流式多因子检测技术 ppt课件
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luminex多因子检测原理Luminex多因子检测是一种高通量、多参数、有色微球流式细胞技术。
它可以同时检测多个分子分析物,包括蛋白质、核酸、生物标志物等,具有快速、高灵敏度和高特异性等优点。
其工作原理分为四个步骤:微球标记、样品反应、洗涤和检测。
第一步,微球标记。
利用荧光染料将聚合物微球标记上不同的颜色,每种颜色微球上面可以结合一个特异性的抗体、核酸探针或配体。
不同颜色的微球可用于区分不同的检测物,每种被检测物对应一种颜色的微球。
第二步,样品反应。
将待测样品和微球混合,其中的待测分子与微球上的抗体、探针或配体结合。
比如,如果待测分子是蛋白质,那么它将与微球上的抗体结合。
第三步,洗涤。
将混合物置于洗涤缓冲液中,洗去未结合的待测分子。
这一步旨在去除非特异性吸附的物质,以提高检测的特异性。
第四步,检测。
将洗涤后的微球悬浮液注入一台Luminex仪器中,该仪器会通过激光激发荧光素,引起微球上的标记物发出特定波长的荧光信号。
这个信号将被检测器检测并转化为数字信号。
每种颜色微球对应的信号对应于与之结合的待测分子的浓度。
Luminex多因子检测的原理是基于荧光信号的区分,并通过检测信号强度来计算待测分子的浓度。
每种颜色微球上标注不同的抗体或配体,使其与目标分子特异性结合。
这种特异性结合可通过荧光标记物发出的特定波长和强度来检测。
荧光信号的强度与待测分子的浓度成正比,因此可以根据荧光信号的强度来计算待测分子的浓度。
Luminex多因子检测技术具有许多优势。
首先,它可以在一个反应体系中同时检测多个分子,减少了实验时间和样品消耗。
其次,该技术具有高灵敏度和高特异性,可以可靠地检测低浓度的分子。
此外,它也具备高通量性,可以同时分析大量样品。
Luminex多因子检测可以应用于多个领域,如病原体检测、免疫学研究和药物筛选等。
总的来说,Luminex多因子检测技术为多个分子分析物的高通量检测提供了一种快速、准确和可靠的方法。
流式多因子随着流式细胞术和固相化技术的普及和基于微球的多指标检测技术的革命式发展,采用流式细胞术同样可以对可溶性蛋白质进行定性和定量分析。
与传统ELISA 技术只能检测一个指标相比,流式多因子检测技术能够实现从一份标本中同时检测多种指标,大大提高了科研人员的工作效率以及实现了对稀少珍贵样品的多指标分析。
其中代表技术是Luminex和BD CBA (cytometric bead array system, CBA), 以及eBioscience公司旗下的FlowCytomix技术。
百泰派克公司采用BD公司的CBA技术以及FlowCytomix技术为广大科研人员提供多参数细胞因子或其它可溶性分子检测服务。
检测原理:该技术的检测原理与夹心法免疫测定相同。
荧光微球被选择的抗原特异的抗体包被。
已包被了抗体的微球混合物与样本进行孵育。
样本中的待检物(如细胞因子等)与微球上包被的抗体结合。
生物素标记的抗体混合物,与结合于捕获抗体(微球)的待检物特异性结合。
最后加入Streptavidin-PE,与生物素结合进行荧光检测。
流式细胞仪根据微球大小和荧光标记强弱来区分微球群。
2种大小的微球(4.4μm, 5.5μm)内部分别标记9、11种不同强度的荧光染料(远红荧光,可被氩、氦氖甚至紫外光源激发,发射波长690nm),构成了20种可以同时被流式细胞仪识别和区分的不同微球故可以同时在一份标本中进行多达20种指标的检测。
百泰派克提供以下流式多因子检测服务:特异性皮炎细胞因子检测代谢性骨病细胞因子检测心血管疾病细胞因子检测细胞凋亡因子检测糖尿病细胞因子检测免疫调节细胞因子检测肥胖相关免疫因子检测疼痛相关免疫因子检测系统性红斑狼疮细胞因子检测肿瘤免疫细胞因子检测技术优势:与传统的ELISA检测相比,采用流式进行多因子检测有以下优点:抗体的选择目前有上百种的抗体适用于该项技术,并可以根据科研的不同需求进行随机组合开发。
其中我们将常见的检测因子组合,开发成一系列流式试剂盒,大大缩短了抗体定制所需要的时间。
细胞因子流式
细胞因子流式是一种检测细胞因子表达水平、类型、数量和功能的
高通量技术。
它是基于细胞分析仪原理的一种技术,可以将多种细胞
因子同时分析,从而获得更为全面和准确的信息。
细胞因子是一类介导细胞间信号传递的小分子蛋白质。
它们在机体免疫、炎症、发育和修复过程中发挥重要的生物学功能。
目前已知的细
胞因子有多种,包括促炎症因子、细胞生长因子、趋化因子等。
细胞因子流式技术主要通过使用荧光标记的单克隆抗体识别和检测不
同种类的细胞因子。
利用流式细胞仪的精细检测能力,可以实现同时
检测多种不同种类的细胞因子。
细胞因子流式技术的优点在于快速、高通量、准确、方便。
它可以用
于研究免疫细胞在病毒感染、恶性肿瘤、炎症和自身免疫性疾病等多
种疾病中的免疫调节机制。
同时,它还可以帮助研究人员快速发现新
的免疫调节标记并开发新的治疗方法。
除此之外,细胞因子流式技术还可应用于药物筛选、免疫细胞疗法、
临床诊断等多个领域。
它在新药开发、免疫治疗和疾病诊断中的应用
前景非常广阔。
总的来说,细胞因子流式技术在生命科学领域中具有重要的应用价值。
它的应用不仅可以促进我们对于细胞因子在生物学过程中的作用机制
的深入理解,而且可以在实际应用中为疾病的防治和药物开发做出重要的贡献。