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单宁酸缓释微胶囊的释放特性与应用研究吴春;冯海波;郭丽娟【摘要】为提高单宁酸的脂溶性和生物利用度,制备了单宁酸缓释微胶囊.对该微胶囊进行了扫描电子显微镜测试,考察了单宁酸缓释微胶囊在不同极性溶剂、释放介质、释放环境温度下的释放特性,并研究了其在猪油基质中的抗氧化活性.结果表明,该产品具有较好的包封效果,单宁酸微胶囊的缓释能力为非极性溶剂＞极性溶剂、模拟胃液＞模拟肠液,30℃下缓释效果最佳.通过控制释放,单宁酸缓释微胶囊的抗氧化能力更持久,添加0.06％的单宁酸缓释微胶囊,其抗氧化作用略强于0.02％抗氧化剂264(BHT).【期刊名称】《黑龙江大学自然科学学报》【年(卷),期】2016(033)003【总页数】5页(P381-385)【关键词】单宁酸;缓释微胶囊;释放性能【作者】吴春;冯海波;郭丽娟【作者单位】哈尔滨商业大学食品工程学院,哈尔滨150076;哈尔滨商业大学食品工程学院,哈尔滨150076;哈尔滨商业大学食品工程学院,哈尔滨150076【正文语种】中文【中图分类】TN92单宁酸(Tannic acid)别名单宁、鞣质，在植物体内广泛存在，属于多元酚类化合物，主要分布在种子植物中，约70%以上的生药中含有该类化合物，化学性质活泼。
因其具有抗氧化、捕捉自由基、抗肿瘤、抑菌、衍生化反应等化学及生理特性，而被广泛应用于食品、医药、皮革工业和水处理等领域，具有广阔的开发前景[1-3]。
由于pH值、热、光等多种理化因素会对单宁酸的稳定性产生不利影响，直接导致其抗氧化活性和其他生物学功能的减弱和丧失；同时，单宁酸水溶性强而脂溶性差，为其贮存带来不便，因此，制约了它的广泛应用。
微胶囊技术是用液体、气体或固体作为囊芯，用合成的或是天然的高分子材料将其包裹，形成具有密封或半透性囊膜的微型胶囊的包装技术。
通过包埋囊芯物质，使其抗敏感性得以提高，可操作性得到改善，最大程度地发挥其抗氧化功能。
通过控制囊芯物质的释放，使芯材的使用量减少，使其生物利用度进一步提高[4-8]。
一、实验目的1. 掌握单宁的提取方法；2. 熟悉单宁含量的测定方法；3. 分析不同样品中单宁含量的差异。
二、实验原理单宁，又称鞣酸，是一种多酚类化合物，广泛存在于植物中。
单宁具有抗氧化、抗菌、抗炎等生理活性。
本实验采用Folin-Denis法测定样品中单宁的含量。
该方法原理是：单宁在碱性条件下，可与磷钨钼酸反应生成蓝色络合物，该络合物在波长760nm处有最大吸收峰，其吸收值与单宁含量成正比。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：高粱、茶叶、苹果等含有单宁的样品；2. 仪器：分光光度计、电子天平、研钵、烧杯、移液管、容量瓶、玻璃棒等。
四、实验步骤1. 样品预处理：将样品烘干、磨碎，过筛，备用；2. 样品提取：准确称取一定量的样品，加入适量乙醇，搅拌溶解，过滤，滤液备用；3. 标准曲线绘制：准确配制一定浓度的单宁标准溶液，依次加入Folin-Ciocalteu试剂、磷酸溶液、A液、B液，混匀，放置5min，于760nm波长处测定吸光度，以单宁浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线；4. 样品测定：准确移取一定量的样品提取液，依次加入Folin-Ciocalteu试剂、磷酸溶液、A液、B液，混匀，放置5min，于760nm波长处测定吸光度，从标准曲线上查得单宁含量。
五、实验结果与分析1. 标准曲线：根据实验数据，绘制单宁标准曲线，得到线性回归方程为：y=0.0522x-0.0043，R²=0.9988；2. 样品测定：根据标准曲线，计算样品中单宁含量，结果如下：（1）高粱样品：单宁含量为2.5mg/g；（2）茶叶样品：单宁含量为15.2mg/g；（3）苹果样品：单宁含量为1.8mg/g。
从实验结果可以看出，不同样品中单宁含量存在明显差异。
高粱和苹果中单宁含量较低，而茶叶中单宁含量较高。
六、实验结论本实验采用Folin-Denis法成功测定了高粱、茶叶、苹果等样品中单宁的含量。
实验结果表明，不同样品中单宁含量存在明显差异，为后续研究单宁的生理活性提供了参考依据。
植物单宁的含量测定方法1 植物单宁单宁（Tannins）又称单宁酸、鞣质、鞣酸。
按Bategnt的定义，指相对分子质量为500~3000的能沉淀蛋白质、生物碱的水溶性多酚化合物。
主要应用于[1]医药、食品、制革、日用化学品、水处理等领域。
单宁在传统医药上内服可治胃肠道出血和止痢，外用于局部止血和创面保护防止感染发炎；近年研究发现单宁还具有抑菌抗病毒、抗过敏、抗氧化和延缓衰老、预防心血管疾病、抗肿瘤和促进免疫等作用。
单宁在食品行业中可作为功能性成分用于制作保健品，生产食品添加剂、风味剂等；在化妆品中主要起收敛、防晒、美白、抗皱、保湿、防腐等作用；在制革工业中，单宁是栲胶的主要成分。
2 单宁的含量测定经典的有皮粉法、干酪素法、氧化滴定法、分光光度法等；现阶段涌现出许多新型的测定方法，如高效液相色谱法、流动注射分析法、原子分光光度法等。
2.1 经典测定方法2.1.1 皮粉法皮粉法是国际上公认的单宁含量测定方法，从 20 世纪 60 年代至今，原苏联、日本、印度和中国都采用此法作为国家标准测试方法。
皮粉的主要成分是蛋白质，单宁是多元酚类，分子中的酚羟基与蛋白质的酰胺键以氢键结合形成不溶于水的沉淀，以此使单宁沉淀下来，用重量法测定其含量。
根据皮粉与单宁溶液接触方式不同，可将其分为震荡法和过滤法。
震荡法是皮粉与单宁溶液一起震荡来脱去溶液中的单宁；过滤法是将单宁溶液流过皮粉柱层以脱去单宁。
通常，过滤法所测的单宁含量比震荡法高5%～7%。
皮粉法所测的是单宁的绝对含量，并且不需要标样，操作简单，可用其测定中药水提液中鞣质的含量[2]。
但皮粉法的缺点是，用重量法测定样品时，须经过过滤、干燥、称重，样品耗用量大，测定时间较长，一般样品分析需20 h 左右，不适合大批量样品的快速测定；没有选择性，对低相对分子质量的多酚也具有一定的吸附能力，往往使测定结果偏高；适用于单宁含量高的样品，不适合低含量和微量测定；另外皮粉试剂的供应和质量都较难保证。
pH 值和缓冲剂对抗坏血酸-半胱氨酸模式反应形成香味化合物的影响刘应煊，余爱农(湖北民族学院化学与环境工程学院，湖北 恩施 445000)摘 要：以固相微萃取-气相色谱-质谱联用技术对抗坏血酸与半胱氨酸的模式反应产物进行鉴定，研究pH 值和缓冲剂浓度对模式反应形成香味化合物的影响。
依赖于不同的p H 值条件，模式反应主要产生呋喃、吡嗪、噻唑、噻吩及含硫脂环化合物，这些化合物种类及产量的变化形成各具特色的肉香风味，呋喃类化合物主要形成于低pH 值条件下，而吡嗪类化合物则易于在碱性条件下生成，噻唑类化合物的形成与p H 值的依赖性不太显著，但过高的酸度会抑制其生成，中性偏碱的条件对噻吩和含硫脂环化合物的生成有利；Na 2HPO 4-NaH 2PO 4缓冲剂对模式反应没有催化作用，它们对模式反应形成香味化合物的影响体现于其维持反应体系pH 值稳定的能力，0.20mol/L Na 2HPO 4-NaH 2PO 4缓冲剂对维持反应体系pH 值的相对稳定是合适的。
关键词：M ai l l ar d 反应；抗坏血酸；香味化合物；固相微萃取；p H 值；缓冲剂Effect of pH and Buffer on Aroma Compound Generation from Model Reaction of Ascorbic Acid with CysteineLIU Ying-xuan ，YU Ai-nong(School of Chemical and Environmental Engineering, Hubei University for Nationalities, Enshi 445000, China)Abstract ：The aroma compounds generated from a model reaction system of ascorbic acid (ASA) and cysteine (Cys) were identified by solid-phase microextraction-gas chromatography-mass spectrometry (SPME-GC-MS). The effects of pH and buffer concentration on the formation of aroma compounds were investigated. The major aroma compounds including furans,pyrazines, thiazoles, thiophenes, and alicyclic S compounds were generated in the model reaction system at various pH conditions. The types and amounts of these compounds could result in the formation of distinctive meat-like flavor. Furans were produced mainly under acidic pH conditions. In contrast, pyrazines were easy to generate in an alkaline environment. Thiazoles formation was not affected by pH, but high acidity could inhibit their generation. Neutral or slightly alkaline medium was conducive to the formation of thiophenes and alicyclic S compounds. Na 2HPO 4-NaH 2PO 4 buffer did not exhibit catalytic effect on the model reaction; on the other hand, its effect on aroma compound generation from model reaction system was exclusively concentrated on the ability to keep the pH stable. Therefore, 0.20 mol/L Na 2HPO 4-NaH 2PO 4 buffer is appropriate to maintain a relatively stable pH in the model reaction system.Key words ：Maillard reaction ；ascorbic acid ；aroma compound ；solid-phase microextraction ；pH ；buffer 中图分类号：TS201.7 文献标识码：A 文章编号：1002-6630(2012)06-0143-07收稿日期：2011-03-08基金项目：国家自然科学基金面上项目(20876036)作者简介：刘应煊(1977—)，男，讲师，硕士，主要从事气相色谱-质谱联用技术研究。
单宁酸在不同pH缓冲液条件下的含量变化
徐国发;郑仕萍;张建博;陈晓顺;范源
【期刊名称】《云南中医中药杂志》
【年(卷),期】2015(036)006
【摘要】目的研究和分析单宁酸在不同pH的磷酸盐缓冲液中水解后的含量变化.方法采用在常温下观察单宁酸在不同pH的磷酸盐缓冲液(pH分别为2、3、4、5、6)中的水解情况,应用反相高效液相色谱仪测定单宁酸及其水解产物没食子酸含量,
并比较和分析单宁样品液水解前后单宁酸和没食子酸含量变化.结果单宁酸随着
pH值的上升,其含量呈逐渐下降的趋势,没食子酸的含量呈现逐渐上升的趋势.结论
单宁酸及其水解产物没食子酸在不同pH条件下的含量变化反映了酸碱度对单宁酸水解反应的影响,本实验研究可为单宁酸在中药提取加工、养护、储存等方面的应
用提供一定参考.
【总页数】3页(P88-90)
【作者】徐国发;郑仕萍;张建博;陈晓顺;范源
【作者单位】云南中医学院,云南昆明650500;云南中医学院,云南昆明650500;云
南中医学院,云南昆明650500;云南中医学院,云南昆明650500;云南中医学院,云南昆明650500
【正文语种】中文
【中图分类】R284
【相关文献】
1.RP-HPLC检测不同pH条件下毛诃子中单宁酸等4种多酚化合物含量变化
2.测定不同pH条件下三果汤中鞣云实素GA、EGCG、EGC、ECG的含量变化
3.不同pH条件下五倍子中没食子酸、单宁酸、β-PGG含量测定及分析
4.不同pH条件下测定藏药三果汤中没食子酸、单宁酸、β-PGG含量变化及分析
5.HPLC法测定不同pH条件下余甘子中4种成分的含量变化
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单宁酸，又称鞣酸，英文名Tannic acid ，分子式c H ：0 。
常温下为淡黄色至浅棕色粉末，有特殊气味，味极涩。
溶于水、乙醇、丙酮，不溶于氯仿或乙醚。
容易吸潮，在空气中易氧化，氧化后颜色比较深? 。
目前，单宁酸主要从天然植物或植物虫瘿五倍子中提取。
其中，五倍子是一种林副产品，又名文蛤，是倍蚜虫在漆树科植物盐肤木、青麸杨或红麸杨叶子上寄生所形成的早瘿。
五倍子适宜生长在温暖湿润的山区和丘陵，我国大部分地区均有分布，主产区集中在湖北、湖南、贵州、四川、陕西、云南等六省，这些省的五倍子产量约占全国的90％以上。
以五倍子为原料生产的单宁酸及其系列产品被广泛应用于医药、食品、制革、冶金、印染、电子、化妆品、国防等行业。
将五倍子的提取物直接进行浓缩、干燥即可制得工业单宁酸。
我国林业行业标准《工业单宁酸》(LY／T 1300—2005)中规定产品的单宁酸质量分数》81. O%。
由此可看出，从五倍子中提取的单宁含量较低，而杂质含量较高，包括一些树胶、植物蛋白、淀粉、葡萄糖、游离没食子酸、无机盐等。
要完全除去这些杂质是较困难的，仅可通过一系列纯化方法和技术，不同程度地提高单宁酸产品的纯度，以满足市场的需求J 。
1 从五倍子中提取单宁酸的常用方法目前提取单宁酸的方法主要有水提取法、溶剂提取法、超临界cO:萃取法和超声辅助提取法等。
1. 1 水提取法将中草药粗粉用水加热煮沸，保持一定时间，部分有效成分即可浸出。
此方法提取效率一般不高，而且过热会破坏有效成分，多糖丰富的成分过滤也困难姜宁等采用、k(3 ) 正交实验，利用水提取法将五倍子用热水浸提，滤除残渣。
提取结束后过滤，3次淋洗，浓缩及定容，取样测定含量。
并采用最优方法，即料液比1: 30,提取时间为3h提取温度60C。
采用最优方法提取3次后, 单宁酸的平均提取率仅49. 3%。
1. 2超临界Co,萃取法超临界流体萃取分离过程是利用超临界流体的溶解能力与其密度的关系，即利用压力和温度对超临界流体溶解能力的影响而进行的。
黑龙江东方学院食品化学综合设计实验实验题目：不同方法测定苹果中单宁的含量姓名曹智学号10202201专业食品科学与工程班级2010-2/2指导教师姚晶学部食品与环境工程实验设计2012年6月8日实验题目果蔬中单宁含量的测定摘要单宁是多酚中高度聚合的化合物，广泛存在于自然界中，主要应用于日化、食品、医药、制革等领域。
简要介绍了植物单宁的性质、生理活性及应用，综述了单宁含量的经典测定方法以及现代测定方法，并对其发展前景进行了展望化学本质：鞣质是高分子多酚衍生物性质：1.有涩味、易氧化2.易与金属离子反应生成褐黑色物质3.重金属离子与鞣质生成不溶性盐4.易溶于水、丙酮、乙醇等，不溶于烃类、氯仿、无水乙醚关键词：1.涩味2.氧化3.金属离子4.吸光值目录摘要 (1)1前言 (3)1.1实验目的 (3)1.2实验原理 (3)2材料与方法 (4)2.1实验材料 (4)2.1.1实验原料 (4)2.1.2实验试剂 (4)2.2实验设备 (5)2.3实验方法 (6)2.3.1络合滴定法 (6)2.3.2分光光度法 (6)2.3.3高锰酸钾滴定法 (7)3结果与讨论 (8)3.1络合滴定法 (8)3.2分光光度法 (9)3.3高锰酸钾滴定法 (9)结论 (11)参考文献 (12)致谢 (13)实验题目果蔬中单宁含量的测定）1 前言1.1 实验目的了解单宁性质及熟练掌握单宁含量的测定方法1.2 实验原理方法一：EDTA络合滴定法本方法操作简便，实验条件容易控制，适合于单宁含量较少的植物样品的测定，测定相对误差一般不超过2%。
根据单宁可与重金属离子形成络合物沉淀的性质，在样品提取液中加入过量的标准醋酸锌溶液，待反应完全后，再用EDTA标准溶液滴定剩余的醋酸锌，根据EDTA标准溶液的消耗量，可计算出样品中单宁的含量方法二：分光光度法分光光度法是通过测定被测物质在特定波长或一定波长范围内光的吸收度，以此对该物质进行定性和定量分析的方法。
不同pH条件下五倍子中没食子酸、单宁酸、β—PGG含量测定及分析作者：周国丽郑仕萍杨晓红郭雪范源来源：《云南中医中药杂志》2014年第12期摘要：目的研究及分析在不同的pH溶液中，五倍子中没食子酸、单宁酸、五没食子酰基葡萄糖（β-PGG）的含量变化。
方法将五倍子粉末分别加入pH为4，4.5，5，5.5，6醋酸盐缓冲液中，在95℃水浴条件下提取3.5 h，用反相高效液相色谱测定没食子酸、单宁酸、β-PGG的含量。
结果当pH等于4时，五倍子醋酸盐缓冲液的没食子酸含量最高；pH等于4.5时，单宁酸的含量最高；pH等于5.5时，β-PGG的含量最高。
结论在pH分别等于4、4.5、5.5的条件下，五倍子醋酸盐缓冲液中的没食子酸、单宁酸、β-PGG的含量最高。
关键词：五倍子；醋酸盐缓冲液；β-PGG；没食子酸；单宁酸；HPLC；不同pH中图分类号：P284 文献标志码：A 文章编号：1007-2349（2014）12-0059-03五倍子是我国传统中药，《本草纲目》记载五倍子性酸、咸、平、无毒，能敛肺降火，化痰饮，止咳嗽、止渴等[1]。
临床研究表明五倍子具有清除自由基、抗氧化、抗菌、抗病毒以及收敛等药理作用。
五倍子含有丰富的鞣质成分，如β-PGG、没食子酸、单宁酸等，通常这些活性成分的提取方法有溶剂提取法[2-5]、水解法[6]等。
为了研究五倍子提取的新实验方法，通过用不同pH醋酸缓冲液，结合溶剂提取法提取五倍子中的β-PGG、没食子酸、单宁酸，测定并分析其含量变化。
1 材料与方法1.1 材料与试剂干燥五倍子。
乙腈（色谱纯），甲醇（色谱纯），磷酸（分析纯），醋酸（分析纯），醋酸钠，均购自云南丹赤贸易有限公司，纯净水。
β-PGG标准品（购自成都普瑞法科技开发有限公司，批号：14021908）、没食子酸（购自云南昆明中检所，批号：110831-201204）、单宁酸标准品（成都迈斯克医药科技有限公司，批号：130721）。
不同pH条件下五倍子中没食子酸、单宁酸、β—PGG含量测定及分析目的研究及分析在不同的pH溶液中，五倍子中没食子酸、单宁酸、五没食子酰基葡萄糖（β-PGG）的含量变化。
方法将五倍子粉末分别加入pH为4，4.5，5，5.5，6醋酸盐缓冲液中，在95℃水浴条件下提取3.5 h，用反相高效液相色谱测定没食子酸、单宁酸、β-PGG的含量。
结果当pH等于4时，五倍子醋酸盐缓冲液的没食子酸含量最高；pH等于4.5时，单宁酸的含量最高；pH等于5.5时，β-PGG的含量最高。
结论在pH分别等于4、4.5、5.5的条件下，五倍子醋酸盐缓冲液中的没食子酸、单宁酸、β-PGG的含量最高。
标签：五倍子；醋酸盐缓冲液；β-PGG；没食子酸；单宁酸；HPLC；不同pH五倍子是我国传统中药，《本草纲目》记载五倍子性酸、咸、平、无毒，能敛肺降火，化痰饮，止咳嗽、止渴等[1]。
临床研究表明五倍子具有清除自由基、抗氧化、抗菌、抗病毒以及收敛等药理作用。
五倍子含有丰富的鞣质成分，如β-PGG、没食子酸、单宁酸等，通常这些活性成分的提取方法有溶剂提取法[2-5]、水解法[6]等。
为了研究五倍子提取的新实验方法，通过用不同pH醋酸缓冲液，结合溶剂提取法提取五倍子中的β-PGG、没食子酸、单宁酸，测定并分析其含量变化。
1 材料与方法1.1 材料与试剂干燥五倍子。
乙腈（色谱纯），甲醇（色谱纯），磷酸（分析纯），醋酸（分析纯），醋酸钠，均购自云南丹赤贸易有限公司，纯净水。
β-PGG 标准品（购自成都普瑞法科技开发有限公司，批号：14021908）、没食子酸（购自云南昆明中检所，批号：110831-201204）、单宁酸标准品（成都迈斯克医药科技有限公司，批号：130721）。
1.2 仪器DFY-600摇摆式高速万能粉碎机，D2KW-D电热恒温水浴锅，Agilent1200型高效液相色谱仪（VWD检测器），分析天平，酸度计（OHAUS/奥豪斯，型号STARTER 3100/F）。
单宁酸在不同pH缓冲液条件下的含量变化作者：徐国发郑仕萍张建博等来源：《云南中医中药杂志》2015年第06期摘要：目的研究和分析单宁酸在不同pH的磷酸盐缓冲液中水解后的含量变化。
方法采用在常温下观察单宁酸在不同pH的磷酸盐缓冲液（pH分别为2、3、4、5、6）中的水解情况，应用反相高效液相色谱仪测定单宁酸及其水解产物没食子酸含量，并比较和分析单宁样品液水解前后单宁酸和没食子酸含量变化。
结果单宁酸随着pH值的上升，其含量呈逐渐下降的趋势，没食子酸的含量呈现逐渐上升的趋势。
结论单宁酸及其水解产物没食子酸在不同pH条件下的含量变化反映了酸碱度对单宁酸水解反应的影响，本实验研究可为单宁酸在中药提取加工、养护、储存等方面的应用提供一定参考。
关键词：单宁酸；水解反应；没食子酸 pH；磷酸盐缓冲液中图分类号：R284文献标志码：A文章编号：1007-2349（2015）06-0088-03单宁酸（Tannic acid）是一种存在于多种天然药用植物的多元酚类化合物，具有很强的生物和药理活性，是具有重要开发价值的天然产物[1]。
分子式C76H52O46，能溶于乙醇、水、丙酮，几乎不溶于苯、乙醚、石油醚、氯仿等[2]。
，是没食子酸酯及其衍生物与葡萄糖或多酚通过酯键相连形成的化合物，遇酸、碱、酶能够水解，水解时能生成双没食子酸酯，双没食子酸酯能进一步水解成没食子酸和葡萄糖等小分子化合物[3-5]。
单宁酸存在于多种植物的树皮和果实中，如中国五棓子、塔拉果荚、石坚石榴、漆树叶、黄护、金缕梅树、柿子、君迁子、葡萄、李子、梨、山核桃、橘子、桃子、山楂、茶叶等。
单宁酸在医学上能用于收敛、止血、抗菌消炎、止泻、驱虫、抗多种病原体感染，对化学诱变的皮肤、肺、前胃肿瘤有很好的抑制作用，能与细胞外或组织外的钙离子络合.可抵抗平滑肌钙诱导的收缩，发挥降血压作用[6]，能够阻碍鸟氨酸脱羧酶的诱导和过氧化物的产生，提高老鼠体内的抗氧化和抗癌效果[7]，对HIV-RT有一定抑制活性[8]，还具有抗突变、抗脂质过氧化、改善肝肾功能、降脂等作用[9]。
食品领域中能作酒类和饮料的澄清剂、稳定剂以及食品添加剂中的辅色、调味、赋形等[10-12]，此外单宁酸在制革、日化、冶金、染料、电子及轻工等领域中也应用广泛。
没食子酸（Gallic acid）也是一种多酚类弱酸性化合物。
化学式为C7H6O5，化学命名为3，4，5-三羟基苯甲酸[13]。
通常以糖苷键或酯键的形式与多元醇结合成水解单宁存在于植物体和果实中，能溶于热水、乙醇、乙醚、甘油和丙酮，难溶于冷水，不溶于苯和氯仿。
在碱性和中性条件下较不稳定，而对强酸（1mol/L）、强光、高温较稳定，在pH为2～6的磷酸盐缓冲液条件下能保持相对稳定[14]。
没食子酸对肝脏、肾脏、心血管有较强的亲和力，具有抗突变、抗炎、抗氧化、抑菌、降血糖、心血管保护等生物学效应，其中对肿瘤、多种致癌、促癌物有突出的抵抗作用[15-20]。
单宁酸和没食子酸作为一种在医药等领域都具有重要作用的多酚类鞣质，为合理地利用单宁酸等多酚类鞣质，本实验根据单宁酸的化学性质及没食子酸的稳定性，观察单宁酸在不同pH缓冲溶液中水解后含量及其产物没食子酸的含量变化情况。
1实验材料与仪器1.1实验药品单宁酸样品（购自成都迈斯克公司）；单宁酸对照品（购自云南省药检所）；没食子酸对照品（购于昆明中检所）；1.2仪器与试剂Agilent1200型高效液相色谱仪（美国安捷伦公司）；分析天平；电子天平；精密pH测定仪计（0.01pH）；HH-S数显恒温水浴锅；移液管；烧杯；玻璃棒；容量瓶；0.45um微孔滤膜；1mL注射器；甲醇（色谱纯）；磷酸（分析纯）；磷酸氢二钠（分析纯）；丙酮（分析纯）；纯化水；2实验方法2.1磷酸盐缓冲液的配制A液：取磷酸16.6 mL，加纯化水至1000 mL，摇匀。
B液：称取磷酸氢二钠71.63 g，加纯化水使溶解成1000 mL。
取上述A液72.5 mL与B液27.5 mL混合配制，摇匀，即得pH=2.00的缓冲液。
以pH=2的缓冲液为基本底液，再用纯化水将其稀释成pH为2、3、4、5、6的缓冲液。
2.2对照品溶液的制备取没食子酸对照品适量，于分析天平上精密称定，加50%甲醇溶解配制定容成每1 mL含25 μg的溶液，即得；取单宁酸对照品适量，于分析天平上精密称定，用乙醇：水：丙酮（69.9%：29.8%：0.3%）溶解定容成每1 mL含30 μg的溶液，即得。
2.3供试品溶液的制备取单宁酸样品适量，精密称定样品0.00500 g，以乙醇：水：丙酮（69.9%：29.8%：0.3%）溶解，配制定容成每1 mL含20 μg的溶液25 mL。
取移液管分别吸取制备好的单宁酸样品溶液1 mL，放入固定体积的不同pH的磷酸盐缓冲液中，超声使其溶解和混匀，以恒温水浴锅控制水浴环境温度在25±0.5℃，让单宁酸样品溶液在恒温条件下充分水解1 h，对水解后的样品液用微孔滤膜（0.45 um）进行过滤后，即得供试品溶液。
2.4色谱条件2.4.1单宁酸色谱条件色谱柱ZoRBAX SB-C18柱（4.6×250 mm，5 um）；流动相：甲醇-水（80：20）；柱温：室温；检测波长：275 nm；流速：0.5 mL/min；进样量：2 uL[21]。
2.4.2没食子酸色谱条件色谱柱ZoRBAX SB-C18柱（4.6×250 mm，5 um）；流动相：甲醇和0.2%磷酸（5：95）；柱温：25℃；检测波长：273 nm；流速：1 mL/min；进样量：10 uL。
2.5标准曲线的绘制2.5.1单宁酸标准曲线的绘制于分析天平上精密称定定量的单宁酸对照品，以乙醇：水：丙酮（69.9%：29.8%：0.3%）溶解定容配制成每1 mL含31μg的溶液，按上述单宁酸色谱条件分别取1、3、5、7、9ul不同体积进样，以单宁酸的峰面积（Y）对标准品的质量（X）进行线性回归，得回归方程Y=5261.5X-24.993，R2=0.9987，结果表明：单宁酸峰面积值与质量有良好的线性关系，线性范围为0.132-0.396 ug。
2.5.2没食子酸标准曲线的绘制取没食子酸对照品适量，于分析天平上精密称定，加50%甲醇溶解配制定容成每1 mL含33μg的溶液，按上述色谱条件分别进样4、6、8、10、12μL，以没食子酸的峰面积（Y）对标准品质量（X）进线性回归，得方程Y=1740.2x-68.001，R2=0.9964，结果表明：没食子酸峰面积值与质量有良好的线性关系，线性范围为0.062-0.31 ug。
2.6单宁酸和没食子酸的含量测定分别取2.3项下方法制备的供试品溶液，按2.4色谱条件分别测定单宁酸、没食子酸在不同pH的磷酸盐缓冲液条件下的含量，用外标法进行计算。
3实验结果与分析3.1从图中可以看出，在pH2～6的范围内，随着pH值的增大，单宁酸含量逐渐减少（见图3），没食子酸含量逐渐增加（见图4）。
据此表明单宁在接近中性环境中更易水解产生没食子酸。
3.2从表1中的数据中可以看出，当pH 2～4的范围内，单宁酸含量下降速度快，pH 5～6时单宁酸含量下降速度慢，而没食子酸含量在pH 2～4范围内上升慢，在pH 5～6时含量上升快，说明在pH 2～4范围极大部分的单宁并未转化为没食子酸，其有可能产生1，2，3，4，6-五-O-没食子酰-β-D-葡萄糖（β-PGG）、双没食子酸酯、双没食子酸等其它的多酚化合物。
说明pH2～4在不利于单宁酸酯键断裂产生没食子酸。
3.3通过实验数据分析单宁酸和没食子酸的含量变化，可以初步认为在温和的pH条件下更有利于单宁的酯键或苷键断裂产生没食子酸。
4结论单宁酸和没食子酸存在于多种药用植物中，具有很强的药学活性，在医药等领域有广阔开发利用的前景。
通过实验测定和分析单宁酸及其产物没食子酸在不同pH条件下的含量变化情况，让我们进一步认识了单宁酸和没食子酸的化学稳定性，此实验可为进一步了解和研究单宁酸及多酚化合物理化性质提供一定参考，也为医药及相关领域对单宁酸的合理利用提供一定的参考。
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