减数分裂的制片与观察二
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植物减数分裂染色体制片及观察宗钊辉 12农贸一 201230010527一、实验目的1.掌握划分母细胞染色体制片技术。
2.了解减数分裂各时期染色体的变化特征。
3.观察植物减数分裂染色体行为。
二、实验原理减数分裂是性母细胞在形成配子时发生的一种特殊的细胞分裂方式。
减数分裂的主要特点:首先是同源染色体在细胞分裂前期配对(pairing),或称联会(synapsis)。
其次是细胞在减数分裂过程中包括两次分裂,第一次是减数的,第二次是等数的。
每一次分裂都包括前期、中期、后期和末期4个时期。
其中以第一次分裂的前期较为复杂,由于减数分裂的前期较长,染色体发生了复杂的变化,故根据染色体的形态特征又将前期分为细线期、偶线期、粗线期、双线期和终变期等5个时期。
高等植物的花药内含有大量发育同步的花粉母细胞,在适宜的时期进行固定处理,可做为观察减数分裂的理想材料。
1.细线期2.偶线期3.粗线期4.双线期5.终变期6.中期17.后期1 8.末期1 9.前期2 10.中期2 11.后期212.末期2 13.四分体三、实验材料及器具1.材料玉米花序。
2.器具镊子、载玻片、盖破片、解剖针、吸水纸3.试剂卡诺氏固定液(95%乙醇与冰乙酸按3:1比例配制)、醋酸洋红。
四、实验步骤1.取材选取适宜的小花是实验的关键。
玉米:在喇叭口期前一周左右,既叶片前后处于减数分裂期。
水稻:当顶叶叶枕与下一叶的叶枕之间的距离为(0-2cm时),既处于性母细胞减数分裂期。
一天中9:00-11:00为减数分裂最旺盛的时间。
2.固定将索取的幼花序立即放入固定液中固定12-24h。
与95%、80%乙醇中各停留30min后,然后70%乙醇中保存备用。
3.制片去一小穗至于载玻片上,用解剖针挑出花药内容物,去掉残渣。
滴加1%醋酸洋红,静置2-3min,盖片。
4.烤片用镊子夹住载玻片,在酒精灯上来回移动,并不时将片子放在手背上试温,以不烫手为宜。
经烤片后,细胞质颜色减退,使染色体得到充分鲜明的着色、5.置换若染色太深,可从盖玻片一侧滴加45%的冰醋酸,在另一边用滤纸吸,让冰醋酸从盖玻片下流过,置换出染液,是细胞质背景颜色变浅。
实验3 减数分裂制片技术和显微镜观察一、实验目的1. 学习花粉母细胞涂抹制片技术,观察细胞减数分裂时期染色体变化规律及特征并绘图。
2.观察花蕾或花药长度与减数分裂时期的关系。
二、实验原理减数分裂是生物在性母细胞成熟形成配子过程中发生的一种特殊有丝分裂,它包括连续两次的细胞分裂阶段,最终分裂为染色体数目减半的四个子细胞,从而发育为雌性或雄性配子(n)。
由于植物花药取材容易,操作和鉴定比较方便,故一般都取用花粉母细胞作为减数分裂制片材料。
在生物发育的适宜时期取样、固定、涂片等程序,便可在显微镜下观察到减数分裂过程中染色体的行为变化。
三、实验材料lily百合(2n=24)四、实验步骤(一)取材lily百合:通常花蕾长度18mm(花药长度8mm)时为花粉母细胞分裂始期。
花蕾约40mm(花药长17mm)时为减数分裂终期。
采集18-40mm不同长度的花蕾,固定,保存。
(二)制片从小花中取出花药1~3 枚置于载玻片 滴一滴醋酸洋红溶液 用镊子按压花药 去尽肉眼可见残渣 染色2分钟 盖上盖玻片 在低倍镜下寻找花粉母细胞 高倍镜下观察各分裂相细胞染色体的特征及变化规律.选择典型分裂相的临时片1~2张 在酒精灯火焰上缓缓烘干(不能沸腾!) 将玻片放入液氮罐,在液氮表面冷冻1分钟 取出玻片放在白纸上,手按盖玻片一边,用刀片从另一边将盖玻片揭开置于白纸上(有材料的一面朝上) 滴一滴中性树胶在载玻片上的材料处 原位盖上盖玻片→树胶凝固后镜检。
1. 取花药1枚(截)置载玻片中央2. 加1滴染色液3.用镊子按压,并镊除可见残渣4.放上盖玻片(三)显微镜观察先在低倍镜下寻找具分裂相的花粉母细胞,然后依次转换到高倍镜观察减数分裂各个时期染色体的行为和形态特征。
区分4 类细胞:1 形状较大,圆形,核大,着色较浅的是花粉母细胞。
2 形状较小、着色较深的是花药壁体细胞。
3 形状居中略呈扇形的是四分体的小孢子。
4 形状较大,内部透明并有明显外壳的是成熟的花粉粒。
实验二减数分裂的制片与观察PB12210261 徐导中国科学技术大学生命科学学院【摘要】本实验选取玉米雄花作为实验材料,首先将已固定好雄花的花药剥离出来,然后通过对花粉母细胞进行解离、染色、压片来观察细胞减数分裂的全过程。
【关键词】减数分裂细线期偶线期粗线期双线期终变期【Abstract】In this experiment, we chose Zea mays as the material. We got a lot of cells in meiosis. Then we disposed the cells in order to observe the whole processes of the meiosis.【Key words】Meiosis leptonema zygonema pachynema diplonema diakineses【实验部分】一、实验目的1、了解植物生殖细胞的形成过程;2、熟悉减数分裂各时期的特点,加深对减数分裂的认识;3、掌握植物花粉母细胞的压片技术和方法。
二、基本原理减数分裂(meiosis),又称成熟分裂(maturation division)是在性母细胞成熟时,配子形成过程中所发生的一种特殊方式的有丝分裂。
性母细胞(2n)连续进行两次核分裂(第一次分裂和第二次分裂),形成四个染色体数目减半的配子(n)。
经过受精,雌雄配子(n)融合为合子,又恢复了体细胞染色体数目(2n)。
确保了亲代与子代间染色体数目的恒定性,从而保证了物种相对的遗传稳定性。
在适当的时候采集植物的花蕾制备染色体标本就可在显微镜下观察到植物细胞的减数分裂。
整个减数分裂可分为下列各个时期:第一次分裂前期Ⅰ减数分裂的特点之一就是前期Ⅰ特别长,而且又较复杂。
通常根据细胞核内结构变化特征又将这一期分成五个时期,即细线期、偶线期、粗线期、双线期和终变期。
细线期(leptotene):这是减数分裂的开始时期,染色质开始浓缩为细而长的丝状,首尾不分,且细线局部可见到念珠状颗粒,即染色粒。
一、实验目的1.了解动物精母细胞减数分裂各时期的主要特点2.掌握动物精母细胞减数分裂染色体标本装片的制作技术二、实验原理减数分裂是生物在性母细胞成熟时配子形成过程中发生的一种特殊的细胞分裂,它包括连续两次的细胞分裂阶段:第一次分裂为染色体数目的减数分裂,第二次为染色体数目的等数分裂。
两次分裂可根据染色体变化特点分为前期、中期、后期和末期。
在减数分裂过程中,同源染色体之间发生联会、交换和分离,非同源染色体之间进行自由组合,最终分裂成为染色体数目减半的四个子细胞。
精卵细胞经过受精结合成为受精卵发育为新的个体,这样又恢复了原有染色体的数目。
三、实验材料、用具及药品实验材料:蝗虫(2 n = 23)的精巢;实验用具:显微镜、小手术剪、解剖针、小弯镊、载玻片等;实验药品:甲醇、冰乙酸、改良品红染色液等。
四、实验步骤1.取材:剪开蝗虫体壁,找到黄色的团状块即精巢;2.固定:用无水乙醇和甲酸3:1 制成的卡诺氏液对材料固定4-12 h;另取材料固定20 mins,作为对比观察油脂量;3.染色:夹取一小枚管状精巢,放置于载玻片上,滴加适量醋酸洋红(17-23 mins)或改良品红(12-18 mins)染色;4.压片镜检:用解剖针挑取少量材料(1条精小管)到1张新载玻片上,加1滴新鲜染料,捣碎成雾状,加盖玻片,覆吸水纸压片,镜检。
五、观察结果及分析图1 蝗虫细胞减数分裂(40×,醋酸洋红,固定20min)图2 蝗虫细胞终变期(局部截图,改良品红)图3 蝗虫细胞第一次减数分裂中期(局部截图,改良品红)图4 蝗虫细胞第一次减数分裂后期(局部截图,改良品红)图5 蝗虫细胞第二次减数分裂中期(局部截图,改良品红)图6 蝗虫细胞第二次减数分裂后期(局部截图,改良品红)。
刘楠楠10生科2班201008010222科目:细胞及遗传学实验实验项目:减数分裂各个时期玻片的观察一:实验目的通过观察玻片,掌握细胞减数分裂各个时期的特点二:实验用品各个时期玻片、显微镜三:实验方法玻片观察四:减数分裂各个时期特点如下(一)、减数分裂I(1)前期I:减数分裂的特殊过程主要发生在前期I,通常人为划分为5个时期:①细线期②偶线期③粗线期④双线期⑤终变期1)细线期: 染色体呈细线状,具有念珠状的染色粒。
持续时间最长,占减数分裂周期的40%。
细线期虽然染色体已经复制,但光镜下分辨不出两条染色单体。
由于染色体细线交织在一起,偏向核的一方,所以又称为凝线期,在有些物种中表现为染色体细线一端在核膜的一侧集中,另一端放射状伸出,形似花束,称为花束期。
2)偶线期:持续时间较长,占有丝分裂周期的20%。
亦称偶线期,是同源染色体配对的时期,这种配对称为联会。
这一时期同源染色体间形成联会复合体。
在光镜下可以看到两条结合在一起的染色体,称为二价体。
每一对同源染色体都经过复制,含四个染色单体,所以又称为四分体。
3)粗线期:持续时间长达数天,此时染色体变短,结合紧密,在光镜下只在局部可以区分同源染色体,这一时期同源染色体的非姊妹染色单体之间发生交换的时期。
4)双线期:染色体进一步变短变粗,联会复合体解体,同源染色体分开,交换部位形成交叉,且向两极移动,称为交叉端化。
可看到4条染色单体。
5)终变期:染色体螺旋化程度更高,是观察染色体的良好时期。
核仁此时开始消失,核被膜解体,但有的植物,如玉米,在终变期核仁仍然很显著。
(2)中期I:核仁消失,核膜解体,中期I的主要特点是染色体排列在赤道面上。
每条同源染色体由一侧的纺锤丝牵引。
(3)后期I:在纺锤丝的牵引下,成对的同源染色体分离,移至两极。
所以染色体数目减半。
但每个子细胞的DNA含量仍为2C。
同源染色体随机分向两极,使母本和父本染色体重所组合,产生基因组的变异。
(4)末期I:染色体到达两极后,解旋为细丝状、核膜重建、核仁形成,同时进行胞质分裂。