分光光度法分析 氨氮 原始记录

一、实验目的1. 熟悉氨氮测量的原理和方法。

2. 掌握分光光度法测定水中氨氮的操作步骤。

3. 通过实验，了解氨氮对水环境的影响及监测意义。

二、实验原理氨氮（NH3-N）是水体中的一种重要氮素形态，主要来源于生活污水、工业废水及农业面源污染。

氨氮对水生生物具有毒性，影响水环境质量。

本实验采用分光光度法测定水中氨氮含量，利用纳氏试剂与氨氮反应生成淡红棕色胶态化合物，其色度与氨氮含量成正比，通过测定吸光度计算氨氮含量。

三、实验仪器与试剂1. 仪器：分光光度计、氨氮测定仪、蒸馏器、锥形瓶、移液管、容量瓶等。

2. 试剂：纳氏试剂、硼酸溶液、磷酸缓冲溶液、无氨水、氨氮标准溶液等。

四、实验步骤1. 标准曲线绘制（1）取一系列不同浓度的氨氮标准溶液，分别加入硼酸溶液，置于蒸馏器中。

（2）加热蒸馏，收集馏出液，加入纳氏试剂，用分光光度计测定吸光度。

（3）以氨氮浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。

2. 样品测定（1）取水样，加入磷酸缓冲溶液，调节pH值至8.5左右。

（2）加热蒸馏，收集馏出液，加入硼酸溶液，待冷却后，加入纳氏试剂。

（3）用分光光度计测定吸光度，根据标准曲线计算氨氮含量。

3. 数据处理与结果分析（1）计算样品中氨氮含量的平均值。

（2）分析氨氮含量对水环境的影响。

五、实验结果与讨论1. 标准曲线绘制：标准曲线的相关系数R²为0.9999，表明标准曲线线性关系良好。

2. 样品测定：本实验测定了某水样中氨氮含量，结果为10.5 mg/L。

3. 结果分析：根据实验结果，该水样中氨氮含量超过了国家地表水环境质量标准（GB3838-2002）的Ⅲ类标准（5 mg/L），表明该水样受到氨氮污染。

六、实验结论1. 分光光度法是一种快速、准确测定水中氨氮含量的方法。

2. 通过实验，掌握了氨氮测量的原理和操作步骤。

3. 氨氮对水环境质量具有重要影响，应加强氨氮污染的监测与治理。

七、实验反思1. 实验过程中，应注意避免氨氮的挥发，确保实验结果的准确性。

纳氏试剂分光光度法测定氨氮3页
一、实验原理
氨氮试剂是使含有氨基化合物与试剂中过量的漂白酸蒸汽反应生成此试剂特有的黄色化合物的一种试剂。

在强酸性条件下，氨氮试剂与氨反应会生成啶酮类物质，其极限吸收波长为630 nm。

因此可用分光光度法测定水样中氨氮的浓度。

二、实验流程
1.样品制备
从实验室旁的水龙头中取一定量的自来水，用试管接收。

加入适量氢氧化钠，调节pH 值至9-10。

将制备好的样品均匀搅拌10分钟，待悬浮物沉淀后分别取上清液1 ml，加入含0、5、10、20、40、80 μg氨氮的标准溶液中，制成系列不同浓度的标准曲线。

剩下的水样须测定氨氮的含量。

2.测定方法
取一支洁净的比色管，加入0.1 ml样品和4.9 ml氨氮试剂。

用漂白酸蒸馏法进行漂白，约30秒后插入比色管中心的钴光校准板测定A630。

进行6次测定，求平均数。

3.结果处理
按照标准曲线计算样品中氨氮的含量。

三、注意事项
1.样品制备中加入的氢氧化钠用量不能过多，若pH值过高会干扰分析结果。

2.比色管中加入样品和试剂的量不能超过标线，否则会影响测定结果。

3.氨氮试剂应保存在避光、干燥的地方，严防潮湿。

4.不宜将试管或比色管内物品碰到手指或其他物品。

若不慎污染导致实验结果出错，应重新进行实验。

5.实验工具应保持干净、无污染状态。

纳氏试剂分光光度法测定水中氨氮标准
试剂和仪器：
纳氏试剂、蒸馏水、比色皿、分光光度计
操作流程：
1.取样：取一定量的待测水样，先进行前处理。

即用蒸馏水洗净比色皿后，加入待测水样，至刻度线。

2.添加试剂：用分度玻璃管向比色皿中加入纳氏试剂7.5ml，搅拌，室温放置10分钟。

3.进行分光测定：用分光光度计在680nm波长进行吸光度的测定，将比色皿放置在光路中，操作时注意比色皿中是否有气泡。

4.做样：将待测水样中的氨氮含量与纳氏试剂反应生成的产物的吸收光强度之间建立标准曲线，计算样品中的氨氮含量。

标准曲线与结果分析：
1.建立标准曲线：取一定量活水，分别加入0、0.7、1.4、
2.1、
3.5、7.0ml氨
标准溶液，并用蒸馏水配成100ml,加入纳氏试剂，操作3中所述的分光测定方法，得到吸光度值。

以吸光度为纵坐标，氨标准溶液中氨氮的质量浓度为横坐标，做出标准曲线。

2.计算结果：通过标准曲线找出待测水样的吸光度值，即可计算出含量。

样品中的氨氮含量，用公式计算：C=(S-A)/k，其中S为待测水样的吸光度，A为纯水的吸光度，k为标准曲线斜率，C为样品中氨氮的含量。

3.结果分析：根据计算出的样品中氨氮含量，判定水质是否合格。

若氨氮含量超标，则需在水处理工艺中加入相应的氨氮去除方法。

纳氏试剂分光光度法测定水中氨氮标准(一)纳氏试剂分光光度法测定水中氨氮标准什么是氨氮？氨氮是指水中含有的氨和氨的化合物的总量，一般都是以氨氮的浓度来表示。

氨氮是水中常见的一种污染物，它会破坏生态平衡，对人体健康和生态环境造成严重影响。

什么是纳氏试剂分光光度法？纳氏试剂分光光度法是一种测定水中氨氮浓度的方法。

它是以氨和氯仿反应生成烟酸盐，并利用分光光度计测定其光密度值，从而计算出水中氨氮的浓度。

标准方法下面介绍纳氏试剂分光光度法测定水中氨氮的标准方法：1.取一定量的样品，多用100ml。

2.将样品加入25ml的蒸馏水中，磁力搅拌10分钟，过滤。

3.取1ml滤液加入25ml量筒中，加入1ml硼酸溶液，4ml纳氏试剂（5%NaOH/0.05%MgSO4/0.01%NaCl/0.3%NaNO2/NaClO存储2小时后加入），摇匀，室温下放置20分钟左右。

4.在395nm处使用分光光度计测定纳氏试剂反应产生的光密度值。

5.使用空白对照样品重复操作，并将其光密度值减去待测样品的光密度值。

6.根据所做的标准曲线计算氨氮的浓度。

结论纳氏试剂分光光度法是一种准确、简单的测定水中氨氮浓度的方法。

在实际应用中，需要按照标准方法进行操作，以确保测量结果的准确性和可比性。

优缺点优点1.纳氏试剂分光光度法简单易懂，使用简便。

2.测定结果准确，误差小。

3.纳氏试剂分光光度法适用于水中相对较低浓度的氨氮测定。

缺点1.无法测定水中不同形态的氮含量，如亚硝酸盐、硝酸盐等。

2.纳氏试剂分光光度法对样品的处理和保养很关键，如果不注意则会影响测量结果的准确性。

应用范围纳氏试剂分光光度法是一种经典的测定水中氨氮的方法，其适用范围如下：1.工业废水、生活污水、农业污水等水体中氨氮的测定。

2.水产养殖过程中氨氮的监测。

3.其他需要测定水中氨氮浓度的研究。

注意事项在进行纳氏试剂分光光度法测定水中氨氮时，需要注意以下事项：1.样品应当完全清洁，以避免干扰测量结果。

纳氏试剂分光光度法测定水中氨氮实验报告一、前言随着社会的发展，人们对水资源的需求越来越大，水质问题也越来越受到关注。

而氨氮是衡量水体中氮含量的重要指标之一，对于水体的生态环境和人类健康具有重要意义。

因此，研究和掌握纳氏试剂分光光度法测定水中氨氮的方法具有重要的理论和实际意义。

本文将对纳氏试剂分光光度法测定水中氨氮的原理、方法、影响因素以及实验结果进行详细分析和讨论。

二、纳氏试剂分光光度法测定水中氨氮的原理纳氏试剂分光光度法测定水中氨氮的原理是基于纳氏试剂与氨氮在碱性条件下生成红色络合物的特性。

当纳氏试剂与氨氮反应生成红色络合物时，络合物吸收特定波长的光线，通过测量吸收光强度的变化来计算氨氮的浓度。

三、纳氏试剂分光光度法测定水中氨氮的方法1. 样品制备：将待测水样过滤，去除水中的悬浮物和杂质。

然后，将过滤后的水样与适量的纳氏试剂混合，使纳氏试剂充分溶解。

在此过程中，需要控制好纳氏试剂的用量，以保证反应的准确性和稳定性。

2. 比色测定：将反应好的水样转移到比色皿中，加入适量的氧化剂(如高锰酸钾),使红色络合物转化为无色的络合物。

此时，根据比色皿中溶液的颜色深浅，可以计算出水样中氨氮的浓度。

3. 数据处理：为了准确评价测定结果，需要对测定数据进行一定的处理。

要对不同时间点的测定值进行线性拟合，得到一条拟合曲线。

然后，根据已知的水样浓度范围，通过比较拟合曲线与标准曲线的交点位置，可以确定待测水样的氨氮浓度。

四、影响纳氏试剂分光光度法测定水中氨氮的因素1. 纳氏试剂用量：纳氏试剂用量的选择对测定结果具有重要影响。

过少的纳氏试剂会导致反应不充分，影响测定精度；过多的纳氏试剂则会使络合物过于稳定，难以分离，同样会影响测定结果。

因此，在实验过程中需要严格控制纳氏试剂的用量。

2. 氧化剂用量：氧化剂(如高锰酸钾)的用量也会影响测定结果。

过少的氧化剂会导致红色络合物无法完全转化为无色的络合物，影响测定精度；过多的氧化剂则会使溶液颜色过深，干扰比色过程。

一、实验目的1. 了解氨氮测定的环境意义；2. 掌握纳氏试剂分光光度法测定水中氨氮的原理及操作方法；3. 熟悉KDY-9820型凯氏定氮仪的工作原理及操作方法；4. 比较自动测氮蒸馏系统与传统蒸馏方法在氨氮测定中的应用。

二、实验仪器与试剂仪器：- KDY-9820型凯氏定氮仪- 分光光度计- 蒸馏装置- 玻璃仪器：锥形瓶、烧杯、容量瓶等试剂：- 纳氏试剂- 碘化汞和碘化钾的碱性溶液- 硼酸溶液- 磷酸缓冲溶液- 标准氨氮溶液- 无氨水三、实验原理氨氮的测定主要采用纳氏试剂分光光度法。

其原理如下：碘化汞和碘化钾的碱性溶液与氨反应生成淡红棕色胶态化合物，其色度与氨氮含量成正比。

通常在波长410~425nm范围内测定其吸光度，计算其含量。

四、实验步骤1. 水样预处理取200mL水样置于蒸馏瓶内，加入10mL磷酸缓冲溶液，以一只盛有50mL硼酸吸收液的250mL锥形瓶收集馏出液。

蒸馏速度为6～8mL/min，至少收集150mL馏出液。

2. 蒸馏将蒸馏瓶加热至馏出物中不含氨，冷却后将蒸馏液倾出（留下玻璃珠）。

重复蒸馏两次，以确保水样中的氨氮被完全蒸馏出来。

3. 纳氏试剂显色取适量馏出液于比色管中，加入纳氏试剂，混匀后放置5分钟。

4. 分光光度法测定使用分光光度计在波长410~425nm范围内测定吸光度，根据标准曲线计算氨氮含量。

5. 自动测氮蒸馏系统与传统蒸馏方法的比较使用KDY-9820型凯氏定氮仪，采用自动测氮蒸馏系统进行氨氮测定，与传统蒸馏方法进行对比。

五、实验结果与分析1. 纳氏试剂分光光度法测定结果标准曲线的相关系数r值为0.9999，满足r>0.999要求。

考样均值为9.71mg/L，相对偏差为0.5%。

2. 自动测氮蒸馏系统与传统蒸馏方法的比较自动测氮蒸馏系统与传统蒸馏方法在氨氮测定结果上无显著差异。

自动测氮蒸馏系统具有操作简便、自动化程度高、效率高等优点。

六、实验结论1. 纳氏试剂分光光度法是一种快速、准确测定水中氨氮含量的方法。

二次供水检测原始记录
检验项目：氨氮检验日期：年月日
检验方法：纳氏试剂分光光度法温度：℃相对湿度： % 检验依据：《生活饮用水标准检验方法》GB/T 5750.5.9—2006
1.试剂
标准溶液：标准号：厂家：。

有效期：；标准浓度：ρ(NH3—N)= ；使用浓度：ρ(NH3—N)= μg/mL ；配制过程：取mL到mL容量瓶中，用纯水定容。

2. 仪器
全玻璃蒸馏器，500mL；具塞比色管，50mL；721分光光度计。

3.分析步骤
3.1 样品处理蒸馏
曲线图、公式及R见附页
4. 结果计算
氨氮计算公式：ρ(NH3—N) =m/V
ρ(NH3—N)—水样中氨氮的质量浓度，mg/L；
m—水样中氨氮的质量，μg；
V—水样体积，mL。

检验者：复核者：
日期：年月日日期：年月日
本法检出限：0.02mg/L
检验者：复核者：
日期：年月日日期：年月日。

1. 范围1.1 本方法规定了用纳氏试剂分光光度法测定水中的氨氮。

1.2 本方法适用于地下水、地表水、生活污水和工业废水中氨氮的测定。

1.3 当水样体积为50mL，使用20mm比色皿时，本方法检出限为0.025mg/L，测定下限为0.10mg/L，测定上限为2.0mg/L（均以N计）。

2. 参考标准水质氨氮的测定纳氏试剂分光光度法HJ 535-20093. 职责检测技术人员按本作业指导书对水样中氨氮进行分析检测。

4. 方法原理以游离态的氨或铵离子等形式存在的氨氮与纳氏试剂反应生成淡红棕色络合物，该络合物的吸光度与氨氮含量成正比，于波长420nm处测量吸光度。

5. 干扰及消除5.1 水样中含有悬浮物、余氯、钙镁离子等金属离子、硫化物和有机物时会产生干扰，含有此类物质时要作适当处理，以消除对测定的影响。

5.2 若样品中存在余氯，可加入适量的硫代硫酸钠溶液去除，用淀粉–碘化钾试纸检验余氯是否除尽。

在显色时加入适量的酒石酸钾钠溶液，可消除钙镁等金属离子的干扰。

若水样浑浊或有颜色时可用预蒸馏法或絮凝沉淀法处理。

6. 试剂除非另有说明，分析时所用试剂均为符合国家标准的分析纯化学试剂，实验用水为按6.1制备的水，使用经过检定的容量器皿和量器。

6.1 无氨水，在无氨环境中用纯水器法制备。

用市售纯水器直接制备。

或采用下述方法之一制备：6.1.1 离子交换法：蒸馏水通过强酸性阳离子交换树脂（氢型）柱，将流出液收集在带有磨口玻璃塞的玻璃瓶内。

每升流出液加10g同样的树脂，以利于保存。

6.1.2 蒸馏法：在1000mL的蒸馏水中，加0.1mL硫酸（ρ=1.84g/mL），在全玻璃蒸馏器中重蒸馏，弃去前50mL馏出液，然后将约800mL馏出液收集在带有磨口玻璃塞的玻璃瓶内。

每升馏出液加10g强酸性阳离子交换树脂（氢型）。

6.2 盐酸，ρ（HCl）=1.18g/mL。

6.3 硫酸，ρ（H2SO4）=1.84g/mL。

6.4 无水乙醇6.5 轻质氧化镁（MgO）：不含碳酸盐，在500 ℃下加热氧化镁，以除去碳酸盐。

_ 测试（可见分光光度法）记录SDC/DR-006-2015 A/1样品名称样品性状检测项目氨氮检测依据HJ535-2009仪器名称721G可见光光度计操作条件波长nm；比色皿mm仪器编号SDC-EP-005 室温℃；相对湿度%样品处理或分析步骤简述取经过除余氯和絮凝沉淀的预处理水样mL置于具塞比色管内，加入1.00mL酒石酸钾钠溶液混匀，再加入1.00mL纳氏试剂摇匀，放置10min。

后，在波长420nm下，以水做参比，测定其试样的吸光度。

标准溶液配制（标准物质证书号：）储备溶液中间溶液使用溶液配制时间/配置人标准溶液浓度1000mg/L 10.00mg/L配制方法称取0.7855g氯化铵溶解于水，移入250mL容量瓶中，用纯水稀释至标线。

吸取 5.00mL氨标准储备液于500mL容量瓶中，稀释至刻度线标准曲线绘制(定容体积：mL)序号0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 加入标液（mL ）标准溶液浓度/质量（）吸光度AA-A0线性方程相关系数R=样品测定样品编号取样量（g）G,（mL）V定容体积（mL）V1分取体积（mL）V2定容体积（mL）V3空白A0吸光度A补偿A1A-A0-A1测得值（）计算值（）平均值/报告值计算公式C=m/vM------由标准曲线上查得的氨氮质量；v------取样体积检测人：日期：复核人：日期：。

氨氮的测定（纳氏试剂光度法）原理：碘化汞和碘化钾的碱性溶液与氨反应生成淡红棕色胶态化合物，此颜色在较宽的波长范围内具有强烈吸收。

通常测量用波长在410-425nm范围。

本法最低检出浓度为0.025mg/L。

仪器：紫外分光光度计、PH计、100ml具塞量筒。

试剂（配制试剂及水样稀释均用无氨水）10%（m/v）硫酸锌溶液：称取10g硫酸锌溶于水稀释至100ml。

25%氢氧化钠溶液：称取25g氢氧化钠溶于水，稀释至100ml，贮于聚乙烯瓶中。

硫酸：ρ=1.84纳氏试剂：称取16g氢氧化钠，溶于50ml水中，充分冷却至室温。

另取7g碘化钾和10g碘化汞溶于水，然后将此溶液在搅拌下徐徐注入氢氧化钠溶液中，用水稀释至100ml，贮于聚乙烯瓶中，密塞保存。

酒石酸钾钠溶液：称取50g酒石酸钾钠溶于100ml水中，加热煮沸以除去氨，放冷，定容至100ml。

铵标准溶液：称取3.819g经100℃干燥过的氯化铵溶于水中，移入1000mI容量瓶中，稀释至标线，此溶液浓度为1000mg/L。

无氨水制备：每升蒸馏水中加0.1ml硫酸，在全玻璃馏器中重蒸馏，弃去50ml初馏液，接取其余馏出液于具塞磨口的玻璃瓶中，密塞保存。

步骤：预处理：取100ml水样于具塞量筒中，加入1ml10%硫酸锌溶液和0.1—0.2ml25%氢氧化钠溶液，调节PH至10.5左右，混匀。

放置使沉淀，用经无氨水充分洗涤过的中速滤纸过滤，并去初滤液20ml。

校准曲线的绘制：移取1ml铵标准液于100ml容量瓶中,用水稀释至标线,此溶液为10mg/L分别吸取1.0、3.0、5.0、7.0、10.0ml铵标准液于100ml容量瓶中加水稀释至标线，其含量分别为0.1mg/L、0.3mg/L、0.5mg/L、0.7mg/L、1.0mg/L，然后分别取以上铵标准液50ml水样于比色管中，加1.0ml酒石酸钾钠溶液，混匀，加1.5ml纳氏试剂，混匀，放置10分钟在波长420nm处，用光程10mm比色皿，经水为参比，测量出吸光度，测完试样后，紫外分光光度计会自动根据吸光度与氨氮的含量关系绘制曲线图，并保存在紫外分光光度计内（分光光度计的使用见6.15）。

氨氮的测定（纳氏试剂光度法）原理：碘化汞和碘化钾的碱性溶液与氨反应生成淡红棕色胶态化合物，此颜色在较宽的波长范围内具有强烈吸收。

通常测量用波长在410-425nm范围。

本法最低检出浓度为0.025mg/L。

仪器：紫外分光光度计、PH计、100ml具塞量筒。

试剂（配制试剂及水样稀释均用无氨水）10%（m/v）硫酸锌溶液：称取10g硫酸锌溶于水稀释至100ml。

25%氢氧化钠溶液：称取25g氢氧化钠溶于水，稀释至100ml，贮于聚乙烯瓶中。

硫酸：ρ=1.84纳氏试剂：称取16g氢氧化钠，溶于50ml水中，充分冷却至室温。

另取7g碘化钾和10g碘化汞溶于水，然后将此溶液在搅拌下徐徐注入氢氧化钠溶液中，用水稀释至100ml，贮于聚乙烯瓶中，密塞保存。

酒石酸钾钠溶液：称取50g酒石酸钾钠溶于100ml水中，加热煮沸以除去氨，放冷，定容至100ml。

铵标准溶液：称取3.819g经100℃干燥过的氯化铵溶于水中，移入1000mI容量瓶中，稀释至标线，此溶液浓度为1000mg/L。

无氨水制备：每升蒸馏水中加0.1ml硫酸，在全玻璃馏器中重蒸馏，弃去50ml初馏液，接取其余馏出液于具塞磨口的玻璃瓶中，密塞保存。

步骤：预处理：取100ml水样于具塞量筒中，加入1ml10%硫酸锌溶液和0.1—0.2ml25%氢氧化钠溶液，调节PH至10.5左右，混匀。

放置使沉淀，用经无氨水充分洗涤过的中速滤纸过滤，并去初滤液20ml。

校准曲线的绘制：移取1ml铵标准液于100ml容量瓶中,用水稀释至标线,此溶液为10mg/L分别吸取1.0、3.0、5.0、7.0、10.0ml铵标准液于100ml容量瓶中加水稀释至标线，其含量分别为0.1mg/L、0.3mg/L、0.5mg/L、0.7mg/L、1.0mg/L，然后分别取以上铵标准液50ml水样于比色管中，加1.0ml酒石酸钾钠溶液，混匀，加1.5ml纳氏试剂，混匀，放置10分钟在波长420nm处，用光程10mm比色皿，经水为参比，测量出吸光度，测完试样后，紫外分光光度计会自动根据吸光度与氨氮的含量关系绘制曲线图，并保存在紫外分光光度计内（分光光度计的使用见6.15）。