2015-动物实验基本操作

动物实验的基本操作技术生理学实验主要以动物为实验对象，为了能获得满意的实验结果，应对动物品系特性有所了解。

实验动物系指供生物医学实验而科学育种、繁殖和饲养的动物。

高质量的实验动物是指通过遗传学与微生物学的控制，培育出来的个体；其具有较好的遗传均一性、对外来刺激的敏感性和实验再现性。

一、常用实验动物的种类及其特点（一）青蛙与蟾蜍两者均属于两栖纲，无尾目。

蟾蜍和青蛙是教学实验中常用的小动物。

其心脏在离体情况下仍可有节奏地搏动很久，可用于心功能方面的实验。

蛙舌与肠系膜是观察炎症和微循环变化的良好标本。

此外，蛙类还能用于水肿和肾功能不全的实验。

（二）小白鼠属于哺乳纲，啮齿目，鼠科。

其繁殖周期短、产仔多、生长快，饲料消耗少，温顺易捉，操作方便，又能复制出多种疾病模型，是药学实验中用途最广泛和最常用的动物。

（三）大白鼠亦属鼠科。

性情不像小白鼠温顺。

受惊时表现凶恶，易咬人。

雄性大白鼠间常发生殴斗和咬伤。

具有小白鼠的其他优点，故在药学实验中的用量仅次于小白鼠。

（四）豚鼠豚鼠又名天竺鼠、荷兰猪。

原产于欧洲中部。

属于哺乳纲，啮齿目，豚鼠科。

性情温顺，胆小。

不咬人也不抓人。

豚鼠可分为短毛、长毛和刚毛3种。

短毛种豚鼠的毛色光亮而紧贴身，生长迅速，抵抗力强，可用于实验。

其余两种对疾病非常敏感，不宜用于实验。

（五）家兔家兔属于哺乳纲，啮齿目，兔科，为草食哺乳动物。

家兔性情温顺、怯懦、惊疑、胆小，是常用的实验动物。

家兔品种很多，在实验室中常用的有：（1）青紫蓝兔：体质强壮，适应性强，易于饲养，生长较快。

（2）中国本兔（白家兔）：抵抗力不如青紫蓝兔强。

（3）新西兰白兔：是近年来引进的大型优良品种，成熟兔体重在4～5.5kg。

（4）大耳白兔：耳朵长大，血管清晰，皮肤白色，但抵抗力较差。

（六）狗狗属于哺乳纲，食肉目，犬科。

狗的嗅觉很灵敏，对外环境的适应力强；血液、循环、消化和神经系统等均很发达，与人类很相近。

狗喜欢接近人，易于驯养。

动物实验的基本操作（动物的捉拿与给药方法）小鼠捉拿法有二种：一种是用右手提起尾部，放在鼠笼盖或其他粗糙面上，向后上方轻拉，此时小鼠前肢紧紧抓住粗糙面，迅速用左手拇指和食指捏住小鼠颈背部皮肤并用小指和手掌尺侧夹持其尾根部固定手中；另一种抓法是只用左手，先用拇指和食指抓住小鼠尾部，再用手掌尺侧及小指夹住尾根，然后用拇指及食指捏住其颈部皮肤。

大鼠捉拿时，右手抓住鼠尾基部，将大鼠放在粗糙面上，左手戴上防护手套或用厚布盖住大鼠，抓住其整个身体并固定其头部以防咬伤。

捉拿时勿用力过猛，勿捏其颈部，以免引起窒息。

家兔捉拿时一手抓住其颈背部皮肤。

轻轻将兔提起，另一手托住其臀部。

猫捉拿时先轻声呼唤，再慢慢将手伸入猫笼中，轻抚猫的头、颈及背部，抓住其颈背部皮肤并以另一手抓其背部。

如遇凶暴的猫，不让接触或捉拿时，可用套网捉拿，必要时可用固定袋将猫固定。

实验动物的给药方法1．灌胃法小鼠灌胃法将小鼠放在粗糙面上，左手拇指和食指捏住小鼠颈背部皮肤，无名指或小指将尾部紧压在手掌上，使小鼠腹部朝上，注意使口腔和食管成一直线。

右手持灌胃针管从小鼠口角插入口腔内，经舌面紧贴上腭进入食管，进针2~3cm 后，如此时动物安静并无呼吸异常，即可将药注入。

如遇阻力或动物憋气时则应抽出重插，不能强插以免刺破食管或误入气管使动物死亡。

兔灌胃法用兔固定箱，可一人操作。

右手将开口器固定于兔口中，舌压在开口器下面，左手将导管经开口器中央小孔插入。

如无兔固定箱，则需两人协作进行，一人就坐，腿上垫好围裙，将兔的躯体夹于两腿间，左手紧握双耳，固定其前身，右手抓住其两前肢。

另一人将开口器横放于兔上下颌之间，固定在舌面上,将导管自开口器中央的小孔插入，慢慢沿兔口腔上腭壁插入食道约15～18cm。

插管完毕将胃管的外口端放入水杯中，切忌伸入水过深。

如有气泡从胃管逸出，说明不在食道内而是在气管内，应拔出来重插。

如无气泡逸出，则可将药推入，并以少量清水冲洗导尿管保证管内药液全部进入胃内。

动物实验基本操作一（固定、性别判定、标识）【实验目的】在做动物试验时，为确保给药、实验顺利进行，防止被动物咬伤、准确辨别动物性别、准确标识动物，要学会用正确方法捉拿实验动物、掌握辨别动物性别的方法以及掌握标识动物的方法。

【实验对象】SD大鼠，KM小鼠，雌雄各半，体重180-250g。

【实验器材和药品】器材：鼠笼、大小鼠固定器、方木板、美式图钉、细绳、防护手套药品：苦味酸80%~90%酒精饱和溶液、20%乌拉坦【实验步骤】一、小鼠的捉拿1、徒手固定：用右手提起尾巴中部，放在鼠笼盖或其他粗糙面上。

向后上方轻拉，此时，小鼠前肢紧紧抓住粗糙表面。

左手拇指和食指迅速捏住小鼠颈背部皮肤，再置小鼠于左手心，并以左手掌心和中指夹住小鼠背部皮肤，无名指压住小鼠尾根部，将其固定于手中。

右手可行注射或其它操作。

2、固定器固定：尾静脉注射或给药时，将小鼠放进固定器中或者大小和重量适当的容器（如烧杯），只露出尾巴，该类容器能够压住尾部，避免其活动。

勿固定过紧造成窒息死亡。

进行腹腔手术或心脏采血时，先准备一个15-20cm的方木板，边缘钉入五颗钉子。

将小鼠四肢分别用20-30cm的线绳捆绑，线的另一头分别绑在方木板的钉子上，并且在头部上颚切齿牵引一根线绳，也固定在钉子上，达到完全固定。

二、大鼠的捉拿4-5周内的大鼠，方法同小鼠。

周龄较大的，则：1、首先戴好防护手套。

2、用右手拇指和食指抓住大鼠尾巴中部将大鼠提起，放在大鼠饲养盒的面罩上。

3、左手顺势按、卡在大鼠躯干背部，稍加压力向头颈部滑行。

4、以左手拇指和食指捏住大鼠两耳后部的头颈皮肤，其余三指和手掌握住大鼠背部皮肤，完成抓取保定。

三、性别判定小鼠、大鼠性别判定（1）幼鼠外生殖器与肛门间隔短的是♀，外生殖器与肛门间隔长的是♂。

（2）成年动物可直接肉眼辨认，雄性有膨起的阴囊和阴茎，雌性动物有阴道口。

四、动物的标记小鼠的短期标记法：苦味酸80%~90%酒精饱和溶液（黄色），标出属于自己的编号【注意事项】1、实验人员要有精神准备：掌握方法，胆大心细，做好防护。

动物实验基本操作一、实验动物的抓取与固定。

（一）小鼠。

1. 抓取。

- 用右手拇指和食指捏住小鼠尾巴中部将其提起，放在鼠笼盖或其他粗糙表面上。

当小鼠向前挣扎时，用左手的拇指和食指迅速捏住小鼠两耳后颈背部皮肤，无名指和小指夹住小鼠尾巴根部，将小鼠固定成头部略向上的姿势。

- 原因：捏住尾巴提起小鼠可以避免小鼠咬伤操作人员，将其放在粗糙表面上是利用小鼠的本能反应（向前挣扎），便于后续准确抓取其颈背部皮肤。

而固定成头部略向上的姿势有利于进行诸如灌胃、注射等操作，并且能防止小鼠咬伤操作人员脸部等部位。

2. 固定。

- 如需进一步固定，可将小鼠放在特制的小鼠固定器内，将其身体和四肢固定好。

也可以将小鼠固定在泡沫板上，用大头针固定其四肢（这种方法常用于解剖实验）。

- 原因：使用固定器可以确保小鼠在实验过程中保持稳定，减少因挣扎而影响实验操作的准确性，同时也能保障操作人员的安全。

对于解剖实验，在泡沫板上用大头针固定四肢可以充分暴露小鼠的身体结构，便于进行精细的解剖操作。

（二）大鼠。

1. 抓取。

- 先用右手抓住大鼠尾巴中部，将大鼠提起，放在粗糙平面上。

然后用左手戴防护手套（大鼠体型较大且可能会激烈挣扎，容易咬伤操作人员），从大鼠背部绕到其胸前，拇指和食指捏住大鼠两耳后颈背部皮肤，其余手指握住大鼠身体，将其提起固定。

- 原因：与小鼠抓取类似，先抓住尾巴提起是为了初步控制大鼠，放在粗糙平面上利用其向前挣扎的本能便于后续抓取。

戴防护手套是因为大鼠的咬合力较强，为了防止操作人员受伤。

2. 固定。

- 可将大鼠放入大鼠固定器中固定。

对于需要进行手术等操作的大鼠，也可将其麻醉后固定在手术台上，用绑带固定其四肢。

- 原因：固定器和手术台固定都能保证大鼠在实验过程中保持稳定，使实验操作能够顺利进行，尤其是在进行需要精细操作的手术时，稳定的固定是确保手术成功的关键因素之一。

二、实验动物的给药操作。

（一）口服给药。

1. 灌胃法（以小鼠为例）- 准备好灌胃针（一般为特制的金属针具）和相应的药物溶液。

动物实验技术动物实验的基本操作动物实验是科研和医学领域常用的手段，用于评估新药、疫苗、治疗方法和理解生物学机制等。

但是，动物实验是具有伦理争议的，因为涉及到动物权益和福利。

因此，在进行动物实验时，需要遵循一定的伦理原则和严格的实验操作。

以下是动物实验的基本操作：1.实验动物的选择：在选择实验动物时，需要根据研究目的和方法来选择适合的动物模型。

常用的实验动物包括小鼠、大鼠、兔子、狗等。

2.动物的饲养和管理：实验动物需要提供适宜的饲养环境，包括合适的温度、湿度和气流等，并提供适宜的饮食和水源。

此外，实验动物还需要定期检查其健康状态，并按照相关规定进行处理。

3.实验操作的准备：在进行动物实验前，需要准备好实验所需的器械、药物和试剂等。

此外，还需要制定详细的实验方案，确定实验的具体步骤和时间，以确保实验的可重复性和准确性。

4.麻醉和镇痛：在进行动物实验时，有时需要对实验动物进行麻醉或镇痛，以减轻它们的痛苦和压力。

这需要根据具体的实验操作来选择合适的麻醉和镇痛方法。

5.试验操作：根据实验目的和方法，进行相应的操作，如采集血液、组织和器官，注射药物，进行手术，观察行为等。

在进行试验操作时，需要注意操作的准确性和规范性，以保证实验结果的可靠性。

6.数据记录与分析：在进行动物实验时，需要对所得到的结果进行准确的记录，并进行数据的分析和统计。

这将有助于研究者对实验结果进行解读和理解，并做出相应的结论。

7.实验结束和动物处理：在实验完成后，需要根据相关规定对实验动物进行处理。

对于无疾病和伤残的动物，可以选择放归或继续饲养。

对于疾病严重或造成较大伤害的动物，可以选择安乐死或处理。

总而言之，动物实验是一项复杂的科研工作，需要研究者具备较高的科学素养和操作技能。

在进行动物实验时，需要始终将动物福利放在首位，并遵循严格的伦理和法规要求，以确保实验的科学性和可靠性。

第一节实验动物的捉拿、固定和编号方法在基础医学实验中，正确捉拿与固定动物，是实验工作的基础，也是实验顺利进行的保证。

掌握正确捉拿、固定动物的目的就是防止实验者被动物咬伤抓伤，同时也是为了维持动物的正常生理活动，从而不影响实验观察结果。

一、实验动物的捉拿与固定方法在基础医学实验中，最常用的动物有小鼠、大鼠、豚鼠、蟾蜍、蛙、家兔和犬，现分别就其捉拿与固定方法依次予以介绍。

1. 小鼠捉拿时先用右手将鼠尾抓住提起，放在较粗糙的台面或鼠笼上，在其向前爬行时，右手向后拉尾(图5-1)，用左手拇指和食指抓住小鼠的两耳和头颈部皮肤，将其置于左手心中，拉直四肢并用左手无名指压紧尾和后肢(图5-2)，右手即可作注射或其他实验操作。

取尾血及尾静脉注射时，可将小鼠固定在金属或木制的固定器上(图5-11)。

图5-1 图5-22. 大鼠方法基本与捉拿小鼠相同，但实验者事先应戴帆布防护手套。

用右手将鼠尾抓住提起，放在较粗糙的台面或鼠笼上，抓住鼠尾向后轻拉，左手拇指和食指抓紧两耳和头颈部皮肤，余下三指紧捏鼠背部皮肤，如果大鼠后肢挣扎厉害，可将鼠尾放在小指和无名指之间夹住，将整个鼠固定在左手中，右手进行操作。

若进行手术或解剖，则应事先麻醉或处死，然后用棉线活结缚四肢，用棉线固定门齿，背卧位固定在大鼠固定板上。

需取尾血及尾静脉注射时，可将其固定在大鼠固定盒里，将鼠尾留在外面供实验操作。

3. 豚鼠豚鼠具有胆小易惊的特性，因此抓取时要求快、稳、准。

一般方法是：先用右手掌迅速、轻轻地扣住豚鼠背部，抓住其肩中上方，以拇指和食指环握颈部，对于体型较大或怀孕的豚鼠，可用另一只手托住其臀部(图5-3、图5-4)。

图5-4图5-34. 蛙和蟾蜍用左手将动物贴紧在手掌中，并以左手中指、无名指、小指压住其左腹侧和后肢，拇指和食指分别压住左、右前肢，右手进行操作。

根据实验需要，可用图钉，采取俯卧位或仰卧位固定在蛙板上。

抓取蟾蜍时，禁忌挤压两侧耳部毒腺，以免毒液射入眼中。

动物实验的基本操作技术实验报告一、实验目的动物实验是生物医学研究中不可或缺的一部分，通过本次实验，旨在掌握动物实验中常见的基本操作技术，包括动物的抓取、固定、麻醉、给药、采血、处死等，为后续的科研工作打下坚实的基础。

二、实验材料1、实验动物：小白鼠若干只2、实验器材：鼠笼、手套、镊子、注射器、酒精棉球、手术剪、止血钳、麻醉剂等3、实验药品：生理盐水、阿托品等三、实验方法与步骤（一）动物的抓取与固定1、小白鼠的抓取戴上手套，用右手轻轻抓住鼠尾，将其提起，置于鼠笼盖上。

待小白鼠向前爬行时，迅速用左手拇指和食指捏住其两耳及颈部皮肤，将其提起。

2、小白鼠的固定可采用仰卧位固定，将小白鼠仰卧在固定板上，用大头针或橡皮筋穿过其四肢的掌蹠部，固定在板上。

也可采用俯卧位固定，将小白鼠俯卧在固定板上，用大头针或橡皮筋穿过其四肢的掌蹠部，固定在板上。

（二）动物的麻醉1、腹腔注射麻醉抓取固定好小白鼠后，用酒精棉球消毒其腹部皮肤。

以 45 度角将注射器针头刺入小白鼠的腹腔，缓慢注入麻醉剂，注意观察小白鼠的反应，直至其进入麻醉状态。

2、吸入麻醉将小白鼠放入含有麻醉剂的密闭容器中，观察其呼吸和反应，待其麻醉后取出。

（三）动物的给药1、腹腔注射给药按照上述麻醉时的腹腔注射方法，将药物缓慢注入小白鼠的腹腔。

2、灌胃给药用特制的灌胃针，从小白鼠的口角插入，沿咽后壁缓慢插入胃内，注入药物。

（四）动物的采血1、眼眶后静脉丛采血抓取固定好小白鼠，使其头部向上。

用左手拇指和食指抓住其颈部皮肤，使眼球突出。

用毛细吸管从内眦部刺入眼眶后静脉丛，吸取血液。

2、尾尖采血用酒精棉球消毒小白鼠的尾尖。

用手术剪剪去尾尖 2-3mm，让血液自然流出，用吸管吸取。

（五）动物的处死1、颈椎脱臼法抓取固定好小白鼠，用左手拇指和食指捏住其头部，右手拉住鼠尾用力向后上方拉，使颈椎脱位，导致脊髓横断而死亡。

2、过量麻醉法给小白鼠注射过量的麻醉剂，使其呼吸心跳停止而死亡。