高效液相色谱法测定水性涂料中苯、甲苯、乙苯、二甲苯残留量

华南师范大学实验报告课程名称仪器分析实验实验项目液相色谱分析混合样品中的苯和甲苯实验类型□验证□设计□综合实验时间2010 年 3 月31 日实验指导老师实验评分一、实验目的1.掌握高效液相色谱定性和定量分析的原理及方法；2.了解高效液相色谱的构造、原理及操作技术。

二、实验原理高效液相色谱由储液器，泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。

储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱内。

由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中作相对运动是，经过反复多次的吸附－解吸的分配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别，被分离成单个组分依次从柱内流出，通过检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪，记录成数据。

液相色谱的定性依据是保留时间的相对性，通常相对误差不能大于5%。

定量参数常常采用峰高、峰面积、相对峰高、相对峰面积等。

定量方法通常采用外标法、内标法和面积归一化法。

外标法为标准物质标准溶液制定标准曲线法；内标法为在标准溶液、样品溶液中加入内标物质，以相对峰高、相对面积对标准物质的浓度制定标准曲线；面积归一化法假定所有出峰物质的吸光系数相同，计算某物质的峰面积占所有峰面积的百分比。

三、仪器与试剂：1.仪器：SCL-10A vp紫外可见双波长检测器；SPD-M10A vp柱温箱；LC-10AT高效液相色谱仪；10μL微量注射器2.试剂：2μL/mL苯标液；2μL/mL甲苯标液；0.2μL/mL、2μL/mL、4μL/mL、10μL/mL的苯与甲苯的混合标准溶液；甲醇溶液；待测试样溶液四、实验内容与步骤：1.选择合适的流动相配比，优化色谱条件设置有关参数：控制流速为1mL/min。

柱温30℃，检测波长354nm。

设置流动相配比（甲醇：水=1：1），用10μL微量注射器注射5μL的10μL/mL苯与甲苯的混合标准溶液进行测定，观察其分离度和出峰时间。

*作者简介:王 浩(1969-),男,工程师;E -m a i:l hao w ang2003@高效液相色谱法测定化妆品中苯并芘残留王 浩,刘艳琴,杨红梅,郭启雷,史海良,阎龙宝,李小运(北京市海淀区产品质量监督检验所,北京100094))摘 要:建立了化妆品中苯并芘的高效液相色谱测定方法。

该方法经石油醚提取,以C18(5u m,4.6mm @250mm .i d)反相色谱柱分离,流动相为甲醇+水(87B 13),流速1.0mL /m i n ,激发波长360nm,发射波长410nm,柱温30e ,进样量50L L 。

方法的最低定量限5.0L g /kg ,加标回收率92.1%~103.2%,相对标准偏差为3.5%。

关键词:苯并芘;高效液相色谱仪;化妆品苯并(a)芘是一种强致癌物质,化妆品中苯并芘的主要来源包括:加工过程污染、贮存运输过程的污染、原料污染、环境污染等。

目前,我国尚无化妆品中苯并芘的国标测定方法,只有检测食品中苯并芘的国标测定方法[1](GB /T5009.27-2003),但该法存在操作复杂、溶剂毒性大、费时、准确度低等问题。

所以寻求准确、快速、简便的检测方法,对化妆品中苯并芘残留进行高效的定性定量分析具有重要意义。

本文在参考有关文献[1~3]的基础上,采用石油醚超声提取样品,旋转蒸发富集提取液后,使用C18反相色谱柱分离,利用荧光检测器对样品中苯并芘进行测定,获得较满意的结果。

1 实验部分1.1 仪器与试剂Ag ilent1100型液相色谱仪,配荧光检测器。

石油醚(沸程60~90e )、甲醇(北京化工厂)均为分析纯。

苯并(a)芘标准品(国家标物中心)。

化妆品购自本地超市。

1.2 色谱条件色谱柱:Ag ilen t 反相Zo r bax XDB -C 18柱(5L m,4.6mm @250mm );流速:1.0mL /m in ;柱温:30e ;流动相:甲醇+水(87:13);进样量:50L L ;激发波长:360nm ,发射波长:410nm 。

高压液相色谱仪检测药物残留量试验方法简介本文档旨在介绍高压液相色谱仪检测药物残留量的试验方法。

高压液相色谱仪是一种广泛应用于药物分析领域的仪器，能够快速、准确地检测药物残留量。

实验步骤以下是高压液相色谱仪检测药物残留量的试验步骤：1. 样品准备：将待测样品取出并进行适当处理，确保样品的纯度和完整性。

2. 样品提取：将处理后的样品进行提取，常用方法包括固相萃取、液液萃取等。

3. 样品制备：将提取得到的溶液进行稀释或浓缩，使得样品的浓度处于高压液相色谱的检测范围内。

4. 仪器设置：根据待测药物的特性，设置高压液相色谱仪的参数，包括流速、柱温、检测波长等。

5. 样品注射：使用自动进样器或手动注射器将样品注入高压液相色谱仪的进样口。

6. 数据采集与分析：启动高压液相色谱仪，采集药物残留量的检测数据，并进行数据分析。

7. 结果判读：根据标准或限量要求，对检测结果进行判读，判断样品中药物残留量是否符合规定标准。

注意事项在进行高压液相色谱仪检测药物残留量的试验过程中，需要注意以下事项：- 严格遵守操作规程，确保实验操作的准确性和可重复性。

- 准备样品时，应尽量避免污染和样品损失。

- 在样品制备和仪器设置过程中，应根据实际情况进行优化，以获得更好的检测结果。

- 在结果判读时，应比对相关标准和法规，确保结果的可靠性和准确性。

结论高压液相色谱仪是一种有效的药物残留量检测工具。

通过合理的实验步骤和注意事项，可以准确地检测药物残留量，保证产品的质量和安全性。

以上是高压液相色谱仪检测药物残留量的试验方法的介绍。

希望本文对您有所帮助！。

高效液相色谱法分析环境水样中4种苯系物王兴益;陈兴舟;杨燕群;刘玉兰;李明刚;陈君雨;张仟春【摘要】建立了一种高效液相色谱测定水样中4种苯系物(苯、甲苯、乙苯、对二甲苯)的方法.分析柱为Diamonsil5μmC18,250×4.6mm,检测波长为259nm,流动相比例V(乙腈):V(水)=75:25,流量大小为1.000mL/min,色谱柱温度为35℃.方法的线性范围为0.0100～10.0mg/L,相关系数大于0.9997,4种苯系物的检出限(S/N=3)为1.9μg/L～3.2μg/L,方法的重复性良好,峰面积的相对标准偏差(n=7)小于4.6％.样品中未检出,采用加标浓度为0.100mg/L和1.00mg/L进行方法验证,实际水样的加标回收率为82.3％～97.6％,表明该方法可有效用于水样中苯系物的灵敏、准确分析.【期刊名称】《兴义民族师范学院学报》【年(卷),期】2017(000)003【总页数】6页(P119-124)【关键词】苯系物;高效液相色谱;环境水样【作者】王兴益;陈兴舟;杨燕群;刘玉兰;李明刚;陈君雨;张仟春【作者单位】兴义民族师范学院, 贵州兴义 562400;兴义民族师范学院, 贵州兴义562400;兴义民族师范学院, 贵州兴义 562400;兴义民族师范学院, 贵州兴义562400;兴义民族师范学院, 贵州兴义 562400;兴义民族师范学院, 贵州兴义562400;兴义民族师范学院, 贵州兴义 562400【正文语种】中文【中图分类】O656.9Abstract:A method for the simultaneous determination offour benzenes,(benzene,toluene,ethylbenzene,and p-xylene)in water samples was established using high performance liquid chromatography.The analytical column was performed on a Diamonsil C18(5μm×4.6 mm×250 mm),the quantitation analysis of four benzenes were achieved by UV detection at 259 nm,the mobile phase used wasacetonitrile/water(75:253,v/v),the flowrate of the mobile phase was 1.000 mL/min,and the column temperature was kept on 35°C.The linear rangesof four benzenes were in the range of 0.0100 mg/L-10.0 mg/L with correlation coefficients more than 0.9997.The method detectionlimits(S/N=3)off our benzenes were between 1.9 μg/Land 3.2 μg/L.The relative standard deviations(n=7)were less than 4.6%.The spiked recoveries at twomatrixspiked concentrations were in the range of82.3%～97.6%.The results showed that the developed method was sensitive and accurate，and was suitable for the analysis ofbenzenes in water sample．Key words:Benzenes;High Performance LiquidChromatography;Environmental Water Samples苯系物是苯及其衍生物的统称，是塑料、染料、合成纤维、橡胶、药物等的重要原料和有机溶剂，广泛应用于石油化工、医药、农药、塑料、制革等工业中，排放的废水可对环境造成严重的污染[1-2]。

科技论坛高效液相色谱法测定二苯醚有机溶剂残留田辉张明（哈尔滨誉衡药业股份有限公司，黑龙江哈尔滨150000）在本公司研发某化学原料药的合成过程中用到溶剂二苯醚。

参照文献【１】中报道的检验方法，通过方法摸索，采用供试品中加入流动相超声方法提取样品中残留的二苯醚，高效液相色谱法对其进行测定，以检定其有机溶剂残留。

１试验仪器及色谱条件仪器：Ａｇｉｌｅｎｔ１２００紫外检测器色谱柱：ＺＯＲＢＡＸＳＢ－Ｃ１８（５μｍ，４．６×２５０ｍｍ）２检验方法照高效液相色谱法（中国药典２０１０年版二部附录ＶＤ）测定。

色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇：水（８５：１５）为流动相，检测波长为２６５ｎｍ，柱温为３０℃。

理论塔板数按二苯醚峰计算应不低于３０００。

测定法精密称取供试品０．１ｇ，加流动相１０ｍｌ，超声振荡，过滤，取续滤液作为供试品溶液。

精密称取二苯醚对照品，加流动相稀释制成５０μｇ／ｍｌ的溶液，作为对照品溶液。

精密量取对照品溶液及供试品溶液各２０μｌ，注入液相色谱仪，记录色谱图。

按外标法以峰面积计算供试品中二苯醚的含量。

３检验条件选择参照参考文献，拟定检验条件如下：色谱柱：ＺＯＲＢＡＸＳＢ－Ｃ１８（５μｍ，４．６×２５０ｍｍ）流动相：甲醇：水＝８５：１５流速：１．０ｍｌ／ｍｉｎ柱温：３０℃检测波长选择精密称取二苯醚，加流动相稀释至适当浓度，进行紫外波长扫描。

结果最大吸收波长为２６５．００ｎｍ，参照文献报道中检测波长，确定２６５ｎｍ为本品高效液相检验方法的检测波长，进行方法学考察。

４方法学考察取二苯醚，加流动相制成约２５０μｇ／ｍｌ的溶液。

精密量取２０μｌ，注入液相色谱仪，记录色谱图。

结果可见，拟定检验条件对二苯醚可检出，出峰时间为５．５分钟。

根据拟定检验条件对该方法进行方法学研究。

４．１专属性考察称取合成原料０．１ｇ，加流动相１０ｍｌ，超声振荡，过滤，取续滤液。

作为供试品溶液。

【实验题目】高效液相色谱分析混合样品中苯和甲苯的含量【实验目的】1、掌握高效液相色谱定性和定量分析的原理及方法2、了解高效液相色谱的构造、原理及操作技术【实验原理】高效液相色谱由储液器，泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成，储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱内，由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中作相对运动是，经过反复多次的吸附－解吸的分配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别，被分离成单个组分依次从柱内流出，通过检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪。

【实验仪器和试剂】（1）仪器LC-20AT液相色谱仪；微量注射器 10μL、1μL各1支（2）试剂苯标准溶液：2μL/mL；甲苯标准溶液：2μL/mL；苯、甲苯标准溶液：10μL/mL；苯、甲苯混合样品；甲醇（色谱纯）。

【实验内容与步骤】1、选择色谱条件：控制流速为1.0mL/min；检测波长254nm；先调配比系数为80%。

在设定色谱条件下，用微量注射器注入10μL/mL 的苯、甲苯标准溶液5μL(注射器用甲醇润洗3～5遍)，观察锋面积和保留时间 ；再改变配比系数，设为85%，再用微量注射器注入10μL/mL 的苯、甲苯标准溶液5μL ，对比观察锋面积和保留时间，确定使用85%配比系数为最佳条件。

2、苯，甲苯定性分析用微量注射器分别注入2μL/mL 的苯标准溶液5μL ，和2μL/mL 的甲苯标准溶液5μL ，注射器垂直插入进样口，插到不能插，逆时针转动六通阀，注入液体，再将六通阀转回原位。

这是开始记录数据了。

观察记录保留时间，确定苯和甲苯的峰。

3．苯、甲苯定量分析在最佳条件下，用微量注射器分别进样5μL 的1μL/mL 、2μL/mL 、4μL/mL 、10μL/mL 、2μL/mL 、4μL/mL 、10μL/mL 苯和甲苯的标准溶液，注射器垂直插入进样口，插到不能插，逆时针转动六通阀，注入液体，再将六通阀转回原位，这时开始记录数据。

高效液相色谱法测定水性涂料中苯、甲苯、乙苯、二甲苯残留量作者：于海鹏来源：《科学与财富》2020年第04期摘要：本文在利用高效液相色谱仪器检测特点，建立了一种检测水性涂料中苯、甲苯、乙苯和二甲苯（包括同分异构体）等苯系物定性定量的检测方法。

并通过分析实验考察了检测方法的精密度、水性涂料样品检测结果的重现性和样品中各个苯系物的含量。

结果表明，建立的方法精密度高、样品检测结果重现性好、样品苯系物含量满足标准要求。

关键词：高效液相色谱;水性涂料;苯系物;残留检测一、前言由于涂料组成复杂，因此对涂料苯化合物检测前需要对涂料进行溶剂萃取或者色谱柱分离，将苯类化合物富集、分离出来。

检测方法通常使用气相色谱法、高效液相色谱法和气质联用法。

气相色谱对苯类化合物的分离、检测准确性与高效液相色谱法存在一定差距。

为了提高检测结果的准确性和效率，本文在高效液相色谱仪器上建立一种能够定性、定量检测涂料苯系物的方法。

二、实验过程（一）材料与试剂实验使用的水性涂料样品采购于某品牌网店。

实验使用的苯、甲苯、乙苯、二甲苯标准试剂采购于阿拉丁公司;实验使用的甲醇流动相为色谱纯，其他试剂为分析纯，均采购于阿拉丁公司。

（二）实验仪器实验使用的高效液相色谱仪器采购于美国安捷伦公司，型号为Agilent 1290;实验使用的超声清洗仪采购于昆山市超声仪器公司，型号为KQ-220VDB;实验使用的万分之一天平采购于上海岛韩实验有限公司，型号为ABS 320-4N。

（三）溶液配制（1）准确称量苯、甲苯、乙苯、二甲苯各0.05g，分别使用甲醇溶液溶解稀释，并定容到100mL容量瓶中，配制得到浓度为0.5mg/mL溶液。

（2）使用移液枪准确移取配置好的苯、甲苯、乙苯、二甲苯标准溶液0.2mL、0.4 mL、1.0 mL、2.0 mL、4.0 mL、8.0 mL，使用甲醇定容到200 mL容量瓶中。

得到浓度分别为0.5μg/mL、1.0μg/mL、2.5μg/mL、5.0μg/mL、10.0μg/mL、20.0μg/mL的苯、甲苯、乙苯、二甲苯系列标准溶液。

水性漆环保标准HJ中华人民共和国环境保护行业标准HJ/T 201,2005代替HBC 12,2002 环境标志产品技术要求水性涂料Technical requirement for environmental labeling productsWater based coatings2005–11–22 批准 2006–01–01 实施国家环境保护总局发布HJ/T 201,2005前言为贯彻《中华人民共和国环境保护法》，减少水性涂料在生产和使用过程中对环境和人体健康的影响，改善环境质量，促进水性涂料及相关产品的出口贸易发展，制定本标准。

本标准对水性涂料中挥发性有机化合物(以下简称VOC)、甲醛、苯、甲苯、二甲苯、乙苯、卤代烃、重金属及其它有害物提出了限量要求。

本标准对《环境标志产品认证技术要求水性涂料》(HBC 12,2002)的技术内容进行了部分改动并按GB/T 1.1,2000对其进行了全面编辑性修改。

本标准与HBC 12,2002相比主要变化如下:——增加了对水性涂料VOC的定义;——修订了内、外墙涂料VOC含量限值;——对甲醛测定过程中的取样量及样品处理过程进行了修改;——苯、甲苯、二甲苯、乙苯的测试改为直接进样，内标法定量;——卤代烃测试改用ECD检测器，直接进样，内标法定量;——重金属铅、镉、汞、铬测定采用《室内装饰装修材料内墙涂料中有害物质限量》(GB 18582—2001)附录C中规定的方法。

本标准修改采用了《色漆和清漆挥发性有机化合物(VOC)含量的测定第2部分:气相色谱法》(ISO 11890-2:2000)中VOC含量检测方法。

其不同之处在于:——修改了对水性涂料VOC的定义;——VOC测定时，增加了己二酸二乙酯作为250?沸点的标记物;——VOC测定时，增加了对组成水性涂料VOC组份的双色谱柱定性分析;本部分的附录A、附录D、附录E、附录F和附录G为规范性附录，附录B、附录C、附录H和附录I为资料性附录。

涂料中苯甲苯二甲苯的测定涂料是一种常用的建筑和家居装饰材料，其主要功能是保护和美化物体表面。

而涂料中的苯、甲苯和二甲苯是常见的溶剂，用于调整涂料的粘度和干燥速度。

然而，苯、甲苯和二甲苯对人体健康有一定的危害性，因此对涂料中苯甲苯二甲苯含量的测定显得尤为重要。

涂料中苯甲苯二甲苯的测定方法有很多种，常用的方法包括气相色谱法、高效液相色谱法和红外光谱法等。

气相色谱法是一种常见且有效的测定涂料中苯甲苯二甲苯含量的方法。

该方法的原理是利用涂料样品中的苯甲苯二甲苯在高温下被蒸发并分离，然后通过气相色谱仪进行分析和检测。

气相色谱法具有分离效果好、准确性高、灵敏度高等优点，能够准确测定涂料中苯甲苯二甲苯的含量。

高效液相色谱法也是一种常用的测定涂料中苯甲苯二甲苯含量的方法。

该方法的原理是将涂料样品中的苯甲苯二甲苯与特定的溶剂混合，然后通过高效液相色谱仪进行分析和检测。

高效液相色谱法具有操作简便、分析速度快、灵敏度高等优点，能够准确测定涂料中苯甲苯二甲苯的含量。

红外光谱法是一种非破坏性的测定涂料中苯甲苯二甲苯含量的方法。

该方法的原理是利用苯甲苯二甲苯分子的特定振动频率在红外光谱仪中的吸收情况进行分析和检测。

红外光谱法具有操作简单、分析速度快、成本较低等优点，能够快速测定涂料中苯甲苯二甲苯的含量。

除了上述方法外，还可以利用化学分析法、质谱法等进行涂料中苯甲苯二甲苯含量的测定。

这些方法各有优缺点，选择合适的方法取决于具体的实验要求和设备条件。

在测定涂料中苯甲苯二甲苯含量时，需要注意样品的制备和处理。

首先，应该选择代表性的涂料样品，并进行适当的预处理，如稀释、提取等。

其次，在进行测定前，应根据实际需要选择合适的测定方法和仪器设备，并进行校准和质量控制。

最后，在进行测定时，要严格按照操作规程进行，避免操作失误和交叉污染。

涂料中苯甲苯二甲苯的测定是保证涂料质量和人体健康的重要环节。

选择合适的测定方法和仪器设备，进行准确可靠的测定，对于涂料行业的发展和人们的健康至关重要。

气相色谱法测定建筑防水涂料中有害物质苯、甲苯、乙苯、二甲苯、苯酚、蒽、萘的检验方法的优化和改进作者：黄祝华黄舒雯戴敏辉姜振军王兵赵孝佳陈竹青来源：《现代盐化工》2019年第02期摘; ;要：JC1066—2008《建筑防水涂料中有害物质限量》中规定了苯、甲苯、乙苯、二甲苯、苯酚、蒽、萘含量的测定方法。

方法中采用将样品置于顶空瓶，在规定的温度下平衡后进样，用气相色谱仪进行测定。

由于该标准中规定的8种检测物在标准中水性、反应型、溶剂型3类防水涂料规定的限量不同且相差较大，而检测方法中采用4种梯度的8种检测物的标准物质检测后绘制标准曲线，采用外标法进行计算。

在检测方法中这4种梯度不能涵盖上述3种防水涂料规定的限量范围，造成检测数据误差;方法中采用单标进行校准，由于气相在检测过程中，各实验室条件不同，涂料只是各实验室的一个项目，涉及FID检测器的气相检测项目较多，涂料中往往需要顶空进样器的检验项目很少，需要不断地切换。

同时，平衡时间也长，不方便检测。

为实施快速、有效、准确的检验，在多次实验的基础上，对现方法进行優化、改进，摸索出了一条行之有效的检验方法。

关键词：建筑防水涂料;有害物质检测方法;顶空瓶;外标法;检测数据误差1; ; 现标准方法在检验过程中的不确定问题1.1; 标准溶液配制梯度检验方法中规定分别称取0.01 g、0.05 g、0.10 g、0.20 g的苯、甲苯、乙苯、对（间）二甲苯、邻二甲苯、蒽、萘及0.05 g、0.10 g、0.20 g、0.50 g的苯酚用乙酸乙酯分别溶解在50 mL的容量瓶中，溶解定容至刻度后摇匀;用微量注射器称取0.02 mL配制好的标准溶液注入至20 mL的顶空瓶中，在（90±2）℃平衡1 h，取1 mL进样。

根据这配制要求及限量要求值，其所需的进样量如表1所示。

从表1中可以看出，大多数限值的进样量都不在标准曲线进样量的范围内，对检测数据准确性的影响较大。

反相高效液相色谱法测定医药中间体中甲苯的残留量邢春梅(赤峰市制药集团,内蒙古赤峰　024000) 摘　要:本文应用反相高效液相色谱法测定医药中间体中甲苯的残留量。

采用外标法定量,以峰高和进样量的关系作标准曲线,计算出样品中甲苯的残留量,流动相为甲醇-水(V/V 60∶40),检测波长为254nm 。

实验结果表明利用该法测定甲苯的残留量简便、快速、回收率高、重现性好。

关键词:医药中间体;反相高效液相色谱法;甲苯 中图分类号:T Q 460.7+2 文献标识码:A 文章编号:1006—7981(2012)12—0035—031　实验部分1.1　主要试剂甲苯(分析纯),甲醇(高效液相色谱淋洗液),石英亚沸二次蒸馏水。

1.2　主要仪器高效液相色谱仪,Waters 600(含U V 2487),美国Waters 公司;超声波清洗器,KQ 3200,昆山市超声仪器有限公司;电子分析天平,BS124S,北京赛多利有限公司;隔膜真空泵,津腾GM -0.33,天津腾达过滤器件厂;紫外-可见分光光度计,UV -260,日本岛津制作所;超越2000色谱工作站,浙江科学器材进出口有限责任公司。

1.3　实验方法1.3.1　甲苯标准溶液的配制准确称取甲苯(C 7H 8,AR)0.0500g,用甲醇溶解于烧杯中并转移入100ml 的容量瓶中,定容摇匀,即得0.5mg/ml 的甲苯标准溶液。

溶液必须现用现配,而且配制速度要快。

1.3.2　流动相的配制用二次水和甲醇配制甲醇-水(V /V 50∶50,60∶40,70∶30)的流动相,所配流动相必须过微孔滤膜(有机系、孔径0.45m),再用超声波脱气处理15min,备用。

1.3.3　样品溶液的制备样品1、2、3均来源于某药物生产厂家,是乙氧羰基环戊酮中间体生产过程中的产品。

称取样品1、2、3分别为0.1788g 、0.2789g 、0.7764g ,用甲醇溶解并转入100ml 的容量瓶中,定容、摇匀,即得1.788mg/ml 、2.789mg/ml 、7.764mg/ml 的样品溶液,所有溶液都必须过微孔滤膜(有机系、孔径0.45m)。