实验11水的细菌学检查

南昌大学实验报告学生姓名：学号：专业班级：实验类型：√验证□综合□设计□创新实验日期：实验成绩：实验十细菌菌落总数（CFU）的测定一、实验目的：1．学习水样的采取方法和水样细菌总数测定的方法。

2．了解培养基平板菌落计数原则二、实验基本原理：细菌菌落总数（CFU）是指1ml水样在营养琼脂培养基中，于37℃培养24h后所生长的腐生性细菌菌落总数。

它是有机污染程度的指标，也是卫生指标。

在饮用水中所测得的细菌菌落总数除说明水有机污染的程度外，还指示该饮用水能否饮用。

但还应当指出的是，水源水中的细菌菌落总数不能说明污染的来源。

因此，结合大肠菌群数以判断水的污染的安全程度就更全面。

我国现行生活饮用水的卫生标准（GB5749－2006）规定：细菌菌落总数在1ml自来水中不得超过80个。

细菌种类很多，有各自的生理特性，必须用适合它们的培养基才能将它们培养出来。

然而在实验工作中不易做到，通常用一种适合大多数细菌生长的培养基培养腐生性细菌，以它的菌落总数表明有机污染程度。

三、主要仪器设备及耗材：电热干燥箱，高压蒸汽灭菌锅，电热培养箱，恒温水浴，冰箱，菌落计数器，放大镜，肉膏蛋白胨脂培养基，灭菌水，灭菌三角烧瓶，灭菌的带玻璃塞瓶，灭菌培养皿，灭菌吸管，灭菌试管等。

四、实验步骤：1．水样的采取供细菌学检验用的水样，必须按无菌操作的基本要求进行采样，并保证在运送，贮存过程中不受污染。

为了要正确反映水质在采样时的真实情况，水样在采取后应立即送检，一般从取样到检验不应超过4小时。

条件不允许立即检验时，应存于冰箱，但也不应超过24小时，并应在检验报告单上注明。

（1）生活饮用水（自来水）先将自来水龙头用火焰烧灼3分钟灭菌，再开放水龙头使水流5分钟后，用灭菌三角烧瓶接取水样，以待分析。

（2）池水、河水或湖水应取距水面10—15㎝的深层水样，先将灭菌的带玻璃塞瓶，瓶口向下浸入水中，然后翻转过来，除去玻璃塞，水即流入瓶中，盛满后，将瓶塞盖好，再从水中取出，立即返回实验室检查，否则需放入冰箱中保存。

实验十水的卫生细菌学检验（综合）a)水中大肠菌群数的测定一、目的要求学习大肠菌群数的检测原理和方法。

二、实验材料样品: 水样2.培养基：乳糖胆盐发酵管(单料及双料), 伊红美兰琼脂(EMB)平板, 乳糖发酵管。

3.其他：显微镜，酒精灯，无菌吸管(10m1、1m1)，接种环，载玻片等三、基本原理水中的病原菌多数来源于病人和病畜的粪便。

由于病原菌的数量少, 检测过程复杂, 因此, 直接测它们的存在是非常困难的专业化工作。

由于大肠菌群在粪便中数量大, 在体外存活时间与肠道致病菌相近, 且检验方法比较简便, 因此一般采用测定大肠菌群或大肠杆菌的数量来作为水被粪便污染的标志。

如果水中大肠菌群的菌数超过一定的数量, 则说明此水已被粪便污染, 并有可能含有病原菌。

大肠菌群的定义是指一群好氧和兼性厌氧、革兰氏阴性、无芽孢的杆状细菌, 并能在乳糖培养基中, 经37℃24~48h培养能产酸产气。

我国规定每升自来水中大肠菌群不得超过3个。

检测大肠菌群的方法有稀释培养法和膜滤法两种, 其中稀释培养法是标准分析法, 为我国大多数卫生单位和水厂所使用。

它包括初发酵试验、平板分离和复发酵试验三个部分。

四、方法与步骤1.采样: 取100ml磨口带塞玻璃瓶, 包扎后, 干热灭菌备用。

2.取自来水样时, 至少应先放水5min, 以冲去龙头口所带的微生物, 获得主流管中有代表性的水样。

取样时, 用右手握瓶, 左手启开瓶塞, 用覆盖瓶口的纸托住瓶塞, 收集样品后, 连同覆盖纸一起将瓶口塞好, 并用线绳在原处扎好。

注意手指不得触及瓶口内部。

在静水中取样时, 先用右手揭去塞子, 瓶口朝下浸入水下约30cm处, 然后将瓶子反转过来, 待水注满后, 取出塞好瓶口。

如果水在流动, 瓶口必须迎着水流, 以免手上的细菌被水冲进瓶子。

3.水样放置过程中, 内含的细菌数目和类型会发生变化, 所以要求水样品应于6~10℃贮存,并不超过6h。

4.初发酵试验：吸取待检样品接种于乳糖胆盐发酵管内, 10ml接种量采用双料发酵管, 而lml及lml以下接种量采用单料管。

一般生菌数检验方法
一般生菌数检验方法如下：
1.制备10倍品匀液。

按上一步操作程序，每递增稀释一次，换用1次1mL无菌吸管或吸头。

2.取样并制备平板。

同时，分别吸取1mL空白稀释液加入两个无菌平皿内空白对照。

及时将15mL-20mL冷却至46℃的平板计数琼脂培养基（可放置于46℃士1℃恒温水浴锅中保温）倾注平皿，并转动平皿使其混合均匀。

3.待琼脂凝固后，将平板翻转，36℃士1℃培养48h+2h。

如果样品中可能含有在琼脂培养基表面弥漫生长的菌落时，可在凝固后的琼脂表面覆盖薄层琼脂培养基（约4mL），凝固后翻转平板，按2.1条件进行培养。

4.平板上菌落计数可使用自动化菌落计数仪，也可用肉眼观察（必要时可用放大镜观察）记录培养基上菌落数量和相应的稀释倍数。

选取菌落数在30-300CFU之间、无蔓延菌落生长的平板计数菌落总数。

以上就是一般生菌数检验方法，希望对解决您的问题有所帮助。

最新水质实验报告
实验目的：
评估当前水源的水质状况，检测是否存在污染物质，确保水质符合饮
用水标准。

实验日期：
2023年4月15日
实验地点：
城市中央水库
实验方法：
采用标准水质检测方法，包括但不限于色度、浑浊度、pH值、溶解氧、生化需氧量（BOD）、化学需氧量（COD）、重金属含量（如铅、汞、镉）、细菌总数和特定病原体等指标进行检测。

实验结果：
1. 色度：水源无色透明，无可见悬浮物，符合《生活饮用水卫生标准》要求。

2. 浑浊度：平均值为10 NTU，低于标准限值20 NTU，表明水质清澈。

3. pH值：测量值为7.2，处于6.5-8.5的适宜范围内，表明水质中性
偏碱。

4. 溶解氧：平均值为9.5 mg/L，高于最低限值7 mg/L，有利于水生
生物的生存。

5. 生化需氧量（BOD）：平均值为2 mg/L，低于标准限值3 mg/L，表
明有机物含量较低。

6. 化学需氧量（COD）：平均值为15 mg/L，低于标准限值30 mg/L，
表明水质未受明显有机污染。

7. 重金属含量：铅、汞、镉等重金属含量均低于国家规定的限值，未检测到异常。

8. 细菌总数：检测结果显示细菌总数低于标准限值，未发现致病性细菌。

结论：
根据本次实验结果，城市中央水库的水质良好，各项指标均符合国家饮用水标准。

建议继续定期监测，确保水质安全。

同时，加强水源地保护，防止潜在的污染风险。

水质细菌总数的测定菌落计数1.适用范围本方法适用于测定饮用水、水源水、地表水细菌总数的测定。

2.原理平板计数法是测定水中需氧菌、兼性厌氧菌和异养菌密度的方法。

因为细菌在水中能以单独个体、成双成对、链状、成簇等形式存在，而且没有任何单独一种培养基或一套物理、化学条件能满足一个水样中所有细菌的生理要求。

所以，由此法所得的菌落数可能要低于真正存在的活细菌的总数。

3.仪器高压蒸汽灭菌器电热干燥箱恒温培养箱冰箱解剖镜。

采样瓶、三角烧瓶、试管、平皿（直径9cm）、刻度吸管等器皿121°C（20min）高压蒸汽灭菌后于电热干燥箱中烘干。

培养基营养琼脂培养基：市售营养琼脂培养基，按说明配制，装于三角烧瓶中，经121C高压蒸汽灭菌15min,经无菌性检验和标准菌株检验后，贮存于暗处备用。

4.步骤4.1选择稀释度稀释度要选择适宜，以期在平皿上的菌落总数介于30〜300之间。

大多数饮用水水样，未经稀释直接接种1mL,所得的菌落总数可适于计数。

4.2水样的稀释方法①将水样用力振摇20〜25次，使可能存在的细菌凝团成分散状。

②以无菌操作方法吸取1mL充分混匀的水样，注入盛有9mL灭菌水的试管中，混匀成1：100稀释液。

按同法依次稀释成1：1000、1：10000稀释液（稀释倍数按水样污浊程度而定）。

注意：吸取不同浓度的稀释液时，必须更换吸管。

4.3操作方法①以无菌操作方法用1mL灭菌吸管吸取充分混匀的水样或2〜3个适宜浓度的稀释水样ImL，注入灭菌平皿中，倾注约15mL已融化并冷却到45°C左右的营养琼脂培养基，并立即旋摇平皿，使水样与培养基充分混匀。

每个水样应倾注两个平皿。

②待琼脂冷却凝固后，翻转平皿，使底面向上，置于37C恒温箱内培养24h,进行菌落计数。

4.4菌落计数培养之后，立即进行平皿菌落计数。

如果计数必须暂缓进行，平皿需存放于5〜10C冰箱内，且不得超过24h。

但是不可以使这种做法成为常规的操作方式。

水质类卫生细菌学检测原始记录
样品编号 第 页,共 页 样品名称： 样品状态： □正常 □异常 实验室温度： ℃ 湿度： % 仪器名称： 电热恒温培养箱 仪器型号： 360型 仪器编号：
检测依据： GB/T 5750.12-2006 生活饮用水标准检验法
微生物指标
检测程序及结果：
总大肠菌群（滤膜法）：取100mL 水样经微孔滤膜抽滤，将滤膜贴于品红亚硫酸钠培养基，37℃ 24±2h
耐热大肠菌群：取100mL 水样经微孔滤膜抽滤，将滤膜贴于MFC 培养基上，隔水式培养箱内44.5℃ 24
检测起止时间 年 月 日 时 起 年 月 日 时止
检测者： 复核者：
检测原始记录、检测报告副本、样品检测流转单等合并归档保存。

水中细菌总数的检测1.实验目的1、学习并掌握水的细菌学检测方法2、了解水质状况与细菌数量在饮用水检测中的重要性。

2.菌落总数standard plate-count bacteria水样在营养琼脂上、有氧条件下37°C培养48 h后,所得1 mL水样所含菌落的总数.细菌总数是评价水质污染程度的主要卫生指标，所测定的细菌总数增多说明水被生活废弃物污染。

由于结果不能说明污染的来源，因此必须结合总大肠菌群数来判断污染源和安全程度。

3.培养基与试剂2.1 营养琼脂成分2.2 制法：根据实际需要量,按照上述配方称取各成分混合后，加热溶解，调整pH为7.4～7。

6,分装于玻璃容器中（如用含有较多杂质的琼脂，应先过滤.），经103。

43 kPa（121°C，15 lb）湿热灭菌20 min，储存于冷暗处备用。

4.仪器和材料4.1仪器:高压蒸汽灭菌器、干热灭菌箱、水热恒温培养箱、电炉、天平、冰箱.4.2材料：灭菌平皿（直径9 cm）、灭菌试管、刻度吸管、三角烧瓶、采样瓶、酒精灯、消毒水、镊子、试管架等。

4.3放大镜或菌落计数器、pH计或精密pH试纸、火柴或打火机。

5.样品采集5.1自来水的取样：先将自来水龙头用酒精棉擦拭，再用酒精灯火焰灭菌，打开龙头放水3—5 min，用无菌空三角瓶接取水样200 ml.5.2纯净水取样:用消毒酒精棉擦拭纯水机出口后，先放走部分水，再用无菌空三角瓶接取水样200毫升.5.3地表水的取样:应取距水面10-15 cm的深层水样，先将灭菌的带玻璃塞瓶，瓶口向下浸入水中,然后翻转过来，除去玻璃塞，水即流入瓶中，盛满后,将瓶塞盖好，再从水中取出，最好立即检查,否则需放入冰箱中保存。

6.检验步骤6.1生活饮用水（自来水、纯净水）：以无菌操作方法用灭菌吸管吸取1 mL充分混匀的水样，注入灭菌培养皿中，倾注约15 ml已融化并冷却到45°C左右的营养琼脂培养基，并立即旋摇平皿，使水样与培养基充分混匀。

水体细菌总数实验报告实验目的：研究水体中细菌的总数。

实验原理：水体中的细菌可以通过进行菌落计数的方法来确定数量。

菌落计数是一种常用的细菌计数方法，可以通过培养细菌在琼脂上形成的菌落来推测水体中的细菌数量。

实验过程主要包括取样、培养、计数等步骤。

实验材料：1. 取样容器：玻璃瓶或塑料容器。

2. 高温灭菌器：用于灭菌取样容器和培养用具。

3. 培养基：如琼脂培养基。

4. 培养皿：用于培养细菌。

5. 显微镜和培养皿计数器：用于观察和计数细菌菌落。

实验步骤：1. 高温灭菌：将取样容器放入高温灭菌器中，以杀灭所有可能存在的细菌。

2. 取样：使用洁净的容器，在研究对象的水体（如湖泊、河流、自来水等）中取样。

同时，注意避开周围的污染源，以确保取样的准确性。

3. 培养：将取样溶于适量的无菌水中，制备不同的稀释液。

如取1ml取样溶液与9ml稀释液混合，得到10^-1稀释液。

再取1ml 10^-1稀释液与9ml稀释液混合，得到10^-2稀释液，以此类推。

然后，将不同浓度的稀释液分别均匀涂布于琼脂平板培养基上，并用无菌铁环均匀划过，使细菌均匀生长。

4. 孵育：将培养皿密封，并置于恒温培养箱中，在适宜的温度下孵育。

5. 计数：在一定孵育时间后，取出培养皿，使用显微镜观察细菌生长情况，并使用培养皿计数器进行菌落计数。

将各个稀释液中的菌落个数相加，得到相应浓度下的菌落总数。

6. 统计分析：将不同浓度下的菌落总数乘以相应的稀释倍数，即可得到水体中细菌的总数。

实验注意事项：1. 所有工具和试剂必须经过高温灭菌处理，以减少实验中的细菌污染。

2. 在取样时，应避免接触周围环境的物质，保持取样器具的干净无菌。

3. 在计数过程中，应注意观察显微镜下的细菌形态和特征，避免误判。

4. 实验过程中要遵守实验室安全操作规范，确保个人安全。

实验结果：根据实验步骤和计数结果，我们可以得到不同浓度下的菌落总数，并根据稀释倍数计算得到水体中细菌的总数。

水质的细菌学检查水质的细菌学检查一、目的要求(一)学习水质的细菌学检查法(二)了解水质状况同细菌数量的关系及大肠菌群的数量在饮水中的重要性。

二、基本原理检测水中的细菌数量是评价水质状况的重要指标之一。

饮水是否合乎卫生标准，需要进行水中细菌数量及大肠菌群数量的测定。

大肠菌群是肠道最普遍存在和数量最多的一群细菌，由于大肠菌群是一群能发酵乳糖的革兰氏阴性、无芽孢杆菌，它们在乳糖培养基中经37℃培养24小时即能产酸、产气，所以常将其作为粪便污染的标志。

饮用水一般规定：1毫升自来水中总菌数不得超过100个；1000毫升自来水中大肠菌群数不得超过3个。

三、实验材料培养基及器皿、牛肉膏蛋白胨培养基、乳糖蛋白胨发酵管（内倒置小管）、三倍乳糖蛋白胨发酵管（内倒置小管）、伊红美蓝琼脂培养基、无菌空瓶、无菌水、无菌培养皿、移液管、试管。

四、实验内客(一)采取水样1、自来水：从学校各生活区取样。

先将自来水龙头用火焰灭菌,再开放水龙头使水流1—2分钟后，用无菌空瓶接取水样。

2、池水、湖水或河水：用无菌空瓶取距水面10—15厘米深层水样。

水样采取后应立即检验，不得超过4小时。

(二）水中细菌总数测定l、自来水：稀释水样：原水样和10-1 水样，用无菌移液管分别吸取l毫升原水样和10-1水样，分别注入二个无菌培养皿中。

每皿各加13--15毫升已融化并冷却到4 5-- 50℃的牛肉膏蛋白胨培养基，轻轻旋转，使培养基与水样充分混匀，待凝固后，将平板倒置于37℃恒温箱内，培养24小时进行菌落计数。

制作培养基方法、消毒灭菌、接种、计数皆参照参微生物学实验指导，具体如下：培养基制作：实验五、培养基的制备培养基配方：附录二、常用培养基之一培养基灭菌：实验六、灭菌与消毒水样接种：实验七、土壤微生物的分离与测数细菌总数测定：实验七、土壤微生物的分离与测数2、池水、湖水或河水等。

稀释水样：稀释倍数视水样污浊程度而定，使水样培养后每个平板中的菌落数在30--300之间的的稀释度最为合适。

临床标本的细菌学鉴定实验报告临床标本的细菌学鉴定实验报告一、引言在临床医学中，细菌学鉴定是一项至关重要的实验。

通过对临床标本进行细菌学鉴定, 可以帮助医生准确诊断和治疗感染性疾病。

本实验报告将对临床标本的细菌学鉴定进行评估和讨论，旨在加深我们对该实验方法的理解，并提供有关细菌学鉴定的综合性知识。

二、细菌学鉴定的目的和意义细菌学鉴定作为一种直接、快速、可靠的诊断方法，对临床诊断和治疗起到重要作用。

细菌学鉴定的主要目的是准确确定临床标本中存在的细菌种类，以便为医生提供科学依据。

通过细菌学鉴定，我们能够了解细菌的形态、结构、生物学特性以及对药物的敏感性，从而指导医生选择合适的抗生素进行治疗。

三、细菌学鉴定的方法1. 标本采集：选择适当的临床标本，按照规范采集方法采集标本。

常见的标本包括血液、尿液、呼吸道分泌物等。

2. 标本处理：对采集的标本进行适当的处理，如培养、染色等。

培养可以通过将标本划取于培养基上进行，以便细菌在适宜环境下生长繁殖，从而进行进一步的鉴定。

3. 微生物学特性观察：观察培养基上出现的微生物种类及其生长情况。

根据细菌的形态、结构、染色特性等，可以初步鉴定细菌的属种。

4. 生理生化特性测试：通过一系列生化试剂和培养基，检测微生物的生理特性，如产气、产酸、氧需求等。

根据生化反应的结果，可以进一步缩小细菌的鉴定范围。

5. 抗生素敏感性测试：选取不同类型的抗生素，用其调配成不同浓度的药品，将细菌接种在含有不同药物的培养基上进行培养。

观察细菌的生长情况，以判断其对抗生素的敏感性。

四、个人观点和理解在细菌学鉴定实验中，我认为标本采集的规范性非常重要。

只有正确采集到具有代表性的标本，才能更准确地进行鉴定并提供有效的治疗建议。

由于抗生素耐药性的增加，抗生素敏感性测试也变得越来越重要。

通过该测试，我们可以为医生提供更精确的抗生素选择，避免不必要的药物使用和抗药性的进一步扩散。

总结回顾：本实验报告全面评估了临床标本的细菌学鉴定方法，并深入探讨了如何通过观察微生物学特性、生理生化特性和抗生素敏感性来鉴定细菌种类。

实验室生活饮用水微生物检测SOP（一）引言概述：实验室生活饮用水微生物检测SOP是为了确保实验室饮用水的安全与卫生，检测水中的微生物污染情况，并采取相应的措施进行处理。

本文将详细介绍实验室生活饮用水微生物检测的步骤和要点。

正文：一、实验室生活饮用水微生物检测前的准备工作1. 准备所需的检测设备和试剂，包括培养基、平板计数器、显微镜等。

2. 清洗和消毒检测设备，确保设备的洁净和无菌。

3. 确保实验室供水管道的安全和干净，避免水源污染。

二、水样采集和处理1. 选择合适的水样采集器具，如钢质水样容器或无菌采样瓶。

2. 在采集水样前进行必要的洗手和佩戴消毒手套，以避免污染水样。

3. 选取水源合适的位置采集水样，尽量避免水源受到外界污染。

4. 采集水样后立即送至实验室进行处理，避免样品在运输过程中受到污染。

三、水样预处理1. 对水样进行过滤，以去除大颗粒物质和悬浮物。

2. 进行稀释处理，确保微生物数量在检测范围内。

3. 根据需要进行pH调节或添加抑菌剂，以保证后续检测的准确性和可靠性。

四、微生物检测方法1. 采用培养法进行微生物定量分析，包括总菌落计数和特定菌群检测。

2. 根据需求选择合适的培养基和培养条件，如温度、pH值等。

3. 加入样品到培养基中，进行平板计数或液体培养，并进行恰当的菌落计数。

4. 进行特定菌群的检测，如大肠杆菌、沙门氏菌等，采用相应的培养基和检测方法。

5. 采用显微镜观察法进行微生物形态和特征的检测，确保检测结果的准确性。

五、结果分析和处理1. 根据检测结果进行微生物数量统计和分析，比较检测结果与相关标准的符合情况。

2. 如发现微生物污染超过标准限值，及时采取措施进行处理和消毒。

3. 记录检测结果，并保留相关文件和数据，以备日后参考和审查。

总结：实验室生活饮用水微生物检测SOP的实施可以确保实验室饮用水的卫生安全。

通过准备工作、水样采集和处理、微生物检测方法的选择和结果分析处理，可有效地监测和控制实验室饮用水中的微生物污染，保障实验室工作人员的身体健康和实验室环境的卫生安全。

水中检测细菌的实验原理实验所需材料及设备：1.水样：待检测的水样（例如自来水、河水、湖水等）；2.培养基：含有营养物质的液体或固体培养基；3.培养皿：用于培养细菌的平板状容器；4.培养箱：提供合适的温度和湿度条件，促进细菌生长；5.显微镜：用于观察细菌的形态和结构；6.毛细管或塑料平板：用于从水样中吸取适量的样品。

实验步骤：1.样品采集：首先需要采集待检测的水样。

可以从水源中直接取样或者从自来水龙头中采集。

2.稀释：取一定量的水样，进行适当的稀释。

这是因为水样中的细菌数量通常非常庞大，稀释可以使细菌数量降低到可以计数的范围内。

3.培养：将稀释后的水样均匀地分布在培养基的表面上。

对于液体培养基，可以用毛细管从水样中吸取适量的样品滴入培养基中。

对于固体培养基，可以使用塑料平板，将样品均匀地涂抹在培养基表面上。

4.培养条件：将培养基置于培养箱中，在适当的温度和湿度下培养一定的时间。

细菌通常在合适的温度和湿度下生长得更快。

5.观察：将培养后的培养皿置于显微镜下观察细菌的形态和结构。

通过观察细菌的形态可以初步判断细菌的种类。

6.计数：使用显微镜、计数盘或其他适当的方法统计培养皿上的细菌数量。

这可以帮助测定水样中细菌的浓度。

7.标识：根据初步的形态观察和计数结果，可以将不同形状、颜色等特征的细菌标记出来。

实验原理解释：在实验中，将采样的水样分布在含有营养物质的培养基上，并提供适当的温度和湿度条件，以促进细菌的生长。

培养基中的营养物质为细菌提供生长所需的营养元素。

根据细菌的不同需求，可以选择不同的培养基。

经过一段时间后，细菌会在培养基上生长形成可见的菌落。

根据菌落数量的多少，可以初步判断水样中的细菌浓度。

在观察菌落后，可以通过显微镜观察细菌的形态和结构，并进一步确定细菌的种类。

值得注意的是，细菌只占水样中微生物的一小部分，仍然存在许多其他的微生物如真菌和病毒等。

因此，细菌检测只是微生物检测的其中一种方法。

为了全面评估水质，常常需要采用更多的方法和技术。