动物实验基本操作1
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实验动物的一般操作技术一、目的和意义毒理学研究需要用实验动物来进行各种实验,通过对实验动物的实验观察和分析来研究毒作用,获得毒物的毒性、剂量——反应关系、毒作用机制等方面的资料,因此动物实验是毒理学研究中重要的手段之一。
通过本次实习学习毒理学实验中有关动物实验的基本操作技术,掌握实验动物的选择、动物抓取、染毒方法和生物材料的采集等技术。
二、内容(一)健康动物的选择无论选择哪种种属品系的动物进行实验,均要求选择健康的实验动物。
健康动物检查时要求达到:外观体型丰满,被毛浓密有光泽、紧贴体表,眼睛明亮,行动迅速,反应灵活,食欲及营养状况良好。
选择时重点检查以下项目:1.眼睛明亮、瞳孔双侧等圆,无分泌物。
2.耳耳道无分泌物溢出,耳壳无脓疮。
3.鼻无喷嚏,无浆性粘液分泌物。
4.皮肤无创伤、无脓疮、疥癣、湿疹。
5.颈部要求颈项端正,如有歪斜提示可能存在内耳疾患,不应选作实验动物。
6.消化道无呕吐、腹泻、粪便成形,肛门附近被毛洁净。
7.神经系统无震颤、麻痹。
若动物(大鼠、小鼠)出现圆圈动作或提尾倒置呈圆圈摆动,应放弃该动物。
8.四肢及尾四肢、趾及尾无红肿及溃疡。
(二)实验动物的性别鉴定动物性别不同对毒物的敏感性也不同,这可能与性激素、肝微粒体羟基化反应有关,也随受试物而异。
因此,要根据实验要求选择性别,一般实验如对性别无特殊要求者,宜选用雌性动物各半。
1.大鼠、小鼠主要依肛门与生殖孔间的距离区分,间距大者为雄性,小者为雌性。
雌性生殖器与肛门之间有一无毛小沟,距离较近。
雄性可见明显的阴囊,生殖器突起较雌鼠大,肛门和生殖器之间长毛。
另外成年雄性卧位可见到睾丸,雌性在腹部可见乳头。
(三)实验动物的抓取方法正确地抓取固定动物,是为了在不损害动物健康、不影响观察指标、并防止被动物咬伤的前提下,确保实验顺利进行。
1.小鼠的抓取方法首先用右手从笼盒内抓取鼠尾提起,注意不可抓尾尖(见图A),放在鼠笼盖或实验台上向后拉(见图B),在其向前爬行时,迅速用左手拇指和食指抓住小鼠的两耳和颈部皮肤(见图C),将鼠体置于左手中心,把后肢拉直,以无名指按住鼠尾,小指按住后腿即可(见图D)。
实验一小鼠的基本实验操作一、实验目的:通过实际操作,掌握小鼠的一般操作方法,包括小鼠的抓拿、标记、给药(灌胃、腹腔注射、皮下、肌肉、尾静脉注射)、取血(眶后静脉丛,摘眼球)、脊椎脱臼法处死、大体解剖。
二、实验动物:昆明小鼠2只(1雌1雄)三、实验步骤1、抓取与固定,标记2、去毛3、给药:消化道、腹腔注射、尾静脉注射4、取血:眼眶后静脉丛、尾静脉、眼球摘除法、断头法5、麻醉:氯胺酮腹腔麻醉6、处死:脊椎脱臼法7、解剖:雄性:睾丸、附睾、输精管、鼠蹊腺(在膀胱下方,胶质状,透明)雌性:双角子宫、卵巢肾上腺、胆囊、甲状腺、胃、肝脏、脾、肺、肾、心脏、甲状腺四、实验结果1、抓取与固定标记:抓取:抓小鼠的尾根部固定:抓住小鼠的尾根部,让小鼠在粗糙平面上爬行,后拉尾跟部,右手的拇指与食指抓住小鼠两耳及其间的颈部皮肤,小指与无名指将尾巴固定在手掌面。
并标记: 2、灌胃法:左手抓取小鼠固定后,右手持特制灌胃针,沿一侧口角进针,紧贴咽后壁,头后仰以便伸直消化道,进针2/3后灌生理盐水0、5ml3、注射给药:腹腔注射:从下腹部的两侧进针 ,进针时针与腹部成45°。
进针后稍微晃动针,如无粘滞感则可注射药物尾静脉注射:一人固定小鼠,另一人用左手中指与拇指将尾拉直,食指托住尾部,在尾动脉位置进针注射0、5ml生理盐水。
注射完毕拔出针头,用无菌棉球压迫止血。
4、采血从眼角内侧0、5cm处进针眼球摘除法:左手抓取用固定小鼠,右手持弯头镊在眼球根部将眼球摘除,头朝下,眼眶内血迅速流出。
5、麻醉:0、5%氯胺酮腹腔麻醉:本小鼠重22g,按100mg/kg的药量给药,2分钟麻醉成功6、处死:脊椎脱臼法:按住头部,将尾根部向后上方以短促的力量拉即可致死7、解剖:雄性:寻找到睾丸、附睾、输精管、鼠蹊腺雌性:双角子宫、卵巢 3、7、2 肾上腺:米粒大小胰腺:位于胃下方,类似于脂肪组织,浑浊状 3、7、4 ,胆囊:芝麻大小,浅绿色,半透明,甲状腺:紧贴环状软骨 ,另可解剖出胃、肝脏、脾、肺、肾、心脏。
实验一常用实验动物的实验基本操作实验目的:掌握动物实验的基本操作一、实验动物的选择及捉拿固定(一)实验动物的选择1.小白鼠的生物学特征是什么?主要用于哪些实验?小白鼠性情温顺,易于捕捉,胆小怕惊,对外来刺激敏感。
它胃容量小,不耐饥渴,随时采食。
在机能学实验中常选用该动物。
故适用于大量的实验动物,如:某些药物的筛选实验、半数致死量(LD50)测定、药效比较、毒性实验、妊娠期 20 天左右,常用于避孕药实验及抗癌药实验。
2.大白鼠的生物学特征是什么?主要用于哪些实验?大白鼠性情温顺,行动迟缓,易于捕捉,但受惊吓或粗暴操作时,会紧张不安甚至攻击人。
大鼠嗅觉发达,对外界刺激敏感,抵抗力较强。
大鼠无胆囊,肾单位表浅,肝再生能力强。
大鼠的血压反应比兔稳定,可用它作血压实验,也可用于慢性实验、抗炎、降脂、利胆、子宫实验及心血管系统的实验。
药典规定该动物为催产素效价测定及药品指控中升压物质检查指定动物。
3.家兔生物学特征是什么?主要用于哪些实验?家兔属于草食性动物,性情温顺但群居性差,听觉、嗅觉十分灵敏,胆小易惊,具夜行性和嗜睡性。
它主要利用呼吸散热维持体温平衡,耐冷不耐热,厌湿喜干。
家兔广泛应用于医学研究中。
由于兔耳血管丰富,耳静脉表浅,易暴露,是静脉给药及采血的最佳部位。
兔的减压神经在颈部与迷走交感神经分开走行而自成一束,常用于研究减压神经与心血管活动的关系。
家兔的体温调节较稳定,反应灵敏,常用于发热研究和热源试验,是药品质控中热源检查的指定动物。
家兔对组织胺不敏感,不发生呕吐,因此不适用于组织胺过敏性休克、催吐和镇吐药物的研究。
(二)实验动物的捉拿固定正确的捉拿固定动物是为了不损害动物健康,不影响观察指标,并防止被动物咬伤,保证实验顺利进行。
1、如何正确捉拿及固定小白鼠?小鼠性情温顺,一般不会主动咬人,但取用时动作也要轻缓。
抓取时先用右手提起鼠尾,放在鼠笼盖上或易攀抓的粗糟面上,将鼠尾向后轻拉,此时小鼠前肢紧紧抓住粗糟面,迅速用左手拇指及食指沿其背向前捏住两耳和头颈部皮肤,将小鼠尾巴夹在无名指、小指和手掌之间。
动物实验基本操作一、实验动物的抓取与固定。
(一)小鼠。
1. 抓取。
- 用右手拇指和食指捏住小鼠尾巴中部将其提起,放在鼠笼盖或其他粗糙表面上。
当小鼠向前挣扎时,用左手的拇指和食指迅速捏住小鼠两耳后颈背部皮肤,无名指和小指夹住小鼠尾巴根部,将小鼠固定成头部略向上的姿势。
- 原因:捏住尾巴提起小鼠可以避免小鼠咬伤操作人员,将其放在粗糙表面上是利用小鼠的本能反应(向前挣扎),便于后续准确抓取其颈背部皮肤。
而固定成头部略向上的姿势有利于进行诸如灌胃、注射等操作,并且能防止小鼠咬伤操作人员脸部等部位。
2. 固定。
- 如需进一步固定,可将小鼠放在特制的小鼠固定器内,将其身体和四肢固定好。
也可以将小鼠固定在泡沫板上,用大头针固定其四肢(这种方法常用于解剖实验)。
- 原因:使用固定器可以确保小鼠在实验过程中保持稳定,减少因挣扎而影响实验操作的准确性,同时也能保障操作人员的安全。
对于解剖实验,在泡沫板上用大头针固定四肢可以充分暴露小鼠的身体结构,便于进行精细的解剖操作。
(二)大鼠。
1. 抓取。
- 先用右手抓住大鼠尾巴中部,将大鼠提起,放在粗糙平面上。
然后用左手戴防护手套(大鼠体型较大且可能会激烈挣扎,容易咬伤操作人员),从大鼠背部绕到其胸前,拇指和食指捏住大鼠两耳后颈背部皮肤,其余手指握住大鼠身体,将其提起固定。
- 原因:与小鼠抓取类似,先抓住尾巴提起是为了初步控制大鼠,放在粗糙平面上利用其向前挣扎的本能便于后续抓取。
戴防护手套是因为大鼠的咬合力较强,为了防止操作人员受伤。
2. 固定。
- 可将大鼠放入大鼠固定器中固定。
对于需要进行手术等操作的大鼠,也可将其麻醉后固定在手术台上,用绑带固定其四肢。
- 原因:固定器和手术台固定都能保证大鼠在实验过程中保持稳定,使实验操作能够顺利进行,尤其是在进行需要精细操作的手术时,稳定的固定是确保手术成功的关键因素之一。
二、实验动物的给药操作。
(一)口服给药。
1. 灌胃法(以小鼠为例)- 准备好灌胃针(一般为特制的金属针具)和相应的药物溶液。
动物实验的一般操作实验过程中技术及生物材料的收集是否恰当,直接影响实验结果的质量。
因此,实验人员必须正确地掌握动物实验中的一般操作技术,包括动物的捉拿、固定、性别鉴定、标记、生物材料的收集、处死方法和解剖检查,这是保证实验工作成功的基本条件之一。
一、实验动物的捉拿固定实验动物的正确捉拿和固定,不但可以避免由于过强的刺激和动物的损伤而影响观测结果的正确性,而且还可防止被动物咬伤,从而保证实验的顺利进行。
常用的小鼠、大鼠及家兔的捉拿固定方法如下:(1)小鼠用右手抓住鼠尾,提出后立即放在铁丝笼或粗糙的板面上,而后右手将小鼠缓缓后拉,恰好与鼠要向前爬行的力相反而使其固定,此时可用左手的姆指和食指捏住小鼠耳后枕颈部皮肤即可提起,掌心向上而将鼠体置于掌心中,用无名指和小指将鼠尾压住。
此时小鼠即被固定好,可以进行各种实验操作。
操作熟练后,可采用左手一手抓取法,更为方便,右手可不必放下注射器等器具。
(2)大鼠捉取大鼠时,不宜突然袭击式地去抓它,这样手指容易被咬伤。
取用时,应轻轻抓住其尾巴后提起,置于实验台上,将其放入大鼠固定盒将鼠固定,这样可进行尾静脉取血或注射。
如要作腹腔注射或灌胃操作时,实验者应戴上帆布手套,右手轻轻抓住大鼠的尾巴向后拉,左手抓紧鼠二耳和头颈部的皮肤,并将鼠固定在左手中,右手即可进行操作。
(3)家兔家兔性情一般较温顺而胆小,捉拿动作要轻。
家兔二耳较长,但并不能承担全身重量,因此捕捉家兔不能抓其两耳,使它疼痛而挣扎。
从笼内捉兔时,先轻轻打开笼门,勿使受惊,随之将手伸入宠内,从头前阻拦它跑动,兔便匍伏不动,此时用右手把二耳轻轻地压于手心内,抓住颈部的被毛与皮,提起兔,然后用左手托住它的臂部,兔身的重量大部分落于左手上。
家兔的固定按实验要求而定,如在耳血管采血、注射、观察瞳孔及呼吸变化时,可将家兔装入能使头部露出的特制木箱。
做心脏抽血时,可将其仰卧固定在简易木质手术台上,头部用特制兔头夹固定,四肢用活结粗棉扁带缚在台边。
动物实验基本操作技术之一“实验动物抓取与固定”实验动物的抓取与固定是进行动物实验时的基本操作技术之一,确保实验动物在实验过程中能够稳定地保持固定的姿势,以便进行各种操作和测量。
本文将详细介绍实验动物抓取与固定的基本方法和注意事项。
一、实验动物的选取在选择实验动物时,要综合考虑实验的目的、动物的特性以及实验操作难度等因素。
常见的实验动物有小鼠、大鼠、兔子、猪等。
根据研究的需要,可以选择体型适中、繁殖能力强、易于操作和维护的动物品种。
二、实验动物的准备在进行实验前,需要对实验动物进行一系列的准备工作,以确保实验的准确性和动物的安全性。
1.饲养环境:提供适宜的饲养环境,包括恒温、恒湿的饲养箱、适当的饲料和水源等。
2.麻醉或镇痛:根据实验的需要,可以对动物进行麻醉或镇痛处理,以减轻实验操作对动物的伤害和痛苦。
3.消毒处理:在进行操作前,需要对实验器械、操作台面等进行消毒处理,以防止交叉感染。
三、实验动物抓取的方法在进行实验动物抓取时,可以根据实验的需要选择不同的方法。
1.手持抓取法:适用于小鼠等小型动物,操作者可以用手直接抓住动物的尾部或颈部,保持动物的姿势。
这种方法简单方便,但不适用于进行需要长时间固定的实验。
3.麻醉固定法:适用于大鼠、兔子、猪等体型较大的动物,可以在进行一些需要比较复杂的操作时使用。
在进行麻醉固定时,需要注意选择适宜的麻醉方法和药物,以确保动物的安全。
四、实验动物固定的方法固定实验动物的目的是为了保持动物在实验过程中的稳定性,以便进行各种操作和测量。
常见的实验动物固定方法有以下几种:1.割裂固定法:适用于进行小鼠、大鼠等小型动物的实验。
可以将动物的四肢用绳子或胶布固定在特制的操作平台上,确保动物保持特定的姿势不动。
2.弹簧夹固定法:适用于小鼠、大鼠等小型动物的实验。
可以使用特制的弹簧夹将动物的四肢固定在操作台上,并通过调节夹子的松紧度来控制动物的运动范围。
3.麻醉固定法:适用于大鼠、兔子、猪等体型较大的动物。