Lovibond 法和分光光度法对茶叶籽油色泽测定的比较研究吴靖，李德宝，黄惠华（华南理工大学轻工与食品学院，广东 广州 510640）摘要：研究了Lovibond 法和分光光度法对茶叶籽油色泽测定的差异，并探讨了两种方法的优缺点。
得到如下结论：茶叶籽油色泽的常规检测可用Lovibond 法；若要准确检测可用一般的分光光度法在669 nm 的波长下检测；另脱色剂等会对茶叶籽油中的的红色最大吸收波长产生影响，其一般在640~690 nm 的波长范围内偏移，故精确检测茶叶籽油中的色素含量可通过测定640~690 nm 波长扫描图下与X 轴所围的吸光度面积来测定。
关键词：Lovibond 测色法；分光光度法；茶叶籽油中图分类号：TS207.3；文献标识码：A ；文章篇号:1673-9078(2009)01-0114-04Comparison of the Color Measurement of Tea Seed Oil by Lovibondand Spectrophotometry MethodsWU Jing, LI De-bao, HUANG Hui-hua(1.College of Light Industry and Food Science , South China University of Technology,GuangZhou510640, China )(2.College of Biology and Food Engineering, HeFei University of Technology, HeFei 230001, China )Abstract: The Lovibond color indicator method and spectrophotometer method on measuring the color of tea seed oil were compared. The result showed that Lovibond method could be used as general method for the color measurement of tea seed oil. The spectrophotometry method at 669nm was more accurate than the Lovibond method. The max absorbance wavelength was affected by the absorbent and migrated to 640nm -690nm .So the pigment content of tea seed oil could be measured by determination of the scanning area at 640nm-690nm.Key words: Lovibond color indicator; spectrophotometer method; tea seed oil茶叶籽是山茶科植物茶(Camellia sinensis 0．Ktze)的果实，是茶叶生产的副产品，每年几乎所有的茶叶籽都会被弃之不用，造成极大的浪费。
茶叶籽中含油率为18％~22％，不饱和脂肪酸的含量在85%左右，其中油酸接近60%，亚油酸含量为25%高达橄榄油的5倍，其是一种潜在的食用植物油资源，茶叶籽油的研究对提高茶叶生产深加工和产品附加值，具有重大的意义[1~4]。
国标法对植物油脂色泽的测定（GB5525-85）是采用Lovibond 测色法，其通过调节红黄蓝3种颜色的镜片与待测油脂相同的颜色，三种颜色的数值组合即为色泽读数，具有简单、方便、直观等特点。
对于大多数植物油来说，影响植物油颜色质量的是红色值，在Lovibond 测色仪上表现为R 值大小，在黄色值（Y收稿日期：2008-07-15，改回日期：2008-08-15作者简介：吴靖（1985-），男，在读研究生，研究方向：农产品加工与贮藏 通讯作者：黄惠华教授值）固定的情况下，R 值越高，则说明油的颜色越差，反之亦之。
但是其缺点也是显而易见的，如不同人对颜色敏感度的差异容易造成数据重复性差；同一个人由于肉眼观察疲劳再进行许多组数据采取时也容易造成前后数据的差异；仪器内部光源情况影响读数等。
分光光度法通过测定特征波长下吸光度值来表示植物油的颜色情况，从理论上知其准确性和重复性都较高，可克服Lovibond 色泽法的缺陷。
1 材料与方法1.1 实验材料1.1.1 茶叶籽油样品的制备 实验中所用茶叶籽油样品是经下列精炼工艺所取得（精炼步骤中的毛油来源于安徽省宣城市郎溪县董铺茶场）。
压榨毛油→预处理→脱胶（水或磷酸液）→离心（除胶质）→碱炼（NaOH 液）→离心（除皂脚）→水洗→蒸发除水→脱114色（活性白土）→过滤（除废白土）→脱臭1.1.2 茶叶籽脱色油的制备[5~6]制取5个脱色程度不同的茶叶籽油，使油的色泽跨度和相应的最大吸收波长下吸光度值差别大，保证数据采集具有代表性。
制取方法为：利用循环水式多用真空泵形成负压(真空度在0.098 MPa)，在5个锥形瓶中分别准确称取15 g 碱炼油，分别加入油重1%，2%，2.5%，3%，4%的复合白土（m 活性炭:m 活性白土=1/12），利用油浴磁力加热搅拌器调节温度至85 ℃，并用搅拌子搅拌20 min ，然后抽滤得到脱色油。
1.2 实验设备HH-2数显恒温水浴锅，金坛市瑞尔电器有限公司；RE52-3旋转蒸发器，上海沪西分析仪器厂；SHB-Ⅲ循环水式多用真空泵，郑州长城科工贸有限公司；JJ-1型增力电动搅拌器，江苏金坛市金城国胜实验仪器厂；TDL-40B 离心机，上海安亭科学仪器厂；DF-1集热式磁力加热搅拌器，江苏金坛市环宇科学仪器厂；WSL-2Lovibond 比较测色仪，上海精密科学仪器有限公司；UV-1600紫外分光光度计，Waters 公司。
1.3 实验方法1.3.1 茶叶籽油红色最大吸收波长的确定在UV-1600紫外分光光度计下，选用1 cm 石英比色皿，以水为参比，进行400~700 nm 可见光范围下的波长扫描，绘制波长扫描图，以得到茶叶籽油红色最大吸收峰波长。
1.3.2 茶叶籽油色泽测定的Lovibond 色泽法和分光光度色泽法的比较取上述5个茶叶籽油样分别测定其Lovibond 色泽（Y 值固定为35）和在红色最大吸收峰波长669 nm 下的吸光度值。
2 实验结果与讨论2.1 400~700 nm 下可见光范围内茶叶籽油的波长扫描分析结果由图1可知，在660 nm 到675 nm 处有一明显的吸收峰，进一步分析可知最大吸收峰在669 nm 处，落在红色物质的典型吸收范围。
故可以于669 nm 下茶叶籽油的吸光度值表示其红色色泽大小。
孙忠等人的研究表明，未脱色的菜籽油和胡麻油在670 nm 处也均有明显的吸收峰[7]，与本次研究相一致。
2.2 Lovibond 法和分光光度法的结果比较表1为5个油样用Lovibond 法和分光光度法(690nm)所测的结果。
由表1可知，Lovibond 法所测的5个茶叶籽油样的R 值依次为：3.0，2.0，1.5，1.0，1.0，其在669 nm 处的吸光度值也随着减小，可见它们都同茶叶籽油的色泽存在相关关系，随着茶叶籽油的色泽降低,其R 值和吸光值也不断下降，但是当色泽降到一定程度时，如表1中的4号样和5号样，Lovibond 法已不能分辨出色泽的差别，而分光光度法仍可测出它们之间的区别。
故若单纯从定性看，Lovibond 法和分光光度法都能够测出植物油的色泽，各有自己特点，Lovibond 法测色方便、简单、直观；而分光光度法能够分别出色泽的细小差距。
当然若要准确定量，最好使用分光光度法检测色泽。
图1 茶叶籽油碱炼油的400nm～700nm 波长扫描图 Fig.1 The absorption value of tea sead oil after neutralizationbetween 400nm and 700nm表1 Lovibond 法和分光光度法（690 nm）结果的比较 Table 1 R values of 5 samples of tea seed oil by Lovibond Colorand absorption value at 669nm方法油样1 2 3 4 5Lovibond R3.0 R2.0 R1.5 R1.0R1.0分光吸光法 1.13610.8614 0.5795 0.35210.32为了验证上述结论，以复合活性白土用量为参照物和横坐标，分别作其与Lovibond 法所测的R 值和分光光度法所测的吸光度的线性关系图，结果见图2和图3。
图2 茶叶籽油的R 值与复合活性白土用量关系图 Fig.2 Effect of mixed adsorbent dosage on R value of tea seedoil115图3 669 nm 下吸光度值与复合活性白土量的关系图 Fig.3 Effect of mixed adsorbent dosage on R value of tea seedoil at 669nm从图2、图3知，分光光度法比Lovibond 法所测的结果与脱色剂用量都存在一定的线性关系，Lovibond 法的相关系数（R 2）为0.875，吸光度法为0.9044，可见若要定量茶叶籽油中的色泽含量，分光光度法比Lovibond 法更为精准。
2.3 分光光度法的改进植物油的色素物质种类复杂繁多，每种色素都有不同的最大吸收峰，故某点的最大吸收峰波长仅代表该种色素物质的含量，用该点的吸光度值来表示植物油中所有色素含量可能存在一定的误差。
另外脱色剂的选择性也存在一定的差异。
为了测量分光光度法在检测茶叶籽油的色泽是否存在误差，故有必要作5种油样的400~700nm 波长的扫描全图，如图4。
图4 5份不同脱色程度茶叶籽脱色油的400～700 nm 下波长扫描图Fig4 Absorption value of 5 samples of tea seed oil with different bleaching degree scanned within the wavelength range of400nm -700nm如图4，随着脱色强度的加大，669nm 后处其吸光度逐渐降低，说明分光光度法都可以反映出油色泽的变化，可以用来衡量油颜色的质量。
但是随着脱色剂用量的加大，茶叶籽油的最大吸收波长向左偏移，可见脱色剂对茶叶籽油的不同红色物质的吸收随着其脱色强度的增大其差异不断增加，因此固定某一最大吸收波长来测定色泽存在一些误差。
