可溶性糖含量的测定

可溶性糖的测定方法可溶性糖的测定方法有多种，常用的方法包括显色法、比色法、电化学法和色谱法等等。

下面将详细介绍这些方法的原理和步骤。

1. 显色法：显色法是通过特定的试剂与可溶性糖发生反应，产生有色产物来测定糖含量的方法。

常用的试剂有硝酸铜和菲林试剂。

步骤：1）将待测样品与硝酸铜溶液混合，加热沸腾，反应生成红色沉淀。

2）离心沉淀，取上清液用氨水中和。

3）将中和后的溶液与菲林试剂混合，加热沸腾，产生显色反应。

4）使用分光光度计测定显色溶液的吸光度，根据吸光度与可溶性糖浓度之间的关系，计算样品中可溶性糖的含量。

2. 比色法：比色法是通过将待测样品与特定试剂反应，产生有色产物，并与标准溶液进行比色，从而计算样品中可溶性糖含量的方法。

常用的试剂有邻苯二酚、菲林试剂和磷酸重铈。

步骤：1）将待测样品与试剂混合，使其发生特定反应生成有色产物。

2）根据反应产物的颜色强度，与标准溶液的颜色强度进行比较，计算样品中可溶性糖的含量。

3. 电化学法：电化学法是通过利用可溶性糖在电极表面发生氧化还原反应，测定电流、电势或电导率的变化来确定糖浓度的方法。

常用的电化学方法有极谱法和电导法。

步骤：1）将待测样品与电解质溶液混合，形成电解质溶液。

2）将电解质溶液置于电极中，测量电流、电势或电导率的变化。

3）根据电流、电势或电导率的变化，计算样品中可溶性糖的浓度。

4. 色谱法：色谱法是通过使用色谱柱将样品中的可溶性糖分离，并通过检测分离后的峰面积或浓度来测定糖含量的方法。

常用的色谱技术有气相色谱和液相色谱。

步骤：1）将待测样品溶解，注入色谱柱。

2）通过调节流动相的组成和流速，使样品中的可溶性糖分离。

3）通过检测分离后的峰面积或浓度，计算样品中可溶性糖的含量。

总结：可溶性糖的测定方法有显色法、比色法、电化学法和色谱法等等。

选择合适的测定方法需要根据具体的需求和实验条件来确定。

无论采用哪种方法，都需要在严格控制实验条件的前提下进行，以确保结果的准确性和可重复性。

可溶性糖的测定——蒽酮比色法原理：可溶性糖与浓硫酸反应生成羟甲基糠醛，其与蒽酮生黄绿或蓝绿的糠醛衍生物，该物质在630nm(620)处有最大吸收峰，其浓度与可溶性糖的含量成正比。

试验用品：电子天平、分光光度计、恒温水浴锅、1mL，2mL，5mL 移液管各一支、容量瓶（根据需稀释倍数选择25或50mL）、10mL 刻度试管或离心管、试管架（别用胶的）、指型管（大一点的便于震荡混匀液体）、漏斗、滤纸、洗瓶试验药品：蒽酮、乙酸乙酯、分析纯蔗糖、浓硫酸（优级纯或分析纯）、蒸馏水试验样品：玉米叶（干样）标液及标曲配制：蒽酮-乙酸乙酯试剂：称取分析纯蒽酮1g溶于50mL乙酸乙酯中，贮于棕色瓶，至于黑暗中保存，如有结晶析出可加热溶解。

1%蔗糖标准液：精确称取1.000g分析纯蔗糖加少量蒸馏水溶解后转入100mL容量瓶中，加0.5mL浓硫酸，用蒸馏水定容至刻度线；100mg/L蔗糖标准液：精确吸取1%蔗糖标准液1mL，加入100mL容量瓶，加水至刻度线。

标曲：项目管号0 1 2 3 4 5各管中蔗糖含量（ug) 0 20 40 60 80 100 100mg/L蔗糖液（ml）0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 蒸馏水（ml） 2.0 1.8 1.6 1.4 1.2 1.0 蒽酮乙酸乙酯试剂（ml）0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5浓硫酸（ml） 5 5 5 5 5 5 吸光度A630样品测定：称取0.05g样品于干燥的10mL刻度试管中，加蒸馏水10mL后放入水浴锅内沸水浴30min，再过滤到50mL容量瓶内混匀。

取干燥的指型管分别加入1.5mL蒸馏水、0.5mL蒽酮乙酸乙酯试剂、0.5mL样品溶液和5mL浓硫酸快速震荡摇匀后冷至室温比色（摇匀后反应10min左右可放入冷水中冷却）。

结果计算：可溶性糖含量=Mx×V×D×100V1×W×103Mx：标准溶液查得的糖含量（ug）V ：样品总体积（mL）V1：测定时的取用体积（mL）D ：稀释倍数（mg）103：样品重量单位由mg换算成ug的倍数。

可溶性糖含量的测定
切取样品0.5g置入研钵内，加入蒸馏水和少量石英砂研磨至匀浆，将匀浆连同残渣一起定容至100mL的容量瓶中，室温下静置30～60min（每隔5min混匀一次），或离心或过滤，弃去残渣。

取干净试管若干支，分别加入样液1ml和蒽酮试剂5ml，摇匀后于沸水浴中，加热10min，冷却后于620nm下测定吸光值（以标准曲线的空白为零点），并记录数据。

根据标准曲线可计算出每个处理每1g样品所含有的可溶性糖含量。

结果与计算
C＝AN/W
C.样品可溶性糖量（ug/g）；A.标准曲线中得到的可溶性糖量（ug）；N.稀释倍数；W.样品重量（g）。

注意事项：
✧研磨要充分，否则提取样品的糖含量会偏低；
✧研磨后静置的过程要求每隔一段时间将容量瓶上下颠倒混匀这样
可以使糖充分地提取至溶液中；
✧要求严格掌握反应的时间和温度；
✧比色前，需冷却才能比色，否则温度会影响到比色的结果；
✧蒽酮试剂不稳定，易被氧化变成褐色，所以一般为当天配置；
蒽酮试剂的配制：称取0.2g蒽酮溶于100ml98%浓硫酸中。

可溶性糖测定方法可溶性糖测定方法是一种常用的分析方法，用于测定食品、饮料、果汁等中的可溶性糖含量。

可溶性糖是指在水中能够溶解的糖类化合物，如葡萄糖、果糖、蔗糖等。

测定可溶性糖含量可以帮助我们了解食品的甜味程度，还可以用于质量控制和产品开发等方面。

目前常用的可溶性糖测定方法主要包括比色法、光度法和高效液相色谱法等。

下面我将分别介绍这些方法的原理和步骤。

首先是比色法。

这种方法基于可溶性糖分子与特定试剂的反应，生成具有一定颜色的复合物。

比色法最常用的试剂是菲龙试剂、安利试剂和硝酸铜试剂等。

测定步骤一般包括样品的准备、试剂的配制和比色测定。

样品的准备通常是将食品或饮料样品经过适当处理后，将溶液通过滤纸滤除杂质。

试剂的配制则是根据给定的比例将试剂与溶剂混合。

比色测定时，则是将样品溶液和试剂溶液混合，并在一定时间内测量其吸光度。

根据比色复合物的吸光度与可溶性糖含量的关系，即可计算出样品中可溶性糖的含量。

其次是光度法。

这种方法是利用可溶性糖溶液对特定波长的光的吸收特性进行测定的。

光度法需要使用专用的光度计或分光光度计进行测量。

测定步骤与比色法类似，首先是样品的准备和试剂的配制，然后将试剂与样品溶液混合，并将混合溶液转移到光度计中进行测量。

光度计会根据样品溶液对光的吸收情况，输出吸光度值。

根据吸光度与可溶性糖浓度的相关关系，可以计算出样品中可溶性糖的含量。

最后是高效液相色谱法。

这种方法需要使用高效液相色谱仪进行分析。

高效液相色谱法是通过样品中可溶性糖与色谱柱中的填料分离，进而进行测定的。

测定步骤包括样品的制备和高效液相色谱仪的设置。

样品的制备一般涉及样品的提取和净化等过程。

提取过程通常使用有机溶剂将可溶性糖从样品中提取出来，净化过程则是通过固相萃取等手段去除杂质。

高效液相色谱仪的设置则是根据样品特性，选择合适的色谱柱，并设置适当的流动相条件和检测波长。

测定时，样品溶液会经过自动进样器注入色谱柱，可溶性糖在柱中与填料相互作用而分离，然后通过检测器检测吸收峰面积或浓度，最终计算出样品中可溶性糖的含量。

可溶性糖含量测定实验的改进可溶性糖含量测定在许多领域都具有重要意义，如植物生理学、食品科学、医学等。

通过对可溶性糖含量的测定，可以了解植物的生理状态、食品的品质和加工工艺，以及人体血液中血糖的水平等。

因此，对可溶性糖含量测定实验的改进就显得尤为重要。

可溶性糖含量测定主要基于糖类的水解和还原性质。

在碱性环境中，糖类可以被碘化钾氧化，同时生成可滴定的碘。

通过测定消耗的硫代硫酸钠标准溶液的体积，可以计算出可溶性糖的含量。

实验所需材料和设备包括：新鲜植物叶片、氢氧化钠、盐酸、无水乙醇、丙酮、酚酞指示剂、1 mol/L硫代硫酸钠标准溶液、容量瓶、滴定管等。

样品制备：将新鲜植物叶片剪成小段，称取一定质量，加入50 mL 80%乙醇，在80℃下加热10 min，然后过滤得到提取液。

蒸馏：将提取液倒入蒸馏瓶中，加入5 mL浓盐酸，蒸馏至100 mL。

萃取：向蒸馏液中加入10 mL丙酮，用力摇动后静置分层，弃去水层。

滴定：向丙酮层中加入3滴酚酞指示剂，用1 mol/L硫代硫酸钠标准溶液滴定至粉红色。

计算：根据硫代硫酸钠标准溶液的用量和实验条件，计算可溶性糖的含量。

称取样品时要保证叶片的质量和大小基本一致，以保证实验结果的准确性。

在加入盐酸进行蒸馏时要注意安全，避免烫伤。

在萃取步骤中要保证丙酮完全覆盖水层，以确保糖类物质被完全萃取。

在滴定过程中要保证滴定管洁净，避免残留物对实验结果的影响。

每个样品需做至少3个平行实验，以保证实验结果的可靠性。

通过实验，我们得到了不同样品中可溶性糖的含量（表1）。

从表中可以看出，不同样品中可溶性糖的含量存在较大的差异。

通过对不同样品中可溶性糖含量的测定，我们可以发现不同样品之间的糖含量存在差异。

这种差异可能是由于植物生长环境、品种等因素造成的。

实验过程中也需要注意操作细节，如称样量的控制、萃取时丙酮的使用量等，这些因素都会对实验结果产生影响。

因此，需要对实验操作进行精确控制，以提高实验结果的准确性。

可溶性糖含量的测定实验九植物组织中可溶性糖含量的测定2005级生物科学(1)班赵银锁(40508010) 一(实验目的学习可溶性糖测定的蒽酮比色法二(实验原理植物在个体发育的各个时期，代谢活动也发生相应的变化，碳水化合物的代谢也不例外其含量也随之发生变化。

了解可溶性糖含量的变化，在生理上和实践上都有重要的意义。

本实验采用蒽酮比色法测定可溶性糖的含量。

糖在硫酸的作用下生成糠醛，糠醛再与蒽酮作用，形成一种绿色的络合物.在低浓度时，625nm的OD值与糖含量成正相关。

该实验方法简便，但没有专一性，对于绝大部分的碳水化合物都能与蒽酮反应，产生颜色。

三(实验用品721型分光光度计分析天平研钵恒温水浴锅烧杯刻度试管大试管活性炭移液管漏斗酒精(80%)葡萄糖标准溶液:称取已在80?烘箱中烘至恒重葡萄糖100mg,配制成500mL溶液，即得每mL含糖为200μg的标准溶液。

蒽酮试剂:称取1g经过纯化的蒽酮，溶解于1000mL稀硫酸中即得。

稀硫酸溶液由760mL浓硫酸(比重1.84)稀释成1000mL而成。

四(实验步骤1.可溶性糖的提取称取0.5g的新鲜植物叶片，于研钵中加80%酒精4ml，仔细研磨成匀浆，倒入离心管内，置于80?水浴中不断搅拌30min，离心10分钟(5000转/min)，收集上清液于10ml的刻度试管中，其残渣加2ml80%酒精重复提1次，合并上清液。

在上清液中加0.5g活性炭，80?水浴脱色30min,定容至10ml，过滤后取滤液(稀释10倍或20倍后)测定。

2.显色及比色吸取上述糖提取液1mL，放入一干洁的试管中，加蒽酮试剂5mL混合之，于沸水浴中煮沸10分钟，取出冷却，然后于分光光度计上进行测定，波长为625nm，测得吸光度。

从标准曲线上查得滤液中得糖含量(或经直线回归公式计算)，然后再行计算样品中含糖百分数。

3.绘制标准曲线1取标准葡萄糖溶液将其稀释成一系列不同浓度的溶液，浓度分别为每mL含糖0、5、10、20、40、60、80μg。

植物可溶性糖含量的测定可溶性糖包括葡萄糖、果糖、蔗糖，是植物品质的重要构成性状之一，尤其是以果实为目的产品的果树作物，可溶性糖与酸的含量及其配比是影响果实风味品质的重要因素。

对于鲜食品种，一般来讲，高糖中酸，风味浓，品质优；低糖中酸，风味淡，品质差。

因此，可溶性糖的定量讨论对果树的品质育种具有重要意义。

一、试材及用具1．试材新奇或冷冻的植物材料2．仪器及试剂高速组织捣碎机、电热恒温水浴锅、1000W调温电炉以及200mL、250mL容量瓶、250mL锥形瓶及50mL碱式滴定管等玻璃仪器；试剂主要包括费林试剂及亚甲基蓝溶液等。

二、原理本试验的主要原理：在加热条件下，用还原糖溶液滴定肯定量的费林试剂时，将费林试剂中的二价铜还原为一价铜，以亚甲基蓝为指示剂，稍过量的还原糖马上使蓝色的氧化型亚甲基蓝还原为无色的还原型亚甲基蓝。

通过试验，学习并把握用费林试剂滴定法测定可溶性糖的原理和方法。

三、方法步骤（一）试剂配制1．费林试剂甲：称取硫酸铜（CuSO45H2O，分析纯）34.6g溶于水中，稀释至500mL，过滤，贮于棕色瓶内。

2．费林试剂乙：称取氢氧化钠50g和酒石酸钾钠（KNaC4O6H44H2O，分析纯）138g溶于水中，稀释至500mL，用石棉垫漏斗抽滤。

3．转化糖标准溶液：称取9.5g蔗糖（分析纯）用水溶解后转入1000mL容量瓶中，加入6mol/L HCl（分析纯）10mL，加水至100mL。

在20～25℃下放置三天或在25℃保温24h，然后用水定容（此为酸化的1%转化糖液，可保存3～4个月）。

测定时，取1%转化糖液25.00mL放入250mL容量瓶中，加入甲基红指示剂一滴，用1mol/L NaOH溶液中和后用水定容，即为1mg/mL转化糖标准溶液。

4．亚甲基蓝溶液：称取0.5g亚甲基蓝（分析纯）溶于10mL水中。

5．乙酸锌溶液：称取21.9g乙酸锌[Zn(OAC)22H2O，分析纯]溶于水中，加冰乙酸3mL稀释至100mL。

实验方案一、实验目的通过实验，掌握测定萝卜品质的方法（一）萝卜外部形态的测定1、实验材料取鲜样3个∕小区直尺、蒸馏水、笔、记录本、吸水纸2、实验方法．用自来水将各组萝卜洗净后，再用蒸馏水洗涤，擦干表面水分．每个小区取3个重复，用电子天平称量每株的鲜重，用直尺测量植株的茎长、茎粗、叶长，取平均值作为指标值实验(二) 植物体内可溶性糖含量的测定（蒽酮法）一、实验目的了解蒽酮法测定可溶性糖含量的原理；掌握分光光度计的使用二、实验原理糖类物质是构成植物体的重要组成成分之一，也是新陈代谢的主要原料和贮存物质。

不同载培条件，不同成熟度都可以影响水果、蔬菜中糖类的含量。

因此对水果、蔬菜中可溶性糖的测定，可以了解和鉴定水果、蔬菜品质的高低。

蒽酮比色定糖法是一个快速而方便的定糖方法，在强酸性条件下，蒽酮可以与游离的或多糖中存在的己糖、戊糖及己糖醛酸（还原性和非还原性）作用生成蓝绿色的糖醛衍生物，其颜色的深浅与糖的含量在一定范围内成正比。

蒽酮也可以和其他一些糖类发生反应，但显现的颜色不同。

当存在含有较多色氨酸的蛋白质时，反应不稳定，呈现红色。

上述特定的糖类物质，反应较稳定。

该法特点：灵敏度高，测定量少，快速方便。

三、材料、仪器及试剂1.材料：植物种子、白菜叶、柑桔2.仪器：分光光度计；恒温水箱； 20ml具塞刻度试管（3支）漏斗；100ml容量瓶；刻度试管；试管架；剪刀；研钵3.试剂（1）200μg/ml标准葡萄糖：AR级葡萄糖100mg，蒸馏水溶解，定容至500ml。

（2）蒽酮试剂：1g蒽酮，用乙酸乙酯溶解，定容至50ml，棕色瓶避光处贮藏；（3）浓硫酸四、实验方法1.葡萄糖标准曲线的制作取6支20ml具寒试管，编号，按下表数据配制一系列不同浓度的标准葡萄糖溶液。

在每管中均加入0.5ml蒽酮试剂，再缓慢地加入5ml浓H2SO4，摇匀后，打开试管塞，置沸水浴中煮沸10分钟，取出冷却至室温，在620nm波长下比色，测各管溶液的光密度值（OD），以标准葡2.称取1克白菜叶，剪碎，置于研钵中，加入少量蒸馏水，研磨成匀浆，然后转入20ml刻度试管中，用10ml蒸馏水分次洗涤研钵，洗液一并转入刻度试管中。

植物体内可溶性糖含量的测定——蒽酮法一、实验目的1.了解蒽酮法测定可溶性糖含量的原理2.掌握分光光度计的使用二、实验背景糖类物质是构成植物体的重要组成成分之一也是新陈代谢的主要原料和贮存物质。

不同载培条件不同成熟度都可以影响水果、蔬菜中糖类的含量。

因此对水果、蔬菜中可溶性糖的测定可以了解和鉴定水果、蔬菜品质的高低。

三、实验原理总糖是指样品中的还原单糖及在本法测定条件下能水解成还原单糖的蔗糖、麦芽糖和可部分水解为葡萄糖的淀粉。

蒽酮比色法是测定样品中总糖量的一个灵敏、快速、简便的方法。

其原理是糖类在较高温度下被硫酸作用脱水生成糠醛或糖醛衍生物后与蒽酮(C14HoO)缩合成蓝色化合物。

溶液含博量在每mL 150 pg以内，与蔥酮反应生成的颜色深浅与糖量成正比。

蒽酮不仅能与单糖也能与双糖、糊精、淀粉等直接起作用,样品不必经过水解。

四、材料、仪器及试剂1.材料：苹果2.仪器：分光光度计恒温水箱试管漏斗容量瓶试管架研钵刀片3.试剂：蒽酮试剂(称取100 mg蒽酮溶于100 mL 98%硫酸溶液(A.R)中）葡萄糖标准溶液(100 μg)/mL(精确称取100 mg干燥葡萄糖,用蒸馏水定容至1000 mL）。

样品溶液（可自选待测物制成样品溶液。

eg：称取0.1g苹果剪碎置于研钵中加入少量蒸馏水研磨成匀浆然后转入20ml刻度试管中用10ml蒸馏水分次洗涤研钵洗液一并转入刻度试管中。

置沸水浴中加盖煮沸10分钟冷却后过滤滤液收集于100ml容量瓶中用蒸馏水定容至刻度摇匀备用。

）四、实验方法1.葡萄糖标准曲线的制作：取七支干燥洁净的试管编号后，按下表操作。

编号123456700.100.200.300.400.600.80葡萄糖标准液(100ug/ml)H2O 1.00.900.800.700.600.400.20蒽酮试剂10101010101010每管加人葡萄糖标准液和水后立即混匀，迅速置于冰浴中，传各管都加人蒽酮试剂后，同时置于沸水浴中，准确加热7分钟，立即取出置冰浴中迅速冷却。

Ⅳ、植物组织中可溶性糖含量的测定（蒽酮法）二、原理糖类（包括单糖、双糖、寡糖）在浓硫酸存在下，脱水生成糠醛或羟甲基糠醛，然后蒽酮与糠醛或羟甲基糠醛经脱水缩合，生成蓝绿色的糠醛衍生物，颜色深浅与糖浓度成正相关。

显色反应与反应温度、加热时间、反应系统中水和硫酸比例有关。

本实验通过控制反应系统中水和硫酸比例，利用硫酸与水发生水合作用释放的热能，使反应系统自行升温而达到显色效果免去外加热步骤。

蒽酮法具有很高灵敏度，适用于糖的微量测定，且试剂简单，操作简便，因而得到普遍应用。

三、材料、仪器设备及试剂1.材料：烘干材料粉末（过筛100目）或剪碎混匀鲜样品。

2.仪器设备: 分光光度计；电子分析天平；水浴锅；50ml容量瓶；试管；漏斗；剪刀；移液管；洗耳球等。

3.试剂及配制：蒽酮乙酸乙酯试剂：称取蒽酮2 g溶于100ml乙酸乙酯中，棕色瓶保存。

加热溶解。

每次用前检查，有结晶则微热溶解后使用。

100μg·ml－1蔗糖标准母液：准确称取蔗糖1 g于烧杯加少量水溶解后，洗入100ml容量瓶中定容至刻度。

再取1ml稀释定容100ml，即100μg/ml 蔗糖标准液。

四、实验步骤1.蔗糖标准曲线制作1.1取6支试管，编号，按下表配制每管含量为0～100μg蔗糖标准液。

加入表中试剂后，按顺序加入0.5ml蒽酮乙酸乙酯溶液，沿壁缓慢加入5ml浓硫酸，并立即摇动使混合均匀，立即沸水浴，每管准确保温1min，冷却后倒入比色杯，以0号管作空白对照，在630nm波长处，以多点校准总量法，制作标准曲线。

2.样品提取称取干样品粉末100mg或剪碎混匀的鲜样品1g，放入试管中，加入蒸馏水10ml，置于沸水浴中提取30min，冷却后过滤入50ml容量瓶中，再次加水10ml，沸水浴30min，一并滤入容量瓶中，待冷至室温，定容至刻度，即为样品待测液。

残渣如需继续测定淀粉，则过滤前离心，防止残渣流失。

3.糖含量测定吸取待测液0.5ml，加入试管中，再加蒸馏水1.5 ml。

可溶性糖测定
可溶性糖是指在水或其他溶液中能够被溶解的糖类物质，主要包括单糖、双糖和少量
的多糖。

可溶性糖在生物体中起到了重要的营养供应和能量代谢作用，因此对于可溶性糖
的测定具有重要意义。

本文将介绍常见的可溶性糖测定方法以及其原理。

1. 酚硫酸法
酚硫酸法是一种常见的可溶性糖测定方法，适用于各种单糖和双糖的测定。

其原理是
将样品加入到酚硫酸试液中，糖与试剂中的酚反应能够产生紫红色的复合物，根据复合物
的颜色深浅可以测定糖的含量。

该方法具有操作简便、测定灵敏度高、适用范围广等优点，但同时也存在样品干扰和部分糖类无法测定的缺点。

2. 酶法
3. 高效液相色谱法
高效液相色谱法是一种适用于各种单糖、双糖和多糖的测定方法，其原理是利用色谱
柱对样品进行分离和纯化，通过检测柱後样品分离出来的不同组分的质量和相对浓度来确
定糖的含量。

该方法具有测定精度高、可同时测定多种糖类等优点，但需要高精度设备和
技术人员，操作较为繁琐。

4. 紫外光度法
综上所述，各种可溶性糖测定方法具有优缺点，需要根据不同的实验需求选择最适合
的方法进行研究。

实验8 植物可溶性糖含量的测定可溶性糖包括葡萄糖、果糖、蔗糖，是植物品质的重要构成性状之一，尤其是以果实为目的产品的果树作物，可溶性糖与酸的含量及其配比是影响果实风味品质的重要因素。

对于鲜食品种，一般来讲，高糖中酸，风味浓，品质优；低糖中酸，风味淡，品质差。

因此，可溶性糖的定量研究对果树的品质育种具有重要意义。

一、试材及用具1．试材新鲜或冷冻的植物材料2．仪器及试剂高速组织捣碎机、电热恒温水浴锅、1000W调温电炉以及200mL、250mL 容量瓶、250mL锥形瓶及50mL碱式滴定管等玻璃仪器；试剂主要包括费林试剂及亚甲基蓝溶液等。

二、原理本实验的主要原理：在加热条件下，用还原糖溶液滴定一定量的费林试剂时，将费林试剂中的二价铜还原为一价铜，以亚甲基蓝为指示剂，稍过量的还原糖立即使蓝色的氧化型亚甲基蓝还原为无色的还原型亚甲基蓝。

通过实验，学习并掌握用费林试剂滴定法测定可溶性糖的原理和方法。

三、方法步骤（一）试剂配制1．费林试剂甲：称取硫酸铜（CuSO4•5H2O，分析纯）34.6g溶于水中，稀释至500mL，过滤，贮于棕色瓶内。

2．费林试剂乙：称取氢氧化钠50g和酒石酸钾钠（KNaC4O6H4•4H2O，分析纯）138g 溶于水中，稀释至500mL，用石棉垫漏斗抽滤。

3．转化糖标准溶液：称取9.5g蔗糖（分析纯）用水溶解后转入1000mL容量瓶中，加入6mol/L HCl（分析纯）10mL，加水至100mL。

在20～25℃下放置三天或在25℃保温24h，然后用水定容（此为酸化的1%转化糖液，可保存3～4个月）。

测定时，取1%转化糖液25.00mL 放入250mL容量瓶中，加入甲基红指示剂一滴，用1mol/L NaOH溶液中和后用水定容，即为1mg/mL转化糖标准溶液。

4．亚甲基蓝溶液：称取0.5g亚甲基蓝（分析纯）溶于10mL水中。

5．乙酸锌溶液：称取21.9g乙酸锌[Zn(OAC)2•2H2O，分析纯]溶于水中，加冰乙酸3mL 稀释至100mL。

可溶性糖测定方法可溶性糖测定是食品分析中常用的方法之一，用于测定食品中可溶性糖的含量。

可溶性糖是指在食品中可溶于水并能发挥甜味的一类糖类化合物，如蔗糖、葡萄糖、果糖等。

常用的可溶性糖测定方法主要有高效液相色谱法、酶法和红外光谱法等。

高效液相色谱法是一种快速、准确的测定可溶性糖的方法。

该方法利用高效液相色谱仪对样品中的糖进行分离和检测。

首先，将食品样品加热转化为液体状态，然后将样品注入高效液相色谱仪进行分离。

分离完成后，通过检测器检测出糖的吸收峰，根据峰的面积计算出样品中可溶性糖的含量。

酶法是一种常用的测定可溶性糖含量的方法。

该方法利用特定的酶催化反应将可溶性糖转化为可以检测的产物。

常用的酶包括葡萄糖氧化酶、蔗糖酶和果糖酶等。

首先，将食品样品与适当的缓冲液混合，加入酶催化剂后进行反应。

反应完成后，通过比色法或荧光法等检测方法测定反应产物的含量，从而得出样品中可溶性糖的含量。

红外光谱法是一种非破坏性的测定可溶性糖含量的方法。

该方法利用红外光的特征吸收峰来鉴定和定量可溶性糖的含量。

首先，将食品样品制备成薄片或粉末，并放置在红外光谱仪中进行测定。

红外光谱仪会发射红外光，样品对红外光的吸收谱进行测定。

通过与标准样品的比较，可以计算出样品中可溶性糖的含量。

以上是常用的可溶性糖测定方法，每种方法都有其特点和适用范围。

在实际应用中，选择合适的方法需要综合考虑样品的性质、仪器设备的可用性和实验室的经验等因素。

此外，需要注意的是，不同方法可能会测得不同的结果，因此在比较不同样品或不同研究结果时需要谨慎处理。

另外，还需要注意样品的制备方法和储存条件等因素对测定结果的影响，以保证测定结果的准确性和可靠性。

总之，可溶性糖测定是食品分析中重要的一环，不同的测定方法可以提供不同角度对可溶性糖含量进行测定。

无论是高效液相色谱法、酶法还是红外光谱法，都可以根据实际需要选择合适的测定方法，以获得准确可靠的结果。

可溶性糖含量测定简易程序一、反应液的配制方法1、药品：蒽酮（AR）、浓硫酸（AR）、95%乙醇、蒸馏水2、配制方法：1）反应液A：准确称取0.4g蒽酮置于烧杯（烧杯必须是干燥的，烧杯的体积应大于反应液体积），后加入200ml浓硫酸，并用玻璃棒搅动硫酸，以使蒽酮完全溶解（搅动时玻璃棒不能碰撞烧杯壁，以防止烧杯破裂，硫酸外溢）；2）反应液B：准确量取15ml乙醇置于烧杯（500ml），后加入60ml蒸馏水，并用玻璃棒搅动，以混匀溶液；3）反应液C：将反应液A通过玻璃棒导流缓慢加入盛有反应液B的烧杯中，整个过程须在冰浴中进行（反应液A只能往反应液B中倒，倒反应液A时，一定要用玻璃棒导流，且缓慢而匀速，勿直接倒入，以防止反应液飞溅）。

4）若要配量大的反应液时，反应液A和反应液B所称（量）取的对应药品要同倍数增加。

二、样品测定程序1、将实验所需的玻璃器皿洗干净，并用蒸馏水冲洗，干燥；2、测定前，样品须在80℃烘箱中烘干24小时，以确保样品干燥；3、准确称取0.2±0.002g样品，置于100ml三角瓶中，每个样品3份（每个三角瓶须编号）；4、在盛有样品的每个三角瓶中准确加入50ml蒸馏水，后用保鲜膜封口，以防止提取液在煮沸时过度蒸发；5、将三角瓶放到水浴锅中，煮40min（三角瓶中的蒸馏水开始沸腾时记时）；6、煮沸后，待三角瓶中的提取液冷却至室温后，提取液经过滤定容至50ml容量瓶中（容量瓶须编号），定容时用蒸馏水冲洗三角瓶3次（每次加少量蒸馏水冲洗），定容后应颠倒容量瓶数次，使提取液混合均匀，若暂时不测定放4℃冰箱中保存；7、吸取0.25ml提取液加到20ml的试管中，再加入0.75ml蒸馏水，后加入5ml反应液C，并振荡试管，使反应液混合均匀；8、将试管放到水浴锅中沸水浴1min，后冷却至室温；9、将试管中的反应液倒入比色杯中，在620nm处比色，记OD值。

植物组织中可溶性糖含量的测定在作物的碳素营养中，作为营养物质主要是指可溶性糖和淀粉。

它们在营养中的作用主要有：合成纤维素组成细胞壁；转化并组成其他有机物如核苷酸、核酸等；分解产物是其他许多有机物合成的原料，如糖在呼吸过程中形成的有机酸，可作为 NH 3 的受体而转化为氨基酸；糖类作为呼吸基质，为作物的各种合成过程和各种生命活动提供了所需的能量。

由于碳水化合物具有这些重要的作用，所以是营养中最基本的物质，也是需要量最多的一类。

Ⅰ蒽酮法测定可溶性糖一、原理糖在浓硫酸作用下，可经脱水反应生成糠醛或羟甲基糠醛，生成的糠醛或羟甲基糠醛可与蒽酮反应生成蓝绿色糠醛衍生物，在一定范围内，颜色的深浅与糖的含量成正比，故可用于糖的定量测定。

该法的特点是几乎可以测定所有的碳水化合物，不但可以测定戊糖与己糖含量，而且可以测所有寡糖类和多糖类，其中包括淀粉、纤维素等（因为反应液中的浓硫酸可以把多糖水解成单糖而发生反应），所以用蒽酮法测出的碳水化合物含量，实际上是溶液中全部可溶性碳水化合物总量。

在没有必要细致划分各种碳水化合物的情况下，用蒽酮法可以一次测出总量，省去许多麻烦，因此，有特殊的应用价值。

但在测定水溶性碳水化合物时，则应注意切勿将样品的未溶解残渣加入反应液中，不然会因为细胞壁中的纤维素、半纤维素等与蒽酮试剂发生反应而增加了测定误差。

此外，不同的糖类与蒽酮试剂的显色深度不同，果糖显色最深，葡萄糖次之，半乳糖、甘露糖较浅，五碳糖显色更浅，故测定糖的混合物时，常因不同糖类的比例不同造成误差，但测定单一糖类时，则可避免此种误差。

糖类与蒽酮反应生成的有色物质在可见光区的吸收峰为 620 nm ，故在此波长下进行比色。

二、实验材料、试剂与仪器设备（一）实验材料任何植物鲜样或干样。

（二）试剂1. 80 ％乙醇。

2. 葡萄糖标准溶液（ 100 μg/mL ）：准确称取 100 mg 分析纯无水葡萄糖，溶于蒸馏水并定容至 100 mL ，使用时再稀释 10 倍（ 100 μg/mL ）。