第二章 代谢控制发酵的基本思想
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第一章绪论1、代谢控制发酵:就是利用遗传学的方法或其他生物化学方法,人为地在脱氧核糖核酸(DNA)的分子水平上,改变和控制微生物的代谢,使有用目的产物大量生成、积累的发酵。
P22、代谢控制发酵的关键:取决于微生物代谢控制机制是否能够被解除,能否打破微生物正常的代谢调节,人为地控制微生物的代谢。
P23、代谢工程的具体思路:P31、改变代谢流:(1)、加速速度限制反应;(2)、改变分支代谢途径的流向;(3)、构建代谢旁路;(4)、改变能量代谢途径。
2、扩展代谢途径和构建新的代谢途径:(1)、引入外源基因,延伸代谢途径;(2)、利用新的底物,构建新的生物合成途径。
第二章代谢控制发酵的基本思想1、微生物细胞的调节机制:P7-9(1)、通过控制基因的酶生物合成的控制机制:①诱导——促进酶的合成;②阻遏——抑制酶的合成,包括:1)终产物阻遏,2)分解代谢物阻遏。
(2)、酶活性的控制机制:①终产物抑制或激活,②通过辅酶水平的活性调节,③酶原的活化,④潜在酶的活化。
(3)、通过细胞渗透性的控制:(根据酶在代谢调节中作用不同分类)①调节酶:变构酶、同功酶、多功能酶。
②静态酶③潜在酶2、脱敏作用:变构酶经特定处理后,不丧失酶活性而失去对变构效应物的敏感性。
注:处理方法:①使变构酶解聚,②基因突变。
P153、反馈抑制的调节类型可以分为以下几种:P18-21 图略(1)、单功能途径中酶活性的调节类型:①前体激活,②补偿性激活。
(2)、多功能途径中酶活性的调节类型:①协作反馈抑制或称多价反馈抑制,②合作反馈抑制,③积累反馈抑制,④顺序反馈抑制,⑤假反馈抑制:指结构类似物的反馈抑制,⑥同功酶4、分解代谢物阻遏:当细胞具有一优先利用的底物(通常是,但并不总是葡萄糖)时,很多其他分解反应途径受到阻遏。
P27 (注:根据葡萄糖效应理解)5、突破微生物的自我调节控制机制,使代谢产物大量积累的有效措施:P31 (1)、应用营养缺陷型菌株。
1、代谢控制发酵指利用遗传学的方法或者其它生物化学的方法(1分),人为地在脱氧核糖核酸(DNA)分子水平上改变和控制微生物的代谢,使目标产物大量生成、积累的发酵(1分)。
2、关键酶是参与代谢调节的酶的总称(1分)。
作为一个反应链的限速因子,对整个反应起限速作用。
常称为调节酶,主要包括变构酶、同功酶和多功能酶(1分)。
3、操纵子是指原核生物基因组的一个表达调控序列(1分),长度约1000bp左右,由若干结构基因串联在一起,其表达受到同一调控系统的调控(1分)。
4、巴斯德效应在有氧的条件下(1分),由于进行呼吸作用而使酒精发酵和糖酵解作用受到抑制的现象(1分)。
5、营养缺陷型指原菌株由于发生基因突变(1分),致使合成途径中某一步骤发生缺陷,从而丧失了合成某些物质的能力,必须在培养基中补加该营养物质才能生长的突变型菌株(1分)。
10分,每题2分)√,如果是错误的,在其下方加以改正。
即真核细胞中功能上彼此有关的基因往往分布在不同染色体√(2分)×(1分)(1分)反馈抑制是在DNA水平上进行控制。
×(1改正:反馈阻遏是在DNA水平上进行控制,反馈抑制控制的是酶蛋白的构象变化。
分)5、渗漏型缺陷是指遗传性障碍不完全的缺陷型,仍能够在基本培养基上进行大量生长。
×(1分)改正:渗漏型缺陷是指遗传性障碍不完全的缺陷型,能够在基本培养基上进行少量生长。
(1分)三、填空题(本题满分20分,每空1分)1、乳糖操纵子中结构基因编码的三个酶分别是β—半乳糖苷酶、β-半乳糖透性酶、β-半乳糖苷转乙酰基酶。
2、微生物细胞代谢的调节机制主要有酶的活性调节和酶的生物合成(酶量)调节。
3、调节酶的催化部位与酶反应底物相结合,催化酶的反应;变构部位能与特异代谢物(变构效应物)相结合,使酶的构象发生改变,从而影响催化部位的活性。
4、变构酶的脱敏作用指该酶经过特定处理后,可使变构酶解聚,或变构酶的编码基因发生突变,失去调节功能,但一般不丧失其催化活性。
代谢控制发酵名词解释代谢控制发酵是在发酵过程中通过调控代谢途径,使得微生物产物合成提高、副产物减少或消失的一种控制策略。
代谢(Metabolism)指的是一个生物体对外界物质的摄取、吸收、转化和排泄等一系列化学反应的总和。
代谢可分为两个主要部分:合成代谢和能量代谢。
合成代谢是指生物体从较简单的物质合成复杂的有机物质,如蛋白质、核酸、多糖等。
能量代谢则是指生物体通过氧化降解有机物质释放能量。
在酿酒或发酵过程中,发酵菌通过能量代谢将碳源转化为酒精和二氧化碳,同时合成一些副产物或其他附属物质。
控制是指通过调控代谢途径和操作条件,使得发酵过程中所需产物的合成产率和选择性提高,产物分离纯化步骤简化,副产物减少或消失的手段。
代谢控制是通过操作微生物的代谢途径和条件来控制发酵过程中所需产物和副产物的产生和积累情况。
其核心目标是寻找并调控关键代谢途径,使得所需产物的合成路径得到加强、其他途径得到抑制,从而改善产物的产率和质量,减少副产物的生成。
代谢控制包括以下几个主要方面:1.反应物选择性控制:通过调节发酵中的反应物浓度、比例和添加时间,来控制产物和副产物的生成。
这一策略主要是通过供应还原剂、控制氧气浓度、碳源的选择和添加等手段来实现。
2.酶活性和基因表达的调控:通过改变酵母菌或细菌内部关键酶的活性或调节相关基因的表达,并使用遗传工程技术来调控发酵过程中的代谢途径。
例如,通过过表达某一限速酶或降低副产物相关基因的表达,从而提高所需产物的产率。
3.代谢通路调控:通过改变微生物内部代谢途径的通路结构、酶的组合或代谢流量分布,来控制产物的选择性合成。
例如,通过改变代谢通路的路线,将副产物产生的分支途径阻断,从而增加所需产物的合成。
4.发酵条件的优化:通过调节发酵过程中的温度、pH值、搅拌速度、氧气含量等操作参数,来控制发酵过程的代谢行为。
例如,通过调节温度和pH值来改变酵母菌的生长速率和代谢活性,从而影响产物的生成。
代谢控制发酵的原理及应用1. 引言发酵作为一种重要的工业生产过程,广泛应用于食品工业、制药工业、化工工业等领域。
控制发酵过程中的代谢反应是提高发酵产物得率和质量的关键。
本文将介绍代谢控制发酵的原理及其在实际应用中的意义。
2. 代谢控制发酵的原理2.1 代谢途径代谢途径是细胞内各种代谢酶反应所组成的网络。
通过对代谢途径进行控制,可以实现对发酵过程中代谢产物的合成与降解的调控。
•代谢途径的分类:–糖代谢途径:通过调节糖酵解和糖异生途径的活性,实现对碳源代谢的控制。
–脂肪代谢途径:调节脂肪酸合成和降解途径,影响发酵产物的合成。
–氨基酸代谢途径:调控氨基酸的合成和降解,影响蛋白质合成和产物生成。
–核苷酸代谢途径:控制DNA和RNA的合成,对生物体的生长和发育起到重要作用。
2.2 代谢调控策略代谢调控策略是通过对代谢途径内关键酶的调控,实现对代谢产物合成和降解速率的调控。
•调控策略的分类:–底物浓度调控:通过调节底物浓度,影响酶催化反应速率,进而控制代谢产物的生成。
–反馈抑制:通过代谢产物对酶活性的抑制,调节代谢途径内各个酶的活性,从而控制代谢产物的生成。
–遗传调控:通过改变生物体内部基因表达水平,调节代谢途径内酶的含量,进而影响代谢产物的合成速率。
–外部条件调控:例如温度、pH值等环境条件的调控,对代谢产物合成有重要影响。
3. 代谢控制发酵的应用3.1 食品工业在食品工业中,利用代谢控制发酵技术可以实现食品添加剂、发酵食品等的生产。
•食品添加剂的生产:通过控制微生物发酵过程中的代谢途径和代谢产物的合成,可以高效生产食品添加剂,如谷氨酰胺、谷氨酰胺钠等。
•发酵食品的生产:利用代谢控制发酵技术,可以生产出口感好、品质优良的发酵食品,如酸奶、面包等。
3.2 制药工业代谢控制发酵技术在制药工业中有着广泛应用。
•抗生素的生产:通过调控微生物发酵过程中底物浓度、代谢途径和酶活性,可提高抗生素的产量和质量。
•生物药物的生产:通过遗传调控和代谢途径调控,可以实现生物药物的高效合成,如重组人胰岛素和重组人生长激素等。
《代谢控制发酵》复习题1.名词解释代谢控制发酵:所谓代谢控制发酵就是利用遗传学的方法或其他生物化学的方法,人为地在脱氧核糖核苷酸的分子水平上,改变和控制微生物的代谢,使有用目的产物大量生成、积累发酵。
关键酶:参与代谢调节的酶的总称。
作为一个反应链的限速因子,对整个反应起限速作用。
变构酶:有些酶在专一性的变构效应物的诱导下,结构发生变化,使催化活性改变,称为变构酶。
诱导酶:诱导酶是在环境中有诱导物(通常是酶的底物)存在的情况下,由诱导物诱导而生成的酶。
调节子:就是指接受同一调节基因所发出信号的许多操纵子。
温度敏感突变株:通过诱变可以得到在低温下生长,而在高温下却不能生长繁殖的突变株。
碳分解代谢物阻遏:可被迅速利用的碳源抑制作用于含碳底物的酶的合成,就称为碳分解代谢阻遏。
氮分解代谢物阻遏:可被迅速利用的氮源抑制作用于含氮底物的酶的合成,就称为氮分解代谢阻遏。
营养缺陷型突变菌株:原菌株由于发生基因突变,致使合成途径中某一步骤发生缺陷,从而丧失了合成某些物质的能力,必须在培养基中外源补加该营养物质才能生长的突变菌株。
渗漏突变株:由于遗传性障碍的不完全缺陷,使它的某一种酶的活性下降而不是完全丧失。
因此,渗漏突变菌株能少量的合成某一种代谢最终产物,能在基本培养基上进行少量的生长。
代谢互锁:从生物合成途径来看,似乎是受一种完全无关的终产物的控制,它只是在较高浓度下才发生,而受这种抑制(阻遏)作用是部分性的,不完全的。
平衡合成:底物A经分支合成途径生成两种终产物E与G,由于a酶活性远远大于b酶,结果优先合成E。
E过量后就会抑制a酶,使代谢转向合成G。
G过量后,就会拮抗或逆转E的反馈抑制作用,结果代谢流转向又合成E,如此循环。
(P45图)优先合成:底物A经分支合成途径生成两种终产物E和G,由于a酶的活性远远大于b酶的活性,结果优先合成E。
E合成达到一定浓度时,就会抑制a酶,使代谢转向合成G。
G合成达到一定浓度时就会对c酶产生抑制作用。
代谢控制发酵名词解释
代谢控制发酵是一种生物工程技术,旨在通过调控微生物的代谢过程,使其能够高效地生产目标化合物。
在传统的发酵过程中,微生物通常在一定的培养基中生长并产生代谢产物。
然而,由于微生物的代谢途径是非常复杂的,导致产物的产量和质量难以得到有效控制。
代谢控制发酵的目标是通过对微生物代谢过程的调控,实现产物的高产和高纯度。
这一技术的核心在于通过对微生物的基因组进行工程改造,调节关键酶的表达水平,从而改变代谢途径,提高目标产物的产量。
在代谢控制发酵中,首先需要对微生物的代谢途径进行深入的研究和了解,包括代谢产物的合成途径、限速酶等。
然后,通过基因工程技术对微生物基因组进行改造,例如通过插入外源基因或删除某些基因,从而改变微生物的代谢途径和产物的合成过程。
此外,还可以通过优化培养条件,如调整pH值、温度和培养基组分等,来进一步提高产物的产量和质量。
代谢控制发酵在生物制药、食品工业和能源生产等领域有着广泛的应用。
通过该技术,可以有效提高目标产物的产量和质量,降低生产成本,减少对环境的影响。
同时,代谢控制发酵也为新型生物材料和生物能源的开发提供了新的途径。
总之,代谢控制发酵是一种利用基因工程技术来调控微生物代谢过程的生物工程方法。
它可以通过改变微生物的基因组,调节代谢途径和培养条件,实现高效生
产目标产物的目标。
这一技术的应用前景广阔,对于提高生产效率、降低成本、保护环境等方面都具有重要的意义。