铈配合物与人血清白蛋白相互作用的研究

中药有效成分与人血清白蛋白相互作用研究的开题报告一、研究背景及意义中药作为传统中医学的重要组成部分，已经被广泛地运用于临床治疗。

中药有效成分的药效成分主要是由多种天然物质组成，其中一些有效成分分子结构相对分子量较小，容易被人体代谢，有效成分的药效水平将受到人体吸收、分布、代谢和排泄的影响。

因此，中药有效成分的药效测定成为中药研究领域的重要方向。

而在中药药理研究中，人血清白蛋白已经被证明可以广泛参与许多药物的代谢和药效。

这些药物可能会与血清白蛋白结合，并由此发挥其药理活性。

因此，了解中药有效成分与人血清白蛋白相互作用的机制，对于中药的药效评估和安全性探讨具有重要的理论和实际意义。

二、研究问题与目标2.1 研究问题中药有效成分与人血清白蛋白相互作用的影响机制和影响程度，以及中药有效成分与人血清白蛋白的相互作用是否影响中药的药效和安全性。

2.2 研究目标1）研究中药有效成分与人血清白蛋白的相互作用情况。

2）探究不同因素对中药有效成分与人血清白蛋白相互作用的影响，如pH值、温度等。

3）研究相互作用对中药药效的影响。

4）找到一些能够增强或减轻中药有效成分与人血清白蛋白相互作用的方法。

三、研究方法3.1 中药有效成分提取工作步骤包括药材选择、药材制备、提取条件的优化等。

将选定的药材粉末，根据常规提取方法，在不同的溶剂、不同的提取温度、提取时间、提取剂和浓度下进行提取实验。

最后利用高效液相色谱仪等仪器对提取出的中药有效成分进行分离和纯化。

3.2 确定人血清白蛋白通过血清分离方法，采用离心分离血浆，将血浆样品获得血清，采用蛋白质电泳等方法进行分离和鉴定，确定人血清白蛋白。

3.3 研究相互作用情况采用光谱学、分子模拟等方法，研究中药有效成分与人血清白蛋白的相互作用情况，明确不同物质作用于不同位点的效应，从而判断中药有效成分与人血清白蛋白的相互作用机制和有效成分与人血清白蛋白相互作用的情况。

3.4 研究相互作用对药效的影响利用分子模拟和分子对接方法等，研究中药有效成分与人血清白蛋白相互作用对中药药效的影响，从而探究中药有效成分与人血清白蛋白相互作用机理。

药物与人血清白蛋白相互作用的研究作者：于雪辛莹娟高茜来源：《科技风》2016年第15期摘要：研究药物与血清蛋白结合规律是了解药物在体内的分布、药效、药代动力学等方面的基础，具有非常重要的指导意义，随着生命科学、医学的快速发展，药物与蛋白相互作用研究方法也在不断更新变化。

本文从药物-血清蛋白相互作用的研究现状以及研究方法两方面进行介绍。

关键词：药物；人血清白蛋白；相互作用人血清白蛋白，是血浆中含量最丰富的蛋白，作为药物的载体，能够广泛结合多种药物、许多内源性和外源性物质，将其贮存、运输直至遍及全身各个部位，进而发挥药效。

因此，了解药物-血清蛋白的结合规律可以直接帮助我们了解药物在生物体内的分布、转运、药效、代谢以及毒副作用等方面的信息。

特别是在多种药物与蛋白结合时会产生彼此间的协同、抑制等生理作用，因此该研究在联合用药方面也可以提供一定的理论依据和指导[ 1 ]。

1 人血清白蛋白人血清白蛋白（HSA）是由585个氨基酸组成的单条多肽链，由具有相似螺旋体的domainⅠ、domainⅡ和domainⅢ三个结构域组成的三维球状结构，如图1所示， domainⅡ和domainⅢ中存在的sub domain A和subdomain B两个亚域，是多种物质结合的区域所在[ 2 ]。

HSA上具有两类四个亲和位点，其中高亲和位点两个：Sudlow siteⅠ（warfarin，华法林位点）、Sudlow siteⅡ（indole，吲哚位点）；两个低亲和位点：tamoxifen位点（他莫昔芬位点）和digitoxin位点（毛地黄毒苷位点）。

2 研究内容目前药物-蛋白质相互作用的研究思路可以用How many？ How tightly？ Where ？ why？[ 3 ] 这四个问题来概况。

How many？结合多少？是要获取二者相互作用定量关系，可以通过测定药物-蛋白质相互作用的结合常数、结合位点数等参数实现。

How tightly？结合力怎样？通常我们测定二者形成的复合物的解离常数，来考察药物-蛋白质结合作用的强弱程度。

姜黄素钐配合物与牛血清白蛋白相互作用研究方瑞萍;陈宁生;施金才【摘要】The binding of curcumin-samarium coordination and bovine serum albumin（BSA） was investi- gated by fluorescence method. According to the fluorescence quenching effect of the complex-BSA, the variable-temperature experiments were finished, from which the binding constants, the number of binding sites and the values of thermodynamic parameters were obtained. The quenching mechanism and the type of binding force were inferred. With the theory of forster energy transfer the distance was calculated. The probe was used for positioning and the synchronous fluorescence spectroscopies were scanned to monitor the effect of the complex on BSA. The results showed that the complex quenched the intrinsic fluorescence of BSA mainly by a staticprocess;meanwhile the non-radiative energy transfer occurred. △Hθ and △sθ〈0 , suggesting van der Waals forces and hydrogen bonding was the main binding force. The binding occurred in the Site II of BSA molecular and the distance was 2.4 nm. The conformation of BSA molecu- lar was modified by the complex,which had a greater effect on tryptophan residues.%应用荧光法研究了姜黄素钐配合物与牛血清白蛋白（BSA）的结合反应．根据配合物对BSA的荧光猝灭效应，利用变温试验，求得相互作用的结合常数、结合位点数及热力学参数，由此推测猝灭机理和结合力类型；依据Forster能量转移理论计算结合距离；并利用探针进行结合点定位；用同步荧光光谱确定配合物对牛血清白蛋白结构的影响．结果表明，姜黄素钐配合物对BSA的内源荧光猝灭主要以静态方式，同时发生非辐射能量转移；由△Hθ和△sθ〈0推测范德华力与氢键是主要结合力；配合物在BSA分子的SiteⅡ位结合，结合距离为2．4nm；配合物改变了BSA分子构像，对色氨酸残基影响更大．【期刊名称】《安徽工程大学学报》【年(卷),期】2012(027)002【总页数】4页(P27-30)【关键词】姜黄素;钐;牛血清白蛋白;荧光;紫外可见光谱【作者】方瑞萍;陈宁生;施金才【作者单位】安徽工程大学生物与化学工程学院,安徽芜湖241000;安徽工程大学生物与化学工程学院,安徽芜湖241000;安徽工程大学生物与化学工程学院,安徽芜湖241000【正文语种】中文【中图分类】O657.39稀土离子具有抗炎、杀菌、抗癌、抗凝血等药理作用［1］，近年来已广泛应用于工、农业和医学.姜黄素是自然中对称的β－二酮类有色物质，β－二酮的酮式－烯醇式之间的异构化转变赋予其许多独特的光学性质和配位化学性质，已被广泛用作色素、食品添加剂及调味品，其药理作用广、毒性低并具有抗肿瘤活性［2］.研究表明，姜黄素稀土配合物在抗氧化活性和抑菌等药理性能较姜黄素有所提高，对某些疾病和肿瘤具有优良的潜在药用价值［3］.研究蛋白质与稀土配合物的相互作用，为阐明其作用机制、药效、毒理和设计新药提供参考.目前已有文献研究了药物金属配合物与蛋白质相互作用［4］，姜黄素稀土配合物的研究主要集中在合成和性能测试，与蛋白质的结合反应未见报道.牛血清白蛋白（BSA）与人血清白蛋白（HSA）的氨基酸序列相似［5］，且含量丰富、成本低，作为研究的蛋白模型.本文利用荧光法结合紫外可见光谱等技术研究了姜黄素钐配合物与BSA的相互作用，测定了结合常数、结合位点数和热力学参数，并判断结合力类型、结合点，以及配合物对BSA的构象影响.1 实验部分1.1 主要仪器与试剂F－4500荧光分光光度计（日本日立公司）；UV－757CRT紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限公司）；BSA（国药集团，1.0×10－5 mol/L），低温保存；姜黄素（国药集团）；姜黄素钐配合物（按文献［6］自制，经表征，配合物结构和文献一致.实验用乙醇溶解，其浓度为1.0×10－4 mol/L），避光低温保存；保泰松（Alfa Aesar公司，1.0×10－4 mol/L）；氟灭酸（Acros Orcanics公司，1.0×10－4 mol/L）；NaCl（0.1 mol/L），Tris－HCl溶液（p H＝7.4）；实验用水为二次蒸馏水，其他试剂均为分析纯.1.2 实验方法取1.0 mL BSA溶液、1.0 mL NaCl溶液、1.0 mL Tris－HCl溶液和不同体积的配合物溶液于10 mL比色管中，用二次蒸馏水标定至刻度，摇匀、静置，待测.荧光光谱：光电管电压400 V、响应速度2.0 s、波长扫描速度1 200 nm/min，激发和发射狭缝宽10 nm，激发波长280 nm，待测液置于1 cm石英比色皿中，扫描300～500 nm荧光光谱.分别设定Δλ＝15 nm和60 nm，记录250～400 nm同步荧光光谱.紫外可见光谱：于1 cm石英比色皿中加入待测液，以空白溶液为参比，扫描200～600 nm吸收光谱.由于体系具有“内滤光效应”，荧光强度用下列公式予以校正［7］：式中Fcor和Fobs分别是校正后和观察到的荧光强度，Aex（0.086）和Aem（0.079）是配合物溶液分别在激发波长和发射波长处的吸光度值.本文下述荧光强度均已校正.2 结果与讨论2.1 荧光猝灭光谱图1为不同浓度配合物和BSA溶液的荧光光谱图.由图1可知，BSA的荧光强度随着配合物浓度增大而不断降低，且发射峰位置由352 nm（纯BSA）逐渐蓝移至341 nm.表明配合物使BSA内部氨基酸周围的微环境发生了变化，使其疏水性增强，为配合物与BSA发生相互作用提供了证据.2.2 猝灭机理根据猝灭效率遵循的Stern－Volmer方程［8］：式中F0和F分别表示未加入和加入猝灭剂时的相对荧光强度，Ksv表示动态猝灭常数，Kq表示双分子猝灭过程的速率常数，τ0为不存在猝灭剂分子时荧光分子的平均寿命（τ0＝10－8 s），［Q］表示猝灭剂的浓度.作F0/F～［Q］关系图（见图2），不同温度下Ksv和Kq的值列于表1.由表1可知，Kq大于2.0×1010 L/mol/s［8］，且Ksv随着温度升高有降低趋势，不符合动态猝灭特征，故姜黄素钐配合物对BSA的猝灭可初步判断是由于生成复合物而引起的荧光猝灭，属静态猝灭，温度升高可能引起复合物的稳定性下降，从而减小静态猝灭的程度.表1 不同温度下配合物对BSA的猝灭方程及猝灭常数T/K quenching equations Ksv×10－4（L/mol）Kq×10－12（L/mol/s）RSDb 298 F0/F＝0.916 1＋0.579 6［Q］5.796 5.796 0.992 1 0.077 303 F0/F＝1.038＋0.351 9［Q］3.519 3.519 0.999 3 0.014 308 F0/F＝1.079＋0.255 5［Q］2.555 2.555 0.998 3 0.015 310 F0/F＝1.095＋0.211 8［Q］2.118 2.118 0.998 2 0.0132.3 结合常数和结合位点数由于姜黄素钐配合物对BSA属静态猝灭，又假设生物大分子有一类相互独立的结合位，并有n个独立的结合位点，且BSA的荧光强度与游离浓度成正比，根据方程［9］：作log［（F0－F）/F］～log［Q］关系图并线性拟合，由直线的截距和斜率可分别得到Kb和n，结果见表2.由图3和表2可知，Kb随T升高有所减小，说明生成的新复合物稳定性随T升高而下降，进一步说明猝灭过程为静态猝灭.各温度下n均接近于1，说明配合物和BSA只有一个结合位点，即配合物与BSA形成1∶1的复合物.表2 不同温度下配合物－BSA的结合常数、结合位点数和热力学参数298 4.986 9.683 1.056 0.997 1－24.05 303 4.124 1.331 0.904 9 0.999 4－19.89－255.9－778.9 308 3.562 0.364 7 0.805 6 0.999 0－16.00 310 3.187 0.153 8 0.737 5 0.997 6－14.442.4 结合作用力根据ROSS等理论［10］，在小分子与生物大分子相互作用过程中，它们的结合力主要类型有：疏水作用力、静电引力、范德华力和氢键作用力等.当温度变化不大时，反应的焓变ΔHθ可看作常数，根据van＇t Hoff方程和式作图ln kb～T－1（见图4）.求得ΔHθ、ΔSθ和ΔGθ，结果见表2.由表2知ΔHθ＜0及ΔSθ＜0，根据ROSS等理论可判断出两者主要是以范德华力与氢键作用力为结合的驱动力. 2.5 结合距离根据Forster偶极－偶极非辐射能量转移原理，蛋白质与小分子发生非辐射能量转移需满足以下3个条件：（1）供能体能够发射荧光；（2）供能体的发射光谱和受能体的吸收光谱有足够重叠；（3）供能体与受能体最大距离不超过7 nm.根据Forster原理，药物与蛋白质分子中作用的荧光基团之间距离由公式计算［12］E＝1－（F/F0），其中E为能量转移效率；R0为转移效率为50%时的临界距离；r为姜黄素钐配合物与BSA的真实距离.F0和F分别为不存在和存在姜黄素钐配合物（［Cur－Sm］＝1.0×10－5 mol/L）时BSA的荧光强度.为偶极空间取向因子；N为介质的折射指数；Φ为BSA的荧光量子产率（一般，实验取为BSA的荧光发射光谱与姜黄素钐配合物的吸收光谱之间的光谱重叠积分为BSA在波长为λ时的荧光强度，εA（λ）为姜黄素钐配合物在波长λ时的摩尔消光系数. 结合图5可求出J＝2.071×10－15 cm3·L/mol，E＝0.1756，R0＝1.9 nm，r＝2.4 nm＜7 nm.即BSA上的氨基酸与姜黄素钐配合物的距离小于7 nm，符合非辐射能量转移理论，氨基酸可将能量以非辐射方式转移到姜黄素钐配合物，引起BSA的荧光猝灭.但从结果来看，BSA与配合物之间存在的能量转移效率较低，故配合物对BSA内源性荧光是一个混合猝灭过程，既包含静态猝灭，又有非辐射能量转移.图1 配合物－BSA的荧光光谱图2 配合物对BSA的荧光猝灭Stern－Volmer图图3 配合物－BSA的log［（F0－F）/F］～log［Q］图图4 ln Kb～T－1图2.6 结合位置研究发现，大多数药物与血清白蛋白上在亚结构域ⅡA和ⅢA结合，对应于Sudlow的SiteⅠ和SiteⅡ位.本文选择保泰松和氟灭酸分别作为SiteⅠ位与SiteⅡ位标记药物［13］加到配合物－BSA体系，测定结合常数.所得结果分别为2.393×105，2.865×103 L/mol，与不加定位剂体系的结合常数（9.683×104 L/mol）比较知，氟灭酸对体系的结合常数影响程度较大，说明氟灭酸与配合物激烈竞争同一个结合位点，由此判断配合物与BSA主要在SiteⅡ位结合.2.7 同步荧光光谱由于Δλ＝15 nm和Δλ＝60 nm的同步荧光光谱分别只显示酪氨酸和色氨酸残基的光谱特性，故扫描其光谱（见图6）.由图6可知，随着姜黄素钐配合物浓度的增大色氨酸残基和酪氨酸残基均表现出一定的荧光猝灭作用，但对色氨酸残基猝灭作用明显，且使色氨酸残基发射峰位置从288 nm蓝移至283 nm.这表明姜黄素钐配合物的加入改变了BSA上的色氨酸所处的微环境，使生色团疏水结构变紧密，肽链的伸展程度减少，极性减小，疏水性增加［14］，改变了BSA的内部构象.图5 BSA的荧光光谱和配合物的的UV光谱的重叠图图6 配合物－BSA的同步荧光光谱3 结论姜黄素钐配合物与BSA之间有较强的结合作用.配合物静态猝灭BSA的内源荧光，并发生非辐射能量转移.配合物使BSA分子中的色氨酸残基微环境改变，对酪氨酸影响较小.配合物与BSA分子中SiteⅡ位的色氨酸结合，结合力主要是范德华力与氢键作用力，结合距离为2.4 nm，因此，BSA可以作为姜黄素钐配合物的有效载体.该研究为从分子水平上阐明姜黄素钐配合物在体内的运输过程和药用机理提供一定的理论参考，同时，也为新药的设计与开发提供了有效信息.参考文献：［1］许军鹏，刘景旺，达文燕，等.稀土－姜黄素－菲啰啉配合物荧光和抑菌活性研究［J］.中国稀土学报，2009，27（1）：68－69.［2］李一诗，傅仲学.姜黄素逆转肿瘤多药耐药的研究进展［J］.重庆医学，2010，39（16）：2 225－2 227.［3］刘晓真，张宏颖.姜黄素与肿瘤细胞作用的分子机制［J］.大连医科大学学报，2008，30（5）：465－468.［4］刘哲，王坤杰，董银龙，等.水杨酸金属配合物与牛血清白蛋白的相互作用［J］.无机化学学报，2010，26（1）：72－78.［5］陶慰孙，李惟，姜涌明.蛋白质分子基础［M］.北京：高等教育出版社，1995.［6］许军鹏.稀土姜黄素配合物的合成、抑菌性及与DNA的相互［D］.兰州：西北师范大学.2009.［7］ Ding Fei，Zhao Guangyu，Huang Jinli，et al.Fluorescence spectroscopic investigation of the interaction between chloramphenicol and lysozyme［J］.Eur.J.Med.Chem，2009，44：4 083－4 089.［8］ Jin Jing，Zhang Xia.Spectrophotometric studies on the interaction between pazufloxacin mesilate and human serum albumin or lysozyme ［J］.Journal of Luminescence，2008，128：81－86.［9］ Yan Zhengyu，Shao Xiufen.Interactions between gatifloxacin and bovine serum albumin［J］.J Chin.Pharm.Sci.，2005，4（1）：33.［10］ROSS P D，SUBRAMAN IAN S.Thermodynamics of protein association reactions：forces contributing tostability［J］.Biochemistry，1981，20：3 096－3 102.［11］杨频，高飞，马贵斌.生物无机化学导论［M］.西安：西安交通大学出版社，1991.［12］Yu Xianyong，Liu Ronghua，Yi Rongqiong，et al.Study of the interaction between N－confused porphyrin and bovine serum 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第18卷第1期分析测试学报V ol.18N o.11999年1月FENXI CESHI XUE BAO (Journal of Instrum ental Anal y sis )Jan.19993茜素红S 与人血清白蛋白相互作用的分光光度研究迟燕华33庄稼33李克安333李娜董发勤33童沈阳(北京大学化学与分子工程学院北京100871)摘要在p H 4.3左右的Britton -R obinson (B -R )缓冲溶液中,茜素红S (ARS )与人血清白蛋白(HSA )结合,生成红色的复合物,吸光度值与HSA 含量呈线性关系。

复合物的吸收峰值λmax 为530nm ,比ARS 试剂本身红移110nm 。

其表观摩尔吸光系数ε=1.0×104L ・m ol-1・cm -1。

HSA 标准曲线在其质量浓度10～900m g /L 间呈线性关系,最低检出限为3m g /L 。

研究了该配合物用于蛋白质分光光度法测定的基本条件。

应用该法测定了人血清样品,回收率在96.9%～102.1%范围内。

实验表明该反应选择性、重现性和对照性均好,操作简便,适用测定浓度范围宽。

关键词茜素红S ,人血清白蛋白,分光光度法人体血液中的白蛋白是形成血浆胶渗压的主要成分,它在维持体液的正常分布、保持血容量及血压等方面起重要作用。

同时,血浆白蛋白对人体具有营养作用。

现已有报道将它作为人体营养健康和疾病诊断、疗效观察的重要指标[1]。

测定、研究血浆中白蛋白的含量,可对人体健康和生命科学的研究提供重要的科学依据。

茜素红S (ARS )是由天然产物中提取的物质,通常作为染料用于无机元素分析。

它作为生物探针用于测定生物大分子,目前还未见报道。

本文将它作为探针用于蛋白质的定量测定与分析中。

通过实验研究,表明该法的结果良好。

1实验部分1.1仪器与试剂UV -265分光光度计(Shim adzu ),724微机型分光光度计(上海光学仪器厂),821型p H 计(中山大学电子厂)。

小分子与血清白蛋白相互作用的探究在血浆中,人血清白蛋白是一种含量极为丰富的载体蛋白,可以跟人体内药物分子融合,从而运输至人体各个部位,进一步发挥出有效作用。

药物小分子与人血清白蛋白相结合,能够对药物的吸收、分析及新陈代谢产生重要影响,与此同时还能够对药物的稳定性及毒性产生很大程度的影响。

本组采取多种方法对药物小分子与血清白蛋白之间的相互作用进行了分析,具体内容如下。

1 药物小分子与人血清白蛋白的相互作用对于生命新陈代谢的维持,人血清白蛋白发挥了非常重要的作用。

同时,人血清白蛋白也是疾病诊疗观察过程的一项重要的参考指标。

近年来,在医药快速发展的背景下,药物的大量应用致使分子在体内和人血清白蛋白发生了诸多反应,进一步导致人血清白蛋白的构象发生变化。

药物在进入人体之后,先和人血清白蛋白相结合,大量学者对药物小分子和人血清白蛋白的作用机理进行了探究,比如姜黄素、白藜芦醇脂肪酸及布洛芬等。

其中,白藜芦醇脂肪酸可以跟人血清白蛋白进行有效结合,从而使其荧光强度增强,并使其紫外吸收减弱。

2 探究方法分析对于药物小分子与人血清白蛋白相互作用的研究,会应用到多种方面,具体表现如下:2.1 光谱分析法在对生物大分子,尤其是蛋白质和药物之间的作用进行分析过程中,通过使用到光谱分析法。

对于药物小分子,通过静电、疏水及氢键等方式和人血清白蛋白之间产生作用。

产生作用之下,使蛋白质的光谱性质发生显著变化,并结合光谱技术定性及定量检测其作用的改变,从而更深层次地对其作用进行研究。

对荧光探针与蛋白质结合之后峰的强度、波长及位移进行测定,能够对其微环境的极性及蛋白质构象等性质进行研究。

使用荧光分析,具备多方面的优势,比如选择性优良、重现性良好及灵敏度高等。

有学者使用荧光法对马兜铃酸I和人血清白蛋白进行结合,结果发现马兜铃酸I结合到Trp-214,从而使人血清白蛋白的荧光强度得到有效降低。

2.2 毛细管电泳法对于毛细管电泳法来说,是具备多方面的优势的,包括了:(1)药物与白蛋白混合液不需要进行处理;(2)一次进样能够将药物总浓度与有利药物浓度同时测量出来;(3)对于纳摩尔进样量或者更低的进样量,依旧具备优良的重现性。

硕士学位论文M．D．Thesis几种抗凝血药物与人血清白蛋白的相互作用Study on the Interaction between SeveralAnticoagulants and Human Serum Albumin张琼Zhang qiong西北师范大学化学化工学院目 录独创性声明 (i)中 文 摘 要 (ii)Abstract (iii)第一章 绪 论 (1)1.1血清白蛋白简介 (1)1.1.1蛋白质的空间结构 (1)1.1.2人血清白蛋白（Human serum albumin, HSA） (2)1.1.2.1 人血清白蛋白的结构 (3)1.1.2.2人血清白蛋白的生物学功能 (4)1.1.2.3人血清白蛋白的光谱学特征 (4)1.2 小分子物质与蛋白质相互作用的研究方法 (6)1.2.1 紫外吸收光谱法（UV absorption spectroscopy） (6)1.2.2圆二色谱法（Circular dichroism，CD） (6)1.2.3 核磁共振波谱法（Nuclear magnetic resonance，NMR） (7)1.2.4 红外光谱法（Infrared spectroscopy，IR） (8)1.2.6色谱分析（Chromatography） (12)1.3 荧光光谱法在研究小分子物质与蛋白质结合反应中的应用 (13)1.3.1 结合部位的确定 (13)1.3.2 结合距离的确定 (14)1.3.3 荧光猝灭机理的确定 (15)1.3.4 结合常数与结合位点数的测定 (16)1.3.5 作用力类型的确定 (18)1.3.6 小分子对血清白蛋白构象的影响 (18)1.4 本论文研究内容及其意义 (19)参考文献： (19)第二章 华法灵钠与人血清白蛋白的相互作用研究 (25)2.1 引言 (25)2.2 实验部分 (25)2.2.2 实验方法 (26)2.3 结果与讨论 (26)2.3.1 荧光光谱 (26)2.3.2 荧光猝灭方式 (27)2.3.3 用静态猝灭法分析华发灵钠与HSA的相互作用 (29)2.3.4 华法灵钠与HSA之间的作用力类型 (30)2.3.5 同步荧光光谱 (30)2.3.6 紫外光谱 (31)2.3.7 HSA的构象变化 (32)2.4 结论 (33)参考文献 (33)第三章 华法灵过渡金属配合物与人血清白蛋白相互作用研究 (35)3.1 前言 (35)3.2 实验部分 (35)3.2.1 仪器与试剂 (35)3.2.2 实验方法 (36)3.3 结果与讨论 (36)3.3.1 荧光光谱 (36)3.3.2 荧光猝灭方式 (38)3.3.3 用静态猝灭法分析配合物与HSA的相互作用 (40)3.3.4 二元配合物与HSA之间的作用力类型 (41)3.3.5 同步荧光光谱 (42)3.3.6 紫外光谱 (44)3.4 结论 (46)参考文献 (46)第四章 水杨酸与人血清白蛋白的相互作用研究 (49)4.1引言 (49)4.2 实验部分 (49)4.2.1 仪器与试剂 (49)4.3 结果与讨论 (50)4.3.1 荧光光谱 (50)4.3.2 荧光猝灭机理、荧光猝灭速率常数 (50)4.3.3 结合常数及结合位点数 (53)4.3.4 热力学参数和作用力类型 (54)4.3.5 同步荧光光谱 (54)4.3.6 紫外光谱 (55)4.3.7 HSA的构象变化 (56)4.4 结论 (57)参考文献 (57)致 谢 (59)西北师范大学化学化工学院专业：无机化学导师：宋玉民中 文 摘 要目前脑血管病已成为我国人口的第一位致残和死亡原因，且发病率有逐年增多的趋势，其中以动脉粥样硬化为基础的缺血性脑血管病发病率正在增长，故对具有抗凝血药物的研究早已是药物学家研究的重点。