中药制剂的鉴别

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二、薄层色谱法
2.薄层色谱法使用的材料 涂布器：手工、半自动薄层涂布器。 涂布的厚度有固定厚度或可以调节的两种。 点样器材 A 定量点样毛细管（微升毛细管）——最常用规 格： 0.5µl、 1.0µl、2.0µl、3.0µl、4.0µl、5.0µl、10µl。 要求：标示容量准确，管端平整光滑，管壁 洁 净，液流 通畅，无堵塞，无污染。 B 微量注射器。
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1 第二章 中药制剂的鉴别
❖ 第一节 性状鉴别 ❖ 第二节 显微鉴别
❖ 第三节 理化鉴别
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中药制剂的鉴别
教学大纲
掌握如何建立中药制剂的薄层色谱定性鉴别方法。
熟悉中药制剂的显微鉴别、荧光鉴别、可见－紫外 光谱鉴别方法。
了解中药制剂的气相色谱、高效液相色谱定性鉴别 方法。
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第一节 性状鉴别
概念
2.升华法 3.纸色谱法 4.光谱法
薄层色谱法 鉴别方法 5. 色谱法 薄层扫描法
气相色谱法 高效液相色谱法 6. 其他方法: X射线衍射法、导数光谱法、指纹 图谱法等。
A 第三节 理化鉴别
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化学1反3应法
①以50%～70%乙醇回流提取：提取出多数成分
②以酸性乙醇回流提取：检验酚类、有机酸、生物碱等。
A.室温浸泡：检验氨基酸、蛋白质。
样 ③以水提取 B.60℃热水提取：检验单糖、多糖、皂苷、
品
鞣质及其他苷类。
提
取
A.滤液检验酯、内酯、苷元；
④以乙醚提取 B.药渣挥去乙醚，甲醇回流提取：检验各种苷类
⑤ 以升华法提取：升华的成分，如游离蒽醌苷元等
⑥以水蒸气蒸馏法提取：挥发性成分。
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第三节 理化鉴别
物理常数测定
物理常数包括折光率、旋光度、比旋度、凝点、熔点、相对密度 等。测定这些物理常数可以作为定性鉴别的手段之一。
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第二节 显微鉴别
概 念
中药制剂的显微鉴别：利用显微镜来观察中药 制剂中原药材的组织碎片、细胞或内含物等特征， 从而鉴别制剂的处方组成。
凡以药材粉碎成细粉后直接制成制剂或添加有 部分药材粉末的制剂，由于其在制作过程中原药 材的显微特征仍保留到制剂中去，因此均可用显 微定性鉴别法进行鉴别。
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特点及制片方法
第二节 显微鉴别
①中药制剂一般多由二味以上中药材制备
而成，制剂中各原药材和辅料的显微
1.特点 特征会产生相互影响或干扰。
②由于制备工艺不同，有些药材本身原有
的组织结构特征已不存在。
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第二节 显微鉴别
散剂、胶囊剂：取粉末少量，选用适当的试液
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制
处理后直接进行显微观察。
片
方 片剂：切开，刮取少量样品，观察；粉末太粗
照 方 法
②阴阳对照：采用阳性对照液（只含需鉴别药 材）和阴性对照液（不含需鉴别药材）进行对照鉴别。
③采用对照药材和对照品同时对照。
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色谱法
第三节 理化鉴别
三、薄层扫描法
薄层扫描法概念:用一定波长的光照射在薄层板上，对薄
层色谱有吸收紫外光或可见光的斑点，或经激发后能发射 出荧光的斑点进行扫描，将扫描得到的图谱用于中药制剂 的鉴别。
薄 层 板
B 吸附剂或载体：硅胶G、硅胶GF254、硅胶H、 硅胶 HF254、 硅藻土、硅藻土G、氧化铝、氧化铝G、微晶纤维素、微晶
纤维素F254。其颗粒直径为10～40µm。 加有煅石膏作粘合
剂的商品硅胶G
C 常用的吸附剂 加有荧光剂的硅胶GF254
加粘合剂羧甲基纤维素钠
加酸、碱或缓冲溶液
A 第三节 理化鉴别
样品的预处理及供试液的制备：中药成分复杂，
未知成分多，供试液中相互干扰或背景污染而
难以得到满意的分离效果，甚至难以辨认，故
需对样品进行适当提取净化处理。
A 第三节 理化鉴别
二31、薄层色谱法
5.影响薄层色谱分析的主要因素
A 在常规薄层板上原点的直径不大于3mm， 高效薄层板要求原点直径不大于2mm；
薄层色谱的 B 点样量不宜过大，最好控制在10µL以下；
点样技术 C 如在一个位置重复多次点样时，尽量注意 不要将原点点成一个空心圈；
D 选用溶剂沸点不宜太高或太低。
A 第三节 理化鉴别
二32、薄层色谱法
5.影响薄层色谱分析的主要因素
A 薄层板从干燥器中取出后，吸附剂的 活性取决于实验室环境的相对湿度。
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色谱法
第三节 理化鉴别
二、薄层色谱法
概念：将适宜的吸附剂或载体涂布于玻璃板、塑料或铝基
片上，成一均匀薄层。待点样、展开后，与适宜的对照物 按同法在同板上所得的色谱图对比，并可用薄层扫描仪进 行扫描，用于中药制剂的鉴别。
在中药制剂的鉴别中，薄层色谱法为最常用的方法。
为了保证试验的重现性、准确性及分离度，薄层色谱法要
➢在描述制剂性状特征时，应以中医药理论为指导。 ①水丸 沉香化气丸：本品为灰棕色至黄棕色的水丸； 气香，味微甜、苦。
②片剂 牛黄解毒片：本品为素片或包衣片，素片或 除去包衣后的片芯显棕黄色；有冰片香气，味微苦、 辛。
③糖浆剂 川贝枇杷糖浆：本品为棕红色 的黏稠液体； 气香，味甜、微苦、凉。
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第一节 性状鉴别
3.操作方法
薄层板的制备：
将1份吸附剂（如硅胶G）加3份左右的水在研钵中用研杵 沿一个方向充分研磨，调成均匀糊状物，倒入已准备好的涂 布器中，在玻板上平稳地以直线方向移动涂布器，使硅胶浆 均匀地涂布。薄层厚度一般为0.2～0.3mm。涂布好的薄层板 于室温下在水平台上晾干，再在105℃～110℃活化约30分钟， 置干燥器中备用。
1. 中药制剂的鉴别：利用一定的方法来确定中药制 剂中原料药的组成，从而判断该制剂的真伪。
2. 中药制剂鉴别主要内容：包括性状鉴别、显微鉴 别、理化鉴别等方面，有时在性状鉴别中还应作 相应物理常数的测定。
3. 中药制剂的性状：除去包装后的性状，指成品的 颜色、形态、气味等。
第一节 性状鉴别
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性状4鉴别内容及描述方法： ①颜色：从单一色到组合色不等，如红色深褐色、黄棕色
B 可采用预平衡等方法进行控制。
温度的影响
温度能影响被分离物质的Rf值和物质的相互分离度以及斑 点的扩散等，故试验时应注意温度的控制。
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第三节 理化鉴别
二、薄层色谱法
6.对照品选择
① 对照品对照：用已知中药制剂某一药材的某一有 效成 分或特征性成分对照品制成对照 液，与样品在同一条件 下层析，比较在相同位置上有无同一颜色（荧光）斑点， 对 以此来 （常用检测制剂中是否含有某原料药材。）
与其对照品在同一条件下，进行保留时间的直接比较作为 鉴别依据。
高效液相色谱法不受样品挥发性的限制，流动相、固定
A 第三节 理化鉴别
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二、薄层色谱法
2.薄层色谱法使用的材料
平底展开箱
展开箱（层析缸） 双槽展开箱、
水平式展开箱。
喷雾法：喷雾瓶（在一定的压力下使试
显色与检测仪器
剂喷成均匀的细雾状）
浸渍法：浸渍槽（将展开后的薄层板平 稳放入有显色剂的浸渍槽数十秒至1分钟后取出显色）
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第三节 理化鉴别
二、薄层色谱法
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第三节 理化鉴别
二、薄层色谱法
3.操作方法
在日光下观察色谱中的色斑；
检测 置紫外灯下观察荧光色谱；
加试剂后显色，直接观察或加热后观察。
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第三节 理化鉴别
二、薄层色谱法
4.薄层色谱图记录与保存：
照相 数码照相 复印 扫描 描画
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第三节 理化鉴别
二、薄层色谱法
5.影响薄层色谱分析的主要因素
操作方法：薄层板制备→样品液与对照液制备→点样→展
开→显色→上机扫描→色谱峰确认。
主要用于定量，用于鉴别较少。
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第三节 理化鉴别
色谱法
气相色谱法
主要利用保留值进行定性，多用已知物对照法作为定性鉴
别的依据。
适宜样品为含有挥发油或挥发性成分的制剂。
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第三节 理化鉴别
色谱法
高效液相色谱法
利用化合物在特定的色谱柱上，在一定条件下的保留值
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第三节 理化鉴别
光谱法
1.荧光法
常用方法 2.可见－紫外分光光度法
3.红外分光光度法
4.等离子体光谱-质谱法
A 第三节 理化鉴别
1光7谱法
①适用范围：组成中药制剂的中药材中含有能产生 荧光的化学成分。
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荧 光
②操作方法：取制剂的提取液点在滤纸上或试纸
法 上，置紫外光灯下（365nm或254nm）观察， 或加一定试剂
法 （
样。
中
红 外
③该法具有取样量少、快速、简便、准确等特点，
） 但目 前用于中药制剂的鉴别报道不多。
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19 近红外光谱法
波长：780-2526nm(12820-3959cm-1) • 吸收特征：CH,OH,NH倍频、合频，吸收弱、重叠，化学
计量学处理后可定性 定量 • 特点：在线检测 ，含水量、颗粒大小、均匀度 、含
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第三节 理化鉴别
二、薄层色谱法
3.操作方法
点样：用定量微升毛细管，点样距离底边1cm，点间距离为
1、1.5或2cm，原点直径不大于3mm；如样品容量较大，可点 宽约2～3mm不同长度的条带。
展开：采用上行展开，薄层板浸入展开剂深度要求溶剂最初
的前沿距原点5mm，展距7～9cm；需平衡者可用双槽展开箱， 如需达到饱和状态，可在展开箱内壁贴一被溶剂湿润的滤纸 使展开箱被蒸气平衡；展开剂要求新鲜配制。