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CAP认可要求下SYSMEX XN-9000血液分析仪测定网织红细胞及其参数的性能验证与干扰因素研究蒋浩琴;顾剑飞;陈健;王吉;王凯俊;吕元【摘要】Objective To assess the performance of reticulocyte(RET) determination and its specific parameters by SYSMEX XN-9000 hematology analyzer,and to improve the diagnosis and treatment of anemia. Methods A total of 508 specimens were collected. New methylene blue(NMB) visual microscopy method and SYSMEX XN-9000 for the determination of RET count were compared,and the interference factors were analyzed. The precision,carry-over rate,comparability,accuracy and interference factors of RET determination by SYSMEX XN-9000 were evaluated according to the Clinical and Laboratory StandardsInstitute(CLSI)-the International Council for Standardization in Haematology(ICSH)document H44-A2. The correlation analysis was performed by linear regression analysis and pairedt test. The consistency test was performed by Bland-Altman test,and the interference factors were assessed byttest orWilcoxon rank sum test.Results The coefficient of determination(r2) between NMB visual microscopy method and SYSMEX XN-9000 was 0.97,and the consistency rate was 91.7％. The precision,carry-over rate,accuracy and stability were within allowable ranges. Linear range and normal reference interval met the requirements of verification. The main sources of spuriously high RET counts wereerythrocytosis,thrombocytosis,erythrocyte fragments and nucleatederythrocytes,especially autofluorescence due to drugs andmalaria.Conclusions SYSMEX XN-9000 for the determination of RET count has good performance. Potential interference may exist，which should be corrected in time.%目的评价SYSMEX XN-9000血液分析仪检测网织红细胞(RET)及其特异性参数的性能,进一步加强临床对贫血疾病的诊断和治疗.方法收集508例患者标本,采用新亚甲蓝(NMB)染色显微镜目视计数法与SYSMEX XN-9000血液分析仪的RET计数进行方法学比对和不同干扰因素分组研究;根据美国临床实验室标准化协会(CLSI)-国际血液学标准化委员会(ICSH)H44-A2文件要求对SYSMEX XN-9000血液分析仪计数RET的精密度、携带污染率、可比性、准确度、干扰因素等进行验证;采用直线回归和配对t检验进行相关性统计,用Bland-Altman检验进行一致性检验,采用t检验或Wilcoxon秩和检验对干扰因素进行分析.结果目视计数法与仪器法r2=0.97,一致性符合率为91.7％;精密度、携带污染率、准确度、稳定性均在允许范围内,线性范围和正常参考区间均符合验证;红细胞、血小板增多,红细胞碎片、有核红细胞等干扰因素的存在均能导致网织红细胞计数百分比(RET％)结果的假性增高,荧光类药物和疟原虫等影响因素对RET结果会产生严重干扰.结论SYSMEX XN-9000血液分析仪对RET及其参数的检测性能良好,但在临床应用中仍需及时发现和纠正可能存在的干扰.【期刊名称】《检验医学》【年(卷),期】2018(033)005【总页数】6页(P431-436)【关键词】网织红细胞;未成熟网织红细胞指数;新亚甲蓝;流式细胞术;干扰因素【作者】蒋浩琴;顾剑飞;陈健;王吉;王凯俊;吕元【作者单位】复旦大学附属华山医院检验医学科,上海 200040;复旦大学附属华山医院检验医学科,上海 200040;复旦大学附属华山医院检验医学科,上海 200040;复旦大学附属华山医院检验医学科,上海 200040;复旦大学附属华山医院检验医学科,上海 200040;复旦大学附属华山医院检验医学科,上海 200040【正文语种】中文【中图分类】R446.1网织红细胞（reticulocyte，RET）计数用于评估骨髓中红系增生活跃度已在临床上使用多年，在血液学检验中常使用新亚甲蓝（new methylene blue，NMB）染色的手工目视计数法。
网织红细胞的检测及临床应用网织红细胞是尚未完全成熟的红细胞，是晚幼红细胞在脱核后到完全成熟之间产生的过渡性细胞。
基于其胞质中尚有核糖体、核糖核酸等嗜碱性物质残存,经煌焦油蓝或新亚甲蓝活体染色后,可见蓝或蓝绿色枝点状甚至网织状结构，所以我们通常称其为网织红细胞。
网织红细胞可以直接对骨髓红系造血功能进行反映，主要是应用于评价骨髓增生能力、判断贫血类型，评价贫血疗效，骨髓移植前后监测，放疗和化疗的监测等方面。
随着高端检测仪器的普遍使用，网织红细胞相关参数的检测为疾病提供了大量的信息，临床应用价值越来越高。
1网织红细胞的检测网织红细胞的检测方法有活体染色手工镜检法、血细胞分析仪法、流式细胞仪法和专用网织红细胞分析仪法。
活体染色手工镜检法分为玻片法和试管法。
由于玻片法在实际应用中很可能造成混合血液中水分的蒸发，染色时间不足，所以检测的结果可能会出现偏低的情况。
而试管法则更容易掌握，具备较为显著的重复性优势，在必要的情况下还可以进行复查，最大程度上降低了被检查者的痛苦，是手工法网织红细胞计数的参考方法。
由于传统的显微镜计数方法操作比较繁琐，影响因素比较多，近年来，我国主要采用米勒窥盘的方式进行计数统计，不仅有效规范了计算区域，同时还明显降低了实验中出现的误差，对于结果的准确性提升有着重要帮助和影响。
目前血细胞分析仪的应用，给网织红细胞的计数提供了更为有效的帮助。
此种仪器不仅能更为精准的计数网织红细胞，同时还能检测出网织红细胞的绝对值、网织红细胞的平均体积、网织红细胞的成熟指数等许多参数，这些参数为疾病的诊断、鉴别诊断及治疗等提供更为显著的帮助作用。
流式细胞仪法是一种多用途的精密分析仪器，应用特殊的荧光染料对网织红细胞染色后进行技术分析，从而得出网织红细胞的百分比和绝对值等参数，它还可对网织红细胞的成熟程度进行分群，将其划分为低荧光强度网织红细胞、中荧光强度网织红细胞、高荧光强度网织红细胞、。
仪器法在应用过程中的主要优势就是能对大量红细胞进行测量，同时又能避免主观因素对工作产生的影响，方法的标准性更强。
临床测定网织红细胞方法及结果分析标签：测定;网织红细胞; 方法;结果;分析临床应用CD-3500全自动血细胞分析仪”根据多角度激光散射法”的检测原理进行网织红细胞（Ret）计数，即当细胞通过检测器时会受到特定波长的激光照射，感受器从不同的角度得到红细胞的光散射信号，根据这些信号仪器可以判别并计数网织红的绝对值和百分比并能显示各细胞群的光散射强度分布图。
我们对该仪器的临床应用进行了分析。
一、试验材料及资料来源1.1试验材料：1.美国Abbott公司CD-3500）全自动血细胞分析仪。
2.美国肚击狱公司提供的Ret专用试剂和质控品3.EDTA-2K 抗凝剂。
4.1%的天青Ⅰ生理盐水溶液。
5.普通光学显微镜。
1.2资料来源：二、方法与结果分析1.仪器的稳定性试验：每天在进行临床标本的网织红细胞计数之前，先用作试剂空白计数两次，再按常规法测定网织红细胞质控物（批号为G087-2 ),连续监测两周（11个工作日）。
结果均符合要求2.临床标本测试结果的重复性试验：取新鲜抗凝血5份，每份标本吸20ug，加入3.7ml的染液中，室温放置15min 后上机测定，每份标本连续测定20次，计算其、s、CV %（高、低值各分2组），高值1分别为17.23%、0.60%、3.48%；高值2分别为6.63%、0.28%、4.22%；中值分别为：2.21%、0.16%、7.22%；低值1分别为：0.63%、0.06%、9.50% ；低值2分别为0.26%、10.03%、11.5%。
3.仪器的携带污染率试验：取Ret 高值标本1份（Ret=6.63 % , RBC =3.76 ×1012/ L ) ，连续计数3次后立即进行空白计数3次。
根据下列公式计算：携带污染带= ×100%，得到CD-3500的平均携带污染率0.26%4.仪器测试的灵敏度及其与显微镜法的相关性试验：收集有代表性的临床标本共10份（其中再障2例，声带息肉2例、原发性血小板减少症2例、缺铁性贫血恢复期1例、溶血性贫血3例），分别用仪器法和显微镜法进行Ret计数两种方法Ret对比结果表明：对于低值标本，仪器法的灵敏度和分辨力较好；但Ret8.0%的区域内仪器法则要低。
网织红细胞的临床意义与实验室检测技术进展网织红细胞（Ret）是红细胞成熟过程中的一个重要阶段，是判断贫血状况，反映机体骨髓红系造血功能及评估其他相关性疾病治疗效果的重要参考指标，Ret的实验室检测方法已进入自动化分析阶段，现对网织红细胞实验室检测技术的进展及其临床应用作一综述。
标签：网织红细胞；检测技术；临床应用网织红细胞（Ret）是介于晚幼红细胞和成熟红细胞之间的过渡阶段细胞，是有核红细胞刚刚失去核的阶段，仍属未完全成熟的红细胞，胞质尚有核糖体、核糖核酸等嗜碱性物质残存，经煌焦油蓝或新亚甲蓝染色后，胞质中常可见蓝色或蓝绿色枝点状甚至网状结构，故名网织红细胞。
网织红细胞内含核糖核酸，使用新亚甲蓝或煌焦油对其进行染色后呈网状结构。
网织红细胞总数（retic）、网织红细胞平均体积（MCVr）、网织红细胞百分比（retic%）、单个网织红细胞平均血红蛋白浓度（CHCMr）、单个网织红细胞血红蛋白含量（CHr）和成熟度（LFR、MFR、HFR）是临床上检测该细胞时主要的检测参。
总数及百分比可以有效诊断贫血类型和观察治疗效果。
CHr可以准确判断溶血性贫血及增生性贫血等。
随着医学检测技术的发展，逐渐取代人工显微镜检测的传统方式并进入全自动分析的全新阶段。
笔者就网织红细胞的临床应用及实验室检测技术的进展综述如下。
l 网织红细胞的临床意义目前在肿瘤放、化疗过程中，常用白细胞（WBC）和血小板（PLT）来监测骨髓造血功能状况，但放、化疗患者易受到感染、输血应激等因素影响，WBC 不能准确及时反映患者情况；同时当发现WBC、PLT下降时骨髓已明显受到抑制。
因此，及早得到骨髓造血功能变化的提示，对于指导临床科学、合理用药，预防感染、出血有重要临床意义。
有学者报道，接受放、化疗的肿瘤患者Ret 降低总是早于WBC、PLT的降低；在骨髓恢复时，患者未成熟Ret迅速升高，IRF升高明显早于WBC、PLT等参数。
李文楷报道肿瘤患者放、化疗后第3天，MFR、HFR、Ret显著减低，而WBC、PLT变化不明显，直到第6天才显著减低，当造血功能恢复时MFR、HFR、Ret于放、化疗后第12天开始增高，而WBC、PLT仍持续下降，放、化疗后第15天MFR、HFR显著升高，而WBC、PLT直到第20天才出现明显升高。
网织红细胞及其荧光强度测定的临床应用价值广西桂林全州县咸水镇卫生院检验科 541511关键词：网织红细胞测定；荧光强度；应用网织红细胞是介于晚幼红和成熟红细胞间未完全成熟的红细胞，其胞质内存有嗜碱性物质RNA。
随着五分类血液分析仪的普及，运用全自动血细胞分析仪检测网织红细胞及其荧光强度，既可作为某些贫血鉴别诊断的初筛指标，也是判断骨髓造血系统抑制和恢复等方面较敏感的指标[1]。
过去一直将白细胞计数、粒细胞绝对值和血小板计数作为骨髓移植、放疗、化疗恢复期的观察指标，而这些指标易受移植后感染、排异及长时间输入血小板等因素的影响，所测结果有时不能准确反应造血系统实际情况，而网织红细胞的测定主要是作为某些贫血鉴别诊断的初筛指标[2]。
近年来全自动血细胞分析仪、流式细胞术定量分析仪等自动化分析仪器为网织红细胞计数提供了先进的检测手段和更多的相关参数。
运用全自动流式血细胞分析仪测定网织红细胞，可获得网织红细胞百分比（RET%）、网织红细胞绝对数（RET#）、低荧光强度网织红细胞百分比率（LFR）、中荧光强度网织红细胞百分比率（MFR）、高荧光强度网织红细胞百分比率（HFR）、未成熟网织红细胞指数（IRF）等一系列参数（根据红细胞RNA的存在量将细胞的成熟度分为3级）。
其中HFR和HFR+MFR的出现不仅能反映骨髓造血活性，而且其出现或增高均早于白细胞、粒细胞、血小板等常规指标，并不受感染、排异和输入血小板的影响[3]。
1 网织红细胞的测定在贫血鉴别诊断中的应用1.1有实验证实[4]，不仅网织红细胞含量的变化与幼红细胞合成血红蛋白的数量有关，而且未成熟网织红细胞指数（IRF）越高，RNA含量就越多，网织红细胞越幼稚，越能反映骨髓红系的造血情况。
部分贫血患者的造血恢复初期RET%正常，而其IRF及HFR和／或MFR已升高，说明IRF、HFR和MFR三参数的敏感性比RET%更高，同时由于IRF水平变化只与骨髓状态有关，不受外周血红细胞数量的影响，所以当骨髓增生状态发生改变时，IRF水平的改变更为敏感。
网织红细胞及其荧光强度检测的临床意义目的探讨流式细胞检测结合核酸荧光染色技术在网织红细胞(Ret)及其荧光强度分析中的临床应用价值。
方法应用Sysmex XT——2000i全自动血液分析仪分析不同类型贫血患者的网织红细胞和荧光强度的变化。
结果130例贫血患者与30例正常人群比较,其Ret 绝对值及其Ret百分比有不同程度的升高、轻度降低或显著降低;荧光强度的变化差异较大,表现为低荧光强度网织红细胞比率(IFR)降低,幼稚网织红细胞比率(IRF)、中荧光强度网织红细胞比率(MFR)和高荧光强度网织红细胞比率(HFR)升高,差异均有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01)。
结论网织红细胞荧光强度分析是骨髓造血系统抑制和恢复较敏感的指标,可作为某些贫血诊断和鉴别诊断的初筛指标及对判断和监测骨髓的损伤程度和预后具有重要的临床意义。
标签：贫血; 网织红细胞计数; 荧光强度; 临床应用网织红细胞(Ret)是介于晚幼红细胞和成熟红细胞之间尚未成熟的红细胞,其胞质内存留多少不等的嗜碱物质RNA,其RNA含量越多,Ret越不成熟,反之亦然。
通过使用核酸荧光染料多聚亚甲基可对细胞胞浆中的核酸物质(RNA)进行染色,越不成熟的Ret其荧光越强,反之,成熟Ret荧光极少或最弱,故将Ret分成高荧光强度网织红细胞(HFR)、中荧光强度网织红细胞(MFR)、低荧光强度网织红细胞(LFR)三部分。
IRF定义为中、高荧光强度区域内Ret百分数之和(MFR+HFR),为不成熟Ret比例,可更灵敏的反映骨髓造血系统的状况。
我院使用的具有全自动网织红细胞计数、荧光强度自动化分析及成熟度分类功能的Sysmex X T-2000i 血细胞分析仪,广泛用于临床血液常规标本的检测,为临床提供了大量的分析参数和研究参数,现将网织红细胞及其光强度分析的临床应用情况报道如下。
1 材料与方法1.1 研究对象2009年1～11月本院住院患者均为首诊并未做过输血及抗贫血治疗。
血液网织红细胞测定分析网织红细胞绝对记数和百分比仍然是最常用的反映红细胞增生活性的血液学指标，但随着血细胞分析仪中各种新技术的使用，许多新的参数被发现，仪器不仅可提供骨髓释放出来的网织红细胞数量，还可以提供外周血中网织红细胞的成熟度。
为探讨网织红细胞绝对计数、网织红细胞百分比和网织红细胞的成熟度的敏感性，笔者使用促红细胞生成素前后的观察，现报道如下。
1 血液网织红细胞测定1.1 血液网织红细胞测定不但对血液系统疾病的诊断，治疗及疗效观察具有重要的意义。
而且通过观察网织红细胞，可以了解肿瘤病人化疗及化疗后骨髓变化的情况。
MFR是评价骨髓受抑制后开始恢复的较敏感的指标。
MFR+HFR是估计移植后造血恢复的早期指标。
监测网织红细胞还能了解骨髓移植，观察肾移植术后促红细胞生成素（EPO）的疗效、调整药物剂量和治疗方案早期指标。
1.2 SYSMEX-R3500的优点是能直接用全血测定网织红细胞，操作简便，快捷，与SE9000,SP100自动制片染色机，电脑工作站组合起来，构成HST流水线。
其质控物批内CV为2.95%，标本批内CV为4.42%(1.27～10.05%)，与文献报道一致。
批间CV为3.56%，与文献报道一致。
同时仪器显示的散点图直接反映网织红细胞的成熟阶段，根据荧光强度，将网织红细胞分成高、中、低荧光强度网织红细胞（HFR、MFR、LFR），越是幼稚的网织红细胞显示出的荧光越强。
网织红细胞的成熟指数（RMI）是根据HFR+MFR/网织红细胞绝对值的计算而来。
SYSMEX-R3500存在的线性范围：0%～15%，超出线性范围的标本需手工稀释后测定。
当某些病人血液中有核细胞或淋巴细胞异常增加时，可导致结果假阳性增加：仪器计数受Howell-Jolly小体，疟原虫和大血小板的干扰；冷凝集素存在、红细胞的聚集、某些病理因素或药物都能使红细胞产生自身荧光，影响结果。
1.3 COULTER MAXM不但能进行网织红细胞的测定并给出其绝对值，还能检测CBC和WBCD-IFF，提供高分辨率的三维分类。
血液细胞检验质量控制在临床医学检验中的应用研究1. 引言1.1 研究背景血液细胞检验是临床医学检验中常见的一种检测项目，通过对血液细胞的分析可以了解患者的血液情况，包括血红蛋白、白细胞、血小板等指标的数量和形态。
血液细胞检验结果对于诊断疾病、监测疗效以及评估患者健康状态都具有重要意义。
由于血液细胞检验结果直接涉及患者的健康和生命安全，因此质量控制尤为重要。
随着临床医学技术的不断发展，血液细胞检验的质量控制方法也在不断优化和改进。
有效的质量控制方法可以确保检验结果的准确性和可靠性，减少误诊率和漏诊率，提高临床诊断的准确性和可靠性。
对血液细胞检验质量控制在临床医学检验中的应用进行研究和探讨具有重要意义。
本研究旨在探讨血液细胞检验质量控制在临床医学检验中的实际应用，分析其意义和挑战，并提出未来研究的方向。
通过对血液细胞检验质量控制的深入研究，可以为临床医学检验提供更加可靠和准确的数据支持，提高医疗质量，保障患者的健康和安全。
1.2 研究目的研究目的是为了探讨血液细胞检验质量控制在临床医学检验中的应用情况，并分析其在提高检验结果准确性和可靠性方面的作用。
通过对不同的质量控制方法进行比较和评价，找出最适合临床实践的质量控制策略。
同时，研究目的还包括探讨血液细胞检验质量控制的意义，以及挑战和解决方案，为临床医学实践提供科学依据和指导。
通过这些研究，我们可以更好地了解血液细胞检验质量控制的重要性，推动医学检验技术的发展和提升，为临床诊断和治疗提供更可靠的依据，最终造福患者和医疗健康产业的发展。
1.3 研究意义血液细胞检验是临床医学检验中的重要组成部分，通过对血液中各种类型的细胞数量和形态进行检测，可以帮助医生诊断和治疗各种疾病。
而质量控制是保证检验结果准确可靠的关键步骤，特别是在血液细胞检验这样对结果精确度要求较高的检验项目中更是不可或缺的。
研究血液细胞检验质量控制的意义在于提高检验结果的准确性和可靠性，保障患者获得正确的诊断和治疗。
网织红各项参数在临床贫血病人中的应用研究【摘要】目的：研究诊断溶血性贫血、再生障碍性贫血与网织红细胞各项参数指标的相关关系。
方法：选取河北省医院近两年的病人，一共80位贫血病例，此次论文的数据是以其中有溶血性贫血30例，再生障碍性贫血50例以此设立为实验组,另外再选取20 位健康的人设立为健康组为参考数据。
网织红细胞各项参数指标选用迈瑞BC6900全自动血液分析仪来分析:依据高荧光强度网织红细胞百分比（HFR%）、中荧光强度网织红细胞百分比（MFR%）、低荧光强度网织红细胞百分比（LFR%）、网织红细胞百分比（RET%）、网织红细胞绝对值（RET#）和幼稚的网织红细胞比率（IFR%）的具体数据统计，对其进行分析并检验结果。
结果：通过贫血病人和健康人员的网织红细胞不同的参数指标的对比，可以发现溶血性贫血病人的RET#、RET%、IRF%、MFR%、HFR% 大幅度上升，LFR% 大幅度下降（P<0.05）；再生障碍性贫血患者RET#、RET%显著降低，IRF%、MFR%、HFR%显著升高（P<0.05），而LFR%轻度降低（P<0.05）。
结论：网织红细胞相关参数指标可以用来诊断不同类型的贫血病症,以及可以用来判断病人贫血状况程度,进而能提供一些数据在临床上。
【关键词】网织红细胞参数贫血溶血性贫血再生障碍性贫血前言由调查数据显示，全世界有将近30亿人患有各类不同程度的贫血症状，其中有近数千万的人死于由贫血引起的疾病。
就当下而言西方国家贫血病得病概率远低于我国，调查显示，患病者中女性、老人和儿童属于高发人群，明显高于成年男性。
贫血是临床多见的病症，临床上将人体外周血红细胞容量低于正常范围的下线称为贫血(anaemia)。
在临床上诊断是否患有贫血症状和贫血程度，是将病人的网织红细胞的各项参数指标与正常人的相比较来判断的，这是由于外周血红细胞的总量难以测量，要求技术很高，不容易测出。
我国诊断贫血的指标标准稍低于国外，成年男性和成年女性血红蛋白浓度分别低于120g/L、110g/L当成判断标准，与成年人相比，小孩子的血红蛋白浓度大概低10%，且无性别区分。
第２７卷第２期２００９年４月实验与检验医学ＥＸＰＥＲＩＭＥＮＴＡＬＡＮＤＬＡＢＯＲ．ＡＴＯＲＹＭＥＤＩＣＩＮＥ・１５７．Ｖ０１．２７Ｎｏ．２Ｆｅｂ．２００９网织红细胞质控品研究进展・综述・章海斌，综述王小中２李静３审校（Ｉ、南昌大学医学院２００５级医学检验一班；２、南昌大学第二附属医院检验科；３、南昌大学第一附属医院检验科３３０００６）中图分类号Ｒ４４６．１１＋１文献标识码Ｃ文章编号１６７４—１１２９（２００９）０２－０１５７－０３＇［）面迂巫圣窆鱼凹！篮西碧至Ⅱ垫：２鲤亟豳耍口１概述网织红细胞（ｒｅｔｉｃｕｌｏｃｙｔｅ，Ｒｅｔ。
ＲＥＴ）是幼稚的红细胞，南骨髓中有核红细胞脱去细胞核形成．大约３ｄ后被释放入血液，并进一步通过降解、自噬、胞吐等复杂机制丢失核糖体、线粒体等细胞器和膜脂、部分血红蛋白、水等成分而获得典型的双凹圆盘状形态，成为成熟红细胞。
这一成熟过程不但能在活体血液内完成，在离体抗凝状态下同样可以进行ｆⅧ。
１８６５年Ｗｉｌｈｅｌｍ在贫血患者的血片上发现红细胞中的这种颗粒．而后由Ｅｒｈｉｃｈ用亚甲蓝对血液进行活体染色，建立了网织红细胞活体染色和显微镜检查法［４１。
经过一个多世纪的发展．今天发达国家已开发出多种网织红细胞的自动分析技术和相应的仪器、试剂等。
这些方法具有分析速度快、效率高．精确度高、自动化程度高等特点．但是价格十分昂贵。
近年来，随着我国经济水平的提高．国内一些大中型的医院先后引进了这些先进的技术．并且通过实验证实，与过去的手工法比较．采用自动分析技术测定网织红细胞具有重复性好，准确性高．操作简便、快捷．提供的参数多。
可大批量快速测定的优点【５．ｑ。
目前我国临床上常用的网织红细胞分析方法有：普通光学显微镜法、流式细胞仪法、专用网织红细胞分析仪法、血液细胞分析仪法，其中有网织红细胞分析功能的血液分析仪主要有应用ＶＣＳ技术分析网织红细胞的Ｂｅｃｋｍａｎ—Ｃｏｕｌｔｅｒ公司产品．采用细胞流式原理和细胞化学染色技术的Ｓｙｓｍｅｘ公司产品．应用多角度偏振光散射分析技术（ＭＡＰＳＳ）Ｉ均Ａｂｂｏｔｔ公司产品和美国Ｂａｙｅｒ公司系列产品和法国ＡＢＸ公司产品。
网织红细胞各项检测在临床上有着重要意义。
其中网织红细胞计数是反映骨髓造血功能的重要指标，临床上可用于判断骨髓红细胞造血情况．观察贫基金项目：江西省卫生厅资助项目ｆ２００７３０５４）通讯作者：王小中．Ｅ－ｍａｉｌ：ｗａｎｇｘｉａｏｚｈｏｎｇ＠ｎｃｕ．ｅｄｕ．１３１１血的疗效及骨髓移植后检测骨髓造血恢复等。
未成熟网织红细胞参数（ＩＦＲ％、ＩＦＲ、ＨＦＲ等）对于骨髓移植／造血干细胞移植后机体造血功能恢复情况的评价比Ｒｅｔ％、ＲＥＴ＃、ＷＢＣ、ＰＬＴ等更加灵敏嗍；ＣＨｒ对于诊断更年期妇女的缺铁性贫血或者未达到贫血而铁缺乏的早期发现有重要的意义［９１。
此外，网织红细胞生成指数（ＲＰＩ）可较准确的表达出网织红细胞的成熟状态．从而对贫血的类型进行分类；网织红细胞分群可以用于促红细胞生成素贫血治疗、监测急性髓性白血病的治疗和观察骨髓移植后造血恢复情况等。
２质控品质量是临床实验室的灵魂．检测结果的准确与否直接影响着疾病的诊断与治疗。
随着临床实验室由过去的以标本为中心．以数据为目的到现在的以病人为中心．以疾病的诊断治疗为目的的转变，质量控制在临床检验中的重要性越来越突显出来。
ＩＳＯｌ５１８９提出了一整套要求来规范实验室的质量管理．其中应用质控品进行室内质控和参加室间质控是检测中质量控制的关键要素。
正常情况下网织红细胞在人体含量很低．目前人们常用哺乳动物血液中的网织红细胞或人工合成的类似人网织红细胞的有核红细胞来制备网织红细胞质控品。
也有少数学者提出用飞禽类动物（如鸟）的血液红细胞来制备网织红细胞质控物．由于飞禽类动物与人亲缘性较远．血细胞的生物学特性存在显著差异．所以笔者在此不作介绍。
２．１用健康人网织红细胞为原料制备网织红细胞质控品陆林平曾用抗凝ＨｂｓＡｇ阴性正常人静脉血，煌焦油蓝枸橼酸等渗盐水染液染色．福尔马林固定后常规推片．将血片包于干净的滤纸中并在干燥器中保存。
从而得到了网织红细胞质控品１１０ｌ。
这种质控品稳定性、均一性都能达到质控品的要求，但是它仅仅万方数据・１５８・第２７卷第２期２００９年４月实验与检验医学ＥＸＰＥＲＩＭＥＮＴＡＬＡＮＤＬＡＢＯＲＡＴＯＲＹＭＥＤＩＣＩＮＥＶ０１．２７Ｎｏ．２Ｆｅｂ．２００９适用于手工计数方法．且只能检测操作人员对网织红细胞的辨认能力．所以临床应用它有很大的局限性。
此外，用人血为原料制备质控品还必须考虑生物安全性问题．应该通过相应的检查排除各种传播疾病的成分，例如：ＨＢｓＡｇ、ａｎｔｉ—ＨＣＶ、ａｎｔｉ—ＨＩＶ等。
然而．目前尚没有任何检查可以排除所有的传播疾病的成分．所以。
人血并不是制备质控品理想的原料。
２．２用哺乳动物的网织红细胞为原料制备网织红细胞质控品郑文芝等人用中性红对新鲜兔血红细胞进行预处理．使网织红细胞中的ＲＮＡ聚集，并以戊二醛使之固定，洗脱中性红和固定剂后保存于含庆大霉素、甘油及硫柳汞的生理盐水中．制成了网织红细胞的质控品１１１１。
这种质控品采用活体染料先使核糖体聚集为光镜下可见的“网状”结构．再经固定及洗脱后保存．从而解决了如何使Ｒｅｔ内的核糖体得以长期保存并在光镜下显示的难题。
此外。
这种质控品在稳定性、均一性上都优于用血片制成的质控品，它不仅可以检测操作者对Ｒｅｔ的辨认能力．还可以控制采血外的Ｒｅｔ计数的各个环节．定值后又可以用于Ｅ．ＱＡ。
Ｆｒａｎｃｉｓ和Ｊｏｈｎｓｏｎ观察发现猪血中网织红细胞含量比人血高、成熟度比人血低。
之后应用两步沉淀离心法将新近屠宰的幼猪新鲜全血网织红细胞浓缩．从而制备成不同浓度水平的网织红细胞质控物［１２１。
该方法是在新鲜猪血中加入抗凝剂／右旋糖苷和ＣＣＤ溶液ｆ其中ＣＣＤ溶液可以促使红细胞沉淀和与血小板分离），然后室温沉淀ｌ。
３ｈ。
使混合液形成深红色的致密沉积物和粉红色半透明的富含血小板的上层液．轻轻移去上层液，向沉积物中加稀释的ＣＣＤ（ＣＣＤ：ＰＢＳＮ＝Ｉ：７．１）溶液至初始体积．使细胞重悬。
将所得细胞悬液在室温条件下重新沉淀一夜ｆ约１５ｈ），得细胞沉积物和上层液。
将上述上层液过滤除去白细胞和血小板即可得到富含网织红细胞的悬液。
离心后收集高浓度的网织红细胞．用保存液将其配制成不同浓度的网织红细胞质控品．然后在２～８０Ｃ条件下保存。
使用时，将分装好的质控品从冷冻环境中取出让它恢复至室温．然后用手轻柔的摇动瓶子使质控品混匀．在６０ｍｉｎ内将混匀后的质控品像分析标本的操作一样进行分析即可。
所用保存液要求没有能量物质，含有酸碱缓冲物质、抗生素（放线菌酮、利福平等）、防腐剂（萘啶酮酸、青霉素等）、蛋白合成抑制剂和其他代谢抑制物，ｐＨ为７．５±０．１，渗透压为３４０±１５ｍＯｓｍ／ｋｇ。
这种质控物稀释好后与新鲜全血相似．它可在手工法和仪器法分析网织红细胞中用于评价检测系统的准确度和稳定性，不同的浓度值质控品还可监测检测系统对不同Ｒｅｔ浓度水平的检测情况。
在此基础上．Ｊｏｈｎｓｏｎ还应用相同的技术制备出能同时进行网织红细胞质控的全血质控物Ｉｎ】，使它更加符合临床待测标本的真实情况．且省去了以前需要分步进行质控所带来的麻烦。
２．３用人工合成的有核红细胞为原料制备网织红细胞质控品ＷａｙｎｅＬ．Ｒｖａｎ和ＡｌｉｒｅｚａＥｂｒａｈｉｍ利用可逆渗透压裂解技术（ｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅｏｓｍｏｔｉｃｌｙｓｉｓｐｒｏｃｅｄｕｒｅ）将酵母中的ＲＮＡ导人成熟红细胞中。
从而得到细胞质量和散点图与网织红细胞相似的有核红细胞，利用这种细胞制备出不同浓度的网织红细胞质控品【１４１。
具体操作为：在无菌条件下从人或其他动物血中分离出红细胞．然后在稀释的特殊混合液中保存适当时间以破坏衰老的、脆弱的红细胞，滤去小的混合物和碎片得到所需红细胞悬液。
将上述红细胞悬液３５０ｘｇ离心１５ｍｉｎ，所得沉积物分成两份。
第一份沉积物用等渗溶液洗涤３次。
通过离心将其浓缩为＞７ｘ１０ｑ斗ｌ的悬液ｆａｌ。
第二份用加有防腐剂的稀释液洗涤３次．用相同的稀释液稀释成浓度为４ｘ１０ｑ斗ｌ的红细胞悬液∞）。
取红细胞悬液（ａ）２体积，事先准备的ＲＮＡ溶液和裂解红细胞溶液各１体积加入含２０体积低渗溶液（ｐＨ＝７．３，渗透压＜３０ｍＯｓ觚ｇ）的透析容器中．使红细胞膨胀，细胞膜上出现ＲＮＡ能够通过的小孔．ＲＮＡ在红细胞裂解产物的诱导下通过膜小孔进入红细胞内．从而得到类似网织红细胞的有核红细胞。
当透析容器中溶液的渗透压达到１８０ｍＯｓｍ／ｋｇ时，将透析液弃取。
室温平衡２０ｍｉｎ后，加入２０体积高渗溶液（ｐＨ＝７．３．渗透压＞８５０ｍＯｓｍ／ｋｇ），使细胞膜恢复原样。
弃取高渗溶液，加入等量等渗中性溶液．在室温下静置２４ｈ后３５０９离心１０ｍｉｎ．除去浮在上面的裂解红细胞成分和没有转入红细胞内的ＲＮＡ．剩下的转人和没有转入ＲＮＡ的红细胞在３７℃孵育２４ｈ使之稳定，然后用上面的稀释液再次洗涤。
所得的细胞成分在６℃条件下平衡一周后。
用红细胞悬液（ｂ）将它配制成不同浓度的质控品。
利用上述方法制备的网织红细胞质控物。
具有万方数据第２７卷第２期２００９年４月实验与检验医学ＥＸＰＥＲＩＭＥＮＴＡＬＡＮＤＬＡＢＯＲＡ７Ｉ’ＯＲＹＭＥＤＩＣＩＮＥ・１５９・Ｖ０１．２７Ｎｏ．２Ｆｅｂ．２００９保存时间长（在６℃温度下可以稳定保存至少８０ｄ）。
所得的有核红细胞特性与人网织红细胞相似．并且能够被多种染料染色．同时适用于手工法和流式细胞仪分析法分析网织红细胞的质控等特点。
Ｊａｃｏｂｓ等人利用交叉结合技术将ＲＮＡ通过共价键或离子键结合在红细胞表面．得到类似于网织红细胞的特殊红细胞．同样制备出网织红细胞质控品嗍。
事先用高碘酸盐或者戊二醛将从酵母中获得的ＲＮＡ激活和用等渗溶液洗涤稀释抗凝哺乳动物红细胞成（０．５～４．Ｏ）ｘ１０６／ｌ上ｌ悬液。
取等体积的激活ＲＮＡ和洗涤红细胞，在室温下轻轻的混匀．使它发生结合反应，生成模拟网织红细胞．然后加入保存液中配制成不同浓度值的质控品。
这种方法制备网织红细胞质控品具有操作简单。
可选择的原料比较广泛．所得质控品可适用于多种网织红细胞分析方法的质控等优点。
３展望网织红细胞是血液中重要的细胞．它的检测对多种疾病的诊断、治疗及疗效监测有着重要的临床意义，具有广阔的应用前景。
随着检测技术的发展．过去那种由仪器生产厂商提供配套专用的质控品已经不再适应市场了．生产出能够适用于各种网织红细胞分析方法的质控品才是市场真正需求的。
目前多数高端血液分析仪都加入了网织红细胞分析的功能，配制一种能同时进行ＲＢＣ、ＷＢＣ、ＰＬＴ和ＲＥＴ质控的质控品也将是研究的一个方向。
技术的发展除了对质控品的功能求全以外。
