人教通用版2020版高考生物新探究大一轮复习第40讲微生物的培养与应用检测含解析

第讲微生物的培养与应用[考纲明细] .微生物的分离和培养.某种微生物数量的测定.培养基对微生物的选择作用.利用微生物发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用知识自主梳理一、微生物的实验室培养．培养基概念：人们按照微生物对营养物质()营养基质的不同需求，配制出供其生长繁殖的。

营养成分：水、()碳源、、无机盐四类营养物质，另外还需要满足微生物生长对氮源、特殊营养物质以及氧气的要求。

()培养基的分类①按物理状态分类②按化学成分分类③按功能分类[深入思考] 为什么选择培养能够“浓缩”所需的微生物？提示在选择培养的条件下，可以使那些能够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖，而那些不适应这种营养条件的微生物的繁殖被抑制，因此可以起到“浓缩”的作用。

．无菌技术()含义：指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。

的入侵。

关键：防止()外来杂菌()不同对象的无菌操作方法(连线)答案①、②、⑥——Ⅰ、Ⅱ③、④、⑤——Ⅲ、Ⅳ．大肠杆菌的纯化培养()制备牛肉膏蛋白胨固体培养基①操作步骤→→→→②倒平板的方法及注意事项乙→→．请用文字和箭头写出正确的倒平板操作流程：丙。

甲丁→．乙中的灭菌方法是灼烧灭菌。

．丁中的操作需要等待平板冷却凝固才能进行。

[深入思考] ()倒平板操作为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？提示通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。

()平板冷凝后，为什么要将平板倒置？提示平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。

()纯化大肠杆菌的两种方法)平板划线法概念：是通过①接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。

②注意事项：.．灼烧接种环，待其冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种。

．第二次及其以后的划线操作总是从上一次划线末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐渐减少，最终得到由单个细菌繁殖而来的菌落。

高考生物一轮专题第40讲微生物的培养与应用A卷姓名:________ 班级:________ 成绩:________一、单选题 (共15题；共30分)1. （2分） (2017高二下·葫芦岛期中) 用稀释涂布平板法统计的样品中活菌的数目与实标值相比（）A . 一致B . 偏高C . 偏低D . 不确定2. （2分）用发酵工程生产的产品，如果是菌体，则进行分离提纯时可采用的方法是A . 蒸馏、过滤B . 过滤、沉淀C . 萃取、离子交换D . 沉淀、萃取3. （2分） (2017高二下·沭阳期中) 培养细菌的培养基适宜的pH为（）A . 1.5﹣2.5B . 3.5﹣4.5C . 6.5﹣7.5D . 8.5﹣9.54. （2分） (2017高二下·沭阳期中) 培养自养型微生物与异养型微生物的培养基，主要差别在于（）A . 碳源B . 氮源C . 无机盐D . 生长因子5. （2分） (2016高二下·黑龙江期中) 下列有关生物技术实践的叙述，正确的是（）A . 不同微生物在特定培养基上生长形成的菌落一般都相同B . 在提取胡萝卜素时，可选用乙醇或石油醚作为萃取剂C . 制作果酒和果醋时都可用体积分数为70%的酒精对发酵瓶消毒D . 腐乳制作中利用的蛋白酶和脂肪酶只产自毛霉6. （2分） (2019高二下·贵州月考) 下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是（）A . 用蒸馏水配制牛肉膏蛋白膝培养基，经高温、高压灭菌后倒平板B . 取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1mL，分别涂布于各组平板上C . 将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养24-48小时D . 确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数7. （2分）关于生物工程和技术的说法正确是（）A . 从某生物cDNA文库中获取的目的基因，不含基因中的启动子B . 单倍体育种需要细胞分裂素、生长素、秋水仙素等激素的参与C . 动物细胞培养过程中，培养箱中需含5%的CO2刺激细胞呼吸D . 为统计某水样中活菌的数目，可采用平板划线法进行接种8. （2分） (2017高二下·石家庄期中) 下列有关培养基的叙述正确的是（）A . 培养基中一定都需要添加碳源或氮源B . 固体培养基中加少量水即可制成液体培养液C . 水在培养基中只是作为溶剂，不是微生物的营养成分D . 根据微生物对碳源需要的差异，可使用含不同碳源的培养基9. （2分） (2015高一上·咸阳期中) MRSA菌是一种引起皮肤感染的“超级细菌”，对青霉素等多种抗生素有抗性．为研究人母乳中新发现的蛋白质H与青霉素组合使用对MRSA菌生长的影响，某兴趣小组的实验设计及结果如表．下列说法正确的是（）A . 细菌死亡与否是通过光学显微镜观察其细胞核的有无来确定B . 第2组和第3组对比表明，使用低浓度的青霉素即可杀死MRSA菌C . 实验还需设计用2μg/mL青霉素做处理的对照组D . 蛋白质H有很强的杀菌作用，是一种新型抗生素10. （2分） (2017高二下·杭锦后旗期中) 关于生物技术实践中的有关检验，不正确的是（）A . 在果酒制作实验结束时要检验是否有酒精产生，正确的操作步骤是先在试管中加入适量的发酵液，然后再加入硫酸和重铬酸钾的混合液B . 在微生物培养中，检验培养基是否被污染的方法是用一组不接种或接种无菌水的培养基与接种培养物的培养基一起培养C . 检验以尿素为唯一氮源的培养是否分离出了分解尿素的细菌，方法是在培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变红，则说明分离成功D . 检验胡萝卜素纯度的方法是纸层析法，原理是不同的色素分子在层析液中的溶解度不同，故随层析液在滤纸上扩散的速度不同，若样品中有杂质，则会出现不同的色素点（带）11. （2分） (2019高二下·金华期末) 某生物兴趣小组应用微生物显微计数法，开展温度对乳酸菌种群密度（个/mL）影响的研究，实验结果见下图。

第40讲微生物的培养与应用[考纲明细] 1.微生物的分离和培养 2.某种微生物数量的测定 3.培养基对微生物的选择作用 4.利用微生物发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用知识自主梳理一微生物的实验室培养1．培养基(1)基质。

(2)(3)培养基的分类①按物理状态分类15指示剂或化学药品培养基鉴别大肠杆菌为什么选择培养能够“浓缩”所需的微生物？提示在选择培养的条件下，可以使那些能够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖，而那些不适应这种营养条件的微生物的繁殖被抑制，因此可以起到“浓缩”的作用。

2．无菌技术(1)含义：指在培养微生物的操作中，所有防止17杂菌污染的方法。

(2)关键：防止18外来杂菌的入侵。

(3)不同对象的无菌操作方法(连线)答案①、②、⑥—b—Ⅰ、Ⅱ③、④、⑤—a—Ⅲ、Ⅳ3．大肠杆菌的纯化培养(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基①操作步骤计算→19称量→溶化→20灭菌→21倒平板②倒平板的方法及注意事项a．请用文字和箭头写出正确的倒平板操作流程：22丙→乙→甲→丁。

b．乙中的灭菌方法是23灼烧灭菌。

c．丁中的操作需要等待24平板冷却凝固才能进行。

1．倒平板操作为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？ 提示 通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。

2．平板冷凝后，为什么要将平板倒置？提示 平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。

(2)纯化大肠杆菌的两种方法 1)平板划线法①概念：将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。

②注意事项： a ．灼烧接种环c ．第二次及其以后的划线操作总是从上一次划线末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐渐减少，最终得到由单个细菌繁殖而来的菌落。

d ．划线时最后一区不要与第一区相连。

e ．划线用力大小要适当，防止用力过大将培养基划破。

①概念：琼脂固体培养基的表面，进行培养。

微生物的培育与应用一、对点练小题，落实主干学问1．做“微生物的分别与培育”试验时，下列叙述正确的是( )A．高压灭菌加热结束时，打开放气阀使压力表指针回到零后，开启锅盖B．倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培育基溅到皿盖上C．为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落D．用记号笔标记培育皿中菌落时，应标记在皿底上解析：选D 在高压灭菌的操作过程中，加热结束后应让灭菌锅内温度自然下降，待压力表的指针指到零时，打开放气阀，旋松螺栓，打开盖子。

倒平板时，用左手将培育皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，而不是完全取下放到一边。

接种环经火焰灼烧灭菌后应在火焰旁冷却后，再用其挑取菌落。

在微生物的培育中，一般将培育皿倒置，在皿底上用记号笔做标记。

2．有关微生物的培育与应用，下列说法正确的是( )A．通常运用液体培育基分别获得细菌单菌落B．大肠杆菌的纯化培育过程包括培育基的配制和纯化大肠杆菌两个阶段C．接种前需对培育基、培育皿、接种环、试验操作者的双手等进行严格灭菌处理D．某一稀释度的3个平板的菌落数依次为M1、M2、M3，以M2作为该样品菌落估计值解析：选B 通常运用固体培育基分别获得细菌单菌落，A错误；大肠杆菌的纯化培育过程包括培育基的配制和纯化大肠杆菌两个阶段，B正确；培育基、培育皿、接种环都须要运用恰当方式进行灭菌处理，而试验操作者的双手只能进行消毒而不能进行灭菌处理，C错误；某一稀释度的3个平板的菌落数依次为M1、M2、M3，为了保证结果精确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数，以它们的平均值作为该样品菌落数的估计值，D错误。

3．(2024年1月新高考8省联考·江苏卷)平板涂布是分别菌种常用的方法，下列相关叙述不恰当的是( )A．固体培育基灭菌后，应冷却至50 ℃左右时倒平板B．倒好的平板需马上运用，以免表面干燥，影响菌的生长C．平板涂布分别到的单菌落需进一步划线纯化D．平板涂布法既可用于微生物的分别，也可用于微生物的计数解析：选B 固体培育基灭菌后，应冷却至50 ℃左右时倒平板，温度过低易导致污染，温度过高无法操作，A正确；倒好的平板须要冷却后运用，且不宜久存，以免表面干燥，影响接种后微生物的生长，B错误；平板涂布分别到的单菌落仍需进一步划线纯化，以利于菌种保藏，C正确；平板涂布法既可用于微生物的分别，也可用于微生物的计数，D正确。

微生物的培养技术及应用一、概念检测1．下列关于微生物培养的说法，错误的是()A．倒平板时，培养基倒入培养皿后要立即倒置放置B．实验中锥形瓶、培养皿常用干热灭菌法灭菌C．用记号笔标记培养皿中菌落时应标记在皿底D．纯化培养时，培养皿应倒置培养在恒温培养箱中解析：选A倒平板时，培养基倒入培养皿后需要等培养基凝固后，才能倒置放置，A 错误。

2．下列关于消毒和灭菌的理解正确的是()A．无菌技术中，若处理对象为液体，则只能消毒，不能灭菌B．培养皿、MS培养基可用干热灭菌法灭菌C．高压蒸汽灭菌完成后，待压力表降至零时，再打开排气阀排气D．外植体消毒时常用硝酸银溶液处理1～2 min解析：选C无菌技术中，若处理对象为液体，可以用高压蒸汽灭菌法灭菌，A错误；培养皿可用干热灭菌法灭菌，培养基一般用高压蒸汽灭菌法进行灭菌，B错误；高压蒸汽灭菌完成后，待压力表降至零时，再打开排气阀排气，C正确；外植体消毒一般采用体积分数为70%的酒精和次氯酸钠溶液处理，D错误。

3．平板划线法和稀释涂布平板法是常用的获取纯培养物的方法。

下列相关叙述错误的是()A．两种纯化方法的核心都是要防止杂菌污染，保证培养物的纯度B．用稀释涂布平板法进行微生物计数时，所得数据往往比实际值偏小C．获取纯培养物的过程中，应根据微生物的种类调整培养基的pHD．对10 mL土样样液稀释106倍后，取0.1 mL稀释液涂布，测得的菌落数分别为218、266、305，则该10 mL土样中目的菌数为2.63×1010个解析：选D用稀释涂布平板法统计微生物的数量时，一般选择菌落数在30～300的至少3个平板进行重复计数，求出平均值，D错误。

4．在分离、纯化大肠杆菌实验中，划线接种(甲)、培养结果(乙)如图。

下列有关叙述错误的是()A．甲中a区域为划线的起始位置B．接种前应对培养基进行高压蒸汽灭菌C．连续划线的目的是获得单个细菌形成的菌落D．接种过程中至少需要对接种环灼烧5次解析：选A每次划线的菌种来自上一区域的末端，因此划线的起始区域菌落最多。

第40讲微生物的培养与应用[考纲明细] 1.微生物的分离和培养 2.某种微生物数量的测定 3.培养基对微生物的选择作用 4.利用微生物发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用板块一知识·自主梳理一、微生物的实验室培养1．培养基(1)概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。

(2)营养成分：水、碳源、氮源、无机盐四类营养物质，另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。

(3)培养基的分类①按物理状态分类②按功能分类2．无菌技术3．纯化大肠杆菌及菌种的保藏(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基①步骤：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。

②倒平板的过程a．在火焰旁右手拿锥形瓶，左手拔出棉塞。

b．右手拿锥形瓶，使锥形瓶的瓶口迅速通过火焰。

c．左手将培养皿打开一条缝隙，右手将培养基倒入培养皿，左手立刻盖上培养皿的皿盖。

d．待平板冷却凝固后，将平板倒过来放置，使皿盖在下、皿底在上。

(2)纯化大肠杆菌①平板划线法(图中A)：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。

②稀释涂布平板法(图中B)：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。

当稀释倍数足够高时，即可获得单个细菌形成的菌落。

(3)菌种的保藏①对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏法。

②对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏法。

二、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数1．筛选菌株(1)自然界中目的菌株筛选的依据：根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。

(2)实验室中微生物筛选的原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生物生长。

(3)选择培养基：允许特定种类的微生物生长，同时抑制和阻止其他种类微生物生长的培养基。

2．统计菌落数目(1)常用方法：稀释涂布平板法。

(2)统计依据当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。

课时作业40 微生物的培养与应用时间：45分钟满分：100分一、选择题(每小题5分，共60分)1．下表是对四种生物的能源、碳源、氮源、新陈代谢类型的描述，正确的一组是( )硝化细菌乳酸菌根瘤菌衣藻A 能源NH3乳酸N2光能B 碳源CO2糖类等糖类等CO2C 氮源NH3[N2N2NO－3D 代谢类型自养需氧型异养[厌氧型自养需氧型自养需氧型类等有机物供能；从氮源看，乳酸菌需要NH＋4、NO－3；从代谢类型看，根瘤菌为异养需氧型；从碳源看，硝化细菌与衣藻需CO2，乳酸菌和根瘤菌需要糖类等有机物。

答案：B2．下列操作与消毒灭菌无关的是( )A．接种前用火焰灼烧接种环B．接种前用酒精擦拭双手 C．将平板倒置，放入培养箱中培养D．接种在酒精灯的火焰旁完成解析：接种用具、器皿、空气中都存在大量微生物，必须严格地消毒灭菌。

A、B、D三项都是实验操作过程中灭菌或防止杂菌污染的措施。

将平板倒置，放入培养箱中培养与灭菌无关。

答案：C3.2011·潍坊摸底下列关于微生物分离和培养的叙述，错误的是( )A．微生物培养前，需对培养基进行消毒B．测定土壤样品中的细菌数目，常用菌落计数法C．分离土壤中不同的微生物，要采用不同的稀释度D．分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中的惟一氮源解析：微生物培养前，需对培养基进行灭菌，而不是消毒；测定土壤样品中的细菌数目，常用菌落计数法；分离土壤中不同的微生物，要采用不同的稀释度，以便能从中选择出菌落数在30～300的平板进行计数；分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中的惟一氮源。

答案：A4．用来判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是( )A．未接种的选择培养基B．未接种的牛肉膏蛋白胨培养基C．接种了的牛肉膏蛋白胨培养基D．接种了的选择培养基解析：将菌液稀释相同的倍数，在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落应明显多于选择培养基的数目，因此，用牛肉膏蛋白胨培养基作为对照。

第40讲微生物的培养与应用一、单项选择题(每题给出的四个选项中，只有一个选项是最符合题目要求的)1．下列关于灭菌和消毒的理解，正确的是( )A．灭菌是指杀死环境中的原核生物B．消毒可以杀死微生物细胞和全部芽孢C．常用的消毒方法有煮沸法、巴氏消毒法、紫外线法和化学药物法D．常用的灭菌方法有加热法、紫外线法、化学药品法答案 C解析灭菌是指杀死环境中的一切微生物的细胞、芽孢和孢子，A错误；消毒可以杀死物体体表或内部的一部分微生物细胞，但是不能杀死芽孢，B错误；常用的消毒方法有煮沸法、巴氏消毒法、紫外线法和化学药物法等，C正确；常用的方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌，D错误。

2．(2019·上海高三月考)下列依次表示倒平板、接种的位置，以及划线法接种的路径示意图，其中错误的是( )答案 D解析倒平板时，用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖，防止空气中的杂菌污染，A正确；接种时，左手将培养皿打开一条缝隙，右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，B正确；划线时，从第二次划线开始，每次划线都要从上一次划线的末端开始，让菌种来源于上一次划线末端，这样才能使菌种逐渐稀释，C正确，D错误。

3．有关平板划线操作的说法正确的是( )A．使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中不再灭菌B．打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取出菌种后需马上塞上棉塞C．将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线即可D．该方法常用于微生物的分离纯化答案 D解析接种环在使用过程中需要多次灭菌，第一次灭菌是为了杀死其他微生物，每次划线结束后需要灭菌是为了杀死上次残留的菌种，A错误；打开含菌种的试管需要通过火焰灭菌，接种后还需要通过火焰灭菌再塞上棉塞，B错误；将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，还需盖上培养皿盖，防止空气中杂菌混入，C错误。

4．如图为“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验中样品稀释示意图。