高效液相色谱柱前衍生法测定牛磺酸含量

柱前衍生化反相高效液相色谱法测定大鼠血浆中牛磺酸的含量及其药动学研究岳山岚;王维;帅淑平;王静;王吉琳;赵一凡;杨俊毅【摘要】建立一种测定大鼠血浆中牛磺酸含量的柱前衍生化-高效液相色谱法,并将其应用于牛磺酸在大鼠体内的药动学研究.采用柱前衍生化高效液相色谱法,以2,4-二.硝基氟苯(DNFB)为衍生化试剂,以KH2PO3缓冲液(pH 7.0)∶乙腈∶水(70∶15∶15,v/v)为流动相,经C18色谱柱(250 mm×4.6 mm×5 μm)分离,柱温30℃,流速1.0 mL/min,进样量为20 μL,牛磺酸衍生物的紫外检测波长为360 nm,并以DAS2.0计算其药动学参数.大鼠血浆中牛磺酸在1.29～1 287.5 μg/mL质量浓度范围内线性关系良好,r=0.999 9,最低定量限1.29 μg/mL,主要药动学参数t1/2为(3.747± 1.430)h,Cmax为(949.573±192.967)μg/mL,Tmax为(1.000±0.000)h,AUC0-t为(2862.168士565.917)(mg/L)/h.该法简单、经济、灵敏,适用于牛磺酸血药浓度测定及药动学研究.【期刊名称】《中国测试》【年(卷),期】2014(040)006【总页数】4页(P56-59)【关键词】牛磺酸;高效液相色谱法;柱前衍生化;药动学【作者】岳山岚;王维;帅淑平;王静;王吉琳;赵一凡;杨俊毅【作者单位】四川大学华西药学院,四川成都610041;四川大学华西药学院,四川成都610041;四川大学华西药学院,四川成都610041;四川大学华西药学院,四川成都610041;四川大学华西药学院,四川成都610041;四川大学华西药学院,四川成都610041;四川大学华西药学院,四川成都610041【正文语种】中文【中图分类】R914;TQ460.7+2;O657.7+2;O623.84牛磺酸（taurine）又名牛胆碱、牛胆素，是存在于人及动物体内的一种非蛋白游离氨基酸[1]。

柱前在线自动衍生-高效液相色谱法快速测定乳粉中牛磺酸林玉宙;黄耀铕;丛骁;钟晓冬【摘要】建立以邻苯二甲醛为衍生试剂测定乳粉中牛磺酸含量的高效液相色谱方法.标准品和样品在自动进样器中完成自动衍生反应后直接进入高效液相色谱系统进行分析,方法采用Ultimate AQ-C18 (2.1 mm×100 mm,3μm)为分析色谱柱,以乙腈和10 mmol/L乙酸钠(pH 4.2)作为流动相,柱温40℃,流速0.4 mL/min.结果表明:在5～100 μg/mL范围内牛磺酸线性关系良好,回归方程为y=19.8006x+20.176 4,相关系数为0.999 7.样品加标回收率为97.33％～105.74％.本方法最低检测限(RS/N=3)为0.06 mg/100 g,最低定量限(Rs/N=10)为0.2 mg/100 g.本方法测定乳粉中牛磺酸含量重复性好、灵敏度高,且比国标检测方法操作简单,适用于乳粉中牛磺酸的常规分析检测.【期刊名称】《乳业科学与技术》【年(卷),期】2015(038)005【总页数】4页(P21-24)【关键词】在线自动化柱前衍生;牛磺酸;乳粉;邻苯二甲醛【作者】林玉宙;黄耀铕;丛骁;钟晓冬【作者单位】明一国际营养品集团有限公司,福建福州 350214;黑龙江明翔乳业责任有限公司,黑龙江齐齐哈尔 161200;明一国际营养品集团有限公司,福建福州350214;明一国际营养品集团有限公司,福建福州 350214【正文语种】中文【中图分类】TS207.3牛磺酸又称牛胆酸，化学名称为2-氨基乙磺酸，分子式为C2H7NO3S，其为白色针状结晶，无臭，味微酸，无任何毒副作用［1］。

长期以来牛磺酸一直被认为是机体内含硫氨基酸的无功能代谢产物，直到1975年Hayes等［2］发现因缺乏牛磺酸可使猫的视网膜老化甚至失明，其营养生理功能才受到国内外学者的重视，在此过程中也逐步了解其营养学价值。

高效液相色谱法测定海洋生物中牛磺酸的含量作者：柳小英毛丽沙鲍敏洁周瑾金火喜来源：《安徽农业科学》2017年第31期摘要[目的]建立牛磺酸的高效液相色谱分析方法，并通过该方法测定不同海洋生物中牛磺酸的含量。

[方法]应用邻苯二甲醛（OPA）柱前衍生法，研究流动相比例、流速、衍生剂比例、衍生时间等因素对牛磺酸检测的影响。

[结果]当牛磺酸∶OPA=1∶2，衍生时间2 min，流动相乙腈∶水=15∶85，流速为0.5 mL/min，检测波长为360 nm时，牛磺酸浓度为10～400μg/mL时具有良好的线性关系（R2>099），平行样品的相对标准偏差为2.9%～7.4%。

利用该方法检测不同海产品中牛磺酸的含量，所选择的海洋贝类、甲壳类、鱼类中均含有牛磺酸，其中海瓜子中含量最高，达11.2 mg/g。

不同组织比较，鱼肉中牛磺酸含量较高，而鳃中较低。

[结论]该研究结果丰富了海洋生物中牛磺酸含量的数据，为进一步研究牛磺酸在不同组织中的合成机制提供了参考。

关键词海产品；高效液相色谱；牛磺酸中图分类号S-3文献标识码A文章编号0517-6611（2017）31-0001-03Abstract[Objective]The aim was to establish the analytical method of taurine by high performance liquid chromatograph and detect the taurine content in different seafood tissues. [Method]The precolumn derivatization of ophthalaldehyde （OPA） was used to detect the taurine by studying the effects of flow phase ratio， flow rate， ratio of derivatization agent and derivatization time. [Result]The linear range （R2> 0.99） was in the range of 10-400 μg/mL at thetaurine∶OPA=1∶2， derivatization time 2 min， acetonitrile∶water=15∶85， flow rate 0.5mL/min， wavelength 360 nm. The relative standard deviation of the parallel samples was 2.9%-7.4%. The content of taurine in different seafood was tested by using this method. The results showed that taurine was determined in all selected marine shellfish， crustaceans and fish. The highest content of taurine was observed in the baby clam， which was up to 11.2 mg/g. Compared with different tissues of fish， the content of taurine in muscle was the higher， while the lower in gill. [Conclusion]The results of this study enrich the data of taurine content in marine life， and provide reference for the further study of the synthesis mechanism of taurine in different tissues.Key wordsSeafood；High performance liquid chromatography；Taurine牛磺酸，分子式C2H7NO2S，是一种含硫的特殊氨基酸，在体内不参与蛋白质合成，以游离状态存在。

柱前衍生法测定保健液中牛磺酸含量摘要：利用邻苯二甲醛(OPA)与牛磺酸定量反应生成邻苯二甲醛牛磺酸衍生物,采用高效液相色谱法分离并测定口服液中牛磺酸的含量,结果衍生化反应迅速,分离条件好,在0~50ng线性关系良好,检测限为20ng,回收率可达到90％以上,该法灵敏度高,迅速,高效。

关键词：柱前衍生法高效液相色谱法牛磺酸含量牛磺酸广泛分布于动物组织细胞内,海生动物含量尤为丰富,哺乳类组织细胞内亦含有较高的牛磺酸,特别是神经、肌肉和腺体内含量更高,是机体内含量最丰富的自由氨基酸。

牛磺酸也是细胞不可缺少的因子,特别是肝脏、心脏、大脑、脾脏等细胞中都特别需要牛磺酸。

牛磺酸是一种非蛋白氨基酸。

牛磺酸不参与蛋白质的合成,与胱氨酸、半胱氨酸的代谢有密切关系,人体合成牛磺酸的能力很低,必须从食物中获得,是人体必需的一种氨基酸。

天然的牛磺酸在脑内的含量丰富、分布广泛,能明显促进神经系统的生长发育和细胞增殖、分化,且呈剂量依赖性,在脑神经细胞发育过程中起重要作用。

如果补充不足,将会使幼儿生长发育缓慢、智力发育迟缓。

牛磺酸与幼儿、胎儿的中枢神经及视网膜等的发育有密切的关。

补充适量牛磺酸不仅可以提高学习记忆速度,而且还可以提高学习记忆的准确性,并且对神经系统的抗衰老也有一定作用。

牛磺酸无共轭双键,在紫外区无吸收,需经衍生后方可产生吸收从而进行含量测定[1],本法采用邻苯二甲醛(OPA)与牛磺酸定量反应生成邻苯二甲醛牛磺酸衍生物,利用其有荧光这一特性,对其进行检测,结果获得了良好的灵敏度与回收率。

1、材料与方法1.1 检测仪器LC20液相色谱仪、荧光检测器（日本岛津公司）,CAPELL PAK C18色谱柱（15cm×0.46 mm,5 μm）（日本资生堂）,ALC-1100 电子天平（德国赛多利斯公司）。

1.2 试剂试药邻苯二甲醛(OPA,分析纯,国药集团化学试剂有限公司);甲醇(色谱纯,天津康科德科技有限公司);乙硫醇(分析纯,国药集团化学试剂有限公司);乙腈(色谱纯,美国天地);0.4mol/L硼酸钠缓冲液(2.48g硼酸和1.41g氢氧化钠,加水溶解并定容至100mL);衍生化试剂(取OPA0.1g,加0.1mL乙硫醇,0.4mol/L磷酸钠缓冲液定容至100mL);牛磺酸(生化试剂)。

高效液相色谱柱前衍生法测定牛磺酸含量颜京霞;宋秀君;卞小芸;勾凌燕;王仁杰;张亚超【摘要】目的探讨高效液相色谱柱前衍生法测定血、房水、晶状体中牛磺酸含量的价值.方法采用2种流动相,流动相A为0.05 mol/L醋酸钠缓冲液(pH=6.5)-甲醇-四氢呋喃(80∶20∶0.8),流动相B为0.05 mol/L柠檬酸缓冲液(pH=6.5)-甲醇(20∶80);色谱柱为necleos ODSΦ4.6 nm×150 nm.Wistar大鼠的血浆、房水、晶状体经处理和衍生后进样分析.结果该方法最低检出限为10 μg/ml,氨基酸浓度与相对响应值之间平均相关系数为0.998±0.002,回收率为91.07 %～96.79 %,牛磺酸峰面积变异系数在进样量3μl时为10.75 %,进样量5 μl时为3.12 %.结论高效液相色谱柱前衍生法可使血、房水、晶状体中的牛磺酸与其它氨基酸很好地分离,是测定牛磺酸含量的好方法.【期刊名称】《河北医科大学学报》【年(卷),期】1999(020)004【总页数】4页(P216-219)【关键词】牛磺酸/分析;白内障/病因学;色谱法,高压液相/方法;大鼠【作者】颜京霞;宋秀君;卞小芸;勾凌燕;王仁杰;张亚超【作者单位】唐山市工人医院;河北医科大学第三医院眼科,石家庄,050051;河北医科大学第三医院眼科,石家庄,050051;中国人民解放军石家庄医学高等专科学校;中国人民解放军石家庄医学高等专科学校;中国人民解放军石家庄医学高等专科学校【正文语种】中文【中图分类】R4MeSH taurine/anal;cataract/etiol;chromatography,high-performanceliquid/methods; rats近几年来,文献报道〔1,2〕牛磺酸在白内障的发生、发展中起着十分重要的作用,但对牛磺酸含量分析常采用氨基酸自动分析仪〔3〕。

高效液相色谱法测定牛磺酸颗粒中牛磺酸的含量
陈向明
【期刊名称】《福建分析测试》
【年(卷),期】2012(000)004
【摘要】建立了测定牛磺酸含量的高效液相色谱(HPLC)方法.方法采用2,4-二硝基氟苯对牛磺酸进行衍生,在ul-timate C18柱(250×4.6mm,5μm)色谱柱上,0.5%三乙胺(用磷酸调PH=4.0)和乙腈为流动相进行梯度洗脱,检测波长360nm.牛磺酸在4.68×10-10~8.49×10-5mol/L范围内与峰面积呈现良好的线性关系(r=0.9998).所建立的方法简单、简单,可用于制剂中牛磺酸含量的测定.
【总页数】2页(P41-42)
【作者】陈向明
【作者单位】滨州医学院药学院,山东烟台264003
【正文语种】中文
【中图分类】O657.72
【相关文献】
1.柱前衍生化-高效液相色谱法测定复方牛磺酸滴眼液中牛磺酸与氨基己酸含量 [J], 汪玲;王莉艳;吴文耀
2.高效液相色谱-示差折光检测器法测定牛磺酸颗粒和滴眼液中牛磺酸含量 [J], 仵淑红;王丽霞
3.高效液相色谱-串联质谱法测定猪肉及猪肉制品中牛磺酸含量 [J], 周海珍;栗亚琼;王淑霞;王祎娟
4.高效液相色谱-串联质谱法测定猪肉及猪肉制品中牛磺酸含量 [J], 周海珍;栗亚琼;王淑霞;王祎娟
5.程序进样-柱前衍生-高效液相色谱法测定乳制品中牛磺酸含量 [J], 吴海智;肖玥惠子;朱礼;袁列江;王淑霞;黄渊圆
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饲料中牛磺酸含量测定方法牛磺酸（分子式NH2CH2CH2SO2OH，分子量125）是一种氨基磺酸，牛磺酸除了能促进大脑的正常发育外，还能增强机体的免疫力。

牛磺酸常用的含量测定方法有：邻苯二醛柱后衍生、2,4-二硝基氟苯柱前衍生、邻苯二醛柱前衍生高效液相色谱法。

本文采用2,4-二硝基氟苯柱前衍生高效液相色谱法测定饲料中牛磺酸的含量。

1.原理：采用2,4-二硝基氟苯为柱前衍生化试剂与牛磺酸在pH9.0的碳酸氢钠溶液中定量进行化学衍生反应，缩合成二硝基苯氨基酸，在反相色谱柱上进样分离，用紫外检测器进行检测。

2.检测方法2.1试剂：牛磺酸对照品（中国药品生物制品检定所）、乙腈（色谱纯）、超纯水、2,4-二硝基氟苯（分析纯）、碳酸氢钠（分析纯）、磷酸二氢钾（分析纯）、硫酸锌（分析纯）、磷酸盐缓冲液pH7.0（取磷酸二氢钾6.8g，加0.1mol/L氢氧化钠溶液291ml，用水稀释至1000ml，即得）。

2.2 仪器：SHIMADZU-10A液相色谱仪（UV检测器）、离心机、超声仪。

2.3色谱条件与系统适用性试验：色谱柱：Phenomenex C18 Synergi 4u Hydro-RP 80A（150×4.6mm,4um）；流动相：磷酸盐缓冲液（pH7.0）-乙腈-水（70:20:10）；检测波长：360nm；流速：1.0ml/min；柱温：30℃；进样量10ul。

理论板数按牛磺酸衍生物峰计算不低于1500，牛磺酸衍生物与2,4-二硝基氟苯乙腈峰的分离度应大于1.5。

2.4溶液的制备2.4.1对照品溶液的制备：精密称取牛磺酸对照品10mg，加水制成每1ml含0.5mg的溶液，精密量取2ml，按2.4.3方法操作，即得。

2.4.2供试品溶液的制备：精密称取样品约5g于具塞锥形瓶中，精密加入25ml水，超声15分钟溶解，精密加入0.1mol/L盐酸溶液10ml，摇匀，加入15g/L硫酸锌溶液5ml，摇匀，精密加入10ml水，摇匀，4000r/min离心20分钟，取上清液过滤，取续滤液2ml，按2.4.3方法操作，即得。