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化妆品中7种染发剂的检测方法（征求意见稿）1 适用范围本方法规定了化妆品中酸性紫43（CAS：224-618-7，CI 42510 ）；碱性紫14（CAS：632-99-5，CI42510）；酸性橙3（CAS：228-921-5）；碱性黄87（CAS：116844-55-4）；碱性蓝26（CAS：2580-56-5，CI44045）；碱性红51（CAS：12270-25-6）；碱性橙31（CAS：97404-02-9）7种染发剂含量的高效液相色谱测定方法。
本方法适用于染发类和烫发类化妆品中碱性红51、碱性紫14、酸性紫43、碱性蓝26、碱性橙31、酸性橙3、碱性黄87等7种染发剂含量的测定。
2方法提要试样经甲醇超声提取后，过0.45μm滤膜，采用高效液相色谱系统分离，紫外检测器或二极管阵列检测器进行检测，外标法定量。
若取5.0g样品，本方法对碱性红51、碱性紫14的检出限为0.06mg/kg；酸性紫43、碱性蓝26的检出限为0.6mg/kg；碱性橙31、酸性橙3的检出限为1.2mg/kg；碱性黄87的检出限为3.0mg/kg；最低定量浓度分别为：碱性红51、碱性紫14：0.2mg/kg、酸性紫43、碱性蓝26为2.0mg/kg；碱性橙31、酸性橙3为3.5mg/kg；碱性黄87为10mg/kg。
3试剂和材料除另有规定外，所用试剂均为色谱纯，水为一级水。
3.1 甲醇。
3.2 四氢呋喃。
3.3 乙酸铵：分析纯。
3.4 乙酸铵溶液（0.02mol/L）：称取1.54 g乙酸铵（3.3），加水至1000 mL，溶解，经0.45μm滤膜过滤。
3.5 染发剂标准物质：酸性紫43（Acid Violet 43，CAS：224-618-7，CI 42510 ）；碱性紫14（Basic Violet 14，CAS：632-99-5，CI42510）；酸性橙3（Acid Orange 3，CAS：228-921-5）；碱性黄87（Basic yellow 87 ，CAS：116844-55-4）；碱性蓝26（Basic Blue 26，CAS：2580-56-5，CI44045）；碱性红51（Basic red 51，CAS：12270-25-6）；碱性橙31（Basic orange 31，CAS：97404-02-9）；纯度均≥90%。
高效液相色谱-串联质谱法同时检测化妆品中6种禁用着色剂林维宣;孙兴权;赵雪蓉;徐伟;郭桂媛【摘要】A method of high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry (HPLC-MS/MS) has been established for the simultaneous determination of six forbidden colorants including Sudan IV, Acid Violet 49, Sudan Blue 2, Solvent Red 49, Basic Violet 1 and Pigment Orange 5 in cream and powdery matrix cosmetics. The samples were extracted with ethanol-acetonitrile (3:2, v/v) solution by ultrasonic technique for 20 min, then centrifuged for purification and enriched by nitrogen blowing sequentially. The analytes were isolated on a Luna C18 column (150 mm x2. 1 mm, 5μm) by gradient elution with methanol and 10 mmol/L ammonium acetate as the mobile phases, and detected by MS/MS in the multiple reaction monitoring (MRM) mode. The qualitative analysis was based on the retention time and the relative abundance ratio of the characteristic ions, and the quantitative analysis on calibration curve method. The results showed that the limits of quantification (LOQ, S/N = 10) of the six colorants ranged from 0. 1 to 10μg/kg and the average recoveries were from 86. 67% to 98. 22% with the relative standard deviations (RSDs) from 4. 01% to 7. 01%. The method is simple and rapid with high sensitivity and good reproducibility, and suitable for the determination of the six forbidden colorants in cosmetics.%建立了高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)同时测定膏状和粉状化妆品中苏丹红Ⅳ、酸性紫49、苏丹蓝2、溶剂红49、碱性紫l和颜料橙5等6种禁用着色剂的检测方法.样品经乙醇-乙腈(3:2,v/v)超声振荡提取20min、离心净化及氮吹浓缩后,在LunaC18色谱柱(150mm×2.1mm,5μm)上进行反相液相色谱分离,以甲醇和10 mmol/L乙酸铵溶液为流动相进行梯度洗脱采用多反应监测(MRM)模式进行质谱测定.根据保留时间及质谱图上特征离子的相对丰度比进行定性,外标法定量.结果表明:6种着色剂的定量限(信噪比为10计)为0.1～10μg/kg,回收率为86.67％～98.22％,相对标准偏差(RSD)为4.01％～7.01％.该方法简便、快速、灵敏度高且重现性好,适合于化妆品中禁用着色剂的定性与定量.【期刊名称】《色谱》【年(卷),期】2012(030)005【总页数】6页(P527-532)【关键词】高效液相色谱-串联质谱;禁用着色剂;化妆品【作者】林维宣;孙兴权;赵雪蓉;徐伟;郭桂媛【作者单位】辽宁出入境检验检疫局技术中心,辽宁大连 116001;辽宁出入境检验检疫局技术中心,辽宁大连 116001;辽宁出入境检验检疫局技术中心,辽宁大连116001;辽宁出入境检验检疫局技术中心,辽宁大连 116001;大连工业大学生物与食品工程学院,辽宁大连 116034【正文语种】中文【中图分类】O658着色剂在化妆品中的作用主要是从美容色彩学和心理学的角度评价，除此之外，尚未发现对人体有任何其他的好处。
柱色谱法分离甲基橙和碱性湖蓝BB一、实验目的1、学习柱色谱法技术的原理和方法；2、掌握柱色谱技术分离甲基橙和碱性湖蓝BB的方法；3、掌握甲基橙的定量方法。
二、实验原理柱色谱有吸附色谱和分配色谱两种。
实验室中最常用的是吸附色谱，其原理是利用混合物中各组分在固定相上的吸附能力和流动相的解吸能力不同，让混合物随流动相流过固定相，发生反复多次的吸附和解析过程，从而使混合物分离成两种或多种单一的纯组分。
甲基橙为橙黄色的鳞状晶体或粉末，稍溶于水而成黄色，不溶于乙醇，用作pH值指示剂，变色范围3.1~4.4，其结构式为：碱性湖蓝BB又称为亚甲基蓝，可含有3~5个结晶水，三水合物是暗绿色结晶，其稀的乙醇溶液为蓝色，其结构时为：1、柱色谱装置色谱柱是一根下端具塞的玻璃管，柱高和直径比应为8：1。
在柱底部塞脱脂棉，上盖石英砂，中间是固定相，最上层再铺一层石英砂。
（如没有色谱柱，可用一根25mL酸式滴定管代替。
）2、装柱装柱前应先将色谱柱洗干净，进行干燥，在柱底铺一小块脱脂棉，再铺约0.5cm厚的石英砂，然后进行装柱。
装柱分为湿法装柱和干法装柱两种。
（1）湿法装柱将吸附剂（氧化铝或硅胶）用洗脱剂中极性最低的洗脱剂调成糊状，在柱内先加入约3/4高的洗脱剂，再将调好的吸附剂边敲边倒入柱中，同时，打开下旋活塞，在色谱柱下面放一个干净并且干燥的锥形瓶或烧杯，接收洗脱剂。
当装入的吸附剂有一定的高度时，洗脱剂下流速度变慢，待所有吸附剂全部装完后，用流下来的洗脱剂转移残留的吸附剂，并将柱内壁残留的吸附剂淋洗下来。
（注意若填装不紧密或留有气泡层等现象，会影响渗透速度和显色均匀。
但如果填装时过分敲击，又会因太紧密而流速太慢。
）在此过程中，应不断敲打色谱柱，以使色谱柱填充均匀并没有气泡。
柱子填充完成后，在吸附剂上端覆盖一层约0.5cm厚的石英砂。
在整个色谱柱过程中，柱内洗脱剂的高度始终不能低于吸附剂最上端，否则柱内会出现裂痕和气泡。
（加沙子目的是在加料时不致把吸附剂冲起，影响分离效果，若无沙子也可用玻璃毛或剪成比柱子内径略小的滤纸压在吸附剂下面。
毛细管电色谱分析碱性药物摘要：本研究应用毛细管电色谱（CEC）使用商业化的硅胶固定相和含水流动相分离一系列的碱性药物。
流动相的组成、缓冲液的PH值、电压、缓冲液的负离子对这些碱性药物的保留时间的影响都进行了研究。
在PH为7. 8时，得到了理想的图谱，但是发现重现性极差。
然而，在PH为 2. 3时，获得了这些碱性药物的良好的、可重现的图谱。
我们先前证明了低的PH值下，使用反相填充材料，在流动相中加入添加剂诸如磷酸三乙醇胺可得到极好的CEC分析碱性药物的效果。
在相同的条件下，使用硅胶固定相分离这些药物，是为了改善峰的形状，获得了极好的如苄胺、去甲替林和苯海拉明等碱性药物的图谱。
实验显示了用CEC分离碱性药物能很容易地获得极好的峰形和高达 3.2万理论塔板数/米。
关键词：毛细管电色谱，碱性药物，硅胶固定相，含水流动相介绍：毛细管电色谱（CEC）结合了液相色谱（LC）和毛细管电泳（CE）的优势，是一种可用于复杂混合物分离的一种多功能的、高效的色谱技术。
到现在为止，已发表了许多CEC应用的研究结果，但这些都局限在中性和酸性化合物的范围内。
然而，用反相填料分离碱性药物时，峰有严重拖尾，缘于疏水性作用和离子交换机制的共同作用。
一个成功的、可重复的方法是使用了诸如三乙胺或九胺的流动相添加剂。
这些小的简单化合物被混入流动相，通过竞争的方式以避免分析物同硅烷基间的反应作用。
这些添加剂的使用产生了高效分离，改善了峰形，并能同时分析酸性、简单的和中性化合物。
过去，硅胶柱常在反相条件下同流动相添加剂一起被用于高效液相分离碱性药物，同使用标准的反相条件相比，使用这种条件明显地提高柱效和重现性。
硅胶固定相和含水流动相用于碱性药物的分析未能得到广泛的接受，可能由于大量的反相固定相降低了硅烷基的活性和硅胶固定相缺乏反相特性。
表面硅烷基的酸性不同，或者说表面硅烷基的统一性不同导致了碱性物质严重的峰拖尾现象，因为不同的分析物/硅烷基间吸附/脱附的比例。
实验室常用酸碱指示剂的变色域及配制方法实验室中常用的酸碱指示剂有苏木精、酚酞、甲基红、溴蓝、品红、石蓝等。
这些指示剂在不同的pH值下会呈现不同的颜色，用于酸碱滴定等分析实验中。
下面将介绍这些酸碱指示剂的变色域及配制方法：
1.苏木精指示剂：
苏木精指示剂敏感区间为pH3.0-4.0，呈现黄色到红色。
苏木精指示剂的配制方法：将0.1克苏木精溶解于100毫升乙醇中。
2.酚酞指示剂：
酚酞指示剂敏感区间为pH6.8-8.2，呈现无色到红色。
酚酞指示剂的配制方法：将0.1克酚酞溶解在100毫升乙醇中。
3.甲基红指示剂：
甲基红指示剂敏感区间为pH4.2-6.3，呈现红色到黄色。
甲基红指示剂的配制方法：将0.1克甲基红溶解在100毫升乙醇中。
4.溴蓝指示剂：
溴蓝指示剂敏感区间为pH5.0-6.6，呈现黄色到蓝色。
溴蓝指示剂的配制方法：将0.1克溴蓝溶解在100毫升乙醇中。
5.品红指示剂：
品红指示剂敏感区间为pH5.0-5.8，呈现无色到紫红色。
品红指示剂的配制方法：将0.1克品红溶解在100毫升乙醇中。
6.石蓝指示剂：
石蓝指示剂敏感区间为pH10.0-12.5，呈现蓝色到蓝绿色。
石蓝指示剂的配制方法：将0.1克石蓝溶解在100毫升乙醇中。
以上所述的指示剂可以根据实验的需要进行配制和调配，在使用时可以按照实验要求配制合适浓度的酸碱指示剂溶液。
需要注意的是，配制和使用指示剂的过程中，要注意安全操作，避免接触指示剂溶液。
碱性紫5BN的色谱分析方法作者：蔡秀丽来源：《中国科技博览》2013年第37期摘要：本文通过对流动相、色谱柱、检测波长法的选择确定了最佳的分离条件，具有较好的准确度和精密度。
关键词：高效液相色谱；碱性紫5BN ；色谱分析1. 前言碱性紫5BN是目前碱性染料的主要产品之一，由于其制造工艺的特殊性，厂家的合成工艺各异，产品产物和副产物有所差异，使碱性紫5BN 的主要成分所占比例不同，对产品的质量影响甚大，故通过对其分析使其质量符合国家标准显得尤为重要。
本课题主要研究用高效液相色谱法对碱性紫5BN进行分析检测，并进行优化。
2.碱性紫5BN的性质及组成碱性紫 5BN俗名盐基青莲，是一种三苯甲烷型碱性染料，外观呈深绿色粉末，微臭，溶于热水后呈紫色，主要含有五甲基衍生物，也常含有四甲基和六甲基衍生物，所以碱性紫是这些三苯甲基衍生物的混合物[1]，它的分子式为C25H30ClN3。
3.碱性紫5BN的分析方法碱性紫5BN的分析方法主要有高效液相色谱分析法和紫外分光光度法，前者从控制PH着手，对产品主成分进行测定，对碱性紫5BN粗制品和成品分析均适用，后者具有快速、方便、省时、准确等优点，可作为医院制剂质量控制的一种方法[2]。
4.实验部分4.1 仪器与试剂高效液相色谱仪：Waters510泵； 484检测器；色谱工作站： Echr om 98 。
甲醇：色谱纯；蒸馏水：经0 .45 μm滤膜过滤；碱性紫5BN标准品；碱性紫5BN样品；分析天平（感量： 0.01mg）；定量环：10 μL；玻璃注射器： 0.25mL。
4.2 色谱分析条件色谱柱： 150mm ×416mm i1d （Spherisorb C18）；流动相：甲醇 +水 = 70 + 30 ；流速： 0.8mL /min；波长： 280nm；进样量：10μL。
4.3 标准品及样品的制备4.3.1 标准溶液的配制准确称取碱性紫 5BN标准品0.0095g ，碱性紫6BN 标准品0.0106g ，分别用少量流动相溶解，并定容于50mL 容量瓶中，于超声波发生器中震荡10 min 后冷却至室温，配制成0.190mg/ mL 、0.212mg/ mL的标准溶液。
