糖类、蛋白质、脂肪的鉴定56939

细胞中的元素和无机化合物及糖类脂肪蛋白质的鉴定基础知识一、组成细胞的元素：1、最基本元素：C2、基本元素：C、H、O、N3、主要元素：C、H、O、N、P、S4、大量元素：C、H、O、N、P、S、K、Ca、Mg （含量占生物体总重量万分之一以上的元素）5、微量元素：Fe、Mn、Zn、B、Cu、Mo （含量占生物体总重量万分之一以下的元素）6、鲜重最多的元素：O 鲜重排序：O>C>H>N；7、干重最多的元素：C 干重排序：C>O>N>H）二、生物界和非生物界具有统一性和差异性1、统一性：组成细胞的化学元素在自然界的无机环境中都能找到,没有一种元素是生命特有的。

2、差异性：各种元素在细胞中和无机环境中的含量却有区别。

1）、生物体含量最多的4种元素：O、C、N、H、2）、无机环境最多的4种元素：O、Si、Al、Fe3、感悟拓展：1）、生物体的元素是生物根据自身生命活动的需要，有选择地从无机环境中吸收的，这体现了生物生物界与非生物界的统一性。

2）、不同生物体内所含的化学元素的种类基本相同，但在不同生物体内同种元素的含量差别较大；同一生物体内的不同元素的含量也不相同，这是细胞统一性和差异性的表现。

三、组成细胞和生物体的化合物：水：85%～90%无机物化合物无机盐：1%～1.5%糖类：脂类：1%～2% 1%～1.5%蛋白质：7%～10%核酸：一般情况下活细胞内含量最多的化合物是水，含量最多的有机化合物是蛋白质。

1、水：占细胞总重量的60%-90%，是活细胞中含量是最多的物质。

生物体内含水超过50%，是各种化合物中含量最多的；不同生物，体内含水量不同；同一生物，不同器官含水量不同。

概念；在细胞内与其它物质结合的水结合水：含量；4.5%功能；是细胞结构的重要组成成分概念；在细胞内以游离的形式存在，可以自由流动。

自由水：含量：95.5%（幼嫩植物、代谢旺盛细胞含量高）功能；①是细胞内的良好溶剂②是细胞内各种化学反应的媒介③参与细胞内的许多生物化学反应有机化合物④运输营养和代谢废物⑤调节体温——水的比热大⑥维持细胞的形态，保证代谢的正常进行二者在一定的条件下可以相互转化，温度、代谢强度等（1）自由水结合水①在代谢旺盛的细胞中，自由水的含量一般较多；②在环境条件恶劣（如低温、干旱、盐渍）时，结合水的含量增多，使植物的抗逆性增强。

真验一检测死物构制中的糖类、脂肪战蛋黑量之阳早格格创做一．真验手段：测验考查用化教试剂检测死物构制中糖类、脂肪战蛋黑量，道明真验本理—颜色反应，识记战区别用于可溶性还本糖、脂肪、蛋黑量审定的试剂及爆收的特定颜色，收端掌握审定上述化合物的基础要领，教会形貌真验局面，掌握NaOH 溶液战CuSO4溶液的使用要领.两．真验本理：某些化教试剂能使死物构制中的有闭有机化合物，爆收特定的颜色反应.1．死物构制中一致存留的可溶性糖类较多，有葡萄糖、果糖、麦芽糖战蔗糖.前三种糖的分子内皆含有游离的具还本性的半缩醛羟基，果此喊搞还本糖；蔗糖分子内不，为非还本糖.真验中所用的斐林试剂，只可审定死物构制中可溶性还本糖，而不克不迭审定可溶性非还本糖.可溶性还本糖（如葡萄糖、果糖、麦芽糖）与斐林试剂爆收效率，可死成砖红色的Cu 2O重淀.如：葡萄糖+ 2Cu2++ 4OH—加热葡萄糖酸+ Cu 2O↓（砖红色）+ H 2O即Cu 2+被还本成Cu 2O，葡萄糖被氧化成葡萄糖酸.用斐林试剂审定还本糖时，溶液变更历程为：浅蓝色→棕色→砖红色重淀淀粉逢碘变蓝色（曲链）或者紫（黑）色（收链）. 2．脂肪战类脂（磷脂、糖脂、固醇脂等）统称为脂类.它是形成人体构制的平常身分，不溶于火而易溶于酒粗、乙醚、氯仿等脂溶剂中.正在化教组成上，脂类属于脂肪酸的酯或者与那些酯有闭的物量.脂类的主要功能是氧化供能.脂肪主要存积于脂肪构制中，并以油滴状的微粒存留脂肪细胞浆内.正在病理考验中，脂类染色法最时常使用以道明脂肪变性，脂肪栓子以及肿瘤的鉴别.脂类染色使用最广大的染料是苏丹染料，最时常使用的有苏丹Ⅲ，苏丹Ⅳ，苏丹乌及油黑O等.脂肪被染色，本量上是苏丹染料被脂肪溶解吸附而浮现染料的颜色.经钻研认为构制中脂量正在液态或者半液态时，对于苏丹染料着色效验最佳.根据那一本理，适合普及温度（37℃-60℃）对于构制切片染色效验是有佳处的.脂类染色，用冰冻或者石蜡切片，以火溶性启固剂启固，如苦油、明胶战阿推伯糖胶等.脂肪不妨被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色或者橙红色（或者被苏丹Ⅳ染液染成红色），胆脂素呈浓红色，脂肪酸不着色，细胞核呈蓝色.苏丹Ⅲ染色液染色：脂肪呈橙黑，胞核呈兰色3．蛋黑量与单缩脲试剂爆收效率，爆收紫色反应.（蛋黑量分子中含有很多肽键，正在碱性NaOH溶液中能与单缩脲试剂中的Cu2+效率，爆收紫色反应.）三．真验资料1．搞可溶性还本性糖审定真验，应选含糖下，颜色为红色的动物构制，如苹果、梨.（果为构制的颜色较浅，易于瞅察.）经考查比较，颜色反应的明隐程度依次为苹果、梨、红色苦蓝叶、黑萝卜.2．搞脂肪的审定真验.应选富含脂肪的种子，以花死种子为最佳，真验前普遍要浸泡3~4小时（也可用蓖麻种子）. 3．搞蛋黑量的审定真验，可用富含蛋黑量的黄豆或者鸡蛋浑.4．淀粉的审定：马铃薯匀浆.四、真验试剂1．斐林试剂（包罗甲液：品量浓度为/ mL NaOH溶液战乙液：品量浓度为/ mL CuSO4溶液）2．苏丹Ⅲ或者苏丹Ⅳ染液（两）脂肪的审定。

实验二检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质一．实验目的：尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质二．实验原理：某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物，产生特定的颜色反应。

还原糖（葡萄糖、果糖、麦芽糖而蔗糖、纤维素、淀粉不是）+ 斐林试剂～砖红色沉淀脂肪+ 苏丹III ～橘黄色脂肪+ 苏丹IVⅢ～红色，橘红色蛋白质+ 双缩脲试剂～紫色反应（在碱性溶液中，Cu2＋与蛋白质发生反应，鉴定肽键）三、实验过程1、还原糖的检测（1）材料的选取：苹果或梨匀浆（无色，含糖量高，颜色为白色或近于白色。

植物叶片有液泡，内含色素，干扰试验）（2）试剂：斐林试剂（甲液：0.1g/mL的NaOH溶液，乙液：0.05g/mL的CuSO4溶液），现配现用，水浴。

（3）步骤：取样液2mL于试管中→加入刚配的斐林试剂1mL（斐林试剂甲液和乙液等量混合均匀后再加入）→50~65°温水大烧杯中温水浴加热2min左右→观察颜色变化（浅蓝色→棕色→砖红色）2、脂肪的检测（1）材料的选取：选择富含脂肪的种子（实验前浸泡3-4h）如花生子叶。

（2）步骤：制作切片（切片越薄越好，透光便于观察）将最薄的花生切片放在载玻片中央（花生切片细胞一部分清晰一部分模糊说明切片薄厚不均）↓染色（滴苏丹Ⅲ染液2～3滴切片上→2～3min后吸去染液→滴体积分数50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精）↓制作装片（滴1～2滴清水于材料切片上→盖上盖玻片）↓镜检鉴定（显微镜对光→低倍镜观察→高倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒。

先用低倍镜，找到子叶最薄处，并移到视野中央，再换高倍镜，调整细焦螺旋观察，可见已着色的脂肪颗粒）3、蛋白质的检测（1）试剂：双缩脲试剂（A液：0.1g/mL的NaOH溶液，B液：0.01g/mL的CuSO4溶液）（2）步骤：选材（豆浆或鸡蛋蛋白,若用鸡蛋实验则用水稀释，防止粘在试管内壁，利于清洗）→取组织样液加入试管中试管中加样液2mL→加双缩脲试剂A 液1mL，摇匀→加双缩尿试剂B液4滴，摇匀→观察颜色变化(紫色)4.淀粉的检测和观察（1）材料选取：淀粉遇碘变蓝。

生物实验生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定一、实验目的初步掌握鉴定生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的基本方法。

二、实验原理1.还原糖的鉴定原理生物组织中普遍存在的还原糖种类较多，常见的有葡萄糖、果糖、麦芽糖。

它们的分子内都含有还原性基团(游离醛基或游离酮基)，因此叫做还原糖。

蔗糖的分子内没有游离的半缩醛羟基，因此叫做非还原性糖，不具有还原性。

本实验中，用斐林试剂只能检验生物组织中还原糖存在与否，而不能鉴定非还原性糖。

斐林试剂由质量浓度为0.1 g/mL的氢氧化钠溶液和质量浓度为0.05g/mL的硫酸铜溶液配制而成，二者混合后，立即生成淡蓝色的Cu(OH)2沉淀。

Cu(OH)2与加入的葡萄糖在加热的条件下，能够生成砖红色的Cu2O沉淀，而葡萄糖本身则氧化成葡萄糖酸。

其反应式如下：CH2OH—(CHOH)4—CHO+2Cu(OH)2→CH2OH—(CHO H)4—COOH+Cu2O↓+2H2O用斐林试剂鉴定还原糖时，溶液的颜色变化过程为：浅蓝色棕色砖红色(沉淀)。

2.蛋白质的鉴定原理鉴定生物组织中是否含有蛋白质时，常用双缩脲法，使用的是双缩脲试剂。

双缩脲试剂的成分是质量浓度为0.1 g/mL的氢氧化钠溶液(A)和质量浓度为0.01g/mL(B)的硫酸铜溶液。

在碱性溶液(NaOH)中，双缩脲(H2NOC—NH—CONH2)能与Cu2+作用，形成紫色或紫红色的络合物，这个反应叫做双缩脲反应。

由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键，因此，蛋白质可与双缩脲试剂发生颜色反应。

3.脂肪的鉴定原理脂肪可以被苏丹Ⅲ染成橘黄色，被苏丹Ⅳ染成红色三、实验过程(见书P18)四、实验用品(见书P18)五、注意1.关于鉴定还原糖的实验，在加热试管中的溶液时，应该用试管夹夹住试管上部，并放入盛开水的大烧杯中加热。

注意试管底部不要接触烧杯底部，同时试管口不要朝向实验者，以免试管内溶液沸腾时冲出试管，造成烫伤。

检测生物组织中的糖类脂肪蛋白质引言：糖类脂肪蛋白质是生物体中一类具有重要生物学功能的大分子物质，它们在维持生物体正常生理活动、调节免疫反应、维持细胞结构稳定等方面起着重要作用。

对于研究生物体的生理、病理变化和疾病发生机制，以及药物研发和临床诊断等方面，对生物组织中糖类脂肪蛋白质的检测具有重要意义。

本文将介绍一些常用的检测方法，以及它们在检测生物组织中的糖类脂肪蛋白质方面的应用。

一、检测方法概述在检测生物组织中的糖类脂肪蛋白质方面，常用的方法主要包括免疫学方法、生物化学方法和分子生物学方法。

1. 免疫学方法免疫学方法是通过免疫反应来检测生物组织中的糖类脂肪蛋白质。

其中，酶联免疫吸附实验（ELISA）是最常用的方法之一。

ELISA通过将待测样品与特异性抗体结合，再通过酶标记二抗的作用，测定标记物的酶活性来体现糖类脂肪蛋白质的含量。

此外，免疫组织化学染色和流式细胞术也常用于检测组织中特定蛋白质的分布和表达。

2. 生物化学方法生物化学方法是通过对生物组织中的成分进行化学分析来检测糖类脂肪蛋白质。

例如，可以通过高效液相色谱法（HPLC）或气相色谱法（GC）来分离和定量糖类成分。

此外，通过核磁共振波谱技术（NMR）可以获取糖类成分的结构信息。

3. 分子生物学方法分子生物学方法是通过研究生物组织中的基因、mRNA、蛋白质等分子的表达和变化来间接判断糖类脂肪蛋白质的存在与功能。

例如，可以通过实时荧光定量PCR（qPCR）检测糖类脂肪蛋白质相关的基因表达水平；通过蛋白质组学技术，如蛋白质质谱分析，可以鉴定和定量蛋白质样品中糖类修饰的情况。

二、应用案例1. 糖类脂肪蛋白质在糖尿病中的检测糖类脂肪蛋白质在糖尿病的病理过程中起着重要作用。

通过检测血液中的糖类脂肪蛋白质含量，可以评估糖尿病的严重程度和治疗效果。

免疫学方法和生物化学方法可以检测血浆中的糖类脂肪蛋白质含量，分子生物学方法可以研究相关基因的表达水平，从而揭示糖尿病的发生机制。

4.1生物组织中糖类、脂肪、蛋白质的检测一、实验内容分析《生物组织中糖类、脂肪和蛋白质的检测》是人教版必修一第二章第1节的一个探究性实验，这是教材中第一个可以引导学生进行初步探究的实验，所以上好该实验不仅对培养学生的探究能力有重要作用，而且可以使学生体会探究思想，初步掌握科学探究的一般方法。

新课标教材把此实验安排在学习蛋白质、糖类和脂肪等知识内容之前，目的在于一方面为接下来学习各类有机物奠定感性认识基础，另一方面，由于实验内容的设置上注重学生对材料的选择，对检测结果的预期和实验方案的设计，因此有利于培养学生的实验探究能力，为以后各章节的探究性实验的顺利开展奠定了基础。

本实验是一个面向全体学生的探究实验，力求使每一个学生在原有的水平上都有所收获、有所提高。

二、学科核心素养与课程目标（一）生命观念在实验中不断探索与研究，在不断发现问题，解决问题的过程中，可以促进学生对生命科学知识来源的了解，培养学生的生命观念，同时也增强学生的思考力。

（二）理性思维通过实验原理的分析，让学生明确实验步骤的不同是实验原理的不同造成的，学会通过原理来进行实验步骤的设计，通过小组成员的协作，设计出合理的实验操作流程。

（三）科学探究选择合适的实验器具、试剂和材料，将本小组所设计的实验方案，加以实施；如实记录和分析实验结果，并运用科学术语展示和汇报实验结果。

（四）社会责任通过探究实验，联系生产、生活等实际，逐步使学生能够把理论应用于实际。

三、实验重点及难点重点：检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质的原理和方法。

难点：实验所用材料多，试剂种类和使用方法多，课堂容量大。

四、实验准备1.教师准备（1）实验材料、器具及试剂准备实验材料：梨匀浆、葡萄若干、冰糖雪梨饮料一瓶、牛奶、花生种子器具：烧杯，温度计，水浴缸，酒精灯，石棉网，三脚架，玻璃棒，胶头吸管，试管，试管架，量筒等。

试剂：斐林试剂（包括甲液：浓度为0.1g/mL NaOH溶液；乙液质量浓度为0.05g/ mL CuSO4溶液）、双缩脲试剂（包括A液：质量浓度为0.1g/mLNaOH溶液；B液：质量浓度为0.01g/mLCuSO4溶液）、（2）确认实验的关键和注意事项，做到心中有数，确保安全。