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艾滋病检测实验室室内质量控制酶免或发光法检测的室内质量控制1 试剂盒内部对照试剂盒内部对照质控品即为试剂盒内提供的阳性和阴性对照。
试剂盒内部对照用于判断每次实验的有效性，不能作为室内质控品使用。
每一次检测临床样本时，必须有试剂盒内部对照，而且只能在同批号的试剂盒中使用。
如内部对照结果无效，必须重新试验。
2 室内质控品为非试剂盒组份的外部质控品，是为了监控检测的重复性而设置的，质控品定值必须为弱阳性。
外部质控品的作用是判断该批临床样本检测的可信性。
因此，每次实验必须包含室内质控品，出现失控时，必须重新试验。
室内质控品可以购买或实验室自行制备。
质控品应稳定、无菌、或不含有影响试剂反应的防腐剂。
3 Levey-Jennings质控图3.1 质控图参数外部质控品的均值和标准差应建立在实验室常规使用方法对外部质控品重复测定的基础上。
一般采用在不同批次检测取得至少20个数据；如果仅做少量批次的检测，也至少做5个批次的检测，每个批次中不少于4个质控血清测定结果，以建立一个临时性的均值和标准差，当达到20批次数据后，替代临时性的均值和标准差。
（1）算术平均值（x）：代表一组质控品测定S/CO值的均值。
为了统计学上有显著性意义，应该采用至少20次（天）测得的外部对照质控品的S/CO值计算平均值。
（2）标准差（s）：是描述样本与均数之间离散程度的一个指标，是与质控品S/CO值均值有关的预期范围。
一组S/CO值的标准差以s表示。
（3）变异系数（cv）：是反映各次S/CO值相对于均值离散程度的一个指标，可以用来衡量检测的重复性或精密度。
（4）控制限：由实验室根据对外部质控品检测结果的均值和标准差来确定。
例如，按照12S质控规则，控制限为外部质控品S/CO均值加减2个标准差；按照13S质控规则，控制限为外部质控品S/CO均值加减3个标准差。
3.2 质控规则实验室在报告结果之前必须评价质控数据，可通过图形记录的检查或由计算机审核结果来决定。
免疫室室内质控方法分析室内质控的目的是监测测定过程，当出现医学上重要的误差时，用适当的质控方法警告分析人员。
一般来说，实验室通过测定质控品来检查检验结果的质量，并将质控结果画在质控图上，观察质控结果是否超过质控限来决定是否失控。
实验室最常用的是Levey-Jennings质控图，由于样本数量和检验成本的限制也可采用“即刻法”质控图进行外部质量评价。
一、室内质控的实际操作步骤二、1 设定靶值1.1 稳定性较长的质控品在开始室内质控时，首先要设定质控品的靶值。
各实验室应对新批号的质控品的各个测定项目自行确定靶值。
靶值必须在实验室内使用自己现行的测定方法进行确定。
定值质控品的标定值只能做为确定靶值的参考。
1.1.1 暂定靶值的设定为了确定靶值，新批号的质控品应与当前使用的质控品一起进行测定。
根据20或更多独立批获得的至少20次质控测定结果，计算出平均数，作为暂定靶值。
以此暂定靶值作为下一个月室内质控图的靶值进行室内质控；一个月结束后，将该月的在控结果与前20个质控测定结果汇集在一起，计算累积平均数（第一个月），以此累积的平均数做为下一个月质控图的靶值。
重复上述操作过程，连续三至五个月。
1.1.2 常用靶值的设立以最初20个数据和三至五个月在控数据汇集的所有数据计算的累积平均数作为质控品有效期内的常用靶值，并以此作为以后室内质控图的平均数。
对个别在有效期内浓度水平不断变化的项目，则需不断调整靶值。
1.2 稳定性较短的质控品在3-4天内，每天分析每水平质控品3-4瓶，每瓶进行2-3次重复。
收集数据后，计算平均数、标准差和变异系数。
对数据进行异常值检验。
如果发现异常值，需重新计算余下数据的平均数和标准差。
以此均值作为质控图的靶值。
2 设定控制限对新批号质控品应确定控制限，控制限通常以标准差倍数表示。
2.1 稳定性较长的质控品2.1.1 暂定标准差的设定为了确定标准差，新批号的质控品应与当前使用的质控品一起进行测定。
在质量方面的指挥和控制组织的协调的活动，通常包括制定质量方针和质量目标以及质量策划、质量控制(quality control, QC)、质量保证(quality assurance, QA)和质量改进(quality improvement, QI) 。
强调对实验室质量不仅仅限于检验结果本身，从管理内容来讲要包括影响分析结果的全过程和全方面。
也就是说不能只考虑检测过程，还应包括检测前(分析前)过程和检测后(分析后)过程。
质量管理不只是质量管理人员或者质量管理部门的事，而是实验室全体人员的事。
自上而下共有五个层次：全面质量管理质量管理质量体系质量保证质量控制定义：是质量管理的一部份，为达到质量要求所采取的作业技术和活动。
十个要素:设施和环境令检验方法、仪器及外部供应品令操作手册令建立和确认方法的性能规格令仪器和检验系统的维护和功能检查令校准和校准验证令室内质量控制令室间质量评价令纠正和纠正措施令质控记录令实验室应确保其环境条件不会使结果无效，或者对所要求的测量质量产生不良影响。
防止交叉污染实验区的准入制度实验室良好的内务实验室必须使用能保证准确和可靠的检验结果的检验方法、器材、仪器、试剂、质控品和供应品。
检验方法：ELISA、化学发光法、快速法等仪器与器材：酶标仪、洗板机、水浴箱、冰箱、移液器、离心机、生物安全柜等试剂盒：必须有国家规定的生产许可证，注册登记证，不能使用过期试剂。
除非有生产厂家的说明，不同批号试剂盒中成份不能相互交换。
试剂盒的敏感性高、特异性好。
实验室所有使用的检验方法都应该有操作手册。
1 、标本采集和处理的要求，以及标本拒收的标准；2 、方法的每一个操作步骤，包括检验的计算和结果的解释。
3 、试剂、质控品的制备；4、标本的保存；5、参考范围及时更新操作手册。
在检测标本前，必须对使用方法的准确度、精密度、检验结果的报告范围(线性范围)、参考值进行确认。
按规定的程序进行维护，并将所进行的维护记录并写成文件。
酶联免疫吸附试验室内质控的几个问题临床实验室质量管理的第一要素是选择和执行适当的室内质量控制(internal quality control,IQC)程序, 例如依据测定项目的质量要求和方法特点选择统计学标准、控制规则和质控品的数目, 并严格执行IQC程序以提高IQC的质量。
室内质控方法很多, 但酶联免疫吸附测定(ELISA)中仍主要采用Levey-Jennings质控图。
笔者长期从事免疫学检验质量管理工作。
发现医院、血站检验科在实际工作中存在一些比较普遍的问题或疑问。
根据自身实践经验, 结合相关专著, 简要介绍如下, 供实验室参考。
1.质控品准准备1.1 质控品浓度以需要质控的点设值进行质控, 般在Cut-of值(即CO值, 是由试剂盒提供的公式计算出的阴、阳性判断标准)附近选点。
建议选点方法。
选择S/CO值减去精密度测定中得到的3倍批间CV与S/CO值的乘积(意即3倍s)仍大于1的质控血清作为判断实验室重复性的室内质控点。
1.2 购买质控品建议用户购买质控品进行室内质量控制, 这样的质控品的稳定性更有保证。
主要项目在卫生部临床检验中心都有长期供应(北京东单大华路1号北京医院内卫生部临床检验中心免疫质量控制室, 邮编: 1O0730) 1.3 自制质控品的制备方法 (1)收集阳性血清(无明显溶血、黄疽、脂血或污染血清), 累积到一定数量(够本室使用6月以上)；(2)混匀, 经56℃ lO小时灭活, (3)离心或过滤, 去除纤维沉淀物(4)用正常人血清或10%小牛血清PBS溶液稀释．使S/CO值达到2～4之间(5)与定值参考品进行对比, 求测定值(6)将质控血清按0.2～O.5毫升/支分装、封口、贴签, 置-2O℃保存。
2.如何正确应用“即刻法”进行质控不能随意使用“即刻法”, 以下情况下可使用：(1)实验室不是每天进行ELISA项目的检验, 而ELISA试剂盒效期短．用一批号试剂盒连续常规检测2O次以获得RCV数据难度较大。
ELISA技术的质量控制概述Engvall和Perlmann于1971年首先建立了酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）。
随着科技的发展，ELISA在抗原、抗体、酶、固相载体及包被技术等方面都有较大的进步，其灵敏度和特异性均大大提高。
由于该技术具有简便、快速、经济等特点，因而已被广泛应用于各行业。
尽管如此，ELISA在应用过程中仍然存在着许多难点，必须严格控制才能保证检测的质量。
ELISA质量保证是一个复杂的过程，许多重要的环节都影响到检测的质量。
现分述如下：一、方法学的影响ELISA测定模式包括以下几种：双抗体夹心法、间接法、双抗原夹心法、IgM抗体捕捉法、竞争抑制法，其中竞争抑制法因受操作时差所引起的不公平竞争等因素的影响，结果重复性较差，质量较难控制。
二、试剂因素1.试剂的选择免疫检测的原理均基于抗原抗体反应。
由于该反应过程受多种因素的影响，如普遍存在基质效应、交叉反应等，因而检测结果难以溯源，不同方法、不同试剂之间甚至同一试剂不同批号间结果均缺乏可比性。
试剂质量在很大程度上决定了检测的水平，因此在引入新项目之前必须对试剂进行严格的评估。
试剂的评估有以下几个步骤：⑴确定开展该项目的必要性；⑵了解该项目现有的检测方法和原理；⑶在了解试剂的组成基础上选择多家试剂盒进行比较，判断标准首选参考方法或参考物质，其次为临床的满意度及权威机构的报告如各级室间质量评价、CDC报告等；⑷定期对检测结果进行追踪反馈直至最终认可该试剂。
2.试剂的准备不同批次的ELISA试剂在制作过程中很难保证质量完全一致，即使是通过批批检的项目其检测结果也存在差异，因此必须选择和订购长批号的试剂，并保证保存条件。
严格执行这一标准可以避免因试剂批号改变而重新建立质控体系及重新评估试剂的复杂过程，并且能够保证结果的稳定性；对于效期短、使用率低的试剂，应当小量分装，每次使用则取分装部分即可，避免反复冻融造成试剂的失效。
levey–jennings质控规则
林奈－詹宁斯质控规则（Levey－Jennings Rule）是一种用来检测持续质控测定结果是否稳定的方法，也被称为 Shewhart控制图，它由林奈－詹宁斯（Levey－Jennings）博士在1942年提出，并在20世纪50年代发展成为临床生化测定和检验的质量控制的技术工具。
林奈－詹宁斯质控仪器用于机械和试剂反应的持续监测，确保测定结果的准确性和稳定性。
为了构建一个林奈－詹宁斯质控规则，应先选取一组稳定的检测系统，包括检测仪器和质控样品，并对其进行精密测定，确定其中稳定的变异范围，然后根据变异范围设定作为标准的参考范围。
然后，每次开展检测过程时，将质控样品和实验样本进行测定，对其结果进行比较，如果测试结果满足质控范围，则认定该次质控检测符合可接受的精密度要求；如果测试结果不满足质量控制范围要求，则表示该次检测结果精密度有问题，应采取措施查明并纠正原因。
林奈－詹宁斯质控仪器是一种非常有效的质量控制手段，可以提高临床诊断检验的准确性和可靠性。
它可以用于实验室内测定技术和化验条件的持续监控，确保数据的准确性和可靠性，满足临床诊断和监测的要求。
它可以检测技术性紊乱、反应有关的物理和化学变化、以及试剂和仪器性能变化等，进而对反应参与因素进行快速准确的检测和识别，及时采取措施以保证诊断检验质量和进步。
