2020/10/4
免疫细胞的分离
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三、免疫细胞亚群的分离 —免疫磁珠分离法
❖ 1. 直接法：
抗细胞表面分子抗体 +磁性微球 免疫磁珠+细胞悬液 与免疫磁珠结合的细 胞
❖ 2. 间接法：
第二抗体+磁性微粒 第一抗体+细胞
特定细胞 13
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免疫磁珠法分选装置
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三、免疫细胞亚群的分离 —流式细胞术（Flow Cytometry，FCM）
FCM将免疫荧光技术应用于流式细胞仪，对单个细胞的表面标 志（抗原或受体）进行快速、精确的分析和自动检测，并将 不同类型的细胞分选收集。
原理：细胞经荧光染色后，通过高速流动系统，细
胞排成单行，逐个流经检测区。当细胞从流动室喷 嘴处流出时，超声震动液流，使液流段裂成一连串 的均匀小滴，每个小滴内最多含一个细胞，细胞经 激光束照射产生荧光和散射光，由光电倍增管接收， 转换成脉冲信号，数据经电脑处理，分辨细胞类型。
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免疫细胞的分离
❖ 人外周血单个核细胞的分离 ❖ 淋巴细胞的分离 ❖ 免疫细胞亚群的分离
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细胞分离原理
❖ 细胞的大小和比重 ❖ 细胞表面标志 ❖ 细胞黏附于各种物质表面的特性
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一、人外周血单个核细胞的分离 ——Ficoll分层离心法
人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell, PBMC): Monocyte、Lymphocyte。
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三、免疫细胞亚群的分离
❖免疫磁珠分离法 ❖流式细胞术
