170.甲状腺过氧化物酶抗体测定作业指导书

血清抗甲状腺过氧化物酶血清抗甲状腺过氧化物酶（TPOAb）是一种血液中的抗体，它与甲状腺自身免疫相关疾病密切相关。

本文将介绍血清抗甲状腺过氧化物酶的作用、检测方法及其临床意义。

一、血清抗甲状腺过氧化物酶的作用血清抗甲状腺过氧化物酶是一种与甲状腺相关的重要抗体，主要作用是抑制甲状腺过氧化物酶催化甲状腺激素的合成。

当血清中的抗甲状腺过氧化物酶抗体增多时，会导致甲状腺过氧化物酶功能受损，使甲状腺激素合成减少，从而引发甲状腺相关疾病的发生。

二、检测血清抗甲状腺过氧化物酶的方法1. 血清检测：通过采集患者的静脉血样本，在实验室条件下，利用酶联免疫吸附试验（ELISA）等方法测定血清中抗甲状腺过氧化物酶的水平。

这种方法简便、快捷，并且具有较高的敏感性和特异性。

2. 其他检测方法：除了血清检测外，还可以通过组织切片染色、免疫荧光等方法检测抗甲状腺过氧化物酶的表达情况。

这些方法主要用于研究抗甲状腺过氧化物酶在疾病发生发展中的作用机制。

三、血清抗甲状腺过氧化物酶的临床意义1. 甲状腺自身免疫疾病的诊断：抗甲状腺过氧化物酶抗体是甲状腺自身免疫疾病（如自身免疫性甲状腺炎、Graves病等）的标志性指标之一。

检测血清抗甲状腺过氧化物酶抗体水平可以帮助医生进行诊断和鉴别诊断，提高疾病的早期诊断率。

2. 甲状腺功能异常的评估：抗甲状腺过氧化物酶抗体水平与甲状腺功能异常密切相关。

甲状腺功能低下时，抗甲状腺过氧化物酶抗体的水平通常升高；而甲状腺功能亢进时，则常伴随抗甲状腺过氧化物酶抗体的降低。

通过检测抗甲状腺过氧化物酶抗体水平，可以辅助评估患者的甲状腺功能状态。

3. 预测孕妇甲状腺相关疾病发生的风险：研究发现，孕妇血清中抗甲状腺过氧化物酶抗体水平的升高可以预示孕期甲状腺相关疾病的发生风险增加，如孕期甲状腺功能低下、产后甲状腺炎等。

因此，在临床中对孕妇进行血清抗甲状腺过氧化物酶抗体的检测，可以及早发现问题，进行干预治疗。

四、总结血清抗甲状腺过氧化物酶作为一种与甲状腺自身免疫相关的抗体，其在诊断甲状腺自身免疫疾病、评估甲状腺功能异常以及预测孕妇甲状腺相关疾病发生风险方面具有重要的临床意义。

过氧化值（滴定法）测定作业指导书1.0目的规定过氧化值的测定方法。

2.0范围适用于食用动植物油脂、食用油脂制品,以小麦粉、谷物、坚果等植物性食品为原料经油炸、膨化、烘烤、调制、炒制等加工工艺而制成的食品。

3.0实验原理制备的油脂试样在三氯甲烷和冰乙酸中溶解,其中的过氧化物与碘化钾反应生成碘,用硫代硫酸钠标准溶液滴定析出的碘。

用过氧化物相当于碘的质量分数或1kg样品中活性氧的毫摩尔数表示过氧化值的量。

4.0内容及要求4.1 仪器和设备4.1.1 碘量瓶：250ml4.1.2 滴定管:10mL,最小刻度为0.05mL4.1.3 天平：感量为1mg4.1.4 滴定管:25mL或50mL,最小刻度为0.1mL4.1.5 电热恒温干燥箱4.1.6 旋转蒸发仪4.1.7 食品组织捣碎机4.1.8 恒温水浴锅4.1.9 4号玻璃滤锅注:本方法中使用的所有器皿不得含有还原性或氧化性物质。

磨砂玻璃表面不得涂油。

4.2 试剂除非另有规定,本方法所用试剂均为分析纯,水为 GB/T6682规定的三级水。

4.2.1 冰乙酸4.2.2 三氯甲烷4.2.3 碘化钾4.2.4 五水合硫代硫酸钠或无水硫代硫酸钠4.2.5 石油醚：沸程为30 ℃-60 ℃4.2.6 可溶性淀粉4.2.7 重铬酸钾:工作基准试剂4.2.8 无水硫酸钠4.2.9 硫酸4.2.10 无水碳酸钠4.3 试剂配制4.3.1三氯甲烷-冰乙酸混合液(体积比40+60):量取40mL三氯甲烷,加60mL冰乙酸,混匀。

4.3.2 碘化钾饱和溶液:称取20g碘化钾,加入10mL新煮沸冷却的水,摇匀后贮于棕色瓶中, 存放于避光处备用。

要确保溶液中有饱和碘化钾结晶存在。

使用前检查:在30mL 三氯甲烷- 冰乙酸混合液中添加1.00mL碘化钾饱和溶液和2滴1%淀粉指示剂,若出现蓝色,并需用1滴以上的0.01mo1/L硫代硫酸钠溶液才能消除,此碘化钾溶液不能使用,应重新配制。

2.性能指标
2.1外观和性状
2.1.1试剂盒各组分应齐全、完整、液体无渗漏；包装标签应清晰，准确、牢固。

2.1.2试剂盒内组分(磁性微球溶液除外) 应为清澈透明的液体，无沉淀、无悬浮物、无絮状物。

2.2净含量
净含量应符合表1的要求。

表1 净含量要求
2.3精密度
2.3.1批内精密度
批内变异系数(CV)应≤10%。

2.3.2批间精密度
批间变异系数(CV)应≤15%。

2.4准确度
相对偏差应在±10%范围内。

2.5空白限
空白限应小于0.38 IU/mL。

2.6线性
在（15.0-1000）IU/mL浓度范围内，线性相关性系数（r）绝对值应大于0.9800。

2.7质控品准确度
测量结果在质控范围内（可接受区间）。

2.8质控品均一性
瓶间重复性CV%应≤10%。

1 / 1。

甲状腺过氧化物酶抗体测定标准操作规程1.检验原理：采用两步法免疫检测，运用化学发光微粒子免疫检测（CMIA）技术与灵活的检测模式的结合，测定人血清和血浆中的甲状腺过氧化物酶抗体。

第一步，将样本、项目稀释液和TPo包被的顺磁微粒子混合并孵育。

将样本中甲状腺过氧化物酶抗体与甲状腺过氧化物酶抗体包被的微粒子结合。

冲洗后进入第二步，加入口丫噬酯标记的抗人IgG 抗体结合物。

再次孵育冲洗后，将预激发液和激发液加入反应混合物中；测量产生的化学发光反应，以相对发光单位（RLUS）表示。

样本中的甲状腺过氧化物酶抗体的含量和ARCHITECTi光学系统检测到的RLUs值成正比。

2.试剂主要组成成分：2.1试剂盒微粒子：甲状腺过氧化物酶（重组体）包被的微粒子，储存于含有蛋白（牛）稳定剂的2-（N-吗啡咻）乙磺酸（MES）缓冲液中。

最低浓度:0.10%固体物质。

防腐剂：抗菌剂。

结合物：口Y咤醋标记的抗人免疫球蛋白G（IgG）（小鼠、单克隆）结合物，储存于含有蛋白（牛）稳定剂的2-（N-吗啡咻）乙磺酸（MES）缓冲液中。

最低浓度：80.0ng∕mL.防腐剂：抗菌剂。

项目稀释液：项目稀释液，储存于2-（2吗啡咻）乙磺酸（MES）缓冲液中。

防腐剂：抗菌剂。

2.2需要但未提供的试剂预激发液：预激发液含有1.32%（W/V）过氧化氢激发液：激发液含有0.35N氢氧化钠浓缩清洗缓冲液：浓缩清洗缓冲液含有磷酸盐缓冲液。

防腐剂：抗菌剂。

3.样本要求：血清和血浆样本中应不含纤维蛋白、红细胞或其他颗粒物质。

可保存72小时；-10℃以下可保存30天。

样本应避免反复冻融。

4.检验方法：仪器法（详见雅培i1000标准操作规程）5.参考范围检验结果的解释1.1甲状腺过氧化物酶抗体项目通过四参数Logistic曲线拟合数据约简法（4PLC,Y加权）生成一条校准曲线7.检验方法的局限性抗体测定是多标准诊断程序上的一个参数。

诊断甲状腺疾病时，应该结合多种诊断方法的同时参考临床症状。

抗甲状腺过氧化物酶抗体审评指导原则我们来了解一下抗甲状腺过氧化物酶抗体的临床意义。

抗甲状腺过氧化物酶抗体是自身免疫性甲状腺疾病的重要标志物，主要包括Graves病、慢性淋巴细胞性甲状腺炎（Hashimoto病）和亚急性甲状腺炎等。

在Graves病中，抗甲状腺过氧化物酶抗体与TSH受体抗体（TRAb）共同作用，导致甲状腺功能亢进。

而在Hashimoto病中，抗甲状腺过氧化物酶抗体则与甲状腺组织发生免疫反应，引发慢性炎症。

因此，抗甲状腺过氧化物酶抗体的检测对于这些甲状腺疾病的诊断和监测具有重要意义。

接下来，我们将介绍一下抗甲状腺过氧化物酶抗体的检测方法。

目前常用的检测方法包括化学发光免疫分析（CLIA）、酶联免疫吸附试验（ELISA）和放射免疫分析（RIA）等。

其中，化学发光免疫分析是一种高灵敏度、高特异性的检测方法，已成为临床上常用的抗甲状腺过氧化物酶抗体检测方法。

此外，抗甲状腺过氧化物酶抗体的阳性率会随年龄增加而增加，在女性中阳性率也高于男性。

我们将讨论一下抗甲状腺过氧化物酶抗体在临床中的应用。

抗甲状腺过氧化物酶抗体的检测可用于Graves病和Hashimoto病的诊断和鉴别。

在Graves病中，抗甲状腺过氧化物酶抗体的水平可用于监测疾病的活动性和预测治疗效果。

在Hashimoto病中，抗甲状腺过氧化物酶抗体的阳性率较高，可作为诊断的重要依据。

此外，抗甲状腺过氧化物酶抗体的检测还可用于预测孕妇妊娠期甲状腺功能减退的风险，并指导临床干预措施。

抗甲状腺过氧化物酶抗体的检测在临床上具有重要的意义。

通过检测抗甲状腺过氧化物酶抗体，可以辅助甲状腺疾病的诊断和鉴别，评估疾病的活动性和预测治疗效果。

此外，抗甲状腺过氧化物酶抗体的检测还可用于预测孕妇妊娠期甲状腺功能减退的风险。

因此，在临床实践中，抗甲状腺过氧化物酶抗体的检测应得到重视，并结合临床病史和其他相关检测指标进行综合分析，以指导临床诊疗和干预措施的制定。

抗甲状腺过氧化物酶过氧化物酶标准操作规程1 检验申请单独检验项目申请：抗抗甲状腺过氧化物酶过氧化物酶测定(缩写Anti-TPO)；检验项目申请：抗甲状腺过氧化物酶组合项目测定；临床医生根据需要提出检验申请。

2 标本采集与处理2.1标本采集2.1.1常规静脉采血约2ml，不抗凝，置普通试管中。

或采用含分离胶的真空采血管。

2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。

2.1.3急诊标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间。

2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。

专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。

2.1.5 下列标本为不合格标本2.1.5.1标本量不足：少于0.3ml的全血标本，或少于0.1ml的血清或血浆。

2.1.5.2对于测定和吸样有干扰的标本：如近期使用鼠源性单克隆抗体诊断后采取。

2.1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的。

2.1.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。

2.2标本保存2.2.1接收标本后在30min内将标本离心分离出血清, 避免溶血。

2.2.2标本保存时间：室温（15～25℃）下可稳定8h，普通冰箱中（2～8℃）稳定48h。

需较长时间保存应将血清存放于-20℃。

冰冻标本仅可冻融一次。

2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号，置2～8℃冰箱内保存7d。

2.3标本采集的注意事项2.3.1采血前使受检者保持平静、松弛、避免剧烈活动。

2.3.2采血后应使血液充分凝固，离心后的血清中不能含有颗粒物或微量纤维蛋白；可使用选用肝素、EDTA抗凝的血液标本。

3 方法原理Anti-TPO测定采用双位点加心化学发光免疫分析法，其检测原理来如下：第一步：将标本、包被着链霉亲和素及结合了生物素化甲状腺过氧化物酶蛋白的超顺磁性磁粒（磁珠)添加到反应管中，经过孵化，样本中 Anti-TPO和磁珠上的TPO结合。

反应完成后，磁场吸住磁珠，洗去未结合物质。

第二步：将蛋白A碱性磷酸酶结合物添加到反应管中，该结合物与 Anti-TPO结合。

上海笃玛生物科技有限公司本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断人（Human）甲状腺过氧化物酶（TPO）ELISA 检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。

往预先包被甲状腺过氧化物酶（TPO）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。

用底物TMB 显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的甲状腺过氧化物酶（TPO）呈正相关。

用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品活性。

样品收集、处理及保存方法1.血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2.血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。

3000转离心30分钟取上清。

3.细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。

3000转离心10分钟取上清。

5.保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

自备物品1.酶标仪（450nm）2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。

从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。

2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。

3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。

4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

5.所有液体组分使用前充分摇匀。

上海笃玛生物科技有限公司试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL 3mL 无检测抗体-HRP 10mL 5mL 无20×洗涤缓冲液25mL 15mL 按说明书进行稀释底物A 6mL 3mL 无底物B 6mL 3mL 无终止液6mL 3mL 无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注：标准品（S0-S5）浓度依次为：0、1、2、4、8、16U/mL试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。

过氧化物酶（pox）检测标准操作规程1.【目的】为了供骨髓涂片及血液细胞涂片染色检查。

2.【职责】1.实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP，室负责人监督落实。

2.本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。

3.【标本类型及实验前准备】1.标本类型1.要求新鲜的骨髓细胞涂片或血液细胞涂片。

2.若样本采集后不能及时测定，可采用95%乙醇固定2分钟后，可保存数天。

亦可使用某些抗凝血（肝素、EDTA）。

3.样本在未染色前切勿沾有甲醇和氧化剂类试剂，以免细胞内的过氧化物被抑制和破坏。

4.溶血样本不宜使用，因涂片中大量游离血红蛋白易使背景产生难以去除的杂质颗粒。

2.患者准备成人一般取骼后、骼前上棘，其次为胸骨、棘突部位。

2岁以下小儿可穿刺胫骨。

3.容器、添加剂类型骨髓液量不宜过多，不需抗凝，迅速置于载玻片上，必要时可用EDTA2K抗凝。

4仪器设备捷达骨髓成像系统，OLYMPUS显微镜5.实验试剂1.快速染液A （ A液）：曙红2.快速染液B （ B液）：天青3.碘化钾溶液（C液）：碘化钾4.WG溶液（D液）：瑞姬氏染料4.【测定原理】细胞中的过氧化物酶分解过氧化物产生新生态氧，后者与KI （碘化钾）作用产生碘，碘与WG等显色剂中的有效成分结合，形成有色颗粒定位于细胞浆中。

5.【程序性操作步骤】本法采用滴染法，滴染工作液配制（1份滴染工作液为2.4ml）使用器材：一次性塑料试管、微量移量液器、一次性吸嘴、滴管。

操作：取C液2.0ml，D液4ul，混匀，2小时内使用。

染色步骤：1.快速染色（核染色）：干燥的骨髓涂片滴加A液（覆盖标本）后，再滴加B液（A液：B液=1:1至1:2）混匀，染色20-30秒，流水冲洗，甩干或滤纸吸干；2.滴加工作液于涂片上，染色40-60秒后倾去（不用水冲洗），滤纸吸干，镜检。

6.【结果计算与判断】呈阳性反应时，可见胞浆中有红棕色至蓝黑色颗粒。

1目的规范过氧化值检测操作，确保检测结果有效。

2适用范围适用于公司产品、原料过氧化值的测定。

3定义：3.1过氧化值：过氧化值表示油脂和脂肪酸等被氧化程度的一种指标。

是1千克样品中的活性氧含量，以过氧化物的毫摩尔数表示。

3.2检测原理：制备的油脂试样在三氯甲烷和冰乙酸中溶解，其中的过氧化物与碘化钾反应生成碘，用硫代硫酸钠标准溶液滴定析出的碘。

用过氧化物相当于碘的质量分数或1kg 样品中活性氧的毫摩尔数表示过氧化值的量。

4职责化验员负责按本作业指导书方法检测。

5内容5.1准备:5.1.1检测设备：250ml碘量瓶，滴定管，天平，水浴锅。

5.1.2试剂：1）石油醚（沸程为30 ℃～60 ℃），无水硫酸钠饱和碘化钾溶液：称取14g碘化钾，加10mL水溶解，必要时微热使其溶解，冷却后存放于棕色瓶内。

临用时现配。

2）三氯甲烷－冰乙酸混合液：量取40mL三氯甲烷，加60mL冰乙酸，混匀。

3）硫代硫酸钠标准滴定液〔c（Na2S2O3）＝0.0020mol/L〕：由0.1000moL/L的硫代硫酸钠标准溶液稀释50倍而成。

临用前稀释。

(0.1000moL/L的硫代硫酸钠标准溶液配制及标定按GB/T 601操作。

每次使用前，需标定。

)4）淀粉指示剂（10g/L）：称取可溶性淀粉0.50g，加少许水，调成糊状，倒入50mL 沸水中调匀，煮沸。

临用时现配。

5.2检测：5.2.1样品制备过程应避免强光，并尽可能避免带入空气。

5.2.2 从所取全部样品中取出有代表性样品的可食部分，将其破碎并充分混匀后置于广口瓶中，加入2～3 倍样品体积的石油醚，摇匀，充分混合后静置浸提12 h 以上, 经装有无水硫酸钠的漏斗过滤，取滤液, 在低于40 ℃ 的水浴中蒸干石油醚，残留物即为待测试样。

5.2.3 称取制备的试样2 g ～3 g(精确至0.001 g) 置于250 mL 碘量瓶中 , 加入30 mL 氯甲烷-冰乙酸混合液，轻轻振摇使试样完全溶解。

抗甲状腺过氧化物酶抗体定量测定·每一试剂盒做一次重新定标：·根据要求进行标定：如质控结果超出范围时。

7 质控PreciControl抗-TPO1和抗-TPO2以及其它合适的质控品。

各浓度区域的质控至少每24工作时、每个试剂盒或每一次定标后测定一次。

质控间隔期应适用于实验室的具体要求。

检测值应落在确定的范围内，如出现质控值落在范围以外，应采取校正措施。

8试剂准备及稳定期M：链霉亲和素包被的微粒（透明瓶盖），1瓶，6.5ml。

粒子浓度0.72g/ml，生物素结合能力： 470ng生物素/mg粒子。

含防腐剂。

R1：Ru(bpy)32＋标记的羊抗TPO抗体（灰盖），1瓶，10ml。

浓度1.0mg/l，TRIS缓冲液0.1mol/l，pH7.2。

含防腐剂。

R2：生物素化的TPO重组抗原（黑盖），1瓶，10ml。

浓度0.15mg/l，TRIS缓冲液0.03mol/l，pH7.0。

含防腐剂。

Cal1：羊抗TPO定标液1(白盖),1瓶,1.3ml。

浓度约35 IU/ml，人血清基质。

含防腐剂。

Cal2：羊抗TPO定标液2(白盖),1瓶,1.3ml。

浓度约350IU/ml，人血清基质。

含防腐剂。

PC ATPO1 PreciControl 人抗TPO质控品1，（黑盖），1瓶，1.0ml。

浓度约20IU/ml，人血清基质。

含防腐剂。

PC ATPO2 PreciControl 人抗TPO质控品2，（黑盖），1瓶，1.0ml。

浓度约100IU/ml，人血清基质。

含防腐剂。

未打开的试剂盒：2－8℃至效期末。

开封后，2－8度6周；放E170/e601和Elecsys2010/e411上2周。

9实验程序按Roche Modular E170/e601 ECL2010/e411标准操作流程严格进行。

10抗干扰能力该方法不受黄疸（胆红素<66mg/dl）、溶血（血红蛋白<1.5g/dl）、脂血（脂质<2100mg/dl）和生物素<60ng/ml等干扰。

抗甲状腺过氧化物酶抗体测定试剂注册技术审查指导原则1. 引言抗甲状腺过氧化物酶抗体测定试剂是一种用于检测人体中甲状腺过氧化物酶抗体水平的试剂。

本文将介绍关于该试剂注册技术审查的指导原则，包括技术要求、注册流程和审查要点等内容。

2. 技术要求2.1 技术原理：详细描述该试剂的工作原理，包括试剂成分、反应机制等。

2.2 试剂成分：列出所有试剂成分及其含量，并说明其功能和作用。

2.3 检测方法：介绍该试剂的检测方法，包括样品处理、反应条件、仪器设备等。

2.4 灵敏度和特异性：评估该试剂的灵敏度和特异性，并提供相关数据支持。

2.5 精密度和重复性：评估该试剂的精密度和重复性，并提供相关数据支持。

3. 注册流程3.1 审查准备：提交注册申请前，需准备相关资料，如技术文档、实验数据等。

3.2 申请材料：详细列出需要提交的申请材料清单，并说明每个材料的要求和格式。

3.3 审查程序：介绍注册审查的程序和流程，包括初审、实验室评估、技术评估等环节。

3.4 实验室评估：说明实验室评估的目的和方法，包括对试剂性能进行验证和验证结果的分析。

3.5 技术评估：介绍技术评估的内容和标准，包括对试剂原理、成分、检测方法等进行综合评价。

3.6 审查结论：根据实验室评估和技术评估结果，给出审查结论，并提出改进建议或要求。

4. 审查要点4.1 技术可行性：评估该试剂的技术可行性，包括原理是否科学合理、方法是否简便可行等。

4.2 检测性能：对该试剂的灵敏度、特异性、精密度和重复性进行全面评估，并提供相关数据支持。

4.3 市场需求：调研市场需求，确定该试剂在临床应用中的潜在价值和市场前景。

4.4 安全性和稳定性：评估该试剂的安全性和稳定性，包括对潜在风险的评估和应对措施的建议。

4.5 技术优势：分析该试剂与同类产品的差异和优势，并给出相应的技术支持和推广建议。

5. 结论抗甲状腺过氧化物酶抗体测定试剂注册技术审查指导原则是对该试剂注册技术审查的指导文件，其中包括技术要求、注册流程和审查要点等内容。

抗甲状腺过氧化物酶（Anti TPO ）标准操作规程1.【实验目的】通过ARCHITECTAnti-TPO检测可以对甲状腺状态进行辅助评估。

2.【职责】2.1实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP，室负责人监督落实。

2.2本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。

3.【样品类型及实验前准备】3.1样本类型：血清和血浆：血清（包括在血清分离器管中采集的血清），血浆（EDTA、肝素锂、肝素钠），使用玻璃管或塑料管分离样本，无黄疸、无溶血、无脂血，已分离出的样本应立即分析。

稳定性：2-8C可稳定3天。

样品贮存于-10C或更低温度下30天没有表现出性能方面的差异。

3.2患者准备：实验前正常饮食，晨起空腹，安静状态下抽取静脉血，条件特殊情况下可非空腹抽血检测。

3.3容器，添加剂类型：血清（包括在血清分离器管中采集的血清），血浆（EDTA三钾、肝素锂、肝素钠），使用玻璃管或塑料管分离样本。

3.4仪器设备：雅培ARCHITECT i10SR,低速离心机3.5实验试剂：3.5.1. 1 ARCHITECT Anti-TPO 试剂盒（2K47 ）甲状腺过氧化物酶包被的磁性微粒子MES缓冲液中3.5.1.2其他试剂：激发液、预激发液、清洗缓冲液（需另行配置）3. 5.2校准品：名称：美国雅培 i10sR Anti-TPO 校准品 LIST NO: 2K47-01规格浓度(IU/mL) 体积（ml）校准品A 0.0 4.0校准品B 5.0 4.0校准品 C 20.0 4.0校准品 D 62.5 4.0校准品 E 250.0 4.0校准品F 10.0 4.03.5.3质控品名称：美国雅培 i10SR Anti-TPO 质控品 LIST NO: 2K47-10水平浓度(IU/mL) 范围(IU/mL)体积(ml)质控一0. 5< 2. 154.075 45 - 105质控+4.04.【实验原理】ARCHITECT门0弘Anti-TPO是采用化学发光微粒子免疫分析（ChemiluminesentMicroparticle ImmunoAssay, CMIA ）技术，夹心两步法对待测样品中的甲状腺过氧化物酶抗体（Anti-TPO）进行定量检测。

附件5抗甲状腺过氧化物酶抗体测定试剂注册技术审查指导原则本指导原则旨在指导注册申请人对抗甲状腺过氧化物酶抗体测定试剂注册申报资料的准备及撰写，同时也为技术审评部门审评注册申报资料提供参考。

本指导原则是对抗甲状腺过氧化物酶抗体测定试剂的一般要求，申请人应依据产品的具体特性确定其中内容是否适用，若不适用，需具体阐述理由及相应的科学依据，并依据产品的具体特性对注册申报资料的内容进行充实和细化。

本指导原则是供申请人和审查人员使用的指导文件，不涉及注册审批等行政事项，亦不作为法规强制执行，如有能够满足法规要求的其他方法，也可以采用，但应提供详细的研究资料和验证资料。

应在遵循相关法规的前提下使用本指导原则。

本指导原则是在现行法规、标准体系及当前认知水平下制定的，随着法规、标准体系的不断完善和科学技术的不断发展，本指导原则相关内容也将适时进行调整。

一、适用范围从方法学考虑，在本文中抗甲状腺过氧化物酶抗体测定试剂盒是指采用化学发光免疫分析技术，利用全自动、半自动化学发光免疫分析仪，对人血清或血浆等样本中抗甲状腺过氧化物酶抗体的含量进行体外定量分析的试剂。

化学发光免疫分析法主要有直接化学发光、电化学发光、酶促间接化学发光等。

根据《体外诊断试剂注册管理办法》（国家食品药品监督管理总局令第5号）和《食品药品监管总局关于印发体外诊断试剂分类子目录的通知》（食药监械管〔2013〕242号），抗甲状腺过氧化物酶抗体测定试剂盒的管理类别为二类，分类代码为6840。

本指导原则适用于进行首次注册申报和相关许可事项变更的产品。

本指导原则不适用于：（一）单独申请注册的抗甲状腺过氧化物酶抗体校准品和质控品。

（二）化学发光免疫分析法原理之外的其他抗甲状腺过氧化物酶抗体测定试剂盒。

二、注册申报资料要求（一）综述资料甲状腺过氧化物酶（thyroid peroxidase，TPO），是催化甲状腺激素的重要酶，由甲状腺滤泡细胞合成。

其主要成分是由933个氨基酸残基组成的分子量103kD的10%糖化的血色素样蛋白质，表达在细胞表面，在滤泡腔面的微绒毛处分布最为丰富。

甲状腺过氧化物酶抗体（TPOA）测定试剂盒（化学发光免疫分析法）适用范围：用于体外定量测定人血清或血浆中的甲状腺过氧化物酶抗体的含量。

1.1 产品规格试剂盒规格为48人份/盒、96人份/盒。

1.2 主要组成成分表1 甲状腺过氧化物酶抗体（TPOA）测定试剂盒（化学发光免疫分析法）主要组成成分a) 酶结合物以含50%小牛血清的0.9%Nacl配制的联接HRP的抗人IgG单克隆抗体，0.5%ProClin300作为防腐剂。

b) 校准品校准品以含20%小牛血清的磷酸盐缓冲液（PH7.4）为稀释液，0.5%ProClin300作为防腐剂，校准品A～F中TPOA的目标浓度分别为0、8 IU/mL、16 IU/mL、32 IU/mL、64 IU/mL、128 IU/mL。

校准品具体浓度详见标签及试剂盒参数IC卡。

c) 发光液发光液A主要成份为鲁米诺，发光液B主要成份为过氧化脲，两者均以pH8.6的Tris-HCl缓冲液配制。

d) 包被微孔板包被有甲状腺过氧化物酶白色聚苯乙烯微孔板，用铝箔袋真空包装。

e) 质控品（备选）以100%正常人血清为基质制备的冻干品，其中含0.5%ProClin300做为防腐剂，其靶值浓度范围QCⅠ为8.00 IU/mL～32.00 IU/mL，QCⅡ为64.00 IU/mL～128.00 IU/mL。

质控品具体浓度详见质控品参数表。

不同批号试剂盒中的相同组分不能互换。

2.1 外观a）液体组分应澄清，无沉淀或絮状物，实际装量应不小于标示装量；b）冻干组分呈白色或淡黄色疏松体，加水后应在3分钟内完全溶解；c）所有组分均无包装破损，标示清楚。

2.2 准确度以国家标准品（编号：150557）为参考物质，使用试剂盒内的校准品进行检测，其测量结果的相对偏差应不超过±10%。

2.3 线性在[12，400]IU/mL范围内，剂量-反应曲线相关系数（r）应不低于0.9900。

2.4 重复性和批间差2.4.1重复性：CV≤10%（手工操作），CV≤8%（全自动）。

抗甲状腺过氧化物酶抗体（TPO-Ab）测定试剂盒（化学发光免疫分析法）产品技术要求华科泰抗甲状腺过氧化物酶抗体（TPO-Ab）测定试剂盒（化学发光免疫分析法）适用范围：本试剂盒用于体外定量测定人血清中抗甲状腺过氧化物酶抗体（TPO-Ab）的含量。

1.1 包装规格96人份/盒。

1.2 主要组成成分主要组成成分见表1。

表1注：校准品靶值批特异、具体浓度详见标签。

2.1物理性能试剂盒的各液体组分应澄明，无沉淀或絮状物。

包被抗体微孔板的铝箔袋，应无破损现象。

2.2 准确度试剂盒内校准品与相应浓度的中国食品药品检定研究院的标准品（编号150557）同时进行分析测定，用Log(X)- Log(Y)模型拟合，要求两条剂量-反应曲线不显著偏离平行（t检验）；以中国食品药品检定研究院的标准品为对照品，试剂盒内校准品的实测值与标示值的效价比应在0.900～1.100之间。

2.3 剂量-反应曲线的线性在企业线性范围内［5，240］IU/ml，剂量-反应曲线的相关系数应（r）应不低于0.9900。

2.4 重复性重复性（CV%）应不高于10.0%.2.5 批间差2.5.1 批间差批间差（CV%）应不高于15.0%。

2.5.2 批内瓶间差校准品各浓度点（除零外）批内瓶间差（CV%）应不高于15.0%。

2.6 空白检测限试剂盒的空白检测限应不高于4IU/mL。

2.7 特异性表2 交叉反应2.8 溯源性根据GB/T 21415-2008的有关规定，提供所用校准品的来源、赋值过程及测量不确定度等内容，溯源至中国食品药品检定研究院提供的标准品（编号：150557）。

2.9 稳定性2℃～8℃保存，有效期12个月，效期后2个月内分别检测2.1～2.4、2.6项，其结果应符合各项要求。