第5章 食品卫生微生物学检验方法

食品卫生微生物学检验标准
以下是食品卫生微生物学检验标准的要点：
1. 采样方法：应根据不同食品的特点和检验目的，选择适当的采样方法，确保采集到有代表性的样本。

2. 检验项目：包括菌落总数、大肠菌群、致病菌等项目的检验，具体检验项目可根据食品种类和相关法规要求进行选择。

3. 检验方法：应选择国家标准或行业标准中规定的检验方法进行检验，确保检验结果的准确性和可靠性。

4. 结果判定：根据检验结果，按照国家标准或行业标准中的判定规则，对食品卫生状况进行判定。

5. 报告编制：检验完成后，应及时编制检验报告，报告内容应包括样品信息、检验项目、检验结果、结果判定等信息。

6. 质量控制：应建立完善的质量控制体系，确保检验过程的准确性和可靠性。

包括对检验仪器设备的校准、维护和检定，以及对检验人员的培训和考核。

课程编号《食品微生物学》课程教学大纲二、课程简介食品微生物学是为食品科学与工程专业和食品质量与安全专业学生开设的一门专业基础课，又是两个专业的主干课程和主要课程之一，为食品保藏原理、食品安全与卫生学、食品工艺学、水产食品学、食品工艺学、食品质量管理与安全控制、食品法规与标准等课程的重要基础课，同时也是一门专业课。

食品微生物学的教学内容主要包括微生物学概况、食品微生物的形态、营养和生长特性、微生物的代谢、微生物的遗传、微生物的生态，微生物与机体免疫，微生物与食品安全等理论知识，实验教学包括微生物的形态观察、微生物的分离、培养方法及检测技术等。

通过学习食品微生物学使学生掌握其基础知识、基本原理，培养学生掌握微生物学的基本实验技能及检验技术，使学生具有扎实的理论知识和实际应用能力。

为学生学习以后的专业课程以及毕业后从事食品生产和科研工作奠定坚实的基础。

三、课程性质食品微生物学是食品科学与工程、食品质量与安全专业的一门必修专业基础课，是两个专业的主干课程和主要课程，为很多专业主要课程和专业课程的重要基础。

四、课程教学总体目标学生修完该课程后，应熟练地掌握细菌、酵母菌和霉菌的形态结构、营养和生长特性、有害微生物的控制、微生物的代谢、微生物与食品安全，了解微生物的遗传与育种、微生物生态、微生物与机体免疫等基本理论。

掌握微生物形态观察、微生物的分离、培养方法及检测等微生物实验技术。

五、理论教学安排及学时分配注：1. 授课方式：讲授、演示、指导参观、课堂讨论、讲解习题等。

2. 授课手段：板书、多媒体、视频、网络等。

六、理论教学内容及要求第一章绪论【教学目标】（1）了解微生物的发展与展望；原核微生物的分类和鉴定《伯杰氏手册》简介；《系统手册》提要。

（2）理解微生物的分类。

（3）掌握微生物与食品微生物学；微生物的定义与特点；微生物与食品（包括食品生产与安全）；微生物的命名。

【授课内容】（细化到章、节、目）第一节微生物与食品微生物学，微生物的定义与特点；微生物与食品（包括食品生产与安全）第二节微生物的发展与展望第三节微生物的命名与分类第四节原核微生物的分类和鉴定，《伯杰氏手册》简介；《系统手册》提要。

生长曲线以少量纯培养细菌接种有限的液体培养基，并在培养过程中定时取样测数，可以发现细菌的生长有一定的规律，若以时间为横坐标，菌数的对数为纵坐标，可以绘出一条类似于S形的曲线，这就是细菌的生长曲线。

由生长曲线可将细菌的群体生长划分为4个时期：延迟期、对数期、稳定期、衰亡期。

延迟期这个时期内的细菌细胞通常表现为个体变长，体积增大和代谢活跃，细胞内的RNA含量增加使细胞质的嗜碱性增强，并由于代谢活性的提高而使贮藏物消失；细胞对外界理化因子（如NaCl、热、紫外线、x—射线等）的抵抗能力减弱。

细菌延滞期的长短取决于菌种的遗传特性、菌龄及接种前后培养条件的差异等。

将处于对数期的培养物接种到相同的培养环境中可以缩短乃至消除延滞期。

对数期生长旺盛，代谢活力增强，分裂速度加快，菌数以几何级数增加，代时稳定，其生长曲线表现为一条上升的直线。

稳定期在对数末期，由于营养物质(包括限制性营养物质)的逐渐消耗,有生理毒性的代谢产物在培养基中的积累及培养环境条件中pH和氧化还原电位Eh等对细菌生长不利的变化，使细菌的生长速度降低，增殖率下降而死亡率上升，当两者趋于平衡时，就转入稳定期。

可以通过补料，调节ｐH、温度或通气量等措施来延长稳定期衰亡期细菌在经过稳定期后，由于营养和环境条件进一步恶化,死亡率迅速增加，以致明显超过增殖率，这时尽管群体的总菌数仍然较高，但活菌数急剧下降，其对数与时间呈反比，表现为按几何级数下降，生长曲线直线下垂，有人又称其为对数死亡期。

这个时期的细胞常表现为多形态，产生许多大小或形态上变异的畸形或退化型，其革兰氏染色亦不稳定，许多G+细菌的衰老细胞可能表现为G-。

恒浊法和恒化法培养核心内容是什么？大概过程是指什么？1.恒浊连续培养不断调节流速而使细菌培养液浊度保持恒定的连续培养方法叫恒浊连续培养。

在恒浊连续培养中装有浊度计，借光电池检测培养室中的浊度(即菌液浓度)，并根据光电效应产生的电信号的强弱变化，自动调节新鲜培养基流入和培养物流出培养室的流速。

食品微生物检验学习本章的意义和内容：掌握光学显微镜的运用方法，掌握细菌染色标本的制造技术。

掌握样品的采集和处置方法。

掌握菌落总数的测定方法与步骤。

掌握大肠菌群的测定方法与步骤。

学会乳糖胆盐发酵管培育基的制备。

掌握革兰氏染色方法。

本章习题内容主要触及：食品微生物检验的范围；食品微生物检验的目的；细菌染色的基本方法和步骤；常用染色方法及染色液；食品微生物学普通检验技术。

一、食品微生物检验的意义食品微生物检验方法为食品监测必不可少的重要组成局部。

(1)它是权衡食品卫生质量的重要目的之一，也是判定被检食品能否食用的迷信依据之一。

(2)经过食品微生物检验，可以判别食品加工环境及食品卫生环境，可以对食品被细菌污染的水平做出正确的评价，为各项卫生管理任务提供迷信依据，提供传染病和人类、植物和食物中毒的防治措施。

(3)食品微生物检验是以贯彻〝预防为主〞的卫生方针，可以有效地防止或许增加食物中毒人畜共患病的发作，保证人民的身体安康；同时，它对提高产质量量，防止经济损失，保证出口等方面具有政治上和经济上的重要意义。

二、食品微生物检验的范围食品微生物检验的范围包括以下几点：(1)消费环境的检验：车间用水、空气、空中、墙壁等。

(2)原辅料检验：包括食用植物、谷物、添加剂等一切原辅资料。

(3)食品加工、贮藏、销售诸环节的检验：包括食品从业人员的卫生状况检验、加工工具、运输车辆、包装资料的检验等。

(4)食品的检验：重要的是对出厂食品、可疑食品及食物中毒食品的检验。

三、食品微生物检验的目的我国卫生部公布的食品微生物目的有菌落总数、大肠菌群和致病菌三项。

(1)菌落总数菌落总数是指食品检样经过处置，在一定条件下培育后所得1g或1mL检样中所含细菌菌落的总数。

(2)大肠菌群大肠菌群是旅居于人及温血植物肠道内的肠居菌，它随着的大便排出体外。

食品中假设大肠菌群数越多，说明食品受粪便污染的水平越大。

(3)致病菌致病菌即可以惹起人们发病的细菌。

食品微生物检验复习资料绪论食品卫生：指“为了确保食品安全性和适用性在食物链的所有阶段必须采取的一切条件和措施”。

食品卫生学：研究食品中存在或从环境可能进入食品、能威胁人体健康的有害物质和因素及其评价方法、预防与控制措施，以提高食品卫生质量，保证食用者安全的学科。

食品微生物检验学：是运用微生物学的理论与技术，研究食品中微生物的种类、数量、性质、活动规律等特性，建立食品微生物学检验方法和确定食品卫生的微生物学标准的一门应用性科学。

食品微生物检验学特点：1.研究对象以及研究范围广：食品种类多，各地区有各地区的特色，分布不同，在食品来源、加工、运输等都可能受到各种微生物的污染；微生物的种类非常多，数量巨大。

2.涉及学科多样：食品微生物检验是以微生物学为基础的，还涉及生物学、生物化学、工艺学、发酵学等方面的知识，以及兽医学方面的知识等。

根据不同的食品以及不同的微生物，采取的检验方法也不同。

3.实用性及应用性强：本学科在促进人类健康方面起着重要的作用。

通过检验，掌握微生物的特点及活动规律，识别有益的、腐败的、致病的微生物，在食品生产和保藏过程中，可以充分利用有益微生物为人类服务，同时控制腐败和病原微生物的活动，防止食品变质和杜绝因食品而引起的病害，保证食品卫生的安全。

4.采用标准化：在食品的卫生质量标准中，有明确的微生物学标准。

必须达到法规规定的标准。

《中华人民共和国国家标准——食品卫生检验方法》中的具体规定，这是法定的检验依据。

食品微生物检验的任务：1、研究各类食品中微生物种类、分布及其特性2、研究食品的微生物污染及其控制，提高食品的卫生质量3、研究微生物与食品保藏的关系4、研究食品中的致病性、中毒性、致腐性微生物5、研究各类食品中微生物的检验方法及标准；为生产出安全、卫生、符合标准的食品提供科学依据。

第一章微生物常规鉴定技术接种：将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程叫做接种。

划线接种：这是最常用的接种方法。

食品微生物检验是通过检测食品中的微生物数量和种类，以评估其卫生状况和质量。

微生物检验是确保食品安全的重要手段之一，因为食品中的微生物不仅可能引起腐败，还可能导致食源性疾病。

以下是食品微生物检验的一般步骤和一些常见的检测项目：
一般步骤：
1. 样品采集：从食品样品中取得代表性的样本，确保样本的收集方式和过程不会引入外部微生物。

2. 样品制备：对采集到的样品进行适当的处理和制备，以获得可检测的微生物。

3. 培养：将样品在适当的培养基上进行培养，以促使微生物生长。

4. 计数：利用计数方法，例如表面计数法或液体培养法，来确定样品中微生物的数量。

5. 鉴定：对培养后的微生物进行鉴定，确定它们的种类。

常见的检测项目：
1. 总菌落计数：评估食品中的总微生物数量，常用于评估食品的卫生状况。

2. 大肠菌群检测：大肠菌群是一类与粪便相关的微生物，其检测可以作为食品中病原菌的指标。

3. 霉菌和酵母检测：评估食品中霉菌和酵母的数量，特别是对于易腐食品。

4. 致病菌检测：检测食品中是否存在常见的致病菌，例如沙门氏菌、大肠埃希氏菌等。

5. 菌落形态鉴定：对培养的微生物进行形态学和生理学鉴定，以确定其种类。

6. 抗生素敏感性测试：针对检测到的致病菌，进行抗生素敏感性测试，以评估其对抗生素的敏感性。

食品微生物检验的目标是确保食品的卫生和安全，防止因食用受污染的食品而引发食源性疾病。

检验的具体项目和方法可能因地区、国家和食品种类而异。

在实施检验时，通常需要遵循相关的法规和标准。

食品安全与卫生中的微生物检测实验报告一、实验目的本实验的目的是探究食品中微生物的检测方法，以确保食品的安全与卫生。

二、实验原理1. 食品中微生物检测的重要性：食品中的微生物污染可以引起食物中毒、食源性疾病等危害健康的问题。

因此，及时检测并控制食品中的微生物是确保食品安全和卫生的重要步骤。

2. 常用微生物检测方法：a. 培养法：通过将食品样品培养在含有特定营养物质的培养基上，利用微生物生长的特性来检测和计数微生物。

例如，采用总大肠菌群检测食品中的细菌污染程度。

b. 酶联免疫吸附试验（ELISA）：利用特定抗体与食品中的微生物发生特异性反应，通过测定光信号的强度来检测微生物的存在。

c. PCR（聚合酶链反应）法：利用特定引物和酶来扩增食品样品中微生物的基因片段，从而检测微生物的存在与数量。

三、实验步骤1. 样品的制备：选取一定数量的待测试食品样品，进行表面消毒，以减少外界的微生物污染。

2. 对待测样品进行样品预处理：根据不同的检测方法选择相应的样品预处理方法，如液体悬浮液培养法、表面刷拭法等。

3. 进行微生物检测：a. 培养法：将经过样品预处理的食品样品分别接种于适宜的培养基上，置于适宜温度下进行培养。

根据不同微生物的特点，培养一定时间后通过菌落计数或荧光染色法来确定微生物的数量。

b. ELISA法：根据所需检测的微生物种类选择相应的试剂盒，按照试剂盒说明书中的方法进行操作，并利用ELISA仪器检测信号强度。

c. PCR法：根据所需检测的微生物种类设计特异性引物，进行PCR扩增反应。

扩增产物经电泳检测，根据检测结果确定微生物的存在与数量。

4. 结果分析与评估：根据实验结果，对不同食品样品进行微生物检测结果的分析，并评估其食品安全和卫生状况。

四、实验结果经过微生物检测，我们得到了以下结果：1. 样品A：采用培养法检测，菌落计数结果显示大肠杆菌数量超标。

2. 样品B：采用ELISA法检测，检测结果显示微生物污染度较低。