,相对前面几种方法来说,月季的组织培养技术能大幅地提高获得月季植株的速度和质量,正越来越被广泛地运用到实际生产中。
一方面,组织培养可有效地保持母株的优良性状;另一方面,它对植物品种改良和选育新品种也有重要意义③。
0实验流程外植体处理→初代培养→继代培养→生根培养→壮苗炼苗→移栽1外植体的选择和灭菌1.1外植体的选择月季组培外植体通常采用带芽茎段。
同一枝条上不同部位的腋芽诱导效果不同。
取枝条中部的腋芽效果最好,这可能与月季枝条不同部位的腋芽成熟程度及休眠状态不同等因素有关。
很多研究都证明枝条中部的腋芽萌发较顶部和基部时间早,且中部的腋芽长势好,增殖系数高,其次是基部,再次是顶部④-⑥。
另外,取材时也注意天气的选择,根据几次初代培养的结果来看,天气晴好时取材初代培养的成功率要比阴雨天要高,具体原因可能是阴雨天植物的外植体带菌比较多,杀菌不彻底从而使培养失败。
此外,外植体的休眠状态对芽的萌发也有影响,李青等⑦采用1 年生枝条的冬芽和当年生枝条的腋芽为外植体进行比较,发现越冬芽较嫩枝条的芽成活率高,且萌动所需时间较短,主要原因是芽内积累了丰富的营养物质,在适宜的条件下很快萌发生长;而春季嫩枝上的芽,由于刚刚形成且未经休眠,所以本身较弱,但越冬芽污染率高于嫩枝芽。
摘要:月季花作为我国传统的名花之一,以其花色丰富、花期长、耐修剪等特点深受人们喜爱。
本文通过对月季的生物学特性、栽培技术、病虫害防治等方面的总结,旨在为月季的栽培提供理论依据和实践指导。
一、引言月季(Rosa chinensis),属于蔷薇科蔷薇属植物,原产于我国,具有悠久的栽培历史。
月季花色艳丽,香气浓郁,具有较高的观赏价值和经济价值。
随着人们对美化环境、提高生活质量的需求不断增长,月季栽培技术的研究与应用日益受到重视。
二、月季生物学特性1. 植物形态:月季植株高大,枝条柔韧,叶片为奇数羽状复叶,花单生或簇生,花色多样,有红、粉、黄、白等。
2. 生长期:月季分为春花型、夏花型、秋花型和冬花型,不同品种的月季开花期有所差异。
3. 光照需求:月季喜光照充足的环境,光照不足会导致植株生长缓慢,花色暗淡。
4. 水分需求:月季喜湿润环境,但忌积水,水分过多会导致根部腐烂。
5. 土壤要求:月季适宜在肥沃、排水良好的沙质土壤中生长。
三、月季栽培技术1. 选地与整地:选择光照充足、排水良好的地块,深翻土壤,施足底肥。
2. 种植密度:根据品种特性,合理确定种植密度,一般每亩种植100-150株。
3. 修剪与整形:根据植株生长情况,适时进行修剪,保持树形美观,促进花芽分化。
4. 施肥与浇水:根据生长阶段,合理施肥,保持土壤肥力。
浇水应遵循“见干见湿”的原则,避免积水。
5. 病虫害防治:定期检查植株,发现病虫害及时防治,可选用生物农药或化学农药。
四、结论月季栽培技术是一门综合性较强的学科,涉及生物学、土壤学、植物保护等多个领域。
通过总结月季的生物学特性和栽培技术,可以为月季的栽培提供理论依据和实践指导。
在实际生产中,应根据具体情况,灵活运用各种栽培技术,提高月季的产量和品质。
关键词:月季;栽培技术;生物学特性;病虫害防治。
月季如何组织培养月季属蔷薇科蔷薇属多年生草本植物,每年多次开花,而且香味怡人,在观赏植物中地位很高,分布极广,适应性强,栽培容易,使得月季无愧于“花中皇后”之美誉,随着组织培养技术的应用,成功培育了大量优质月季组培苗,那月季如何组织培养呢?以下是小编为你整理的月季组织培养技术,希望能帮到你。
无菌培养的建立(1)选条从中国一级科研机构引进6个月季优良品种,分别是“红双喜”、“白雪山”、“彩云”、“和平”、“皇冠”、“金丝鸟”。
选取生长健壮的当年生枝条,用饱满而未萌发的侧芽作为外植体。
以枝条中段芽最好,因为接种后,中段芽第5天左右就能萌发,而基部和梢部的芽往往迟至15天才萌发。
(2)培养基的配制整个培养过程都可用MS培养基,诱导芽萌发所加的植物激素只需要BA一种即可,每升用0.3~1.Omg,6个品种均适用,只是萌发迟早有些差别。
(3)清洗外植体采回的枝条切去叶,再剥去附在茎上的叶柄及皮刺,先整段用洗手刷沾浓洗衣粉水仔细刷洗,再用自来水冲洗,毛巾擦干,放置在小木板上,用利刀切成2~3厘米一段,每段至少一个侧芽,装入消毒过的培养皿,放在超净工作台上,打开紫外灯,做表面灭菌30分钟。
(4)消毒与接种在超净工作台上,用饱和漂白粉上清液作表面灭菌25~30分钟,灭菌时间快到时,即倾去灭菌溶液,用无菌水涮洗数次,无菌纱布吸干茎段外表水分,按无菌操作要求,接种到小试管里,从芽萌发到芽长到1厘米左右需要2~3周。
(5)培养培养温度21℃最好,最高不超过25℃,有昼夜温差,光照10~12小时/天,光强800~1200LX。
继代增殖(1)将上述无菌芽从原茎段上切下,转接到MS+BA1-2+1AA0.1-0.3或MS+BA1-2+NAA0.01-0.1的培养基上,促使嫩茎长出更多的侧芽,原茎段弃去。
继代增殖培养基每升用蔗糖30克。
(2)5周后,“红双喜”增殖了3.5倍,“白雪山”4.1倍,“和平”、“彩云”5~6倍,“皇冠”、“金丝鸟”达15倍。
月季植物组培方案月季是一种常见的观赏花卉,其花朵色彩丰富,花期长,是花坛、花境、花笼和花圃中常见的植物。
然而,传统的繁育方法存在效率低下、时间长、容易受到病害感染等问题。
因此,利用组织培养技术进行月季植物的繁育具有十分重要的意义。
一、材料准备1.可供选择的月季植株,选择健康无病害的茎干作为外植体。
2.组培基质:可以选择MS培养基,配制麦芽糖浓度为30g/L,琼脂浓度为7g/L。
3.消毒液:例如75%酒精、10%双氧水、0.1%漂白粉。
4.无菌器皿:例如培养瓶、试管、平皿等。
5.显微镜及显微镜片:用于观察、检验组培过程中的细胞分裂情况。
6.整枝针和剪刀:用于取样。
二、外植体消毒处理1.将外植体的茎干从月季植株上剪下。
2.将茎干进行无菌处理,先用70%酒精擦拭,再浸泡于10%双氧水中10-15分钟,最后用无菌水洗净。
3. 将处理后的茎干切成0.5-1.0cm长的段,并观察切割的部位是否出现霉变,如有则再次进行消毒处理。
三、组培基质配制1.取适量MS培养基粉末,按照说明书配制,加入适量麦芽糖并充分溶解。
2.将溶解的培养基过滤灭菌,滤液加热至煮沸并充分搅拌,再加入适量琼脂并搅拌均匀。
3.将配制好的培养基灌装到无菌器皿中,如培养瓶、试管或平皿。
四、组培过程1.将处理好的茎段放置于准备好的无菌器皿中,使其埋入培养基中。
2.将无菌器皿密封,并放入无菌环境,通常应保持在25-28℃、光周期为16/8小时(光照/黑暗)的条件下,以促进茎段的快速生长。
3.在培养过程中,应定期观察外植体的生长情况,如出现异常或病害感染,应及时更换培养基或采取其他措施进行处理。
4.经过3-4周后,可观察到茎段的侧芽开始发生增殖,此时外植体可进行移植。
五、移植1.在移植之前,应先准备好新的无菌器皿和培养基。
2.将茎段取出,用消毒液进行消毒处理,然后将其移植到新的培养基中。
3.将培养皿重新密封,并放回无菌环境中继续培养。
4.经过数周后,可将外植体移植到普通培养基中,进行生根和生长。
一、实习背景随着现代生物技术的快速发展,组织培养技术在植物繁殖中的应用越来越广泛。
为了深入了解组织培养技术在月季繁殖中的应用,提高自己的实践操作能力,我于XX年XX月XX日至XX年XX月XX日在XX花卉研究所进行了为期一个月的组培月季实习。
二、实习内容1. 组培基础知识学习实习初期,我重点学习了组织培养的基本原理、操作步骤和注意事项。
通过学习,我了解了月季植物组织培养的流程,包括外植体选择、消毒、诱导愈伤组织、诱导芽分化、诱导根分化以及生根培养基的制备等。
2. 实践操作在掌握了组培基础知识后,我开始进行实际操作。
具体内容包括:(1)外植体消毒:选取健康的月季枝条,用75%酒精和氯化汞进行表面消毒,再用无菌水冲洗。
(2)诱导愈伤组织:将消毒后的外植体接种到MS培养基上,添加适当的植物生长调节剂,在恒温培养箱中诱导愈伤组织形成。
(3)诱导芽分化:将愈伤组织转移到分化培养基上,添加适量的生长素和细胞分裂素,诱导芽分化。
(4)诱导根分化:将分化出的芽转移到生根培养基上,添加适量的生长素,诱导根分化。
(5)生根培养基的制备:根据实验要求,制备适宜的生根培养基。
3. 数据记录与分析在实习过程中,我详细记录了每一步操作的步骤、时间、温度、光照等数据,并对实验结果进行分析,以便了解月季组织培养的效果。
三、实习收获1. 提高了动手能力:通过实际操作,我掌握了组织培养的基本技能,提高了自己的动手能力。
2. 深化理论知识:在实习过程中,我将所学理论知识与实际操作相结合,加深了对组织培养技术的理解。
3. 培养团队协作精神:在实习过程中,我与同事互相学习、交流,共同解决问题,培养了团队协作精神。
4. 增长了实践经验:通过实习,我积累了丰富的实践经验,为今后从事相关领域工作打下了基础。
四、实习总结本次组培月季实习让我受益匪浅。
在今后的学习和工作中,我将继续努力,不断提高自己的实践能力和综合素质,为我国植物组织培养技术的发展贡献自己的力量。
月季的植物组织培养综述
摘要:
随着生物技术的迅猛发展,植物组织培养和细胞培养等现代生物技术得到普遍重视和应用,为月季的快繁和新品种的选育提供了新的途径,在月季的改良上显示了很大的应用潜力。
以月季为试材进行组培试验,综述了月季组织培养、快繁的研究技术及进展,并对月季组培的最优条件进行了总结。
本研究探索出的月季组培快速繁殖技术,在试管苗单芽诱导丛生苗、利用代用品培养降低组培成本、试管苗管外扦插生根、试管苗微型化长途运输等方面,较前人有所改进。
月季为蔷薇科蔷薇属木本植物, 其花姿优美,花型丰富,花色齐备, 树型易修剪,栽培难度小;其花型大,美丽,幽雅,高贵。
月季通常采用扦插、嫁接和压条繁殖,但是一些名贵品种扦插不易生根,主要靠芽接繁殖,而芽接速度慢,因而造成优良品种的月季苗供不应求。
前言:
为了进行月季组织培养实验,我们查阅了相关文献,从多个方面了解影响月季组织培养的因素,如外植体的取材部位、时间、大小、消毒、接种方式、不同阶段激素的配比、培养基成分、培养条件等,以期在实验中调控月季组培的环境,确保实验顺利进行。
同时探究由愈伤组织诱导出芽及生根所需的最佳浓度配比。
并在月季组织培养过程中,掌握外植体消毒方面要注意的事项,整个培养过程中培养条件的选取与控制,同时探究由愈伤组织诱导出芽及生根所需的最佳浓度配比。
并在月季组织培养过程中,掌握外植体消毒方面要注意的事项,
整个培养过程中培养条件的选取与控制,实验过程中出现的现象的观察记录以及分析,在这个过程中不断加强理论与实践的联系,深化对理论知识的理解。
察记录以及分析,在这个过程中不断加强理论与实践的联系,深化对理论知识的理解。
关键词:月季、MS培养基、激素等。
综述:
一、培养基
1、基本培养基
众多培养基中以MS 培养基的效果为最好,广泛用于月季的离体快速繁殖中。
对MS 培养基的成分及物理性能进行合理的选择会提高月季组织培养的成功率。
诱导培养基以MS为基本培养基,附加适量的细胞分裂素 6 一苄氨基嘌呤( 6 - BA) 和生长素萘乙 D 6 7 B 0 2) 酸 ( NAA) 。
2、激素
不同激素对诱导愈伤组织的影响诱导培养基以MS为基本培养基,附加适量的细胞分裂素和生长素。
生长素增加至0.1mg/L时,细胞分裂素浓度的高与低已对增殖系数不产生明显影响。
最适的侧芽诱导培养基为MS+细胞分裂素0.5-3.0mg/L和生长素0.01-1.00mg/L,且培养基中添加蔗糖有增加丛生芽数量的作用。
不同生长素种类和浓度对月季生根和移栽成活率的影响。
用NAA 诱导生根和提高移栽成活率效果最好,浓度为100ppm 为宜,现在IAA 诱导生根和高移栽成活率效果并不理想,其浓度只能在1mg/L 以下,超过时对生根的促进作用
已不显著,反而大幅度降低移栽成活率。
NAA和IBA对月季的诱导生根都有较好的效果,在1/2MS培养基附加NAA或IBA0.1-1.5mg/kg均可诱导不定根的产生,生根63.3%-93.3%。
3、糖浓度的影响
不同类型的月季,其组培需求的碳源和糖浓度有所不同。
月季组培最常用的碳源是蔗糖,在丰花月季的组织培养中,初代培养的蔗糖含量为5%,继代培养的蔗糖含量为3%时培养效果最好。
4、无机盐
试验证明,全量的MS无机盐对茎增殖效果最好。
无机盐浓度和含糖量对月季生根的影响。
采用较低浓度的无机盐对月季生根效果较好。
但糖浓度不可降低。
否则削弱苗的生长势,试验证明,1/2MS+30g/l蔗糖利于生根。
MS 培养基中的氮盐含量是影响月季生根的主要因素,把MS 培养基中氮素含量从60mmol/l减少到7.5mmol/L(相当于1/8MS 中的氮素含量)时,嫩茎生根效果良好,保持7.5mmol/L的氮素含量,MS 培养基中其它无机盐的浓度减少到原配方的1/16,对生根没有影响;但氮素含量过高会引起月季组培苗的生根不适。
5、琼脂
培养基中的固化支持物,并非完全不起作用的物质,它含有能影响外植体的物质,培养基中大约有十分之九的固化支持物是琼脂,月季组织培养中,琼脂的种类和产品质量的差异会影响芽的发育与增殖月季的侧芽在纯净的琼脂上发育较好。
6、培养条件(温度、光照、PH、无机盐)
诱导和继代培养均在黑暗条件下进行,培养温度为25Ċ,3-4周更换一次培养基。
3次重复。
培养温度21℃最好最高不超过25℃,有昼夜温差,生根阶段对温度变化非常敏感,生根温度保持在21度左右,光照10-12h/d,光强800-1200LX。
结果发现,在不同的温度下其生长情况有很大的差异。
在21℃时嫩茎生根数目最多,而且嫩茎生根的百分率也最高,然而在温度低于或高于21℃时,嫩茎生根数目均较21℃时减少,同时嫩茎生根的百分率降低,呈现出一个明显的生根数量变化趋势。
7.防褐化
外源激素2mg/L 6-BA易引发褐变,应用时可考虑少量添加。
2mg/L Kt和2mg/L NAA对组织褐变影响不大,考虑使用;使用乙醇消毒剂时,对外植体泡的时间不能过长,建议以5-10为佳;全光照条件培养容易诱发褐变。
外植体的大小对褐变的发生及褐变程度有一定影响。
外植体越小,切面与体积的比率越大,伤害及褐化的程度就越大;相对大的材料褐变的程度较轻.除了机械伤害外,接种时各种化学消毒剂对外植体的伤害也会引起褐变,酒精消毒效果较好,但对外植体伤害很重;升汞对外植体伤害比较轻。
一般来讲,外植体消毒时间越长,消毒效果就越好。
二、外植体
1、取材
①取材部位
外植体一般选取生长健壮的当年枝条的饱满而外萌发的侧芽,剪取腋芽尚未萌发的枝条,去除茎段两端各2毫米选芽以茎段中芽为最好,因为接种后,中段芽第5 天左右就能萌发,而基部和稍部的芽往往迟至15 天才萌发。
②取材时间
外植体的取材部位对芽的萌发也有影响。
外植体的取材时间及培养所需时间对月季嫩茎的发育和增殖也有影响。
对于月季而言,选取外植体的最佳时间是冬季。
③取材大小
取无菌苗叶片切成0.5cm×0.5cm的小块,叶柄,茎段切成小段。
外植体很小时,有利于培养脱毒的植株.对月季的杉树坏疽环斑病毒可通过茎尖培养的方式达到脱毒的目的,如果单纯为了快速繁殖,可用大的茎尖或茎段进行离体培养,这时外植体的大小决定了茎尖的成活比例。
一般说外植体愈大,成活率愈高,成苗时间愈短。
外植体的大小同时影响外植体自身的发育和月季组培苗茎的增殖,外植体的长度在9.0-10.0mm,直径在3.0-3.5mm范围时.茎的增殖和发育是最好的。
2.消毒
接种材料为当年抽生侧芽饱满的幼嫩茎段,自来水冲洗10-20min;75%或70%乙醇表面消毒15s。
用无菌水冲洗3次。
2%NaClO灭菌5—10min。
然后用无菌水冲洗3次。
3.接种方式
在外植体的接种中采用了垂直接种,斜向上45度接种,
水平接种和反转接种4种方式,发现直接种和斜向上45接种,水平接种和反转接种4种方式,发现垂直接种和斜向上45度接种是最佳的接种方式,腋芽再生芽数多,且生长健壮,这可能与植物的生长极性有关。
参考文献:
[1]邱文青,季静,杜长城.月季组培最优条件的选择.天津农业科学,2009,15(3):26-28.
[2]林小洁,李洪清.紫花月季组织培养与快速繁殖研究.安徽农业科学,2011 , 39 (19):11380—11381,11385. [3]王艳红,龚束芳,车代弟.丰花月季愈伤组织的诱导及细胞悬浮培养.东北农业大学学报,2007,38(2):161-165. [4] 王文静,王鹏,左金森.鸢尾组织培养中防褐化技术研究.安徽农业科学,2009, 37( 15):6858- 6859,6891. [5]王正加,高云振,李军萍.月季组织培养过程中的影响因素,浙江林业科技,2003,23(4):52-54.
[6]张丽,张罗国.观赏花卉的植物组织培养探究.甘肃科技,2011,27(3):65-66.
[7]高彩云,季晓泉,李宝山.月季组织培养技术.现代农业,2005(7):26-27.
[8]周庆华,杨桂杰,孙海龙. 月季组织培养技术研究. 2011(2):23-24. [9] 赵松峰.不同培养基及糖浓度对丰花月季叶愈伤组织诱导的影响.北方园艺,2009(4):56-58.
[10]马纯艳,王素激素对不同品种丰花月季组织培养及快速繁殖的影响. 沈阳师范学院学报(自然科学版),1997(2):58-61.
[11]刘玲玲.植物组织培养中外植体发生褐变的原因及防止措施.喀什师范学院学报,2011(2):32-34.。