治疗性疫苗

治疗性结核D N A疫苗S D S含量检测孔雯雯\魏荣华1，王玮\周飞燕1,梁艳2，吴雪琼2,倪世明、黄明\丨.广州白云山拜迪生物医药有限公司，广东广州511495;2.中国人民解放军总医院第八医学中心结核病重点实验室，北京100091)摘要：目的应用吖啶橙法来检测治疗性结核D N A疫苗中的十二烷基硫酸钠（sodium dodecyl sulfate,S D S)的残留量方法将S D S标准液与吖啶橙混合后，经甲苯萃取处理后在波长499 m n测定吸光度值，根据标准曲线计算供试品中S D S的含量 结果S D S浓度在0.005~0.32 mg.mL—1的范围内，相关系数；■ >0.99,线性关系良好…该法受高溫、辅料和核酸的影响较小3批制剂的S D S残留量均小于0.02 mg.mL—1。

结论建立的方法操作简便、专属性、准确度和重现性较好，可用于结核D N A 疫苗制剂中S D S残留量的检测,：关键词：十二烷基硫酸钠；结核；D N A疫苗；吖啶橙中图分类号：R917 文献标志码：A 文章编号：1674-229X(2021) 01-0039-04Doi ：10.12048/j.issn.1674-229X.2021.01.008Determination of the Contents of Sodium Dodecyl Sulfate in Therapeutic Tuberculosis DNA VaccineK O N G Wenwen'.WEI Ronghua1,W ANG Wei1,ZH O U Feiyan1,LIA NG Yan2,W U Xueqiong2,NI Shiming1, HUANG M i n g1 ( 1. Guang"z/i〇u Bai Yun Shan Baidi Bio-Technology C o., L id, Guangzhou, Guangdong 5W495, C hina;2. Tuberculosis Key Laboratory , the Sth Medical Center o f PLA General Hospital, Beijing100091 , C hina)A B S T R A C T:O B JE C T IV E T(> develop a metlunl f or the content determination of sodiumtuberculosis DNA vaccine by acridine orange. M E T H O D S The standard solution of SDS was mixed with acridine orange, then the mixture was extrac ted with toluene and determined the absorbance at the wavelength of 499 nm.The concentration of SDS in samples could be determined by standard t;urve. R E SU L T S The standard curve of SDS concentration showed good linearity at the range of 0.005-0.32mg-niL 1 (r>0.99). And the method was relatively smaller affection by high tem perature,excipients and nucleic acid.The content of SDS from three batches of preparations were all lower than 0.02 mg • mL 1. C O N C LU SIO N The developed method is sim ple,spec ific,accurate,and reproducible,which can he used for the determination of SDS residue in tuberculosis DNA vaccine.K EY W O R D S：sodium dodecyl sulfate；tuberculosis； DNA vaccine；acridine orange结核病是由结核分枝杆菌感染引起的传染病，我国是结核病发病率较高的国家之一 目前临床使用最广泛的结核疫苗是卡介苗，它也是唯一应 用于人类结核病的预防性疫苗[4<。

疫苗研究：从防病向治病迈进——盘点治疗性疫苗的十颗新星1796年，英国医生爱德华·詹纳为一个8岁的男孩接种牛痘疫苗以预防天花，从而开创了现代免疫学时代。

而在其后的200多年里，提到疫苗人们首先会想到的是预防传染病。

如今，这一观念正在悄然发生改变——该领域的研究已经开始由利用激活免疫系统预防疾病向治疗疾病发展，而这一转变始于肿瘤学领域。

首个获得批准上市的癌症疫苗是美国生物科技公司Antigenics(现更名为Agenus)开发的Oncophage（2008年在俄罗斯获得批准用于治疗肾细胞癌）。

随后，Dendreon公司的Sipuleucel-T(Provenge)在2010年获得了美国食品药品管理局(FDA)的批准，用于治疗激素难治性转移性前列腺癌。

继治疗性癌症疫苗之后，如今正在开发的疫苗已开始向靶向治疗疫苗领域发展，如HIV疫苗，以及与感染有关的癌症疫苗-靶向作用于早期宫颈癌和癌前病变的人乳头状瘤病毒(HPV)的疫苗。

而且有多种治疗性疫苗已进入临床试验阶段，如果其最终能够获得成功，将会为目前的疾病治疗提供一种全新的选择。

下面介绍的是正在进行研发而又极具希望的10种治疗性疫苗。

名称：GV A X Pancreas开发者：BioSante制药公司适应证：胰腺癌BioSante制药公司的胰腺癌疫苗GV AX Pancreas来源于异体（非自体）胰腺癌细胞，经过基因修饰产生粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF），进而刺激免疫系统。

胰腺癌被称为“沉默杀手”，因为其往往无症状，而且预后不良，许多患者患病后仅存活3～6个月。

2012年美国临床肿瘤学会胃肠道癌症研讨会发布的Ⅰb期研究结果显示，GV A X Pancreas联合治疗黑色素瘤的单克隆抗体Y ervoy（ipilimumab，易普利姆玛），与单独使用易普利姆玛相比，可使胰腺导管腺癌患者生存率提高60%，既往接受过治疗、晚期或肿瘤转移患者的中位生存期从3.3个月提高到5.5个月，而且1年后存活患者的数量几乎翻了两番。

治疗性乙肝疫苗和预防性疫苗有什么不同？
*导读：大家知不知道人类是乙肝病毒的唯一宿主，所以说，如果能够提供安全有效的乙型肝炎疫苗进行接种，那肯定能控制住乙型肝炎病毒的传播性。

中国目前规定，乙肝疫苗是强直性要求新生儿必须要进行接种，且是免费的。

……
大家知不知道人类是乙肝病毒的唯一宿主，所以说，如果能够提供安全有效的乙型肝炎疫苗进行接种，那肯定能控制住乙型肝炎病毒的传播性。

中国目前规定，乙肝疫苗是强直性要求新生儿必须要进行接种，且是免费的。

而治疗性乙肝疫苗大家又知道是什么不？治疗性的疫苗指
的是患者在感染病原体后或本身已患有某些疾病的机体中，通过接种治疗性疫苗达到治疗，或是防止病情恶化。

虽然两者学名差不多，但作用却是大有不同，我们都知道乙型肝炎疫苗是作预防乙肝用的，针对已经被感染乙型肝炎的人群来说，这种疫苗是无法起到治疗作用的。

但是，随着免疫学研究发展日益增进，人们发现乙型肝炎疫苗的新出路，在预防乙肝上作出了贡献，并配合研发出治疗性乙肝疫苗。

自此后，疫苗的作用就不单单只能预防疾病，还能对疾病进行治疗。

治疗性乙型肝炎像是个老师教会人体免疫系统对病毒奋起攻击，且它是国货，比其他抗病毒药、干扰素等药物的价格要漂亮很多。

不过要提醒大家的是，虽然治疗性乙型肝炎疫苗对治疗能起
到一定的效果，但不代表它能完全代替药物，要视患者自身病情严重程度再作治疗方针。

在此，小编还是要怕你们嫌罗嗦，再次再次叮嘱大家，发现身体有问题一定一定要及时积极地去治疗，别等病情已经严重到不仅危害着自己健康，还拖累了家人，才来后悔。

FDA批准一种治疗性癌症疫苗产品2010年4月，在经历了多年挫败之后，美国食品与药品监督管理局（FDA）终于通过了第一款治疗性癌症疫苗产品。

这就是由美国华盛顿州西雅图市Dendreon公司生产的Provenge （sipuleucel-T）。

该疫苗能够使晚期前列腺癌患者的生命延长好几个月。

美国马里兰州贝塞斯达美国癌症研究院（National Cancer Institute）的肿瘤医学专家James Gulley认为，Provenge疫苗的成功让其它几款癌症疫苗看到了希望。

他指出，FDA在批准Provenge疫苗时需要克服一些管理方面的问题，所以Provenge疫苗无疑是癌症疫苗发展史上的一座里程碑，它为后续的癌症疫苗产品趟开了一条新路。

在近三年时间里，癌症疫苗的研发工作开展得如火如荼，Gulley认为这部分得益于Provenge疫苗的成功，以及其它几款在晚期临床试验中取得突出表现的癌症疫苗的功劳。

大型制药公司们都在启动各自的治疗用疫苗（therapeutic-vaccine）商业项目，小型生物技术公司们也对癌症疫苗研发工作表现出了强烈的兴趣。

在美国，有数百个癌症疫苗的临床试验项目正在开展，美国马里兰州巴尔的摩约翰霍普金斯大学悉尼金梅尔综合癌症中心（Sidney Kimmel Comprehensive Cancer Center at Johns Hopkins University）的肿瘤学家Hyam Levitsky认为，现在，癌症疫苗研究领域的前景要比过去20年间任何时候都要光明得多。

Levitsky介绍说，每一个打算进入癌症疫苗研发领域的人都会得到这样的保证——“这一行绝对有前途。

”Levitsky等人都对癌症疫苗的前景非常乐观，他们坚信癌症疫苗一定会成为常规的治疗手段。

他们如此自信不是没有理由的，不光是Provenge疫苗带给他们信心，其它正在进行的癌症疫苗临床试验结果也让给了他们充足的理由。

治疗性疫苗、反向疫苗与传统疫苗的比较与研究进展班级：组别：姓名：学号：摘要：治疗性疫苗、反向疫苗与传统疫苗各自拥有着它们的优缺点并发挥着重要作用，治疗性疫苗主要起到治疗的作用，而反向疫苗从基因水平表达的产物进行分析从而达到对某种疾病的预防，传统疫苗有着很多缺点，但因其准确也被广泛应用。

本文结合了它们的特点并对最新进展进行了展望。

关键词：治疗性疫苗；反向疫苗；传统疫苗；进展正文：疫苗是将病原微生物（如细菌、立克次氏体、病毒等）及其代谢产物，经过人工减毒、灭活或利用转基因等方法制成的用于预防传染病的自动免疫制剂。

疫苗保留了病原菌刺激动物体免疫系统的特性。

现主要介绍三种疫苗及其研究的新进展。

一．三种疫苗的概念与比较1.1 治疗性疫苗治疗性疫苗是指在已感染病原微生物或已患有某些疾病的机体中，通过诱导特异性的免疫应答，达到治疗或防止疾病恶化的天然、人工合成或用基因重组技术表达的产品或制品。

它通过打破机体的免疫耐受，提高机体的特异性免疫反应，对一些目前尚无有效治疗药物的疾病起到治疗作用。

它不仅具有传统疫苗的一般功能，而且能够用于临床患者的治疗，因此治疗性疫苗研究近年来得到了很大的发展，临床数据表明治疗性疫苗在肿瘤、高血压和乙型肝炎等慢性复发性感染等疾病方而具有不同程度的疗效。

治疗性疫苗的作用机制还尚未完全研究清楚。

目前有两种观点:一种认为，在某些感染病原体的机体内由于免疫系统缺陷，不能发挥免疫反应，从而导致疾病的发生。

治疗性疫苗通过不同的途径把微生物抗原呈递给免疫系统，来弥补或激发机体的免疫反应，从而达到清除病原体的作用。

另一种认为，机体接受治疗性疫苗后，刺激T细胞、B细胞增殖，激活巨噬细胞，促进自然杀伤细胞杀伤病原体，从而发挥免疫增强作用，如利用卡介苗治疗肿瘤，就是通过增强机体免疫系统对肿瘤细胞的杀伤作用而辅助治疗肿瘤。

1.2 反向疫苗反向疫苗学是从全基因水平来筛选具有保护性免疫反应的候选抗原的疫苗发展策略。

10个颇具前途的治疗性疫苗以下译文转自Minhua 新浪博客：/s/blog_4468f9470100zkub.html长期以来，科学家们一直认为，通过加速人体免疫系统的运作，机体自身天然防线能够获得额外的力量来攻击肿瘤及其它疾病。

但是，几十年过去了，很多颇具前景的潜在“免疫调节剂”、“免疫刺激剂”以及“治疗性疫苗”的临床试验均以失败告终。

现在，有证据表明，治疗性疫苗实际上是有疗效的。

传统疫苗是提供持久的保护以防止感染疾病，而治疗性医疗是用来对抗现有的疾病的。

2010年4月，美国食品与药品管理局（FDA）批准了首个治疗性疫苗——Dendreon的Provenge。

Provenge（sipuleucel-T）在临床试验中显示，对于某种特定类型的转移性前列腺癌男性患者，可以延长大约4个月的生命。

这种疫苗可以激发免疫应答，对抗存在于大多数前列腺癌细胞中的一个特定的抗原或识别分子。

Provenge所激发的不仅仅是患者的免疫系统，还有投资者、临床医生还有被免疫加强治疗相对较少的副作用和较高的收益所鼓励的大大小小的公司。

Provenge 一个疗程的费用为93000万美元。

对分子生物学和免疫学的不断深入的认识也激发了新的希望，一些机制不明、甚至在十来年前无法获得的候选疫苗纷纷出现。

现在，FierceVaccines选取了正在临床研究阶段的颇受关注的10个治疗性疫苗。

通常，治疗癌症的疫苗会得到最多的关注，这部分是因为治疗性疫苗的耐受性很好，与传统化疗药物的毒副作用形成了鲜明的对比。

而免疫刺激这一想法最后被证明在肿瘤学上是有限的，这也刺激了研究人员将治疗性疫苗的适应症从原来的传染性疾病如艾滋病和肝炎扩展到癌症。

开发治疗性疫苗的关键问题之一是训练免疫系统如何识别和摧毁“坏”细胞，这样疫苗就可以帮助机体对抗一种类型的肿瘤或者可以个性化治疗的疾病。

因此，我们的名单中包括了一些针对癌症以外疾病的前沿治疗性疫苗。

IICT- 107 - 胶质母细胞瘤VGX- 3100 - 宫颈癌MAGE - A3 - 皮肤癌，肺癌NeuVax - 乳腺癌AE37 - 乳腺癌NexVax2 - 乳糜泻ADXS- HPV - 宫颈癌，头颈癌CRS- 207 - 胰腺癌PEV7 - 复发性外阴阴道念珠菌病GI- 4000 - 胰腺癌疫苗名称：ICT-107开发公司：ImmunoCellular Therapeutics治疗疾病：胶质母细胞瘤就像很多在开发阶段的治疗性疫苗一样，ICT-107利用了树突细胞在免疫应答中的作用。

治疗性疫苗治疗性疫苗是指能够治疗疾病的一种疫苗，与预防性疫苗不同，预防性疫苗主要是通过激活人体的免疫系统来预防某种疾病的发生，而治疗性疫苗则是在疾病已经发生的情况下，通过激活人体的免疫系统来消灭病原体或抑制疾病的进展，从而达到治疗疾病的目的。

治疗性疫苗的研究和应用已经取得了一些重要的突破，对于一些传染性疾病和慢性疾病的治疗具有重要的意义。

治疗性疫苗主要是通过特定抗原刺激人体免疫系统产生具有特异性的抗体或免疫细胞，从而改变机体的免疫状态，使其能够抵抗疾病引起的病理变化。

目前，治疗性疫苗主要用于治疗癌症、传染性疾病和自身免疫性疾病等。

以治疗癌症为例，许多治疗性疫苗的研究着眼于癌症细胞表面的特异性抗原，通过将这些抗原引入人体，激活免疫系统产生特异性的抗体或免疫细胞来攻击癌症细胞。

例如，某些癌症疫苗利用特异性抗原和辅助免疫刺激物（如免疫佐剂）激活机体的免疫系统，增强机体对癌细胞的免疫杀伤作用。

这些疫苗通常会先通过采集患者的肿瘤组织或癌细胞，提取特异性抗原，然后经过一系列的处理和修饰，制备成疫苗。

患者接种这种疫苗后，机体的免疫系统被激活，产生特异性的抗体和免疫细胞，从而主动攻击和杀死癌细胞。

此外，治疗性疫苗不仅可以直接攻击疾病相关的细胞或病原体，还可以通过调节免疫系统来抑制疾病的进展。

例如，免疫疗法可以通过调节机体的免疫应答，增强机体对疾病的免疫力，从而达到治疗的效果。

在治疗乙肝病毒感染的研究中，某些治疗性疫苗可以通过激活机体的免疫系统，增强机体对病毒的清除能力，从而抑制病毒的复制和传播，减少病毒对肝脏的损害，达到治疗乙肝的效果。

此外，治疗性疫苗还可以用于治疗一些自身免疫性疾病，如类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮等。

这些疾病是由于机体免疫系统对自身组织产生异常的免疫应答，导致组织损伤和疾病发生。

治疗性疫苗可以通过激活机体的免疫系统，改变其免疫应答的平衡，从而抑制异常的免疫反应，减少自身免疫性病变的发生。

治疗性疫苗的研究和开发还面临着许多挑战。