中和试验

中和试验中和试验是病毒或毒素与相应的抗体结合后，失去对易感动物的致病力的试验方法。

所属分类：免疫学概述动物受到病毒感染后，体内产生特异性中和抗体，并与相应的病毒粒子呈现特异性结合，因而阻止病毒对敏感细胞的吸附，或抑制其侵入，使病毒失去感染能力。

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中和试验(Neutralization Test)是以测定病毒的感染力为基础，以比较病毒受免疫血清中和后的残存感染力为依据，来判定免疫血清中和病毒的能力。

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两种试验方法介绍中和试验常用的有两种方法：一种是固定病毒量与等量系列倍比稀释的血清混合，另一种是固定血清用量与等量系列对数稀释(即十倍递次稀释)的病毒混合。

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(一) 定血清－稀释病毒法(病毒中和试验)1.病毒毒价的测定毒价单位：衡量病毒毒价(毒力)的单位过去多用最小致死量(MLD)，即经规定的途径，以不同的剂量接种试验动物，在一定时间内能致全组试验动物死亡的最小剂量。

但由于剂量的递增与死亡率递增不呈线性关系，在越接近100%死亡时，对剂量的递增越不敏感。

而一般在死亡率越接近50%时，对剂量的变化越敏感，故现多改用半数致死量(LD50)作为毒价测定单位，即经规定的途径，以不同的剂量接种试验动物，在一定时间内能致半数试验动物死亡的剂量。

用鸡胚测定时，毒价单位为鸡胚半数致死量(ELD50)或鸡胚半数感染量(EID50)。

用细胞培养测定时，用组织细胞半数感染量(TCID50)。

在测定疫苗的免疫性能时，则用半数免疫量(IMD50)或半数保护量(PD50)。

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(1) LD50的测定(以流行性乙型脑炎病毒为例)。

测定方法：将接种病毒，并已发病濒死的小鼠，无菌法取脑组织，称重、加稀释液充分研磨，配制成10-1悬液，3 000r/min离心20分钟，取上清液，以10倍递次稀释成10、10、10……10，每个稀释度分别接种5只小鼠，每只脑内注射0.03ml，逐日观察记录各组的死亡数。

红细胞中和试验操作规程
《红细胞中和试验操作规程》
一、实验目的
红细胞中和试验是一种用于检测体液中抗体和抗原反应的实验方法。

本实验的目的是通过红细胞中和试验来判断患者的血清中是否存在特定的抗体，并对其抗原进行鉴定。

二、实验仪器与试剂
1. 离心机
2. 玻璃试管和试管架
3. 1% 的红细胞悬液
4. 不同血型抗体
三、实验步骤
1. 取一根试管，在底部标记所需进行的血型和试验样本编号。

2. 取充分标记的血样和同等数量的1%红细胞悬液，混合均匀。

3. 在37℃孵育20分钟。

4. 用离心机离心5分钟。

5. 观察红细胞悬液下清液的混浊度，判断是否发生了红细胞中和反应。

四、实验结果判定
1. 若上清液清澈，表示未发生红细胞中和反应。

2. 若上清液混浊，表示发生了红细胞中和反应，即患者血清中含有特定抗体。

五、实验注意事项
1. 实验过程中要严格遵守无菌操作，以免污染。

2. 实验操作时要注意用手套和口罩，避免细菌感染和呼吸道排放。

3. 实验结束后，要将试管和实验仪器及时清洗消毒，以保持实验室卫生。

六、实验结果记录
实验结束后，要将实验结果准确记录在实验记录表中，并及时归档保存。

以上就是关于红细胞中和试验操作规程的详细介绍，希望能对您有所帮助。

酸碱中和实验酸碱中和实验是化学实验中常见的一种实验方法，用于研究酸和碱之间的化学反应，测定其之间的等量点以及计算出物质的摩尔浓度。

本文将介绍酸碱中和实验的步骤和原理，以及实验中可能遇到的问题和解决方法。

一、实验步骤1. 准备实验器材和试剂：实验器材：烧杯、滴定管、酸碱指示剂、容量瓶等；试剂：酸和碱的溶液，一般选取浓度适中的酸和碱。

2. 预处理实验器材：使用洗涤剂洗净实验器材，用蒸馏水冲洗干净后晾干。

3. 配制溶液：a) 使用容量瓶准确地量取一定体积的酸和碱溶液；b) 分别将酸和碱溶液倒入两个干净的烧杯中。

4. 加入酸碱指示剂：在酸碱溶液中加入几滴酸碱指示剂，通常用酚酞或溴酚蓝。

5. 滴定：a) 用滴定管从酸溶液中取少量滴定液，滴入碱溶液中；b) 每滴加入一滴，同时轻轻搅拌溶液，直到颜色发生明显变化；c) 记录滴定的滴数。

6. 结果计算：根据滴定的滴数和酸碱溶液的浓度，可以计算出反应的摩尔比例和物质的摩尔浓度。

二、实验原理酸碱中和反应是一种酸和碱分子之间相互中和的化学反应。

在酸碱中和实验中，滴定是最常用的方法，可以通过滴定的滴数确定酸碱溶液的摩尔比例，从而计算出其摩尔浓度。

滴定实验中的酸碱指示剂是起到指示酸碱等量点的作用。

酸碱指示剂有选择性地发生颜色变化，当酸溶液和碱溶液完全中和时，酸碱指示剂的颜色也发生改变，标志着反应的等量点。

实验中，滴定液的添加量要控制得当，以免过量或不足，影响实验结果的准确性。

需要根据实验所使用的酸碱溶液的浓度进行适当的取滴，以保证实验的可靠性。

三、实验注意事项及问题解决方法1. 仪器和容器应洁净无杂质，以免影响实验结果；解决方法：洗涤剂清洗和蒸馏水冲洗，确保无杂质。

2. 滴定过程中要轻轻搅拌溶液，以保证反应均匀进行；解决方法：使用玻璃棒轻轻搅拌溶液。

3. 滴定液加入过多或不足，会导致实验结果的不准确；解决方法：滴定液加入过多时，可以再滴加酸或碱溶液至颜色变化明显，再次记录滴定液的滴数。

中和试验步骤1、测定病毒TCID100µl50/2、制备细胞悬液，使细胞浓度约为1×105个/mL，加到96孔细胞培养板中，每孔100µl。

置37℃CO2培养箱中，直至细胞长至单层。

3、血清灭活：将待检测的血清放到56℃水浴30min（此时血清中的病原菌都已被灭活）。

4、100TCID50/50µl病毒液或者200TCID50/25µl病毒液的制备，这两者是等价的。

100TCID50/50µl病毒液制备方法：计算已测定了TCID50/100µl 的病毒原液稀释至100TCID50/50µl的稀释倍数:lg100TCID50/50µl=-log100-log(100/50)=-2.30103得100TCID50/50µl=10-2.30103，假设病毒TCID50/100µl=10-6.3，则稀释倍数=(100TCID50/50µl)÷(TCID50/100µl)=106.3÷102.30103≈9976倍。

5、取一块新的96孔板，1-10列每孔加50µl待检血清原液，再用8道孔排枪加每孔100TCID50/50µl病毒液50µl，稍微吹打使血清与病毒液混均。

11列先每孔加50µl维持液，再于11列的第一孔加50µl 标准阳性血清，将标准阳性血清往下作1:2、1:22至1:28倍稀释。

12列第1孔加标准阴性血清原液50µl，再加100TCID50/50µl病毒液50µl。

用维持液将100TCID50/50µl的病毒液作4次连续10倍稀释，稀释成10TCID50/50µl、1TCID50/50µl、0.1TCID50/50µl,依次加到第12列的3到6孔，每孔加50µl，再每孔加50µl维持液。

第十一章血清学试验第五节中和试验根据抗体能否中和病毒的感染性而建立的免疫学试验，称中和试验(Neutralization test）。

中和试验极为特异和敏感，既能定性又能定量，主要用于病毒感染的血清学诊断、病毒分离株的鉴定、病毒抗原性的分析、疫苗免疫原性的评价、血清抗体效价的检测等。

中和试验可在体内进行也可在体外进行。

体内中和试验也称保护试验，试验时先对实验动物接种疫苗或抗血清，间隔一定时间后，再用一定量病毒攻击，最后根据动物是否得到保护来判定结果。

常用于疫苗免疫原性的评价和抗血清的质量评价。

体外中和试验是将抗血清与病毒混合，在适当条件下作用一定时间后，接种于敏感细胞、鸡胚或动物，以检测混合液中病毒的感染力。

根据保护效果的差异，判断该病毒是否已被中和，并可计算中和指数，即中和抗体的效价。

根据测定方法不同，中和试验有终点法中和试验和空斑减数法中和试验等方法。

毒素和抗毒素也可进行中和试验。

其方法与病毒的中和试验基本相同。

一、终点法中和试验终点法中和试验（Endpoint neutralization test）是滴定使病毒感染力减少至50%时，血清的中和效价或中和指数。

有固定病毒稀释血清和固定血清稀释病毒两种方法。

(一)固定病毒稀释血清法将已知的病毒量固定，血清作倍比稀释，常用于测定抗血清的中和效价。

1.病毒毒价单位病毒毒价(毒力)的单位过去多用最小致死量(MLD)，但由于剂量的递增与死亡率递增的关系不是一条直线，而是呈S形曲线，在越接近100％死亡时，对剂量的递增越不敏感。

而死亡率愈接近50%时，剂量与死亡率呈直线关系，所以现基本上采用半数致死量(LD50)作为毒价单位，而且LD50的计算应用了统计学方法，减少了个体差异的影响，因此比较准确。

以感染发病作为指标的，可用半数感染量(ID50)。

用鸡胚测定时，可用鸡胚半数致死量(ELD50)或鸡胚半数感染量(EID50)；用细胞培养测定时，可用组织细胞半数感染量(TCID50)。

中和试验原理什么是中和试验中和试验是一种实验方法，用于研究化学物质之间的中和反应。

中和反应是指酸和碱之间发生的化学反应，产生盐和水。

中和试验可以用于测定酸碱溶液的浓度、酸碱中和点的确定以及酸碱反应的速率等。

中和反应的原理中和反应是一种酸碱反应，其原理基于酸和碱之间的化学反应。

在中和反应中，酸和碱的质子和氢氧根离子结合，形成水和盐。

中和反应的化学方程式可表示为：酸 + 碱→ 盐 + 水例如，硫酸和氢氧化钠之间的中和反应如下所示：H2SO4 + 2NaOH → Na2SO4 + 2H2O在这个反应中，硫酸是酸，氢氧化钠是碱，它们发生中和反应，生成硫酸钠盐和水。

中和试验的步骤中和试验通常包括以下步骤：准备试剂和仪器首先，需要准备所需的试剂和仪器。

通常情况下，需要酸和碱两种试剂，以及用于测量溶液浓度的仪器，如PH计或酸碱滴定管。

测量初始溶液浓度将待测酸和碱的浓度测量并记录下来。

这可以通过使用标准溶液、滴定法或PH计等方法来完成。

确定酸碱的滴定比例根据化学方程式确定酸碱的滴定比例。

滴定比例是指滴定过程中酸和碱反应所需的摩尔比。

例如，对于硫酸和氢氧化钠的中和反应，滴定比例为1:2。

开始滴定将酸和碱分别加入滴定装置中，并开始滴定过程。

在滴定过程中，缓慢滴入酸或碱，直到滴定剂的颜色发生明显的改变。

这表明酸碱已经完全中和。

计算酸碱溶液的浓度或酸碱中和点根据滴定过程中酸碱的滴定比例，可以计算出酸碱溶液的浓度或酸碱中和点。

通过记录滴定剂的用量和滴定比例，可以计算出酸碱溶液的浓度。

如果滴定过程中使用了酸碱指示剂，滴定剂的颜色改变可以确定酸碱中和点。

中和试验的应用中和试验在许多领域都有广泛应用，包括化学、生物化学、医学和环境科学等。

以下是一些中和试验的应用：1.测定酸碱溶液的浓度：通过中和反应，可以测定酸碱溶液的浓度。

这对于分析化学和医学诊断等领域非常重要。

2.确定酸碱中和点：中和试验可以用于确定酸碱中和点，即酸和碱完全中和的点。