SDS-PAGE凝胶制备试剂盒

12% SDS-PAGE 凝胶超快速配制试剂盒产品简介：碧云天生产的12% SDS-PAGE 凝胶超快速配制试剂盒(12% SDS-PAGE Gel SuperQuick Preparation Kit)提供了简单而又超快速地配制12% SDS-PAGE 凝胶(即SDS 聚丙烯酰胺凝胶)所需的所有试剂，用户只需自备制胶器具和蒸馏水，即可配制12% SDS-PAGE 凝胶。

碧云天生产的SDS-PAGE 凝胶超快速配制试剂盒系列产品有6%、8%、10%、12%和15%共5种常见浓度供您选择，也可以考虑选购可以配制各种不同浓度SDS-PAGE 凝胶的P0012AC SDS-PAGE 凝胶快速配制试剂盒。

本试剂盒把SDS-PAGE 凝胶配制所需的Tris-HCl 、Acr-Bis(29:1)、SDS 等预混合成下层胶预混液和上层胶预混液，使用前仅需加入适量10%凝胶聚合催化剂和TEMED 即可简单快速地完成下层胶(分离胶)和上层胶(堆积胶)的配制。

本试剂盒约可配制30-50块常规大小的12% SDS-PAGE 凝胶。

具体可以配制的凝胶数量和凝胶的厚薄以及凝胶的大小有关。

保存条件：4ºC 保存，一年有效。

两种预混液及TEMED 均需4ºC 避光保存。

凝胶聚合催化剂更宜室温保存，4ºC 保存时需拧紧瓶盖注意防潮，受潮后会很快失效。

凝胶聚合催化剂用水配制成10%溶液后，分装成小管-20ºC 保存，通常半年内有效。

注意事项：凝胶聚合催化剂用水配制成10%水溶液后，应当-20ºC 保存。

同时应尽量减少室温存放时间，以防失效。

推荐凝胶聚合催化剂每次均少量配制，并尽量使用较新鲜配制的10%凝胶聚合催化剂溶液。

下层胶预混液和上层胶预混液中含有Acr-Bis ，对人体有毒，操作时请特别小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。

TEMED 易挥发，使用后请盖紧瓶盖。

SDS-PAGE凝胶制备试剂盒使用说明书产品货号：SK6010储存条件：Acr-Bis溶液2-8℃储存，其它常温储存。

有效期2年。

产品组成：Components SK6010-50SK6010-250保存条件30%Acr-Bis(29:1)100ml500ml2-8℃分离胶缓冲液100ml500ml RT浓缩胶缓冲液50ml250ml RTAPS（过硫酸铵）5×0.1g5×0.5g RT TEMED1ml5ml RT/避光说明书1份注意：过硫酸铵（APS）为固体粉末，使用前配制成10%APS溶液（0.1g APS加1ml双蒸水；0.5g APS 加5ml双蒸水）。

APS溶液最好现配现用，通常4℃可保存两周，-20℃能保存半年。

产品简介：本产品包括SDS-PAGE凝胶制备所需全部试剂，只需自备蒸馏水，即可制备各种浓度的变性及非变性PAGE凝胶，方便、快捷、安全、实惠。

本试剂盒在分离胶缓冲液和浓缩胶缓冲液中已加入10%SDS，使用时无需另外加入，分离胶缓冲液、浓缩胶缓冲液放置2-8℃可能出现絮状，为SDS析出，常温下放置一会溶液恢复澄清，可继续使用。

因为制备凝胶浓度不同，本品只给出大概制胶数量。

操作步骤：根据目的蛋白分子量大小选择合适的PAGE分离胶配制浓度，最佳胶浓度请参考附表1。

一、灌制分离胶（各试剂使用量请参考附表3）1．参照凝胶模具说明书，装配好凝胶模具。

注：加入上层筛板有助于加样时保持填料与样品均匀接触，是否加入上层筛板可根据实际情况选择。

2．将不同体积的30%Acr-Bis(29:1)、分离胶缓冲液和双蒸水在小烧杯或试管中混合。

3．加入10%APS和TEMED，轻轻搅拌使其混匀，避免产生气泡。

4．在凝胶模具中灌入适量分离胶溶液（对于mini-gel，凝胶液加至约距前玻璃板顶端1.5cm或距梳齿约0.5cm即可，然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1-5cm的水层，使凝胶表面保持平整。

SDS-PAGE凝胶配制试剂盒 (SDS-PAGE Gel kit) B1027描述：本产品提供了配制SDS-PAGE凝胶所需的各种试剂，用户只需自备制胶器具和蒸馏水，即可配制高质量的各种浓度的变性PAGE胶，方便，快捷。

本试剂盒至少可以配制30块常规大小的PAGE 胶，并且其中的分离胶缓冲液和浓缩胶缓冲液中已加入10%SDS，使用时无需另外加入。

产品名称包装保存条件30%Acr-Bis（29:1）100 ml 2-8℃避光分离胶缓冲液80 ml 室温浓缩胶缓冲液25 ml 室温APS（过硫酸铵）0.5 g 室温TEMED1 ml 室温、避光*试剂盒中提供的APS（过硫酸铵）为固体粉末，使用前加入双蒸水溶解即配制成10%APS（0.5 g APS加入5 ml双蒸水），将溶液分装后置于-20℃保存，通常半年内有效。

操作步骤：根据目的蛋白分子量大小选择合适的凝胶浓度，不同浓度的SDS-PAGE分离胶的最佳分离范围参考附表1。

1．灌制分离胶（试剂使用量参考附表2）（1）参照凝胶模具说明书，装配好凝胶模具。

（2）将不同体积的30%Acr-Bis（29:1）、分离胶缓冲液和双蒸水在小烧杯中混合。

（3）加入10%APS和TEMED，轻轻搅拌混匀，避免产生气泡。

（4）将分离胶溶液灌入凝胶玻璃槽中，然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1-3cm的水层，用于压平液面。

（5）静置30-60min，至分离胶凝固。

2．灌制浓缩胶（试剂使用量参考附表3）（1）去除覆盖在分离胶上的水层，并用滤纸吸干，水份吸不干，可能会导致浓缩胶和分离胶分开。

（2）将不同体积的30%Acr-Bis（29:1）、分离胶缓冲液和双蒸水在小烧杯中混合。

（3）加入10%APS和TEMED，轻轻搅拌混匀，避免产生气泡。

（4）将浓缩胶溶液加至分离胶的上面，插入样品梳，避免产生气泡，静置20-30min，直至浓缩胶聚合。

（5）待凝胶聚合后，小心拔下梳子，以免破坏加样孔。

SDS-PAGE凝胶电泳操作一、常规试剂的配制1. 30% 聚丙烯酰胺贮液：丙烯酰胺150g，甲叉双丙烯酰胺4g，双蒸水500ml，滤纸过滤后，棕色瓶避光4℃保存；2. 1.5mol/L，pH 8.8 Tris-HCl分离胶缓冲液：18.15g Tris，用1mol/L HCl定容至100ml，棕色瓶避光4℃保存；3. 1.0mol/L，pH 6.8 Tris-HCl分离胶缓冲液：12g Tris，用1mol/L 调pH至100ml，棕色瓶避光4℃保存；4. 10% SDS溶液：10g SDS加水定容至100ml，完全溶解室温保存；5. 10% AP溶液：0.1g AP（过硫酸铵）加水定容至1ml，用前新鲜配制；6. 1×SDS-PAGE电泳缓冲液：25mM Tris（3.0285g/L），192mM甘氨酸（14.41g/L），0.1%SDS （1g/L），pH 8.30；7. 染色液：0.25g 考马斯亮蓝R-250溶解于45ml甲醇，45ml水，10ml冰醋酸，过滤除去杂质；8. 脱色液：45ml甲醇，45ml水，10ml冰醋酸；9. 固定液：50ml甲醇，40ml水，10ml冰醋酸；10. 2×SDS-PAGE上样缓冲液：10% SDS 0.4ml，0.375M Tris-HCl（pH 6.8）0.333ml，甘油0.2ml，1% 溴酚兰10μL，β-疏基乙醇100μL，加水定容至1ml，分装后-20℃保存。

二、样品的处理1. 蛋白含量较低的酶制剂或原料样品（1）粉剂（或颗粒）样品称取样品1g，加入3-5ml蒸馏水进行搅拌溶解1h（搅拌时间可根据实际情况进行增减），4000rpm离心10min，取离心上清液等体积加入20%的三氯乙酸聚沉30min，离心，弃去离心上清液，用70%的丙酮溶液洗涤沉淀，4000rpm离心10min，重复洗涤3-5次，将丙酮洗涤液吹干，加入适量（1-3ml）PBS溶解沉淀，溶解液即可用于电泳实验。

SDS-PAGE凝胶制备试剂盒使用说明书产品货号：SK6010储存条件：Acr-Bis溶液2-8℃储存，其它常温储存。

有效期2年。

产品组成：Components SK6010-50SK6010-250保存条件30%Acr-Bis(29:1)100ml500ml2-8℃分离胶缓冲液100ml500ml RT浓缩胶缓冲液50ml250ml RTAPS（过硫酸铵）5×0.1g5×0.5g RT TEMED1ml5ml RT/避光说明书1份注意：过硫酸铵（APS）为固体粉末，使用前配制成10%APS溶液（0.1g APS加1ml双蒸水；0.5g APS 加5ml双蒸水）。

APS溶液最好现配现用，通常4℃可保存两周，-20℃能保存半年。

产品简介：本产品包括SDS-PAGE凝胶制备所需全部试剂，只需自备蒸馏水，即可制备各种浓度的变性及非变性PAGE凝胶，方便、快捷、安全、实惠。

本试剂盒在分离胶缓冲液和浓缩胶缓冲液中已加入10%SDS，使用时无需另外加入，分离胶缓冲液、浓缩胶缓冲液放置2-8℃可能出现絮状，为SDS析出，常温下放置一会溶液恢复澄清，可继续使用。

因为制备凝胶浓度不同，本品只给出大概制胶数量。

操作步骤：根据目的蛋白分子量大小选择合适的PAGE分离胶配制浓度，最佳胶浓度请参考附表1。

一、灌制分离胶（各试剂使用量请参考附表3）1．参照凝胶模具说明书，装配好凝胶模具。

注：加入上层筛板有助于加样时保持填料与样品均匀接触，是否加入上层筛板可根据实际情况选择。

2．将不同体积的30%Acr-Bis(29:1)、分离胶缓冲液和双蒸水在小烧杯或试管中混合。

3．加入10%APS和TEMED，轻轻搅拌使其混匀，避免产生气泡。

4．在凝胶模具中灌入适量分离胶溶液（对于mini-gel，凝胶液加至约距前玻璃板顶端1.5cm或距梳齿约0.5cm即可，然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1-5cm的水层，使凝胶表面保持平整。

SDSPAGE所有详细试剂配方SDS-（聚丙烯酰胺凝胶电泳）是一种常用于蛋白质分析的实验技术。

该技术通常涉及到几种试剂，如胶溶液、缓冲液、电泳缓冲液、染色溶液等。

下面是SDS-常见的试剂配方及其详细说明。

一、胶溶液配方：1. 30%（w/v）丙烯酰胺（acrylamide）溶液- 在称量瓶中称取30g丙烯酰胺，并用蒸馏水调至100ml。

搅拌溶解直至均匀。

-这是制备聚丙烯酰胺凝胶的基础溶液。

2. 响应稀释液（Response diluent）-用于稀释聚丙烯酰胺溶液以获得不同浓度的凝胶。

-可通过将聚丙烯酰胺溶液与水按1:3体积比混合来制备响应稀释液。

二、缓冲液配方：1. 离子化追踪剂（Tris-Glycine running buffer）-用于凝胶电泳盒中电解质的运行。

-配方为：3g Tris base （pH 8.8）14.4g glycine将固体溶解于1L蒸馏水中，并调整pH至8.8三、电泳缓冲液配方：1. 离子化追踪剂（Tris-Glycine SDS running buffer）-用于在电泳过程中提供离子追踪剂。

-配方为：30g Tris base144g glycine10gSDS将固体溶解于1L蒸馏水中。

2. 加速剂（stacking gel buffer）- 用于形成凝胶中的聚集堆积层（stacking layer）。

-配方为：30g Tris base （pH 6.8）144g glycine1gSDS将固体溶解于1L蒸馏水中，并调整pH至6.8四、样品处理缓冲液配方：1. 样品加载缓冲液（sample loading buffer）-用于处理蛋白样品，以便在凝胶上获得良好的分离效果。

-配方为：0.5M Tris-HCl（pH 6.8）20%（v/v）甘油10%（w/v）SDS0.05%（w/v）溴酚蓝（bromophenol blue）旋转混合并加入蛋白样品。

五、凝胶染色溶液配方：1. 吸附性染色剂（Coomassie blue staining solution）-用于染色聚丙烯酰胺凝胶上分离的蛋白质。

SDS-PAGE凝胶快速配制试剂盒
产品简介：
碧云天生产的SDS-PAGE凝胶快速配制试剂盒(SDS-PAGE Gel Quick Preparation Kit)提供了配制SDS-PAGE凝胶所需的各种试剂，用户只需自备制胶器具和蒸馏水，即可配制SDS-PAGE胶(即SDS聚丙烯酰胺凝胶)。

本试剂盒中把凝胶配制所需的缓冲试剂、SDS等预混合成下层胶缓冲液(4X)和上层胶缓冲液(4X)，简化了凝胶配制的步骤。

下层胶缓冲液中含Tris pH8.8及适量SDS，上层胶缓冲液中含Tris pH6.8及适量SDS。

本试剂盒约可配制30-50块常规大小的PAGE胶。

保存条件：
下层胶缓冲液(4X)、上层胶缓冲液(4X)和Ammonnium persulfate (过硫酸铵)室温保存。

30% Acr-Bis (29:1)和TEMED 4℃避光保存。

过硫酸铵配制成10%溶液后，分装成小管-20℃保存，通常半年内有效。

注意事项：
过硫酸铵配制成10%溶液后，应当-20℃保存。

同时应尽量减少室温存放时间，以防失效。

TEMED易挥发，使用后请盖紧瓶盖。

另外凝胶凝聚的速度和温度及光照关系密切，可通过适当调节TEMED的用量，控制在不同的室内环境下凝胶凝聚的速度。

温度较低时，下层胶缓冲液(4X)和上层胶缓冲液(4X)中的SDS可能析出。

此时需水浴温育，并在完全溶解和混匀后使用。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明：
1. 根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度，再按照下面的表格配制SDS-PAGE的分离胶(即下层胶)：。