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百日咳诊疗指南百日咳（pertussis,whooping cough）是由百日咳杆菌所致的急性呼吸道传染病。
婴幼儿多见。
临床上以阵发性痉挛性咳嗽、鸡鸣样吸气吼声为特征。
病程可长达2～3月，故名百日咳。
（一）传染源患者是本病唯一的传染源。
自潜伏期末至病后6周均有传染性，以发病第一周卡他期传染性最强。
（二）传播途径主要通过飞沫传播。
（三）易感者人群普遍易感，但幼儿发病率最高。
母体无足够的保护性抗体传给胎儿，故6个月以下婴幼儿发病较多。
病后可获持久免疫力，第二次发病者罕见。
本病发生于各世界各地，多见于温带及寒带。
一般散在发病。
本菌自呼吸道侵入，依菌毛血凝抗原附着于纤毛上皮并在局部繁殖，引起局部炎症及纤毛麻痹，呼吸道中粘液排出障碍，堆积潴留，堆积物不断刺激神经末梢导致痉挛性咳嗽，咳毕因出现深长吸气，急速的气流通过痉挛、狭窄的声门，发出高声调的吼声，即鸡鸣声，直至分泌物排出，剧咳方止。
长期咳嗽，在咳嗽中枢形成兴奋灶，以致在恢复期或病愈后短期内，受到一些非特异性刺激和其他感染可诱发百日咳样咳嗽。
病理变化可见呼吸道上皮细胞坏死、脱落。
支气管甚至肺泡周围间质有炎性细胞浸润。
分泌物阻塞气管可出现肺不张、支气管扩张等。
并发脑炎者脑组织可有充血、水肿、出血及神经细胞变性。
潜伏期2～20天，一般为7～10天。
典型经过分为三期：（一）卡他期（前驱期）自起病至痉咳出现，约7～10天。
初起类似一般上呼吸道感染症状，包括低热、咳嗽、流涕，喷嚏等。
3～4日后其他症状好转而咳嗽加重。
此期传染性最强，治疗效果也最好。
（二）痉咳期咳嗽由单声咳变为阵咳，连续十余声至数十声短促的咳嗽，继而一次深长的吸气，因声门仍处收缩状态，故发出鸡鸣样吼声，以后又是一连串阵咳，如此反复，直至咳出粘稠痰液或吐出胃内容物为止。
每次阵咳发作可持续数分钟，每日可达十数次至数十次，日轻夜重。
阵咳时患儿往往面红耳赤，涕泪交流、面唇发绀，大小便失禁。
少数病人痉咳频繁可出现眼睑浮肿、眼结膜及鼻粘膜出血，舌外伸被下门齿损伤舌系带而形成溃疡。
百日咳检查方法
1.临床意义
百日咳是一种由百日咳杆菌引起的急性呼吸道传染病，自从广泛实施百日咳菌苗免疫接种后,本病的发生率已经大为减少。
百日咳的临床特征为咳嗽逐渐加重，呈典型的阵发性、痉挛性咳嗽，咳嗽终末出现深长的鸡啼样吸气性吼声，病程长达2～3个月，故有百日咳之称。
2.检查方法：
2.1.白细胞计数
卡他期及痉咳期末可见外周血白细胞计数明显增高，可达（20～50）×109/L，分类中淋巴细胞占0.60～0.80，无幼稚细胞。
如有继发感染时，淋巴细胞即相对减少。
2.2.细菌培养
卡他期及痉咳早期使用鼻咽拭子，或用咳碟法收集标本，用薄-姜氏（B-G）培养基做细菌培养，可获得阳性结果。
2.3.荧光抗体染色法检查
用鼻咽拭子涂片，用荧光标记的特异性抗体染色，在荧光显微镜下检查病原体有快速诊断的优点，但本法特异性稍差，仅作辅助诊断之用。
2.4.血清学检查
做双份血清凝集试验及补体结合试验，如抗体效价递升可予确诊。
近年有用酶联免疫吸附试验测定免疫球蛋白M（IgM）、免疫球蛋白G（IgG）和免疫球蛋白A（IgA）抗体，对早期诊断有所帮助。
也有用单份恢复期血清凝集抗体1：320效价作为阳性诊断值者。
2.5.细菌特异性核酸检测
可使用DNA聚合酶链式反应技术（PCR）法扩增细菌特异性核酸，据报道此法特异性及敏感性均较好。
百日咳检验标准全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：百日咳是一种由百日咳杆菌引起的传染病，其主要特征是剧烈的咳嗽发作。
为了确诊和治疗该疾病，需要进行百日咳检验。
百日咳检验是通过检测患者的呼吸道样本中是否含有百日咳杆菌来进行的,有效的百日咳检验标准对于及早发现和治疗该疾病至关重要。
百日咳检验的标准主要包括症状、检测方法和结果解读。
首先是症状，百日咳的典型症状包括剧烈的咳嗽发作、呼吸困难、发热和喉咙疼痛等。
如果患者出现这些症状，应及时就医并进行百日咳检验以确认诊断。
其次是检测方法，目前常用的百日咳检验方法主要包括血清学检测、痰样本检测和鼻咽拭子检测。
血清学检测是通过检测患者的血液中是否含有百日咳抗体来诊断该疾病，痰样本检测是通过检测患者的呼吸道痰液中是否含有百日咳杆菌来诊断，鼻咽拭子检测是通过对患者的鼻咽拭子进行PCR检测来诊断。
这些方法各有优劣，医生应根据患者的具体情况选择合适的检测方法进行检验。
最后是结果解读，百日咳检验的结果通常分为阳性和阴性两种。
阳性结果表示患者的呼吸道样本中含有百日咳杆菌，确诊为百日咳；阴性结果表示患者的呼吸道样本中不含有百日咳杆菌，暂时排除百日咳。
需要注意的是，百日咳检验结果可能受多种因素影响，包括样本采集的时间、样本处理的方法以及检测方法的准确性等，因此在解读结果时应谨慎对待。
百日咳检验标准对于确诊和治疗百日咳起着至关重要的作用。
医生和患者都应遵循相关标准和建议，及时进行检验和治疗，以保障患者的健康和安全。
希望通过不断的科研和实践，能够提高百日咳检验的准确性和有效性，为预防和控制这一传染病做出更大的贡献。
【2000字】百日咳是一种由百日咳杆菌引起的急性呼吸道传染病，其典型症状是剧烈的阵发性咳嗽，咳嗽时常伴随呼吸困难、喘息、呕吐和面部充血等症状。
患者经常在夜间发作并呈现发作性，继续数周至数月，所以称之为“百日咳”。
百日咳主要通过飞沫传播，易在咳嗽处传播给他人，尤其对婴幼儿等免疫力低下的人群具有较高的致病性和传染性。
百日咳诊断标准及处理原则前言【GB 15998—1995】百日咳是百日咳杆菌引起的呼吸道传染病，传染性强，在婴幼儿中有很高的病死率。
临床表现以阵发性痉挛性咳嗽和痉咳终止时出现鸡鸣样吸气吼声为特征，多见于儿童，病程可达2～3个月。
本标准在制定过程中，参考了1989年卫生部制定的《中华人民共和国传染病防治法》及《中华人民共和国传染病防治法实施办法》中的诊断标准，尽量结合我国百日咳的流行病学，临床实践与各地情况，以便易于实施和应用。
本标准附录A是标准的附录；本标准附录B是提示的附录。
本标准由中华人民共和国卫生部提出。
本标准起草单位：中国预防医学科学院流行病学微生物学研究所、北京市地坛医院、首都儿科研究所。
本标准主要起草人：张荣珍、杨立信、王树山。
本标准由卫生部委托技术归口单位卫生部传染病防治监督管理办公室负责解释。
1范围本标准规定了百日咳的诊断标准和处理原则。
本标准适用于各级、各类医疗、卫生、保健机构和人员对百日咳病人的诊断、报告和处理。
2诊断原则应根据流行病学资料及临床表现做出临床诊断，确诊需要百日咳杆菌培养阳性或者检测抗百日咳菌特异性抗体。
3诊断标准3.1流行病学史三周内接触过百日咳病人，或该地区有百日咳流行。
3.2临床表现3.2.1流行季节有阵发性痉挛性咳嗽者。
3.2.2咳嗽后伴有呕吐，严重者有结膜下出血或舌系带溃疡者。
3.2.3新生儿或婴幼儿有原因不明的阵发性青紫或窒息者，多无典型痉咳。
3.2.4持续咳嗽两周以上，能排除其他原因者。
3.3实验室诊断3.3.1白细胞总数显著升高，淋巴细胞占50％以上。
3.3.2从病人的痰或咽喉部分泌物分离到百日咳杆菌，见附录A。
3.3.3恢复期血清凝集抗体比急性期抗体呈四倍以上升高，见附录B。
3.4病例分类3.4.1疑似病例具备3.2.1，3.2.2，3.2.3，3.2.4四项中任何一项，或同时伴有3.1项者。
3.4.2临床诊断病例疑似病例加3.3.1。
3.4.3确诊病例疑似病例加3.3.2或3.3.3。
百日咳诊断标准（WS274-2007）百日咳诊断标准(WS 274-2007)1 范围本标准规定了百日咳的诊断依据、诊断原则、诊断和鉴别诊断。
本标准适用于全国各级各类医疗卫生机构及其工作人员对百日咳的诊断和报告。
2 术语和定义以下术语和定义适用于本标准。
2.1 双份血清paired sera患者急性期和恢复期血清标本。
2.2痉咳spasmodic cough连续不断地痉挛性咳嗽。
2.3 百日咳I相血清Bordetella pertussis phage I serum百日咳鲍特菌光滑型（I相）菌免疫动物所获得的血清。
2.4 聚合酶链式反应polymerase chain reactlon，PCR一种用于在体外酶促扩增特定DNA片段的快速方法，基本步骤包括变性，退火和延伸三个部分。
3 诊断依据3.1 流行病学史(参见附录A)四季均有发病，春夏季多发，该地区有百日咳流行，有与百日咳患者的密切接触史，无预防接种史。
3.2 临床表现(参见附录A)3.2.1 典型病例阵发性、痉挛性咳嗽，持续咳嗽≥2周者。
3.2.2 不典型病例婴儿有反复发作的呼吸暂停、窒息、青紫和心动过缓症状，或有间歇的阵发性咳嗽；青少年和成人具有不典型较轻症状，卡他期、痉咳期、恢复期三期症状都缩短或无明显的阶段性，而只表现持续两周以上的长期咳嗽。
3.3 实验室检查3.3.1 外周血白细胞计数及淋巴细胞明显增高。
3.3.2 从痰、鼻咽部分泌物分离到百日咳鲍特菌，检验方法见附录B。
3.3.3 恢复期血清特异性抗体比急性期呈≥4倍增长，检验方法见附录B。
4 诊断原则根据流行病学史、临床表现及实验室检查结果可做出百日咳病例诊断。
5诊断标准5.1 疑似病例符合3.2.1、3.2.2任何一项的规定，或伴有3.1项的规定。
5.2 临床诊断病例疑似病例同时符合3.3.1的规定。
5.3 确诊病例临床诊断病例同时符合实验室检查中3.3.2、3.3.3项中的任何一项的规定。
百日咳诊断标准及处理原则前言【GB 15998—1995】百日咳是百日咳杆菌引起的呼吸道传染病，传染性强，在婴幼儿中有很高的病死率。
临床表现以阵发性痉挛性咳嗽和痉咳终止时出现鸡鸣样吸气吼声为特征，多见于儿童，病程可达2～3个月。
本标准在制定过程中，参考了1989年卫生部制定的《中华人民共和国传染病防治法》及《中华人民共和国传染病防治法实施办法》中的诊断标准，尽量结合我国百日咳的流行病学，临床实践与各地情况，以便易于实施和应用。
本标准附录A是标准的附录；本标准附录B是提示的附录。
本标准由中华人民共和国卫生部提出。
本标准起草单位：中国预防医学科学院流行病学微生物学研究所、北京市地坛医院、首都儿科研究所。
本标准主要起草人：张荣珍、杨立信、王树山。
本标准由卫生部委托技术归口单位卫生部传染病防治监督管理办公室负责解释。
1范围本标准规定了百日咳的诊断标准和处理原则。
本标准适用于各级、各类医疗、卫生、保健机构和人员对百日咳病人的诊断、报告和处理。
2诊断原则应根据流行病学资料及临床表现做出临床诊断，确诊需要百日咳杆菌培养阳性或者检测抗百日咳菌特异性抗体。
3诊断标准3.1流行病学史三周内接触过百日咳病人，或该地区有百日咳流行。
3.2临床表现3.2.1流行季节有阵发性痉挛性咳嗽者。
3.2.2咳嗽后伴有呕吐，严重者有结膜下出血或舌系带溃疡者。
3.2.3新生儿或婴幼儿有原因不明的阵发性青紫或窒息者，多无典型痉咳。
3.2.4持续咳嗽两周以上，能排除其他原因者。
3.3实验室诊断3.3.1白细胞总数显著升高，淋巴细胞占50％以上。
3.3.2从病人的痰或咽喉部分泌物分离到百日咳杆菌，见附录A。
3.3.3恢复期血清凝集抗体比急性期抗体呈四倍以上升高，见附录B。
3.4病例分类3.4.1疑似病例具备3.2.1，3.2.2，3.2.3，3.2.4四项中任何一项，或同时伴有3.1项者。
3.4.2临床诊断病例疑似病例加3.3.1。
3.4.3确诊病例疑似病例加3.3.2或3.3.3。
4处理原则4.1对病人的隔离自发病后隔离40d，或至痉挛性咳嗽出现后隔离30d。
接触者观察21d。
4.2对病人的治疗尽早给予抗生素治疗及对症治疗，防治并发症。
4.3发生暴发流行的应急措施4.3.1对未接种百日咳菌苗的易感儿童应急接种百白破三联混合制剂。
4.3.2与百日咳患者有密切接触史的易感儿可用药物预防。
4.4百日咳的免疫预防百日咳是一种可以用菌苗预防的传染病，对易感儿童实行百白破三联混合制剂接种，是预防本病的重要措施。
国内外的研究表明，百日咳菌苗的预防效果是肯定的。
按我国现行的免疫程序，儿童出生后第3个月开始初免，全程免疫3针，保护率可达90％以上，第二年再加强一针。
附录A(标准的附录)百日咳病原学诊断方法A1病原体分离从病人鼻咽部采集标本或咳碟法分离病原体。
A1.1标本的采集A1.1.1咳碟法用咳碟法采集样品时，应在病人咳嗽时，将包－姜(Bordet－Gengou)二氏培养平板打开放在病人口前10cm处，使病人对准平板表面咳嗽数次，直接收集病人咳出的飞沫。
然后盖好平皿盖送检。
平皿暴露时间以15s为宜。
A1.1.2鼻咽试子由于百日咳多发于儿童，所以采样时，病儿的头部斜依于母亲的胸怀，母亲以双手固定病儿的头部，医师以右手执棉拭子，左手按病人的头顶部，使顶端稍向下弯的棉拭子自前鼻孔进入，沿下鼻道的底部向后缓缓深入，由于鼻道呈弧形，不可用力过猛，以免发生外伤出血。
待棉拭子顶端到达鼻咽腔后壁时，将棉拭子稍留片刻，以待反射性咳嗽，然后轻轻旋转一周，缓缓取出棉拭子。
A1.2接种和菌种检定A1.2.1菌型百日咳杆菌应为革兰氏阴性呈卵圆形短小杆菌，菌体长0.5～1.0μm。
A1.2.2菌落百日咳杆菌接种于包－姜二氏培养基37℃培养3～4d后其菌落呈圆形、灰白色，表面光滑，中央突起，边缘整齐，具有珍珠般的光泽，菌落周围有弥散性溶血环。
A1.2.3生化及抗原特性百日咳杆菌生化反应极不活跃，不发酵任何碳水化合物，不液化明胶，不产生硫化氢，不形成吲哚，不还原硝酸盐，不利用枸橼酸盐，氧化酶阴性，70％以上菌株触酶阳性。
不产生尿素酶和苯丙氨酸脱氨酶。
百日咳杆菌新分离菌株有荚膜，毒力强，菌落光滑，称为I相菌。
百日咳杆菌有6种凝集因子，1、2、3因子是主要的，籍此又可将I相菌分为三种血清型：1.2，1.3，1.2.3。
血清型具相对稳定性，但可发生变异。
血清型不仅在自然感染，在人工传代培养过程中也可发生变异。
A2皮肤坏死试验A2.1每次试验最少用健康家兔或豚鼠2只，每只家兔或豚鼠可同时试验数个菌株。
A2.2将培养40～48h第三代或第四代20％羊血包－姜二氏培养基上的菌苔，混悬于缓冲盐水或生理盐水中。
A2.3将菌液用灭菌脱脂棉过滤，测定浓度。
A2.4用生理盐水将菌液稀释成4×108/mL及2×108/mL二个浓度。
A2.5试验前一天将健康家兔或豚鼠先行脱毛。
A2.6注射前用75％酒精消毒，再用小试管蘸色素印在脊柱两侧、每只家兔可试验4个菌株。
A2.7每个圈内皮内注射0.1mL，拔针时要在皮内稍稍扭转以免菌液流出。
A2.8注射完毕要做好记录。
A2.9注射后48～72h观察坏死情况，并量坏死的大小。
如两只家兔有一只注射4×108个菌，注射部位出现坏死即为阳性。
A3免疫荧光法检测百日咳杆菌(直接法)A3.1原理将已知百日咳抗血清用化学方法结合荧光色素制成荧光抗体，以此来浸染固定在玻片上的未知细菌，若为相应细菌，则两者结合面留在玻片上，不被缓冲液所冲掉。
在荧光显微镜下有荧光出现。
A3.2材料A3.2.1荧光抗体用前按说明书要求以pH7.3磷酸盐缓冲盐水进行稀释，4℃冰箱保存备用。
A3.2.2pH7.3磷酸盐缓冲盐水氯化钠8.5g磷酸氢二钠 1.07g磷酸二氢钠0.39g蒸馏水1000mLA3.2.3荧光显微镜A3.2.4其他材料0.8～1.2mm厚载玻片。
0.17mm厚的盖玻片。
甘油缓冲液(90mL分析纯甘油加10mL pH8.2磷酸盐缓冲液)，镜油可用液体石蜡代替。
A3.3方法A3.3.1用接种环将待检标本涂布于玻片上，大小约1cm2，火焰固定，用蜡笔将标本圈起。
A3.3.2将稀释的荧光抗体加在标本上，置湿盒，放37℃温箱30min。
A3.3.3取出玻片，用滴管吸取3～5mL磷酸盐缓冲盐水将标本上荧光抗体冲洗，再依次浸入盛有磷酸盐缓冲液三个缸中浸泡，每缸3～5min，并不时振荡。
A3.3.4干燥、封载、镜检。
A3.3.5为使结果正确，还需作以下对照：a)标本阴性对照：标本不加荧光抗体只加磷酸盐缓冲盐水。
b)阳性对照：荧光抗体加在已知阳性菌株标本上。
c)封闭试验：将标本先加未标记的同样抗血清作用30min，充分洗涤后再加标记抗体染色，若是阳性标本，应无特异荧光。
d)标本加正常未免疫的标记抗体，结果应无特异荧光。
A3.4结果判定A3.4.1荧光的强度和形态学的特征＋＋＋＋：菌体显著膨大，黑心清楚，荧光明亮。
＋＋＋：菌体膨大，黑心清楚，荧光明亮。
＋＋：菌体稍膨大，形态清晰，有黑心，荧光较弱。
＋：菌体不膨大，形态不清楚，荧光微弱。
－：细菌无荧光。
A3.4.2判定标准阳性：细菌荧光在“＋＋”以上，在片上可看到分散或成堆出现形态典型的细菌。
阳性对照“＋＋～＋＋＋”，阴性对照为阴性。
附录B(提示的附录)百日咳血清学诊断方法B1百日咳试管凝集试验(半量法)B1.1原理细菌、红血球及其他颗粒性抗原，加入含有特异性抗体的血清，在有适当的电解质存在时，经一定时间作用后，可出现肉眼可见的凝集团块，利用这种现象进行已知抗原定量测定相应抗体或已知抗体测定抗原等方法就是定量凝集试验。
B1.2材料B1.2.1百日咳I相标准血清∶。
效价为112800B1.2.2百日咳菌液菌液的凝集效价应达到I相标准血清的效价的一半以上。
菌液浓度定为2×109/mL。
B1.2.30.85％生理盐水B1.2.4待检血清患者耳血或静脉血，分离出血清后进行测定。
B1.2.5凝集管及试管架B1.2.6刻度吸管(1mL、5mL、10mL)B1.3试验方法∶，∶，120取待检血清0.1mL＋0.4mL生理盐水，稀释成5倍，然后依次倍比稀释即为110∶等，每管0.25mL。
并加入2×109/mL浓度的百日咳菌液，每管0.25mL。
∶，1160140∶，180充分摇匀置35℃过夜，次日取出后，室温放置1h观察结果。
每次试验时要设阴性对照管，即百日咳菌液加生理盐水，设阳性对照管，用一排试管，采用百日咳I相标准血清，按已知效价进行稀释，然后每管加入百日咳菌液和试验组相同条件观察结果。
B1.4结果判定＋：管内液体混浊，少量凝集块沉于管底。
＋＋：管内液体半澄清，部分凝块沉于管底。
＋＋＋：管内液体不完全澄清，凝集块全部沉于管底。
＋＋＋＋：管内液体完全澄清，凝集块全部沉于管底。
若恢复期抗体滴度比急性期增高4倍以上对确诊病例很有意义。
B2微量凝集试验(血凝板法)B2.1材料B2.1.1百日咳I相标准血清∶。
效价112800B2.1.2待检菌液菌液效价应达到I相标准血清效价之半，菌液浓度为3×108～4×108/mL。
B2.1.3稀释液0.85％生理盐水。
B2.1.4U型孔血凝板8排×12孔。
B2.1.5可调微量移液器B2.1.6多孔道加样器B2.1.735℃～37℃恒温箱B2.1.8冰箱B2.1.9微型振荡器B2.1.10带盖搪瓷盘B2.2试验方法B2.2.1取标准血清0.1mL加入9.9mL生理盐水，稀释成100倍。
B2.2.2在U型孔血凝板上，第1孔不加盐水，第2孔至第10孔分别加入0.025mL盐水，第12孔也加入0.025mL盐水作为阴性对照孔。
B2.2.3用微量加样器向第1孔及第2孔各加0.025mL 100倍稀释的标准血清。
B2.2.4用多孔道加样器从第2孔开始倍比稀释至第10孔。
B2.2.5将稀释好的血清每孔加入每毫升含3×108～4×108菌体的菌液0.025mL。
B2.2.6用微量振荡器振荡3～5min。
B2.2.7将血凝板放入下面垫有纱布的带盖搪瓷盘内，再放置于35℃培养箱内过夜。
B2.2.8次日取出血凝板室温放置片刻后，将血凝板放在日光灯上面观察结果。
B2.3结果判断B2.3.1孔底呈圆点状，菌体沉淀物同对照孔(一)。
B2.3.2孔底无圆点状，菌体沉淀物呈微细凝集散在状(＋)。
B2.3.3凝集明显，上清液微浑浊(＋＋)。
B2.3.4凝集明显，上清液清晰(＋＋＋)。
B2.3.5凝集呈块状，上清液清晰(＋＋＋＋)。
