月季的组织培养
方案讲演
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目录
1、外植体的选择 2、外植体的清洗与消毒 3、接种与培养 4、继代增殖 5、壮苗培养与生根 6、总结
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外植体的选择
外植体很小时,有利于培养脱毒的植株。 对月季的杉树坏疽环斑病毒可通过茎尖培养的 方式达到脱毒的目的,如果单纯为了快速繁殖, 可用大的茎尖或茎段进行离体培养,这时外植 体的大小决定了茎尖的成活比例。
一般说外植体愈大,成活率愈高,成苗时 间愈短。茎尖在1~10mm 长短时,对形成多芽 苗最有效,不但多芽苗所占百分率高,而且每 个茎段的侧枝数也比较多。外植体的大小同时 影响外植体自身的发育和月季组培苗茎的增殖, 外植体的长度在9.0~10.0mm,直径在3.0~ 3.5mm范围时,茎的增殖和发育是最好的。
胞分裂素与生长素组成合理的比列,将有效增殖系数控制
在3.0-5.0,以实现增殖和壮整理苗版的课件双重目的。
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2、生根培养
将成丛的试管苗分离成单苗,转接到生根培养基上,在培养容器内诱 导生根的方法。试管苗生根的优劣主要体现在根系质量(粗度、长度) 和根系数量(条数)吸收方面。不仅要求不定根比较粗壮,更重要的 是要有较多的毛细根,以扩大根系的吸收面积,增强根系的吸收能力, 提高移栽成活率。根系的长度不宜太长,在粗而少与细而多之间,可 能以后者较好。
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外植体的取材部位对芽的萌发也有影响,“Gold Glow”和“Improved fire”月季的侧芽如果在不 同激素的培养基上进行组培,可发现在枝条顶部 和基部的芽发育慢,而枝条中部的芽发育快。在 研究中发现靠近外植体顶端的芽较其他部位芽的 发育慢,在茎尖脱毒培养时,由嫩茎的顶芽得到 的外植体成活率高于腋芽。在实际工作中由于顶 芽数量少,故月季的组培依旧常常使用腋芽作为 外植体,这时一般需要进行茎切除顶芽(摘心) 以打破顶端优势、促使腋芽健壮生长,以促进嫩 茎的增殖。